徐資怡，石金鳳，鮮 靜，張 晨，章津銘

成都中醫(yī)藥大學(xué)藥學(xué)院，四川 成都 611137

近年來(lái)，全球腫瘤發(fā)病率和死亡率正在迅速增長(zhǎng)，惡性腫瘤嚴(yán)重危害了人們的健康，影響了人們的正常生活[1]?；熓悄壳澳[瘤治療的主要方式，但大多數(shù)化療藥物水溶性較差、生物利用度不高且化療藥物對(duì)正常細(xì)胞的非選擇性作用，大多數(shù)常規(guī)化療患者出現(xiàn)嚴(yán)重的不良反應(yīng)[2]。中藥活性成分具有高效、低毒、作用廣和靶點(diǎn)多等優(yōu)勢(shì)，可有效克服或彌補(bǔ)化療藥物嚴(yán)重的不良反應(yīng)和腫瘤耐藥性[3]，這使得中藥活性成分逐漸成為研究熱點(diǎn)，通過(guò)研究中藥活性成分以獲得更好的腫瘤治療。

雷公藤紅素又名南蛇藤素，是從衛(wèi)矛科植物雷公藤Tripterygium wilfordiiHook.f.中提取的五環(huán)三萜類單體化合物，除了具有抗炎、抗風(fēng)濕、止痛、治療神經(jīng)性退化疾病等多種藥理活性，還具有顯著的抗腫瘤活性，對(duì)前列腺癌、肺癌、肝癌、白血病、膠質(zhì)瘤、結(jié)腸癌、卵巢癌、乳腺癌、胃癌等細(xì)胞均有抑制作用[4-8]?，F(xiàn)代研究表明，雷公藤紅素具有廣譜、高效的抗腫瘤活性，與傳統(tǒng)抗腫瘤藥物相比，自身細(xì)胞毒性作用輕，抗腫瘤活性更強(qiáng)，并能表現(xiàn)出明顯的放療及化療增敏作用[9]。隨著近年來(lái)雷公藤紅素研究的深入，其廣泛的應(yīng)用和獨(dú)特的優(yōu)勢(shì)使其有望成為抗腫瘤的有效藥物。本文綜述了近幾年雷公藤紅素單用及聯(lián)用抗腫瘤作用機(jī)制及其遞藥系統(tǒng)的研究進(jìn)展，以期為今后雷公藤紅素的深入研究和廣泛應(yīng)用奠定基礎(chǔ)。

1 抗腫瘤作用機(jī)制

1.1 抑制腫瘤細(xì)胞增殖

腫瘤細(xì)胞具有無(wú)限增殖的特性，雷公藤紅素可以通過(guò)促進(jìn)腫瘤細(xì)胞凋亡、誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞自噬、阻滯細(xì)胞周期等抑制腫瘤細(xì)胞增殖，從而達(dá)到治療腫瘤的作用。

1.1.1 誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡 細(xì)胞凋亡是指為維持內(nèi)環(huán)境穩(wěn)定，由基因控制的細(xì)胞程序性死亡，通過(guò)一系列基因的激活、表達(dá)以及調(diào)控等作用，其異常功能是腫瘤生長(zhǎng)和抗腫瘤發(fā)展的基礎(chǔ)。由雷公藤紅素介導(dǎo)的細(xì)胞凋亡主要通過(guò)3種通路實(shí)現(xiàn)：線粒體參與的內(nèi)源性信號(hào)通路、外源性信號(hào)通路和內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激（endoplasmic reticulum stress，ERS）介導(dǎo)的細(xì)胞凋亡。

