劉金艷，張彬，許賽君，趙曉宏，許揚(yáng)，謝勇

·綜述·

衰老進(jìn)程中非酒精性脂肪肝病自發(fā)產(chǎn)生的分子機(jī)制的研究進(jìn)展

劉金艷，張彬，許賽君，趙曉宏，許揚(yáng)，謝勇

100193 北京，中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院藥用植物研究所中草藥物質(zhì)基礎(chǔ)與資源利用教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室

非酒精性脂肪性肝?。∟AFLD）是肝細(xì)胞從單純性脂肪變性（SS）逐步發(fā)展到非酒精性脂肪性肝炎（NASH）、肝纖維化、肝硬化甚至肝細(xì)胞癌進(jìn)程中一系列疾病的統(tǒng)稱[1]。流行病學(xué)調(diào)查顯示在全球范圍內(nèi)，NAFLD 的發(fā)病率約為 25%，且呈現(xiàn)日益增長趨勢[2]，在男性中，NAFLD 的患病率傾向于從年輕到中年人群增加，并且與 NAFLD 的非老年患者相比，老年患者的 NASH 和晚期纖維化患病率更高[3]。美國器官共享網(wǎng)絡(luò)聯(lián)合會(huì)統(tǒng)計(jì)顯示，2005 – 2017 年，NAFLD 發(fā)展為急慢性肝衰竭（ACLF）患者的候補(bǔ)注冊人數(shù)從 134 名增加到 574 名，增長了 331.6%，隨著NAFLD-ACLF 注冊人數(shù)的持續(xù)增長和年齡增長，患者死亡的風(fēng)險(xiǎn)激增[4]。一項(xiàng)對日本 1829 名女性的調(diào)查顯示，NAFLD 的患病率在該群體中隨年齡增長而增加，且與體重增加或代謝綜合征的影響無關(guān)，表明衰老是絕經(jīng)前婦女 NAFLD 的危險(xiǎn)因素[5]。隨著年齡增加，NAFLD 發(fā)病率和惡化程度也隨之增加，已被世界衛(wèi)生組織（WHO）確認(rèn)為危害身體健康的慢性病。迄今為止，NAFLD 的發(fā)病機(jī)制有“雙重打擊”和“多重打擊”學(xué)說。雙重打擊學(xué)說針對肝臟病變機(jī)制，認(rèn)為肝細(xì)胞內(nèi)脂肪增加，突出表現(xiàn)為甘油三酯蓄積和胰島素抵抗引起的肝脂肪變性為第一重打擊；肝細(xì)胞內(nèi)的炎癥反應(yīng)、線粒體功能障礙和氧化應(yīng)激等增強(qiáng)誘導(dǎo) NAFLD 發(fā)展為 NASH、肝纖維化以及肝硬化為第二重打擊[6]。多重打擊學(xué)說針對肝臟以外的誘導(dǎo)肝臟病變機(jī)制，認(rèn)為遺傳和環(huán)境因素的相互作用以及不同組織器官，諸如脂肪組織、胰腺、腸、肝臟等的代謝循環(huán)紊亂引發(fā)的廣泛代謝失調(diào)誘發(fā) NAFLD[7]。近年來的研究表明，伴隨衰老導(dǎo)致的肝細(xì)胞代謝失調(diào)和炎癥與 NAFLD 發(fā)生和惡化呈現(xiàn)正相關(guān)性。伴隨細(xì)胞逐漸衰老，“雙重打擊”和“多重打擊”隨之增強(qiáng)是導(dǎo)致 NAFLD 發(fā)生和惡化的重要因素。動(dòng)物細(xì)胞衰老主要表現(xiàn)為從正常分化二倍體細(xì)胞進(jìn)入細(xì)胞周期停滯狀態(tài)并喪失其增殖能力，導(dǎo)致細(xì)胞分裂能力下降[8]。在光學(xué)顯微鏡下可見衰老細(xì)胞的特征是細(xì)胞和細(xì)胞核明顯變大。細(xì)胞的代謝失調(diào)被衰老進(jìn)程中染色質(zhì)病灶（SAHF）和分泌表型（SASP）增加等促進(jìn)[9]。SASP 涉及促炎細(xì)胞因子、生長因子、蛋白酶、纖連蛋白、活性氧（ROS）和一氧化氮等的含量變化，細(xì)胞內(nèi)這些物質(zhì)含量顯著增加表明細(xì)胞已經(jīng)衰老。迄今為止，伴隨衰老NAFLD 自發(fā)產(chǎn)生的分子機(jī)制尚不清楚。全面深入研究衰老進(jìn)程中 NAFLD 自發(fā)產(chǎn)生的分子機(jī)制不僅補(bǔ)充 NAFLD 的發(fā)病機(jī)制認(rèn)識的空白點(diǎn)，而且能為研發(fā) NAFLD 新藥提供新思路。

