朱佳意 唐東芹 李欣
摘? 要:以6個(gè)不同花色的小蒼蘭品種為實(shí)驗(yàn)材料,在量化小蒼蘭花色表型和初步確定花瓣色素類型的基礎(chǔ)上,利用UPLC-Q-TOF-MS技術(shù)鑒定花瓣中的花黃色素組成并比較分析各組分含量。結(jié)果表明:在小蒼蘭花瓣中鑒定到13種黃酮及黃酮醇物質(zhì),分別為槲皮素、山萘酚、異鼠李素、柚皮素、黃芩素及其糖苷;槲皮素及其糖苷是小蒼蘭花瓣中重要的黃酮醇物質(zhì);隨著小蒼蘭的花朵開放,花黃色素含量多呈下降趨勢(shì);在不同小蒼蘭品種中,花黃色素含量存在明顯差異,其中,紅、紫色系品種含量顯著高于黃、白色系品種,尤其是‘上農(nóng)紅臺(tái)閣‘Red Passion和‘Castor,其含量在各發(fā)育階段均表現(xiàn)為較高水平的積累。此外,花色表型為復(fù)色的‘Red Passion和‘Castor中上部與基部花瓣的花黃色素含量存在顯著差異。相關(guān)分析表明,各花黃色素組分的積累與小蒼蘭花色明度均呈極顯著負(fù)相關(guān);槲皮素、異鼠李素及其糖苷含量與花色紅度呈極顯著正相關(guān),柚皮素、山萘酚及其糖苷與花色紅度呈顯著正相關(guān);山萘酚及其糖苷含量與花色鮮艷程度呈顯著正相關(guān)。可見(jiàn),花黃色素影響小蒼蘭的花色呈現(xiàn)。
關(guān)鍵詞:小蒼蘭;花黃色素;黃酮;黃酮醇;四級(jí)桿飛行時(shí)間串聯(lián)質(zhì)譜;花色
中圖分類號(hào):Q946? ? ? 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼:A
Analysis of Composition and Content of Anthoxanthins in Petals of Freesia hybrida
ZHU Jiayi1, TANG Dongqin1*, LI Xin2
1. School of Design, Shanghai Jiao Tong University, Shanghai 200240, China; 2. Instrumental Analysis Center, Shanghai Jiao Tong University, Shanghai 200240, China
Abstract: In this study, the petal color of Freesia hybrida was measured by the colorimetric card and color meter, then the composition and content of anthoxanthins in petals were analyzed using UPLC-Q-TOF-MS in order to explore the relationship between petal color and the anthoxanthins content. The results showed that 5 flavonoid aglycones, up to 13 flavones and flavonols, were detected in the petals of F. hybrida for the first time. Quercetin and its glycosides proved to be an important flavonol in the petals. During flowering stages, the content of anthoxanthins decreased in general. There were significant differences in the content and components of anthoxanthins among cultivars, namely the content in red and purple cultivars, especially in ‘SN Hongtaige, ‘Red Passion and ‘Castor, were significantly higher than that in yellow and white cultivars. Significant difference in the content of anthoxanthins between the top and the base petals of ‘Red Passion and ‘Castor was reported. Correlation analysis showed a significant negative correlation between the accumulation of anthoxanthins and the brightness of the petals. The redness of petals showed a significantly positive correlation with quercetin and isorhamnetin glycosides, and a positive correlation with naringenin and kaempferol glycosides. The saturation of petals was positively correlated with kaempferol glycosides. Anthoxanthins proved to be closely related to flower color.