線粒體參與的內(nèi)源性信號(hào)途徑主要是由關(guān)鍵調(diào)節(jié)因子B淋巴細(xì)胞瘤-2（B-cell lymphoma 2，Bcl-2）家族蛋白導(dǎo)致的線粒體膜的破壞或通透，從而導(dǎo)致細(xì)胞色素c（cytochrome c，Cyt-c）的釋放和其他凋亡因子的表達(dá)。在細(xì)胞質(zhì)中，Cyt-c與三磷酸腺苷形成一種稱為凋亡酶激活因子的復(fù)合物，該復(fù)合物激活半胱氨酸天門冬氨酸特異的蛋白酶9（cysteinyl aspartate specific proteinase-9，Caspase-9）進(jìn)而激活下游Caspase-3等相關(guān)靶點(diǎn)[10]。Bcl-2家族蛋白包括抗凋亡Bcl-2家族蛋白（Bcl-2、Bcl-xL和Survivin）和凋亡前Bcl-2家族蛋白[B淋巴細(xì)胞瘤-2基因相關(guān)啟動(dòng)子（Bcl-2 asociated death promoter，Bad）、Bcl相關(guān)X蛋白（Bcl-associated X protein，Bax）、BH3結(jié)構(gòu)域凋亡誘導(dǎo)蛋白（BH3 interacting domain death agonist，Bid）和Bcl-2細(xì)胞死亡調(diào)節(jié)因子（Bcl-2 interacting mediator of cell death，Bim）]，他們通過(guò)調(diào)節(jié)Cyt-c的釋放來(lái)抑制或促進(jìn)細(xì)胞凋亡[11-13]。Yang等[14]在研究雷公藤紅素對(duì)人乳腺癌MCF-7細(xì)胞的作用機(jī)制時(shí)發(fā)現(xiàn)，雷公藤紅素通過(guò)降低Bcl-2表達(dá)，增加Bax表達(dá)來(lái)誘導(dǎo)Cyt-c和凋亡誘導(dǎo)因子釋放從而使得Caspase-7、8、9活化，誘導(dǎo)聚二磷酸腺苷核糖聚合酶（poly ADP-ribose polymerase，PARP）裂解以及Caspase-8介導(dǎo)的Bid裂解。雷公藤紅素還可以通過(guò)抑制磷脂酰肌醇3-激酶（phosphatidyl inositol 3-kinase，PI3K）/蛋白激酶B（protein kinase B，PKB/Akt）途徑誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡[15]。當(dāng)用雷公藤紅素5 μmol/L和拉帕替尼5 μmol/L組合處理人乳腺癌MDA-MB-453細(xì)胞時(shí)，可以在體外生長(zhǎng)抑制和凋亡方面顯示出強(qiáng)大的協(xié)同作用，表明凋亡相關(guān)蛋白（Caspase-9、3）與生長(zhǎng)途徑相關(guān)蛋白[人類表皮生長(zhǎng)因子受體2（human epidermal growth factor receptor-2，HER2）、磷酸化HER2（p-HER2）、磷酸化Akt（p-Akt）和磷酸化細(xì)胞外調(diào)節(jié)蛋白激酶（phosphorylated extracellular regulated protein kinases 1/2，p-ERK1/2）]的下調(diào)[15]。雷公藤紅素處理后的細(xì)胞線粒體通透性發(fā)生改變，使得線粒體膜電位破壞[16]。另外有研究發(fā)現(xiàn)雷公藤紅素可以通過(guò)抑制肽基脯氨酰順/反異構(gòu)酶（peptidyl-prolyl cis-trans isomerase NIMA-interacting 1，Pin1）表達(dá)，從而抑制Akt、信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)與轉(zhuǎn)錄激活因子3（signal transducer and activator of transcription 3，STAT3）、p38、c-Jun氨基端激酶（c-Junamino-terminal kinases，JNK）、p65和白細(xì)胞介素（interleukin，IL）-6表達(dá)[17]。Zhang等[18]研究表明雷公藤紅素2、4 μmol/L處理2 d后，人卵巢癌OVCAR3細(xì)胞中miRNA-21的相對(duì)表達(dá)水平降低，miRNA-21表達(dá)的下調(diào)會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞OVCAR3中PI3K/Akt-核轉(zhuǎn)錄因子（nuclear transcription factorκB，NF-κB）的表達(dá)水平降低，從而通過(guò)線粒體途徑誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡。

死亡受體介導(dǎo)的外源性信號(hào)通路是通過(guò)促凋亡配體與促凋亡受體結(jié)合導(dǎo)致死亡誘導(dǎo)信號(hào)復(fù)合體的形成[19]，如自殺相關(guān)因子（factor associated suicide，F(xiàn)as）、腫瘤壞死因子（tumor necrosis factor，TNF）-αR、DR3、DR4和DR5等死亡受體通過(guò)激活配體誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡。雷公藤紅素通過(guò)增加TNF受體（TNF receptor，TNFR）-1、TNFR-2、Fas、DCR2、DR5、RIP和TNFR相關(guān)死亡結(jié)構(gòu)域蛋白的表達(dá)來(lái)誘導(dǎo)口腔癌SASV16細(xì)胞凋亡[20]。NF-κB途徑是細(xì)胞因子刺激、細(xì)胞周期、凋亡和血管生成的關(guān)鍵調(diào)節(jié)因子[21]。Ni等[22]在使用雷公藤紅素處理骨髓瘤細(xì)胞后，采用免疫印跡法對(duì)NF-κB信號(hào)通路進(jìn)行了檢測(cè)，NF-κB和IκB激酶α（IκB kinase α，IKKα）的表達(dá)降低，用免疫熒光法檢測(cè)雷公藤紅素處理后NF-κB p65亞基的核轉(zhuǎn)位，結(jié)果表明雷公藤紅素以時(shí)間相關(guān)的方式有效地阻止了p65亞基的核轉(zhuǎn)位和NF-κB抑制蛋白α（inhibitor of NF-κBα，IκBα））裂解。此外，Mou等[23]發(fā)現(xiàn)雷公藤紅素作用人肺癌A549細(xì)胞48 h后激活自殺相關(guān)因子配體與Fas結(jié)合，并通過(guò)激活Caspase-8觸發(fā)外部途徑細(xì)胞凋亡。雷公藤紅素可以減弱豆蔻酰佛波醇乙酯、TNF-α對(duì)IL-6基因表達(dá)的激活作用，下調(diào)IKKα、p50和p65的表達(dá)，通過(guò)NFκB依賴途徑下調(diào)IL-6基因表達(dá)，達(dá)到抑制前列腺癌細(xì)胞增殖的目的[24]。TNF相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體（TNF related apoptosis inducing ligand，TRAIL）是TNF超家族成員之一，其與DR4/DR5結(jié)合可誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡。在研究雷公藤紅素誘導(dǎo)骨肉瘤細(xì)胞凋亡的實(shí)驗(yàn)中，Li等[25]發(fā)現(xiàn)雷公藤紅素可以上調(diào)外源性凋亡途徑蛋白DR5的表達(dá)。