1 衰老進(jìn)程中的 SAHF 誘發(fā) NAFLD

1.1 端?？s短誘發(fā)NAFLD

細(xì)胞衰老進(jìn)程中 SAHF 增加的表型之一是端粒縮短。端粒位于染色體末端，為重復(fù) DNA 序列和端粒結(jié)合蛋白組成的復(fù)合體，端粒長度變短證明細(xì)胞已經(jīng)衰老[10]。端粒酶是端粒酶逆轉(zhuǎn)錄酶（hTERT）和端粒酶 RNA（hTERC）形成的復(fù)合體，具有核糖核酸蛋白酶功能，可催化真核生物端粒 DNA 的延伸[11]。正常肝臟中，伴隨肝細(xì)胞衰老端粒酶活性也隨之降低，導(dǎo)致端?？s短。在年齡相仿情況下，NAFLD 患者的肝細(xì)胞端粒短于作為對照組的正常肝[12]，表明端?？s短與脂肪變性存在緊密關(guān)聯(lián)，同時(shí)也顯示在同齡的人類中，細(xì)胞衰老進(jìn)程加快的個(gè)體肝細(xì)胞內(nèi)脂肪變性程度顯著增加，可迅速發(fā)展為 NAFLD。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)表明，端粒酶功能障礙導(dǎo)致小鼠肝臟再生受損，并響應(yīng)慢性肝損傷而加速了肝硬化的發(fā)展[13]，有學(xué)者認(rèn)為端粒長度減少可作為判斷肝組織硬化發(fā)生的一種標(biāo)志[14]。在 NASH 發(fā)展為肝硬化的年輕患者來源的肝細(xì)胞內(nèi)的端粒長度明顯短于作為對照的正常人[15]，且細(xì)胞衰老標(biāo)記物諸如 β-半乳糖苷酶、p16、p21 和 p53 等在肝細(xì)胞中表達(dá)量也顯著高于正常人，SASP 為嚴(yán)重衰老型[16]。此外，端粒縮短也增加 NAFLD 介導(dǎo)的癌癥易感性。從健康肝臟到 NAFLD-肝硬化-肝細(xì)胞癌（HCC）的發(fā)展進(jìn)程中，外周血白細(xì)胞的端粒長度逐漸降低[17]。因此，衰老進(jìn)程中端粒縮短導(dǎo)致 SAHF 增加，是 NAFLD 加速惡化推動(dòng)力之一。

1.2 DNA 損傷誘發(fā) NAFLD

細(xì)胞抵抗外部和內(nèi)部環(huán)境變化產(chǎn)生的應(yīng)激反應(yīng)導(dǎo)致 DNA 損傷稱為 DNA 損傷反應(yīng)（DDR）。已經(jīng)存在 DDR 的細(xì)胞通常激活 DNA 修復(fù)機(jī)制或通過抑制細(xì)胞周期來抵抗 DDR 對生命活動(dòng)帶來的不良影響。在抑制細(xì)胞周期的情況下，DDR 觸發(fā)共濟(jì)失調(diào)-毛細(xì)血管擴(kuò)張突變（ATM）和提高 Rad3 相關(guān)的蛋白激酶表達(dá)量，提高 p53 磷酸化水平并激活 p21，導(dǎo)致細(xì)胞周期停滯[18]。同時(shí)，p21 和 p16抑制視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤因子（Rb）的磷酸化，使其與 E2F 轉(zhuǎn)錄因子結(jié)合并終止細(xì)胞周期的進(jìn)程[19]，有利于肝細(xì)胞內(nèi)變性脂肪蓄積。對比易發(fā)生 NAFLD 大鼠與 NAFLD 抵抗大鼠肝臟蛋白表達(dá)也觀察到這樣的 p21 和 p16 變化差異，但這種差異是由組蛋白的修飾差異引起的。與 NAFLD 抵抗大鼠相比，易發(fā)生 NAFLD 大鼠 p16 啟動(dòng)子和編碼區(qū)組蛋白 H4 的乙?；斤@著升高，p16 編碼區(qū)中組蛋白 H3 賴氨酸 27 甲基化水平較低。在 p21 啟動(dòng)子上，組蛋白 H3 和 H4 的乙?；骄@著增加，p21 啟動(dòng)子組蛋白 H3 賴氨酸 27 三甲基化降低而二甲基化顯著升高[20]。由此可見，衰老細(xì)胞內(nèi) DDR 和特定的組蛋白修飾差異具有正相關(guān)性，p21、p16 等蛋白的表達(dá)增加可作為判斷 NAFLD 發(fā)生或惡化的標(biāo)志[21]。