Keywords: Freesia hybrida; anthoxanthin; flavone; flavonol; UPLC-Q-TOF-MS; flower color
DOI: 10.3969/j.issn.1000-2561.2021.04.033
類黃酮(flavonoids)是植物次級(jí)代謝產(chǎn)物,對(duì)植物花色有重要影響[1]。類黃酮物質(zhì)基于其三碳鍵的氧化程度和構(gòu)象的差別,可分為黃酮醇(flavonols)、黃酮(flavones)、花色素(anthocyanins)、原花色素(proanthocyanidins)、兒茶素(catechins)等十四大類[2]。其中,黃酮與黃酮醇物質(zhì)統(tǒng)稱為花黃色素(anthoxanthins),其種類豐富,分布廣泛,是重要的植物色素群[3]。植物花瓣中常見(jiàn)的花黃色素有槲皮素、山萘酚、異鼠李素、木犀草素等。已有研究表明,在觀賞植物中,花黃色素組成的不同影響花色呈現(xiàn)。Wang等[4]研究發(fā)現(xiàn),蘭花(Cymbidium hybrida)花色的多樣性來(lái)自于槲皮素糖苷、山萘酚糖苷等物質(zhì)的濃度和積累模式的不同。李想等[5]發(fā)現(xiàn)芹菜素、槲皮素和金圣草黃素等促成牡丹黃色花瓣形成。而在江南牡丹中,槲皮素糖苷等花黃色素組分差異使花色呈現(xiàn)粉紅色或粉藍(lán)色[6]。此外,花黃色素還能夠通過(guò)共色作用同花色苷使馬藺(Iris lactea)花瓣呈現(xiàn)藍(lán)色[7]。槲皮素和木犀草素作為輔助色素,參與牡丹紅色花瓣的形成[5]。
小蒼蘭(Freesia hybrida)是園藝中的新興觀賞花卉,花色豐富、花型秀麗,有重要觀賞價(jià)值。小蒼蘭又名香雪蘭,為鳶尾科香雪蘭屬多年生草本,是眾多園藝品種的統(tǒng)稱。20世紀(jì)80年代開始,我國(guó)已有學(xué)者對(duì)小蒼蘭的花色表型進(jìn)行過(guò)研究[8]。鐘淮欽等[9]研究發(fā)現(xiàn),小蒼蘭花瓣中的黃酮、花色苷等類黃酮物質(zhì)對(duì)其花色起決定性作用。本課題組也對(duì)小蒼蘭多個(gè)色系品種進(jìn)行了研究,在其花瓣中先后鑒定出多種花色苷成分[10-11]。然而迄今為止,小蒼蘭花色方面的研究,多數(shù)集中在花色苷物質(zhì),針對(duì)花黃色素的鑒定及其與花色呈現(xiàn)的關(guān)系還鮮有報(bào)道,有待深入研究。本文利用超高效液相色譜四極桿飛行時(shí)間串聯(lián)質(zhì)譜技術(shù)(UPLC-Q-TOF-MS)分析不同開花階段的小蒼蘭花瓣中的黃酮及黃酮醇物質(zhì),明確小蒼蘭花瓣中的黃酮及黃酮醇的組成以及積累規(guī)律,通過(guò)分析各組分與花色表型的關(guān)系,探討花黃色素與小蒼蘭花色呈現(xiàn)之間的關(guān)系,為揭示小蒼蘭花色呈現(xiàn)機(jī)理提供科學(xué)依據(jù),也為小蒼蘭花瓣中黃酮及黃酮醇物質(zhì)的開發(fā)利用提供參考。
1? 材料與方法
1.1? 材料