ERS是細(xì)胞的一種保護(hù)機(jī)制，但是當(dāng)長(zhǎng)時(shí)間過(guò)度應(yīng)激或功能障礙時(shí)，可能會(huì)誘導(dǎo)凋亡。ERS通常伴隨著能誘導(dǎo)ERS活性氧（reactive oxygen species，ROS）生成的增加，過(guò)多的ROS水平干擾氧化還原動(dòng)態(tài)平衡從而誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡[26-27]。同時(shí)，ERS也會(huì)導(dǎo)致線粒體功能障礙，增加線粒體ROS生成[28]。研究表明，雷公藤紅素可以誘導(dǎo)JNK的激活進(jìn)一步的誘導(dǎo)C/EBP同源蛋白（C/EBP homologous protein，CHOP），從而誘導(dǎo)DR5死亡受體的表達(dá)，最終引起細(xì)胞凋亡[29]。在用雷公藤紅素1 μmol/L處理MCF-7細(xì)胞后，發(fā)現(xiàn)雷公藤紅素可以通過(guò)ROS-蛋白激酶C-AMP活化蛋白激酶-p53蛋白-Polo激酶1通路誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡[30]。同樣，Chen等[27]發(fā)現(xiàn)雷公藤紅素誘導(dǎo)ROS積聚激活JNK，進(jìn)而啟動(dòng)線粒體介導(dǎo)的細(xì)胞凋亡。雷公藤紅素通過(guò)ROS積聚誘導(dǎo)HSP90客戶蛋白表達(dá)下調(diào)，并通過(guò)抑制線粒體呼吸鏈復(fù)合體I活性促進(jìn)ROS積聚。雷公藤紅素誘導(dǎo)產(chǎn)生的ROS可以激活多種信號(hào)通路，如包括p38、JNK和ERK1/2在內(nèi)的絲裂原活化蛋白激酶（mitogen activated protein kinase，MAPK）家族成員進(jìn)而誘發(fā)細(xì)胞凋亡[31]。研究表明，雷公藤紅素3 μmol/L處理人骨肉瘤HOS細(xì)胞24 h可誘導(dǎo)發(fā)生凋亡，該作用是通過(guò)上調(diào)ERS相關(guān)蛋白[兔抗人結(jié)合免疫球蛋白（binding immunoglobulin protein，BiP）、p-蛋白激酶樣內(nèi)質(zhì)網(wǎng)激酶、肌醇依賴酶1α、鈣聯(lián)蛋白和蛋白質(zhì)二硫鍵異構(gòu)酶]、凋亡相關(guān)蛋白（CHOP、Caspase-12）和Caspase-3的表達(dá)等[32]。Yoon等[33]發(fā)現(xiàn)雷公藤紅素通過(guò)誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡來(lái)殺死乳腺和結(jié)腸癌細(xì)胞系，這種細(xì)胞死亡模式的特征是通過(guò)擴(kuò)張內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和線粒體而出現(xiàn)廣泛的空泡化。雷公藤紅素誘導(dǎo)活化轉(zhuǎn)錄因子4（activating transcription factor 4，ATF4）、CHOP、賴氨酸-天冬氨酸-谷氨酸-亮氨酸受體的積累，同時(shí)通過(guò)線粒體鈣離子單向轉(zhuǎn)運(yùn)體介導(dǎo)的線粒體Ca2+攝取、三磷酸肌醇受體介導(dǎo)的內(nèi)質(zhì)網(wǎng)Ca2+釋放誘導(dǎo)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激。雷公藤紅素通過(guò)誘導(dǎo)線粒體功能障礙從而增加ROS生成，破壞線粒體膜，促進(jìn)Cyt-c的釋放，進(jìn)而激活Caspase-3和Bax的表達(dá)，誘導(dǎo)人肝癌HepG2細(xì)胞凋亡[34]。雷公藤紅素誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡的作用機(jī)制見圖1。

圖1 雷公藤紅素誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡的作用機(jī)制Fig.1 Mechanisms of celastrol inducing apoptosis in tumor cells

1.1.2 阻滯細(xì)胞周期 細(xì)胞周期的調(diào)控由細(xì)胞周期蛋白（Cyclin）、細(xì)胞周期蛋白依賴性激酶（cyclindependent kinases，CDKs）、CDKs抑制劑三者共同協(xié)調(diào)完成[35]。研究表明，雷公藤紅素通過(guò)下調(diào)miR-21的表達(dá)明顯抑制細(xì)胞增殖，并抑制細(xì)胞增殖相關(guān)蛋白Cyclin D1和CDK6的表達(dá)，誘導(dǎo)G2/M細(xì)胞周期阻滯[36]。雷公藤紅素上調(diào)G2/M期相關(guān)蛋白細(xì)胞周期檢測(cè)點(diǎn)激酶2（checkpointkinase 2，Chk2）、磷酸化Chk2（phosphorylate Chk2，p-Chk2）、p-周期蛋白依賴性激酶 1（cyclin-dependent kinases 1，Cdc2）和p-Cdc25C的表達(dá)，下調(diào)Cdc25C的表達(dá)，增加Cyclin B1的表達(dá)。此外，雷公藤紅素還增加了p21的蛋白質(zhì)水平，阻斷Cdk1/Cyclin B1的激活[31]。Li等[17]分別用雷公藤紅素0.25、0.5、1 μmol/L處理人卵巢癌SKOV3細(xì)胞24 h，當(dāng)雷公藤紅素劑量為1 μmol/L時(shí)可以顯著抑制Cyclin D1、CDK2、CDK4和Bcl-2的下調(diào)以及Caspase-3的增加，從而顯著抑制G2/M期細(xì)胞的活力并誘導(dǎo)凋亡和細(xì)胞周期停滯。另一項(xiàng)研究表明雷公藤紅素通過(guò)上調(diào)p-Chk2、Chk2、p-Cdc25C、p-Cdc2、p21和Cyclin B1的表達(dá)，并下調(diào)Cdc25C和Cdc2的表達(dá)，誘導(dǎo)G2/M期的細(xì)胞蓄積，并且G0/G1和S期相應(yīng)減少[25]。Cyclin E是一種核蛋白，與CDK2締合，并在G1期晚期形成活性復(fù)合物，引導(dǎo)其進(jìn)入S期。在雷公藤紅素處理的人骨髓瘤RPMI-8226細(xì)胞中發(fā)現(xiàn)通過(guò)下調(diào)Cyclin D1和Cyclin E水平，上調(diào)p21和p27水平誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡[37]。雷公藤紅素阻滯腫瘤細(xì)胞周期的作用機(jī)制見圖2。