1.3 DNA 甲基化水平降低誘發(fā) NAFLD

DNA 甲基化水平降低是衰老細(xì)胞SAHF 的另一種表型。比較缺乏膽堿和葉酸飼料喂養(yǎng)引起的 NAFLD 小鼠的 DNA 甲基化水平發(fā)現(xiàn)，肝臟 DNA 甲基化水平較低的小鼠更容易發(fā)生肝損傷[22]。而在人類肝臟活檢中發(fā)現(xiàn)，相對于輕度 NAFLD，晚期 NAFLD 表現(xiàn)出明顯的 DNA 低甲基化現(xiàn)象。在重度 NAFLD 中，纖維細(xì)胞生長因子受體 2（FGR2）和胱天蛋白酶 1（CASP1）甲基化水平顯著降低，蛋氨酸腺苷甲基轉(zhuǎn)移酶 1A（MAT1A）基因的甲基化水平升高[23]。肝臟內(nèi)這些蛋白質(zhì)基因的甲基化水平增加和 DNA 甲基化水平降低也可以作為判斷 NAFLD 是否惡化的標(biāo)志。

2 衰老進(jìn)程中的 SASP 誘發(fā) NAFLD

2.1 衰老基因表達(dá)誘發(fā) NAFLD

衰老基因表達(dá)變化促進(jìn)肝臟內(nèi)脂肪變性。Zhang 等[20]通過研究高脂飲食（HFD）誘導(dǎo)的易肥胖和抗肥胖大鼠的衰老基因表達(dá)差異發(fā)現(xiàn)在基因轉(zhuǎn)錄水平上，易肥胖大鼠的 p16 和 p21 的 mRNA 水平顯著升高；在蛋白水平上，NAFLD 大鼠肝臟中 p21 蛋白水平明顯升高，激活 p16 的轉(zhuǎn)錄因子的 Ets1 蛋白質(zhì)表達(dá)量也增加了 2.5 倍，但是 Rb 磷酸化水平卻顯著降低。衰老標(biāo)記蛋白 30（SMP30）是一種抗凋亡蛋白，具有隨著年齡的增加而減少的特點(diǎn)。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)顯示，與單純 db/db 小鼠相比，敲除 SMP30 的 db/db 小鼠的肝脂質(zhì)和脂質(zhì)過氧化水平升高，內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激增加，顯示出伴有炎性反應(yīng)和氧化應(yīng)激的脂肪肝[24]。由此可見，SMP30 表達(dá)量減少和 p16、p21 等蛋白表達(dá)量增加有關(guān)，可能是篩選治療 NAFLD 新藥潛在的靶標(biāo)。