1.1.1? 材料與試劑? 植物材料:選擇‘上農(nóng)紅臺(tái)閣‘Red Passion‘Castor‘上農(nóng)紫玫瑰‘Soleil‘Versailles6個(gè)花色穩(wěn)定的小蒼蘭(Freesia hybrida)園藝雜交品種,其中‘Soleil‘Versailles為純色品種,其余4個(gè)品種花瓣基部顏色與中上部有差異,為復(fù)色品種(圖1)?!限r(nóng)紅臺(tái)閣和‘上農(nóng)紫玫瑰為上海交通大學(xué)自主培育品種,其余為進(jìn)口品種,購(gòu)自荷蘭范登博思公司(https://www.vandenbos.com)。將上述各品種的健康種球于2018年10月下旬定植于上海交通大學(xué)閔行校區(qū)現(xiàn)代農(nóng)業(yè)工程訓(xùn)練中心標(biāo)準(zhǔn)大棚中,并于2019年3—5月采集各品種花蕾期、初花期、盛花期的花瓣(表1)用于后續(xù)試驗(yàn)。
標(biāo)準(zhǔn)品山萘素(kaemperide)、芫花素(genk wanin)、槲皮素3-O-半乳糖苷(auercetin 3-O-galactoside)、楊梅素(myricetin)、異鼠李素(iso rhamnetin)、槲皮素(quercetin)、山萘酚(kaem pferol)、木犀草素(luteolin),上海源葉生物科技有限公司;槲皮素3-O-蕓香糖苷(que rcetin 3-O-rutinoside),BBI生命科學(xué)有限公司。
1.1.2? 儀器與設(shè)備? NR10QC通用色差計(jì),深圳市三恩馳科技有限公司;超高效液相色譜和VION離子淌度四極桿飛行時(shí)間質(zhì)譜聯(lián)用儀(Waters Acquity UPLC I-class / VION IMS QTOF),上海沃特世科技有限公司。
1.2? 方法
1.2.1? 小蒼蘭花瓣花色表型鑒定? 對(duì)小蒼蘭花蕾期、初花期、盛花期花瓣進(jìn)行花色描述,并將復(fù)色小蒼蘭花瓣中上部(top)和花瓣基部(base)分開描述。
在相同光源條件下,用英國(guó)皇家園藝學(xué)會(huì)比色卡(Royal Horticultural Society Colour Chart,RHSCC)與花瓣花色進(jìn)行對(duì)比,描述花色,每種材料重復(fù)5次,取出現(xiàn)頻率最高的結(jié)果。同時(shí)采用由國(guó)際照明委員會(huì)(International Commission on Illumination, CIE)制定的CIE L* a* b*顏色系統(tǒng)對(duì)花色進(jìn)行數(shù)字化描述,用色差儀測(cè)定花色的明度L*值、色相a*、b*值,并計(jì)算彩度C*和色相角度值h。C*=,h = tan?1(b*/a*),每種材料重復(fù)5次取平均值。L*值表示明暗變化程度,a*值表示顏色的紅綠程度,b*值表示顏色的黃藍(lán)程度,C*值表示色彩的彩度,而h值是對(duì)不同色調(diào)的描述。
1.2.2? 小蒼蘭花瓣色素的顏色反應(yīng)? 分別稱取不同品種的盛花期花瓣0.2 g放入研缽中,向研缽中分別加入石油醚、10%鹽酸和30%氨水各10 mL,觀察研磨后液體顏色并記錄[12]。
1.2.3? 小蒼蘭花瓣組分分析? 小蒼蘭花瓣花黃色素的提取采用有機(jī)溶劑萃取結(jié)合超聲提取法。分別稱取不同品種各發(fā)育階段的花瓣0.4 g,取3個(gè)生物重復(fù)。將樣品放入研缽中研磨成粉末置于離心管中,加4mL甲醇-水(70∶30,V/V)后搖晃30 s,置于超聲波振蕩提取60 min,于4 ℃冰箱避光浸提24 h,其間間或搖晃幾次。取上清液1 mL,于24 ℃、12000 r/min條件下離心20 min,再取上清液800 μL,供上機(jī)分析。