圖2 雷公藤紅素阻滯腫瘤細(xì)胞周期的作用機(jī)制Fig.2 Mechanism of celastrol blocking tumor cell cycle

1.2 抑制腫瘤細(xì)胞轉(zhuǎn)移

癌癥患者的死亡通常是由于腫瘤細(xì)胞轉(zhuǎn)移造成的。細(xì)胞黏附是腫瘤細(xì)胞轉(zhuǎn)移級(jí)聯(lián)過(guò)程中的關(guān)鍵步驟，阻斷這一步驟被認(rèn)為是預(yù)防和治療腫瘤轉(zhuǎn)移的合理策略。實(shí)體瘤的生長(zhǎng)和轉(zhuǎn)移依賴于新形成的鄰近血管的血液供應(yīng)。因此，腫瘤血管成為潛在治療干預(yù)的關(guān)鍵靶點(diǎn)[38]。據(jù)研究報(bào)道，雷公藤紅素抑制β-1整合素介導(dǎo)的活性從而抑制人臍靜脈內(nèi)皮HUVECs細(xì)胞與纖連蛋白的黏附。Ke等[38]用1.0、2.0、4.0、8.0 μg/mL雷公藤紅素作用于HUVECs細(xì)胞1 h，細(xì)胞黏附率分別降至87%、68%、52%、46%。此外，有研究發(fā)現(xiàn)，用雷公藤紅素處理人肺癌95-D細(xì)胞和小鼠黑色素瘤B16F10細(xì)胞，可以明顯抑制該細(xì)胞外基質(zhì)黏附。這種抑制是通過(guò)增強(qiáng)β-1整合素配體親和力以及降低黏著斑激酶磷酸化實(shí)現(xiàn)的[39]。研究發(fā)現(xiàn)脂多糖通過(guò)激活細(xì)胞表面受體toll樣受體4（toll-like receptor 4，TLR4）促進(jìn)血管生成，雷公藤紅素可以下調(diào)脂多糖誘導(dǎo)的人多發(fā)性骨髓瘤Lp-1細(xì)胞上TLR4的表達(dá)[40]。雷公藤紅素還可以抑制血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子（vascular endothelial growth factor，VEGF）分泌以及Akt/一氧化氮合酶信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)[41]。關(guān)于雷公藤紅素抑制腫瘤細(xì)胞遷移的通路，有報(bào)道表明雷公藤紅素誘導(dǎo)人前列腺癌PC-3細(xì)胞凋亡并抑制Akt/哺乳動(dòng)物雷帕霉素靶蛋白（mammalian target of rapamycin，mTOR）/p70核糖體蛋白S6激酶（p70 ribosomal protein S6 kinase，p70S6K）通路。研究者用VEGF 50 ng/mL和雷公藤紅素0、0.5、1、2、5 μmol/L共同處理PC-3細(xì)胞后，發(fā)現(xiàn)雷公藤紅素以濃度相關(guān)地方式有效抑制VEGF觸發(fā)的HUVECs細(xì)胞的mTOR信號(hào)級(jí)聯(lián)反應(yīng)，包括Akt、mTOR和S6K激酶的激活，提示雷公藤紅素通過(guò)阻斷mTOR信號(hào)通路抑制腫瘤血管生成[42]?；|(zhì)金屬蛋白酶（matrix metalloproteinases，MMPs）是癌癥侵襲的重要組成部分，用雷公藤紅素0、0.1、0.5、1 μmol/L處理HepG2細(xì)胞后，通過(guò)免疫印跡法檢測(cè)到雷公藤紅素以劑量相關(guān)地方式顯著降低MMP-2和MMP-9蛋白水平，進(jìn)一步的研究發(fā)現(xiàn)抑制miR-224的表達(dá)可以降低MMP-9的蛋白水平[43]。同樣，Ma等[44]發(fā)現(xiàn)雷公藤紅素通過(guò)抑制mTOR/p70S6K/真核生物翻譯起始因子4E和ERK信號(hào)通路來(lái)抑制缺氧誘導(dǎo)的缺氧誘導(dǎo)因子1α的激活，從而抑制VEGF的表達(dá)。