2.2 衰老引起的線粒體失調(diào)誘發(fā) NAFLD

線粒體生物合成減少是衰老的一項(xiàng)顯著特征。細(xì)胞衰老可以通過誘導(dǎo)線粒體功能障礙，導(dǎo)致脂肪代謝活性低下，從而導(dǎo)致細(xì)胞脂肪變性。體外實(shí)驗(yàn)表明，與代謝年輕的肝細(xì)胞相比，代謝衰老肝細(xì)胞的線粒體分解棕櫚酸誘導(dǎo)蓄積在細(xì)胞內(nèi)脂質(zhì)的能力降低[25]。因此衰老細(xì)胞中變性脂肪容易積累。在動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中，與幼年和青年鼠相比，中年小鼠更容易產(chǎn)生飲食誘導(dǎo)的胰島素抵抗，發(fā)展為 NAFLD 的敏感性更高，同時(shí)細(xì)胞內(nèi)線粒體質(zhì)量減少，肝臟中檸檬酸合酶活性降低，可能與核因子類紅細(xì)胞衍生因子 2 樣蛋白 2（NFE2L2）介導(dǎo)的肝線粒體的脂肪酸氧化能力降低有關(guān)[26]，意味著衰老動(dòng)物體內(nèi)的三羧酸循環(huán)活性低下。人類肝臟活檢發(fā)現(xiàn)，與輕度脂肪變性相比，NASH 患者肝臟中線粒體編碼的 NADH 脫氫酶 6（MT-ND6）高度甲基化，DNA 甲基轉(zhuǎn)移酶水平也升高，線粒體出現(xiàn)形態(tài)缺陷和過氧化物酶體增殖等[27]是促進(jìn)變性脂肪蓄積的原因。

3 嘌呤核苷酸惡化衰老動(dòng)物體內(nèi)NAFLD 癥狀

近期我們發(fā)現(xiàn)肌苷酸（IMP）、腺苷酸基琥珀酸（S-AMP）、腺苷酸（AMP）等嘌呤核苷酸都能和人體內(nèi)AMP 活化蛋白激酶（AMPK）的γ 亞基形成復(fù)合體，提高AMPK α 亞基上Thr172 的磷酸化水平而活化AMPK[28-29]。應(yīng)用油酸誘導(dǎo)的脂質(zhì)蓄積的 HepG2 細(xì)胞的降脂實(shí)驗(yàn)顯示，AMPK 被 IMP 等嘌呤核苷酸活化后顯示出比洛伐他汀更強(qiáng)的降脂活性，細(xì)胞內(nèi)甘油三酯脂肪酶（ATGL）和乙酰輔酶 A 羧化酶 2（ACC2）的表達(dá)量和磷酸化顯著上升，表明細(xì)胞內(nèi)的脂肪分解為脂肪酸以及脂肪酸被氧化代謝的活性被顯著增加[28-29]。對飲食誘導(dǎo)產(chǎn)生 NAFLD 的 3 月齡小鼠以劑量 300 mg/kg 的 S-AMP 灌胃給藥 18 d 后能導(dǎo)致小鼠的血脂濃度和肝細(xì)胞內(nèi)脂質(zhì)蓄積降低[28]，而對 6 月齡 db/db 小鼠以劑量 50 mg/kg 的 IMP 灌胃給藥 8 周后發(fā)現(xiàn)小鼠肝細(xì)胞內(nèi)蓄積增加，血清中總膽固醇（TC）含量比未給藥 db/db 小鼠增加約 3 倍，磷酸化的乙酰輔酶 A 羧化酶 2（ACC2）的表達(dá)量顯著上升，肝臟內(nèi)乙酰輔酶 A 含量也顯著增加，不同于體外實(shí)驗(yàn)結(jié)果，肝細(xì)胞內(nèi)ATGL 表達(dá)量未見顯著變化，NAFLD 癥狀反而惡化[29]，造成上述差別的原因是嘌呤核苷酸激活 AMPK 后促進(jìn)肝細(xì)胞體內(nèi)脂肪酸加速氧化，乙酰輔酶 A 是脂肪酸 β 氧化的重要中間產(chǎn)物，是體內(nèi)合成 TC、TG 和經(jīng)由三羧酸循環(huán)（TCA）分解為 CO2和 H2O 的原料。伴隨身體衰老 TCA 循環(huán)活性隨之降低[30]，當(dāng) TCA 循環(huán)不能消耗因脂肪酸過度氧化產(chǎn)生的乙酰輔酶 A 時(shí)，乙酰輔酶 A 蓄積在肝臟內(nèi)主要被用于合成 TC 和 TG。TC 進(jìn)入到小腸內(nèi)促進(jìn)脂肪消化為脂肪酸，脂肪酸被吸收后直接進(jìn)入肝臟后加大肝細(xì)胞內(nèi)脂肪酸氧化水平，于是形成了嘌呤核苷酸驅(qū)動(dòng)的膽固醇介導(dǎo)的肝臟內(nèi)利用外源脂肪酸合成新甘油三酯的通路。肝臟組織形態(tài)學(xué)分析表明，正常飼料飼養(yǎng)的 8 月齡小鼠已經(jīng)存在明顯的 NAFLD 癥狀，而 4 月齡小鼠尚未有明顯的肝臟細(xì)胞內(nèi)脂質(zhì)蓄積[28-29]。因此，這個(gè)通路的活性隨衰老導(dǎo)致的 TCA 循環(huán)活性降低而更加活躍，是肝臟受到第一重打擊的重要推動(dòng)力。此外，由于脂肪酸加速氧化，肝臟內(nèi)需要產(chǎn)生更多的活性氧來完成相應(yīng)的脂肪酸氧化，因此形成了肝臟氧化應(yīng)激，使得SAHF 和 SASP顯著提高，這是肝臟受到第二重打擊的重要推動(dòng)力。結(jié)合已有的自然衰老小鼠體內(nèi)發(fā)生 NAFLD 的作用機(jī)制，嘌呤核苷酸促進(jìn) NAFLD 發(fā)生和分子機(jī)制如圖 1 所示。