小蒼蘭花瓣中花黃色素的定性采用超高效液相色譜法。分析條件:色譜柱為BEH C18 1.7 μm(2.1 mm100 mm)。流動(dòng)相A為0.1%甲酸;流動(dòng)相B為0.1%甲酸-乙腈(1∶1,V/V)。洗脫梯度為0 min,5%B;3 min,20%B;10 min,100%B;12 min,100%B;15 min,95%B;20 min;95%B。流速為0.4 mL/min。進(jìn)樣體積為1 μL;柱溫為45 ℃。質(zhì)譜條件:采集模式為MSE(低能量/高能量切換掃描);離子模式為電噴霧負(fù)離子掃描模式(m/z 50~1000),掃描速度0.2 s。毛細(xì)管電壓為2 kV,錐孔電壓為40 V,霧化氣溫度為450 ℃,霧化氣流量為900 L/h,錐孔反吹氣為50 L/h,離子源溫度為115 ℃,碰撞能量6 eV/20~45 eV。
小蒼蘭花瓣中花黃色素組分的定量采用外標(biāo)法,通過(guò)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線的方式進(jìn)行半定量,并計(jì)算各品種總黃酮及黃酮醇含量(Total flavone and flavonol content, TF),結(jié)果以鮮重計(jì)。
1.3? 數(shù)據(jù)處理
使用Microsoft Excel 2007 軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)整理,使用Origin 2018軟件制圖,使用IBM SPSS Statistics 19.0軟件進(jìn)行小蒼蘭花瓣黃酮及黃酮醇含量差異的LSD顯著性分析,以及花色表型數(shù)據(jù)與黃酮及黃酮醇組分含量的Pearson相關(guān)性分析。
2? 結(jié)果與分析
2.1? 小蒼蘭花瓣花色表型鑒定
用比色卡及色差儀測(cè)定6個(gè)品種小蒼蘭不同發(fā)育階段的花瓣顏色,發(fā)現(xiàn)不同品種各指標(biāo)數(shù)據(jù)分布廣泛(表2)。L*值的分布范圍為27.42~85.49。a*值的分布范圍為?4.64~52.01,b*值的分布范圍為?22.56~66.11,C*值的分布范圍為7.01~69.58,h值的分布范圍為 ?1.42~1.53。不同發(fā)育階段,各品種小蒼蘭上部花瓣顏色在CIE L* a* b*三維坐標(biāo)上的分布規(guī)律基本一致,即黃、白色系品種分布于L*軸的頂部,紅、紫色系品種集中于L*軸底部(圖2)。
2.2? 小蒼蘭花瓣色素的顏色反應(yīng)
由表3可知,在石油醚測(cè)試中,‘Castor‘Soleil和‘Versailles呈現(xiàn)無(wú)色,表明其中不含或含有極少量類胡蘿卜素,其余品種呈現(xiàn)淡黃色,表明含有少量類胡蘿卜素。在鹽酸測(cè)試中,‘上農(nóng)紫玫瑰‘Castor‘上農(nóng)紅臺(tái)閣和‘Red Passion均呈現(xiàn)不同程度的紅色,表明含有花色苷,且所含花色苷的種類或含量可能有差異,而‘Versailles和‘Soleil不含或含有極少量的花色苷。在氨水測(cè)試中,所有品種均呈現(xiàn)不同程度的黃色,表明含有黃酮或黃酮醇類物質(zhì),且其種類或含量可能有差異[11, 13-14]??梢?jiàn),小蒼蘭花瓣中主要色素包括花色苷、黃酮或黃酮醇類等類黃酮。
2.3? 小蒼蘭花瓣花黃色素成分分析