1.3 誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞自噬

自噬是一個(gè)吞噬自身細(xì)胞質(zhì)蛋白或細(xì)胞器并使其包被進(jìn)入囊泡，并與溶酶體融合形成自噬溶酶體，降解其所包裹的內(nèi)容物的過(guò)程，從而實(shí)現(xiàn)細(xì)胞本身的代謝需要和某些細(xì)胞器的更新。p62在氧化應(yīng)激反應(yīng)途徑中起著關(guān)鍵作用[45]。p62表達(dá)的增加也可能與ROS的產(chǎn)生有關(guān)。Liu等[31]發(fā)現(xiàn)雷公藤紅素觸發(fā)了自噬，并上調(diào)了程序性死亡受體-1和微管相關(guān)蛋白輕鏈3B（microtubule-associatedprotein light chain 3 B，LC3B）的表達(dá)以及p62的水平，通過(guò)激活ROS/JNK信號(hào)通路和抑制Akt/mTOR信號(hào)通路，同時(shí)觸發(fā)膠質(zhì)瘤細(xì)胞凋亡和自噬。同樣，在HOS細(xì)胞和人骨肉瘤MG-63細(xì)胞中，Li等[25]發(fā)現(xiàn)雷公藤紅素誘導(dǎo)的LC3B-II表達(dá)的增加。雷公藤紅素1.2 μmol/L作用于人宮頸癌HeLa細(xì)胞12 h，可觀察到LC3點(diǎn)的形成和聚集，提示雷公藤紅素可誘導(dǎo)自噬小體的形成。雷公藤紅素處理的HeLa細(xì)胞12 h內(nèi)，上調(diào)自噬標(biāo)志物L(fēng)C-3I轉(zhuǎn)化為L(zhǎng)C-3Ⅱ和LC3來(lái)誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞系[46]。此外，Guo等[47]發(fā)現(xiàn)雷公藤紅素下調(diào)雄激素受體及其靶標(biāo)miR-17-92a，從而導(dǎo)致前列腺癌細(xì)胞自噬。

1.4 抑制炎癥應(yīng)激

炎癥被認(rèn)為是對(duì)病原體或受損細(xì)胞的生物反應(yīng)。長(zhǎng)時(shí)間的炎癥應(yīng)激會(huì)引起過(guò)敏癥狀和許多疾病的進(jìn)展，包括腫瘤的生成。炎癥的發(fā)生通常與NFκB調(diào)節(jié)的細(xì)胞因子有關(guān)，如TNF-α和IL-1β，然后抑制TNF-α誘導(dǎo)的抗凋亡（如Bcl-2、Bcl-xL和Survivin）、侵襲（如MMP-9）和血管生成相關(guān)蛋白的基因表達(dá)來(lái)發(fā)揮抗腫瘤作用。雷公藤紅素已顯示出對(duì)炎癥介導(dǎo)的腫瘤細(xì)胞的保護(hù)作用。研究發(fā)現(xiàn)，雷公藤紅素可以通過(guò)調(diào)節(jié)Notch信號(hào)通路抑制腫瘤增殖，誘導(dǎo)人白血病U937細(xì)胞凋亡[48]。在人腦星形膠質(zhì)瘤細(xì)胞中，雷公藤紅素下調(diào)黏附分子（如細(xì)胞間粘附分子-1/血管細(xì)胞粘附分子1）和趨化因子[如單核細(xì)胞趨化因子-1（monocyte chemotactic protein-1，CCL2）、CXC趨化因子8（C-X-C motif chemokine ligand 8，CXCL8）和CXCL10]的表達(dá)。研究者通過(guò)使用雷公藤紅素處理人腦星形膠質(zhì)瘤CRT-MG細(xì)胞發(fā)現(xiàn)雷公藤紅素通過(guò)抑制JNKMAPK-STAT1/NF-κB信號(hào)調(diào)節(jié)促炎介質(zhì)的表達(dá)[49]。同樣，另一項(xiàng)研究發(fā)現(xiàn)，雷公藤紅素通過(guò)NF-κB調(diào)節(jié)的趨化因子（CCL2、CXCL10、CXCL12、CCR2和CXCR4）基因抑制人類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎成纖維樣滑膜RA-FLSS細(xì)胞的增殖和侵襲[50]。

2 聯(lián)合用藥

2.1 抗腫瘤作用機(jī)制

雷公藤紅素作為目前具有抗腫瘤前景的中藥活性成分之一，雷公藤紅素的臨床應(yīng)用受到了嚴(yán)重的肝、腎毒性以及免疫抑制限制。迄今為止，對(duì)于許多類型的腫瘤，聯(lián)合治療被認(rèn)為是臨床上優(yōu)選的治療過(guò)程。藥物聯(lián)合使用產(chǎn)生的協(xié)同作用可以提高單獨(dú)用藥治療功效，從而減少每種藥物的劑量，為患者帶來(lái)更好的耐受性，減輕藥物毒副作用。此外由于不同藥物的不同作用機(jī)制，單一用藥經(jīng)常會(huì)使腫瘤細(xì)胞產(chǎn)生耐藥性，聯(lián)合療法降低了耐藥性的風(fēng)險(xiǎn)。因此，雷公藤紅素聯(lián)合用藥為腫瘤治療提供了新的機(jī)遇。具體聯(lián)合作用機(jī)制主要包括抗腫瘤多藥耐藥性（multidrug resistance，MDR）、誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡、抑制腫瘤細(xì)胞轉(zhuǎn)移、阻滯細(xì)胞周期、誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞自噬等。