圖 1 衰老小鼠的肝細(xì)胞內(nèi) IMP 等嘌呤核苷酸啟動(dòng)雙重打擊誘發(fā) NAFLD 的分子機(jī)制（衰老小鼠體內(nèi)活性低下的 TCA 通路用細(xì)線表示，此時(shí)，嘌呤核苷酸活化 AMPK 促進(jìn)脂肪酸氧化產(chǎn)生的乙酰輔酶 A 主要被用于合成 TC 和 TG，TC 促進(jìn)腸道中脂肪的消化和生成的脂肪酸被吸收進(jìn)入肝臟，加大了對肝臟的二重打擊）

4 總結(jié)與展望

高脂、高糖等特殊飼料誘導(dǎo)產(chǎn)生 NAFLD 的小鼠或大鼠以及敲除瘦素受體或瘦素基因的小鼠等是常用于研究 NAFLD 的發(fā)病機(jī)制和藥物研究的模型動(dòng)物[31]，從中發(fā)現(xiàn)了用于篩選治療 NAFLD 藥物的靶蛋白。在新藥研發(fā)方面國內(nèi)外都取得了重大進(jìn)展，一些候選藥物已進(jìn)入到 III 期臨床試驗(yàn)，但迄今為止依然沒有新藥獲批上市[32-33]。中華醫(yī)學(xué)會(huì)肝病分會(huì)藥物性肝病學(xué)組組長茅益民教授認(rèn)為迄今為止還沒有任何動(dòng)物模型能夠完全模擬 NASH 等的病理特征、發(fā)病機(jī)制等是造成這一困境的重要原因（上海國際肝病高峰論壇，上海，2020.12.11 – 13）。鑒于人、小鼠等動(dòng)物在自然衰老進(jìn)程中會(huì)自發(fā)產(chǎn)生 NAFLD，正常飼養(yǎng)小鼠產(chǎn)生 NAFLD 的年齡段是小鼠從發(fā)育成熟期到中年衰老期間[28-29]，這個(gè)正好和人體自發(fā)產(chǎn)生 NAFLD 的年齡段高度吻合，因此 4 ～8 月齡小鼠的 NAFLD 發(fā)病機(jī)制能更準(zhǔn)確地模擬人體內(nèi)對應(yīng)病癥的病理特征、發(fā)病機(jī)制，應(yīng)該作為研究 NAFLD 發(fā)病機(jī)制的新模型，深入開展不同衰老時(shí)間點(diǎn)的代謝失調(diào)機(jī)制研究。