利用 UPLC-Q-TOF-MS進(jìn)行小蒼蘭花瓣花黃色素組分鑒定,得到10種黃酮醇組分、1種黃酮組分及2種二氫黃酮組分(表4)。
通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)品鑒定出組分1、組分2、組分3、組分4、組分5分別為異鼠李素、山萘酚、槲皮素、槲皮素3-O-蕓香糖苷、槲皮素3-O-半乳糖苷5種黃酮醇組分。
從質(zhì)譜數(shù)據(jù)中得知,組分6和組分7主要離子碎片質(zhì)荷比為301,為槲皮素苷元的特征質(zhì)荷比,表明其為槲皮素苷元衍生物。組分6分子離子和碎片離子分子量相差162,對(duì)應(yīng)一個(gè)葡萄糖苷分子量,故推定該組分為槲皮素苷元結(jié)合葡萄糖苷衍生物quercetin-G;組分7分子離子和碎片離子分子量相差176,對(duì)應(yīng)一個(gè)葡萄糖醛酸苷分子量,故推定該組分為槲皮素苷元結(jié)合葡萄糖醛酸苷衍生物quercetin-Gr。組分8和組分9主要離子碎片質(zhì)荷比為285,為山萘酚苷元的特征質(zhì)荷比,表明其為山萘酚苷元衍生物。組分8分子離子和碎片離子分子量相差162,對(duì)應(yīng)一個(gè)葡萄糖苷分子量,故推定組分8為山萘酚苷元結(jié)合葡萄糖苷衍生物kaempferol-G;組分9分子離子和碎片離子分子量相差176,對(duì)應(yīng)一個(gè)葡萄糖醛酸苷分子量,故推定組分9為山萘酚苷元結(jié)合葡萄糖醛酸苷衍生物kaempferol-Gr。組分10主要離子碎片質(zhì)荷比為315,為異鼠李素苷元的特征質(zhì)荷比,表明其為異鼠李素苷元衍生物,其分子離子和碎片離子分子量相差146,對(duì)應(yīng)一個(gè)鼠李糖苷分子量,故推定該組分為異鼠李素苷元結(jié)合鼠李糖苷衍生物isorhammetin-R。
組分11和組分12主要離子碎片質(zhì)荷比為271,為柚皮素苷元的特征質(zhì)荷比,表明其為柚皮素苷元衍生物。組分11分子離子和碎片離子分子量相差162,對(duì)應(yīng)一個(gè)葡萄糖苷分子量,故推定該組分為柚皮素苷元結(jié)合葡萄糖苷衍生物naringenin-G;組分12分子離子和碎片離子分子量相差176,對(duì)應(yīng)一個(gè)葡萄糖醛酸苷分子量,故推定該組分為柚皮素苷元結(jié)合葡萄糖醛酸苷衍生物naringenin-Gr。
組分13主要離子碎片質(zhì)荷比為269,為黃芩素苷元的特征質(zhì)荷比,表明其為黃芩素苷元衍生物,其分子離子和碎片離子分子量相差176,對(duì)應(yīng)一個(gè)葡萄糖醛酸苷分子量,故推定該組分為黃芩素苷元結(jié)合葡萄糖醛酸苷衍生物baicalein-Gr。
2.4? 小蒼蘭花瓣開放過(guò)程中黃酮及黃酮醇含量變化
為探究小蒼蘭開花過(guò)程中花黃色素的積累過(guò)程,對(duì)所測(cè)組分進(jìn)行相對(duì)定量,發(fā)現(xiàn)在小蒼蘭不同開花階段,花瓣內(nèi)各組分中黃酮醇類組分含量最高,其次是二氫黃酮類組分,而黃酮類組分含量較低,在6個(gè)品種中的含量均低于定量限。