2.1.1 協(xié)同增敏，逆轉(zhuǎn)腫瘤MDR 腫瘤MDR是指腫瘤細(xì)胞對(duì)一種抗腫瘤藥物產(chǎn)生抗藥性的同時(shí)，對(duì)于結(jié)構(gòu)和作用機(jī)制不同的多種化療藥物表現(xiàn)出的交叉抵抗現(xiàn)象，是腫瘤難治療、易復(fù)發(fā)的主要原因之一。研究表明，雷公藤紅素聯(lián)合其他藥物增敏是解決腫瘤MDR的一種可靠方法。Lu等[51]發(fā)現(xiàn)TNFα與醉茄素A 2.5 μmol/L或雷公藤紅素0.5 μmol/L聯(lián)合作用時(shí)，以劑量相關(guān)地方式激活Caspase-3、9，下調(diào)X連鎖凋亡抑制蛋白（X-linked inhibitor of apoptosis protein，XIAP），誘導(dǎo)人乳腺癌MDA-MB-231細(xì)胞凋亡。這種結(jié)合還導(dǎo)致蛋白酶體靶蛋白IκBα的積累，從而抑制NF-κB信號(hào)的激活，從而使MDA-MB-231細(xì)胞對(duì)醉茄素A和雷公藤紅素增敏。有研究者探討了雷公藤紅素聯(lián)合表皮生長(zhǎng)因子受體酪氨酸激酶抑制劑（epidermal growth factor receptor tyrosine kinase inhibitor，EGFR-TKIs）對(duì)T790M突變?nèi)朔伟〩1975細(xì)胞生長(zhǎng)的影響及可能的機(jī)制，結(jié)果發(fā)現(xiàn)聯(lián)合用藥抑制H1975細(xì)胞EGFR、STAT3、p-Akt和p-ERK的表達(dá)和磷酸化，提示通過(guò)抑制p-EGFR途徑抑制H1975細(xì)胞的侵襲[52]。同時(shí)，體內(nèi)實(shí)驗(yàn)也證明了雷公藤紅素聯(lián)合EGFR-TKIs對(duì)小鼠腫瘤生長(zhǎng)具有更顯著的抑制作用。Boridy等[53]通過(guò)雷公藤紅素與替拉替尼聯(lián)用，抑制了HSP90靶向蛋白毒性應(yīng)激反應(yīng)，可使人膠質(zhì)母細(xì)胞瘤對(duì)雷公藤紅素治療增敏，增加多泛素化聚集體和p62積累，直接影響蛋白穩(wěn)定，從而克服膠質(zhì)母細(xì)胞瘤中的MDR。雷公藤紅素除了與藥物聯(lián)用可以增加抗腫瘤效果以外，還可以通過(guò)增強(qiáng)肺癌細(xì)胞輻射敏感性來(lái)對(duì)抗腫瘤。Lee等[54]檢測(cè)了雷公藤紅素的放射增敏活性，結(jié)果表明EGFR、人表皮生長(zhǎng)因子受體-2（human epidermal growth factor receptor 2，ErbB2）和Survivin水平降低，絲氨酸（serine，Ser）15和Ser20殘基磷酸化同時(shí)抑制其蛋白酶體降解以及上調(diào)p53水平。

2.1.2 誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡 Yan等[15]對(duì)拉帕替尼5 μmol/L與雷公藤紅素5 μmol/L聯(lián)合誘導(dǎo)HER2/neu高表達(dá)的人乳腺癌MDAMB-453細(xì)胞凋亡進(jìn)行研究，發(fā)現(xiàn)兩藥聯(lián)合可以通過(guò)上調(diào)凋亡相關(guān)蛋白（Caspase-9、3），下調(diào)生長(zhǎng)途徑相關(guān)蛋白（HER2、p-HER2、p-Akt和p-ERK1/2）以及降低HER2膜蛋白表達(dá)來(lái)增強(qiáng)細(xì)胞的凋亡和生長(zhǎng)抑制。Zhu等[55]發(fā)現(xiàn)Bcl-2抑制劑ABT-737 10 μmol/L與雷公藤紅素1.25 μmol/L聯(lián)合應(yīng)用可協(xié)同抑制肝癌細(xì)胞增殖，誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡。其作用的通路包括內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激介導(dǎo)的細(xì)胞凋亡和線粒體參與的內(nèi)源性信號(hào)途徑等。線粒體參與的內(nèi)源性信號(hào)途徑具體包括增強(qiáng)Caspase-3和PARP的裂解作用，誘導(dǎo)Bax積累，降低Bcl-2和Bcl-xL表達(dá)水平，同時(shí)上調(diào)Bim和重組p53，上調(diào)凋亡調(diào)節(jié)因子（recombinant p53 upregulated modulator of apoptosis，PUMA）的表達(dá)及Cyt-c的釋放。內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激被激活，ATF4和CHOP蛋白的表達(dá)增強(qiáng)，eIF2α磷酸化的增加誘導(dǎo)了Noxa的激活。人類髓細(xì)胞白血病-1（myeloid leukemia cell-1，Mcl-1）作為一種重要的凋亡因子，由于其與ABT-737的親和力較弱而不能使ABT-737發(fā)揮出較強(qiáng)的腫瘤殺傷活性。將ABT-737與雷公藤紅素聯(lián)用促進(jìn)了Noxa與Mcl-1的相互作用，導(dǎo)致Mcl-1的表達(dá)減少?gòu)亩鰪?qiáng)了細(xì)胞凋亡。在研究人惡性腦膠質(zhì)瘤U87-MG細(xì)胞的實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)，雷公藤紅素聯(lián)合TRAIL可以通過(guò)上調(diào)DR5表達(dá)并激活Caspase-8、Caspase-3和PARP誘導(dǎo)死亡受體途徑的凋亡[56]。雷公藤紅素聯(lián)合順鉑也通過(guò)線粒體和內(nèi)質(zhì)網(wǎng)途徑促進(jìn)人骨肉瘤U-2OS細(xì)胞凋亡。研究發(fā)現(xiàn)其作用靶點(diǎn)包括上調(diào)Cyt-c、Caspase-3和C/EBP同源蛋白的表達(dá)，下調(diào)Bcl-2、PARP、葡萄糖（相對(duì)分子質(zhì)量78 000）調(diào)節(jié)蛋白和Caspase-9的表達(dá)[57]。