自然衰老小鼠體內(nèi)發(fā)生 NAFLD 以及外源性嘌呤核苷酸促進(jìn)衰老 db/db 小鼠的 NAFLD 發(fā)展的分子機(jī)制提示我們，衰老進(jìn)程中動(dòng)物體內(nèi)嘌呤核苷酸代謝障礙可能隨之加重，一旦肝臟內(nèi)形成嘌呤核苷酸蓄積就促進(jìn) NAFLD 發(fā)生和惡化。今后的研究應(yīng)該聚焦于衰老導(dǎo)致嘌呤核苷酸代謝障礙的變化規(guī)律及其誘導(dǎo)NAFLD 產(chǎn)生的作用機(jī)制。如果證明衰老導(dǎo)致身體內(nèi)嘌呤核苷酸蓄積，降低嘌呤核苷酸蓄積應(yīng)該作為研發(fā) NAFLD 藥物的新思路。因?yàn)榻档土怂ダ蟿?dòng)物體內(nèi)的嘌呤核苷酸含量，脂肪酸過度氧化引起肝細(xì)胞內(nèi)乙酰輔酶 A 蓄積將被抑制，由此引起的TG 過度合成、膽固醇過度合成等都可能隨之降低，同時(shí)線粒體功能紊亂和 DDR 等都可能隨之降低，二重打擊造成肝損傷將缺乏推動(dòng)力，最終改善 NAFLD 癥狀。

[1] Lonardo A, Targher G. NAFLD: Is there anything new under the sun? Int J Mol Sci, 2017, 18(9):1955.

[2] Byrne CD, Targher G. NAFLD: a multisystem disease. J Hepatol, 2015, 62(1 Suppl):S47-S64.

[3] Bertolotti M, Lonardo A, Mussi C, et al. Nonalcoholic fatty liver disease and aging: epidemiology to management. World J Gastroenterol, 2014, 20(39):14185-14204.

[4] Sundaram V, Jalan R, Shah P, et al. Acute on chronic liver failure from nonalcoholic fatty liver disease: a growing and aging cohort with rising mortality. Hepatology, 2020. (Online ahead of print)

[5] Hamaguchi M, Kojima T, Ohbora A, et al. Aging is a risk factor of nonalcoholic fatty liver disease in premenopausal women. World J Gastroenterol, 2012, 18(3):237-243.

[6] Engin A. Non-alcoholic fatty liver disease. Adv Exp Med Biol, 2017, 960:443-467.

[7] Buzzetti E, Pinzani M, Tsochatzis EA. The multiple-hit pathogenesis of non-alcoholic fatty liver disease (NAFLD). Metabolism, 2016, 65(8):1038-1048.

[8] Aravinthan A. Cellular senescence: a hitchhiker's guide. Hum Cell, 2015, 28(2):51-64.

[9] Papatheodoridi AM, Chrysavgis L, Koutsilieris M, et al. The role of senescence in the development of nonalcoholic fatty liver disease and progression to nonalcoholic steatohepatitis. Hepatology, 2020, 71(1): 363-374.

[10] Blackburn EH. Structure and function of telomeres. Nature, 1991, 350(6319): 569-573.

[11] Schmidt JC, Cech TR. Human telomerase: biogenesis, trafficking, recruitment, and activation. Genes Dev, 2015, 29(11):1095-1105.

[12] Aravinthan A, Scarpini C, Tachtatzis P, et al. Hepatocyte senescence predicts progression in non-alcohol-related fatty liver disease. J Hepatol, 2013, 58(3):549-556.

[13] Rudolph KL, Chang S, Millard M, et al. Inhibition of experimental liver cirrhosis in mice by telomerase gene delivery. Science, 2000, 287(5456):1253-1258.

[14] Wiemann SU, Satyanarayana A, Tsahuridu M, et al. Hepatocyte telomere shortening and senescence are general markers of human liver cirrhosis. FASEB J, 2002, 16(9):935-942.

[15] Aikata H, Takaishi H, Kawakami Y, et al. Telomere reduction in human liver tissues with age and chronic inflammation. Exp Cell Res, 2000, 256(2):578-582.

[16] Gutierrez-Reyes G, del Carmen Garcia de Leon M, Varela-Fascinetto G, et al. Cellular senescence in livers from children with end stage liver disease. PLoS One, 2010, 5(4):e10231.

[17] Donati B, Pietrelli A, Pingitore P, et al. Telomerase reverse transcriptase germline mutations and hepatocellular carcinoma in patients with nonalcoholic fatty liver disease. Cancer Med, 2017, 6(8):1930-1940.