2.4.1? 6個(gè)品種小蒼蘭花瓣中黃酮及黃酮醇含量對(duì)比分析? 在6個(gè)品種小蒼蘭開放過(guò)程中,‘上農(nóng)紅臺(tái)閣和‘上農(nóng)紫玫瑰花瓣中的TF下降趨勢(shì)極顯著(P<0.01),‘Soleil和‘VersaillesTF下降趨勢(shì)顯著(P<0.05),而‘Red Passion和‘CastorTF變化趨勢(shì)相對(duì)平穩(wěn)。在各開花階段,不同品種小蒼蘭花瓣TF差異明顯,紅、紫色系小蒼蘭花瓣的TF顯著高于黃、白色系,而在紅、紫色系中,‘上農(nóng)紅臺(tái)閣‘Red Passion和‘CastorTF顯著高于‘上農(nóng)紫玫瑰(圖3)。在花蕾期,‘VersaillesTF最低,而‘上農(nóng)紅臺(tái)閣TF最高,兩者相差約8倍。在盛花期,‘VersaillesTF最低,‘Red PassionTF最高,兩者相差約13倍。
在6個(gè)品種小蒼蘭的不同開花階段中,槲皮素及槲皮素糖苷始終在所有組分中占據(jù)最高比例,達(dá)70.84%~87.13%;山萘酚及山萘酚糖苷在紅、紫色系品種中所占比例較黃、白色系更低,且隨著花瓣的開放,其所占比例逐漸升高;異鼠李素及異鼠李素糖苷、柚皮素及柚皮素糖苷在黃、白色系品種中含量明顯低于紅、紫色系品種,且低于定量限(表5)。
2.4.2? 復(fù)色品種小蒼蘭中上部與基部花瓣黃酮及黃酮醇含量差異分析? 盛花期是小蒼蘭花色呈現(xiàn)的代表時(shí)期,也是主要觀賞時(shí)期,而復(fù)色品種花瓣基部顏色在此時(shí)期也會(huì)影響小蒼蘭觀賞性,因此對(duì)4個(gè)復(fù)色小蒼蘭品種的盛花期中上部花瓣與基部花瓣分別進(jìn)行相對(duì)定量,發(fā)現(xiàn)4個(gè)復(fù)色品種的上部花瓣TF均高于基部花瓣(圖4)。其中,‘Castor中上部花瓣TF相當(dāng)于基部花瓣的2.09倍,‘Red Passion中上部花瓣TF相當(dāng)于基部花瓣1.70倍,差異顯著。而‘上農(nóng)紫玫瑰和‘上農(nóng)紅臺(tái)閣2個(gè)部位的TF差異則不大,2個(gè)品種的中上部花瓣TF僅相當(dāng)于基部的1.19倍和1.20倍。
分析各組分在4個(gè)復(fù)色品種中的相對(duì)比例,發(fā)現(xiàn)槲皮素及槲皮素糖苷在中上部花瓣與基部花瓣中的含量均占據(jù)最高比例,在71.14%~83.82%(表6)。山萘酚及山萘酚糖苷、異鼠李素及異鼠李素糖苷在基部花瓣中的含量占比均高于中上部花瓣,而柚皮素及柚皮素糖苷在基部花瓣中的含量占比則顯著低于中上部花瓣。
2.4.3? 小蒼蘭花瓣黃酮及黃酮醇與花色表型相關(guān)性分析? 對(duì)小蒼蘭花色CIE L* a* b*參數(shù)與黃酮及黃酮醇組分含量進(jìn)行相關(guān)性分析,結(jié)果見(jiàn)表7。明度L*值與K、I、Q、N、TF均呈極顯著負(fù)
相關(guān),表明隨著各組分的積累,花瓣明度會(huì)隨之下降。紅綠程度a*值與I、Q、TF呈極顯著正相關(guān),與K、N呈顯著正相關(guān),表明隨著各組分的積累,尤其是異鼠李素糖苷和槲皮素糖苷的積累,花瓣的紅色程度會(huì)隨之增加。黃藍(lán)程度b*值與K、I、TF呈正相關(guān),但相關(guān)性不顯著。而彩度C*值與K呈顯著正相關(guān),表明隨著山萘酚及山萘酚糖苷的積累,花瓣的彩度會(huì)隨之增加。
3? 討論