2.1.3 抑制腫瘤細(xì)胞轉(zhuǎn)移 Zhang等[58]發(fā)現(xiàn)雷公藤紅素和索拉非尼聯(lián)用可以抑制Akt途徑和VEGF自分泌系統(tǒng)增強(qiáng)對(duì)HepG2細(xì)胞和小鼠肝癌Hepa1-6細(xì)胞的抗腫瘤活性。研究發(fā)現(xiàn)miR-33a-5p在肺腺癌組織中表達(dá)下調(diào)，提示miR-33a-5p可能是一種抑癌基因[59]，且經(jīng)雷公藤紅素處理后，miR-33a-5p表達(dá)上調(diào)，其上調(diào)可以增強(qiáng)細(xì)胞對(duì)雷公藤紅素的敏感性，發(fā)揮協(xié)同抗腫瘤作用。通過(guò)免疫印跡法顯示其抗腫瘤作用的機(jī)制主要是由于雷公藤紅素上調(diào)miR-33a-5p的表達(dá)，miR-33a-5p的高表達(dá)抑制mTOR及其下游效應(yīng)（mTOR、p-p70S6K和p-4EBP1的表達(dá)下降）。此外，有研究發(fā)現(xiàn)雷公藤紅素可與5-氟尿嘧啶、鹽霉素、誘導(dǎo)型一氧化氮合成酶抑制劑1400W和LNIO聯(lián)合應(yīng)用增強(qiáng)抑制人結(jié)腸癌HT-29和HCT116細(xì)胞的增殖、遷移[60]。進(jìn)一步研究表明雷公藤紅素抑制大腸癌細(xì)胞的血管生成主要是通過(guò)抑制血管生成途徑中的關(guān)鍵基因[胸腺嘧啶核苷酸磷酸化酶（thymidine phosphorylase，TYMP）、人血管內(nèi)皮鈣黏蛋白5（cadherin 5，CDH5）、血小板反應(yīng)蛋白2（thrombospondin 2，THBS2）、瘦素（leptin，LEP）、MMP-9和TNF]和蛋白（IL-1β、MMP-9、血小板衍生生長(zhǎng)因子、絲氨酸蛋白酶抑制劑E1和組織基質(zhì)金屬蛋白酶抑制劑-4）的表達(dá)。Shanmugam等[61]報(bào)道了通過(guò)雷公藤紅素與硼替佐米聯(lián)合使用可以抑制CXCR4和MMP-9的表達(dá)，降低血清IL-6和TNF-α水平來(lái)抑制多發(fā)性骨髓瘤MM細(xì)胞的侵襲和遷移，這可能成為治療骨髓瘤和其他血液系統(tǒng)惡性腫瘤的有效途徑。

2.1.4 阻滯細(xì)胞周期 Jiang等[62]將雷公藤甲素和雷公藤紅素聯(lián)用處理人肺癌H1299細(xì)胞和人非小細(xì)胞肺腺癌H157細(xì)胞后，用PI染色流式細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)胞周期分布，發(fā)現(xiàn)雷公藤甲素和雷公藤紅素聯(lián)用可誘導(dǎo)2種腫瘤細(xì)胞的G2/M期積聚和G0/G1期減少。為進(jìn)一步探討雷公藤甲素和雷公藤紅素阻滯細(xì)胞周期的分子機(jī)制，采用免疫印跡法檢測(cè)了細(xì)胞周期相關(guān)蛋白的表達(dá)。結(jié)果表明，這種機(jī)制主要是通過(guò)顯著上調(diào)G2/M期細(xì)胞周期調(diào)控蛋白CDK1、Cyclin B和p21蛋白水平以及降低CDK2/4/6、Cyclin D/E、膜母細(xì)胞瘤蛋白（retinoblastoma protein，pRb）、p27蛋白水平來(lái)實(shí)現(xiàn)的。同樣，有研究者發(fā)現(xiàn)雷公藤紅素1 μmol/L和柳氮磺胺吡啶600 μmol/L聯(lián)用可以誘導(dǎo)人膠質(zhì)瘤SNB-19細(xì)胞在G2/M期的進(jìn)展明顯受阻，受阻率達(dá)到46.6%[63]。

2.1.5 誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞自噬 細(xì)胞自噬同樣是抑制腫瘤細(xì)胞增殖的重要方式，Duan等[64]用雷公藤紅素聯(lián)合鞣花酸處理人肺癌HOP62細(xì)胞和H1975細(xì)胞后，檢測(cè)了綠色熒光蛋白（green fluorescent protein，GFP）標(biāo)記的LC3陽(yáng)性自噬小體的形成。實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)與單獨(dú)在細(xì)胞中使用鞣花酸25 μmol/L或雷公藤紅素0.75 μmol/L進(jìn)行處理相比，聯(lián)合治療可誘導(dǎo)細(xì)胞核和線粒體中的GFP-LC3點(diǎn)顯著增加和LC3-II積累，下調(diào)p-Akt并抑制mTOR磷酸化和p70S6K的表達(dá)，此外還降低蛋白磷酸酶2A癌性抑制因子（cancerous inhibitor of protein phosphatase 2A，CIP2A）表達(dá)。靶向雄激素受體（androgen receptor，AR）軸是前列腺癌治療的標(biāo)準(zhǔn)策略，miR-101是一種自噬的抑制劑，Guo等[65]發(fā)現(xiàn)AR通過(guò)反式激活miR-101來(lái)抑制自噬。因此miR-101模擬物與雷公藤紅素聯(lián)合應(yīng)用治療前列腺癌可能是一種有前途的治療方法。

雷公藤紅素聯(lián)合應(yīng)用抗腫瘤機(jī)制見表1。

表1 雷公藤紅素聯(lián)合應(yīng)用抗腫瘤作用機(jī)制Table 1 Antitumor mechanism of celastrol in combination