[18] Bakkenist CJ, Kastan MB. DNA damage activates ATM through intermolecular autophosphorylation and dimer dissociation. Nature, 2003, 421(6922):499-506.

[19] Rubin SM, Gall AL, Zheng N, et al. Structure of the Rb C-terminal domain bound to E2F1-DP1: a mechanism for phosphorylation- induced E2F release. Cell, 2005, 123(6):1093-1106.

[20] Zhang X, Zhou D, Strakovsky R, et al. Hepatic cellular senescence pathway genes are induced through histone modifications in a diet-induced obese rat model. Am J Physiol Gastrointest Liver Physiol, 2012, 302(5):G558-G564.

[21] Sikora E, Bielak-?mijewska A, Mosieniak G. What is and what is not cell senescence. Postepy Biochem, 2018, 64(2):110-118.

[22] Tryndyak VP, Han T, Fuscoe JC, et al. Status of hepatic DNA methylome predetermines and modulates the severity of non-alcoholic fatty liver injury in mice. BMC Genomics, 2016, 17:298.

[23] Murphy SK, Yang H, Moylan CA, et al. Relationship between methylome and transcriptome in patients with nonalcoholic fatty liver disease. Gastroenterology, 2013, 145(5):1076-1087.

[24] Kondo Y, Hasegawa G, Okada H, et al. Lepr(db/db) mice with senescence marker protein-30 knockout (Lepr(db/db)Smp30(Y/-)) exhibit increases in small dense-LDL and severe fatty liver despite being fed a standard diet. PLoS One, 2013, 8(6):e65698.

[25] Ogrodnik M, Miwa S, Tchkonia T, et al. Cellular senescence drives age-dependent hepatic steatosis. Nat Commun, 2017, 8:15691.

[26] Lohr K, Pachl F, Moghaddas GA, et al. Reduced mitochondrial mass and function add to age-related susceptibility toward diet-induced fatty liver in C57BL/6J mice. Physiol Rep, 2016, 4(19):e12988.

[27] Pirola CJ, Gianotti TF, Burgue?o AL, et al. Epigenetic modification of liver mitochondrial DNA is associated with histological severity of nonalcoholic fatty liver disease. Gut, 2013, 62(9):1356-1363.

[28] Wang Y, Jiang YJ, Cheng Z, et al. Adenylosuccinate, a metabolite in purine salvage pathway, binds to AMP-activated protein kinase (AMPK) γ subunit and enhances the metabolic efficiency of lipid. Chin Med Biotschnol, 2020, 15(3):240-248. (in Chinese)

王洋, 姜允嘉, 成鐘, 等. 腺苷酸基琥珀酸活化AMPK抑制肝細(xì)胞內(nèi)脂質(zhì)蓄積的作用機(jī)制. 中國醫(yī)藥生物技術(shù), 2020, 15(3):240-248.

[29] Jiang YJ, Liu JY, Xu SJ, et al. The freshener 5'-inosine monophosphate (IMP) disodium aggravates lipid metabolic disoder in elderly db/db mice. Food Sci, 2020. (Online ahead of print) (in Chinese)

姜允嘉, 劉金艷, 許賽君, 等. 增鮮劑5’-肌苷酸二鈉惡化老齡db/db小鼠的非酒精性脂肪肝的作用機(jī)制. 食品科學(xué), 2020. (優(yōu)先出版)

[30] Sharma R, Ramanathan A. The aging metabolome-biomarkers to hub metabolites. Proteomics, 2020, 20(5-6):e1800407.

[31] Reimer KC, Wree A, Roderburg C, et al. New drugs for NAFLD: lessons from basic models to the clinic. Hepatol Int, 2020, 14(1):8-23.

[32] Alkhouri N. NASH and NAFLD: emerging drugs, therapeutic targets and translational and clinical challenges. Expert Opin Investig Drugs, 2020, 29(2):87.

[33] Boeckmans J, Natale A, Rombaut M, et al. Anti-NASH drug development hitches a lift on PPAR agonism. Cells, 2019, 9(1):37.

中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院創(chuàng)新工程(2019-I2M-1-005)；國家自然科學(xué)基金面上項(xiàng)目(81473114)

謝勇，Email：yxie@implad.ac.cn

2021-01-17

10.3969/j.issn.1673-713X.2021.03.008