本文利用超高效液相色譜串聯(lián)四極桿飛行時(shí)間質(zhì)譜技術(shù)從小蒼蘭花瓣中鑒定到槲皮素、山萘酚、異鼠李素、柚皮素、黃芩素等5種類黃酮苷元,共13種黃酮及黃酮醇物質(zhì)。槲皮素、山萘酚、異鼠李素在同為鳶尾科植物的馬藺花(Iris lactea)中曾有報(bào)道[15],而已在荷蘭鳶尾(Iris hollandica)和長(zhǎng)尾鳶尾(Iris rossii)中檢測(cè)到的芹菜素糖苷、木犀草素糖苷和金圣草素糖苷在小蒼蘭中并未鑒定到[16-17]。山萘酚、槲皮素糖苷等黃酮醇在同為球根花卉的睡蓮、百合中已被檢測(cè)到,并影響花色呈現(xiàn)[18-19]。馬蹄蓮中也已鑒定到柚皮素、槲皮素、山萘酚、木犀草素等多種類黃酮物質(zhì),黃色、粉色、紅色品種的馬蹄蓮花色呈現(xiàn)與其密切相關(guān)[20]。
不同色系小蒼蘭品種中花黃色素組分有差異,紅、紫色系品種小蒼蘭花瓣中主要花黃色素為槲皮素、山萘酚、異鼠李素、柚皮素,黃、白色系品種花瓣中主要花黃色素為槲皮素、山萘酚。復(fù)色品種中上部花瓣與基部花瓣花黃色素組分相同,但含量和比例有差異。槲皮素及槲皮素糖苷的含量始終在所有組分中占據(jù)最高比例,可見(jiàn)槲皮素為小蒼蘭花瓣中重要的花黃色素。槲皮素及其衍生物是植物中常見(jiàn)的黃酮醇類物質(zhì),能使植物花瓣呈現(xiàn)不同程度的黃色,還能夠增加花色苷的顏色強(qiáng)度和穩(wěn)定性,從而影響紅、紫色系花瓣著色,是重要的植物色素[21-22]。小蒼蘭花瓣黃酮及黃酮醇物質(zhì)含量在花蕾期達(dá)到較高水平,后呈逐漸下降趨勢(shì),可見(jiàn)其合成與積累與花朵發(fā)育進(jìn)程有密切關(guān)系,這一趨勢(shì)與金花茶、牡丹、玉蘭、忍冬等植物花瓣類黃酮研究結(jié)果一致[23-27]。
通過(guò)相關(guān)性分析可知,小蒼蘭花瓣中黃酮及黃酮醇物質(zhì)的積累與花瓣明亮程度呈負(fù)相關(guān),山萘酚糖苷含量影響小蒼蘭花瓣鮮艷程度,槲皮素、異鼠李素糖苷等影響花瓣紅色程度。推測(cè)其原因,首先是由于花黃色素本身能夠使花瓣呈現(xiàn)象牙白色至黃色,其積累會(huì)導(dǎo)致花瓣著色加深,花瓣明度降低。其次,是由花黃色素的輔助著色效應(yīng)所致。紅、紫色系小蒼蘭花瓣中黃酮及黃酮醇物質(zhì)含量顯著高于黃、白色系,與本課題組前期研究中小蒼蘭花瓣花色苷種間分布規(guī)律相同,即紅、紫色系品種積累了豐富的花色苷,而黃、白色系品種不含或含有極少量花色苷[11],因此推測(cè)紅、紫色系品種小蒼蘭通過(guò)合成更多的黃酮醇類物質(zhì)來(lái)穩(wěn)定花色苷,并輔助著色。黃酮醇類物質(zhì)能夠幫助花色苷輔助著色,這一點(diǎn)在葡萄風(fēng)信子、洋桔梗和牡丹等植物中均有報(bào)道[5, 28-29]。李崇暉等[30]也曾報(bào)道蝴蝶石斛蘭中黃酮醇類物質(zhì)的積累與花色苷合成相關(guān)聯(lián)。另有研究表明,花黃色素與花色苷的共色作用能夠使花瓣藍(lán)色程度增加[30-32],在同為鳶尾科的玉蟬花中,二者共同使花瓣呈現(xiàn)藍(lán)紫色等較深的顏色[7]。本研究中,小蒼蘭花瓣黃藍(lán)程度b*值雖然與總黃酮及黃酮醇含量呈正相關(guān),但相關(guān)性并不顯著,可能是受共色作用影響。
綜上,可以推測(cè)小蒼蘭花瓣呈色主要由類黃酮決定,對(duì)其組分的鑒定和分析將為后續(xù)進(jìn)一步解析小蒼蘭花瓣中類黃酮合成的分子機(jī)制、揭示小蒼蘭花色呈現(xiàn)機(jī)理提供堅(jiān)實(shí)的生理生化基礎(chǔ),并為開發(fā)利用小蒼蘭類黃酮物質(zhì)提供科學(xué)依據(jù)。
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