續(xù)表1

2.2 藥物遞送系統(tǒng)用于雷公藤紅素的聯(lián)合抗腫瘤

雖然雷公藤紅素聯(lián)合其他藥物有著良好的抗腫瘤效果，但由于其各種物理化學(xué)和藥動(dòng)學(xué)限制，如低水溶性、低生物利用度和靶向性不足，限制了這些化合物在臨床中的使用。納米技術(shù)在藥物傳遞領(lǐng)域的積極探索為聯(lián)合用藥抗腫瘤帶來(lái)了新思路。納米粒通過(guò)粒徑控制、結(jié)構(gòu)改造和表面修飾等途徑，可具有較強(qiáng)的載藥能力、體內(nèi)長(zhǎng)循環(huán)、腫瘤組織被動(dòng)或主動(dòng)靶向等特點(diǎn)[35]。鑒于納米技術(shù)的優(yōu)勢(shì)，納米載體與前景較好的中藥相關(guān)單體活性化合物的結(jié)合，對(duì)于探索藥物與細(xì)胞相互作用的相關(guān)機(jī)制，促進(jìn)納米載體在臨床治療中的潛在應(yīng)用具有重要意義。

2.2.1 與化療藥物聯(lián)合用于藥物遞送系統(tǒng) 有研究報(bào)道將雷公藤紅素負(fù)載到介孔二氧化硅納米顆粒中，將阿西替尼負(fù)載到聚乙二醇化脂質(zhì)雙層中，制備了負(fù)載阿西替尼/雷公藤紅素的復(fù)合納米顆粒，得到的納米粒粒徑約為120 nm，多分散指數(shù)狹窄（約0.07）。體外細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)復(fù)合納米顆粒能有效地抑制血管生成和線粒體功能，并能有效地內(nèi)化小鼠鱗狀細(xì)胞癌SCC-7細(xì)胞、人乳腺癌BT-474細(xì)胞和人神經(jīng)母細(xì)胞瘤SH-SY5Y細(xì)胞。在異種腫瘤模型中，復(fù)合納米顆粒組小鼠的抑瘤率明顯高于其他組，抑瘤率達(dá)到64%[79]。Hu等[80]將疏水的雷公藤紅素和親水性的吲哚胺2,3-加雙氧酶抑制劑1-甲基色氨酸同時(shí)負(fù)載到透明質(zhì)酸包被的陽(yáng)離子白蛋白納米粒（hyaluronic acid coated cationic albumin nanoparticle，HNPs）中，所得納米粒平均粒徑約為300 nm，實(shí)現(xiàn)了層次化的納米結(jié)構(gòu)，并有效地將小分子藥物輸送到胰腺腫瘤部位。在透明質(zhì)酸酶存在的情況下，HNPs的粒徑減小，以促進(jìn)深入腫瘤組織的滲透。在C57BL/6小鼠移植模型中的生物分布研究表明，HNPs增加了腫瘤的積聚，延長(zhǎng)了HNPs的循環(huán)時(shí)間。與單獨(dú)使用雷公藤紅素相比，雷公藤紅素聯(lián)合1-甲基色氨酸通過(guò)改善腫瘤微環(huán)境的免疫抑制作用，增強(qiáng)了抑制腫瘤的效果。同時(shí)HNPs可減輕體內(nèi)使用雷公藤紅素的不良反應(yīng)如心臟毒性，提高安全性。在促結(jié)締組織增生性黑色素瘤中，腫瘤細(xì)胞和腫瘤相關(guān)成纖維細(xì)胞的纖維化以及腫瘤微環(huán)境的免疫抑制影響了抗腫瘤的療效。為了解決這一難題，Liu等[81]開發(fā)了一種基于米托蒽醌和雷公藤紅素靶向遞送的創(chuàng)新化學(xué)免疫策略，研究發(fā)現(xiàn)當(dāng)米托蒽醌和雷公藤紅素以最佳比例（5∶1）有效地共傳遞到腫瘤部位時(shí)顯著地觸發(fā)了免疫原性腫瘤細(xì)胞凋亡并恢復(fù)了腫瘤抗原識(shí)別，從而激發(fā)了整體的抗腫瘤免疫，通過(guò)協(xié)同作用減少了藥物用量和不良反應(yīng)。納米載體介導(dǎo)的化學(xué)免疫治療成功地重塑了纖維化和免疫抑制的腫瘤微環(huán)境，阻止了腫瘤的發(fā)展，并進(jìn)一步抑制了腫瘤向主要器官的轉(zhuǎn)移。

2.2.2與中藥活性成分聯(lián)合用于藥物遞送系統(tǒng) 秦越等[82]采用經(jīng)典的薄膜水合的方法制備了基于丹參酮IIA磺酸鈉和小粒徑的雷公藤紅素微乳的多組分脂質(zhì)體，該脂質(zhì)體通過(guò)最初釋放丹參酮IIA磺酸鈉表現(xiàn)出協(xié)同的抗乳腺癌活性用于調(diào)節(jié)腫瘤微環(huán)境，隨后釋放雷公藤紅素微乳以消滅腫瘤組織。體外研究表明，該脂質(zhì)體可誘導(dǎo)MCF-7細(xì)胞大量凋亡，表明其對(duì)腫瘤細(xì)胞具有協(xié)同的細(xì)胞毒性作用。此外，與單獨(dú)使用雷公藤紅素相比，該脂質(zhì)體的全身毒性較小。沈展等[83]采用“混勻-滴注”方法制備轉(zhuǎn)鐵蛋白修飾的β-欖香烯-雷公藤紅素共傳遞微乳用于協(xié)同靶向抗結(jié)直腸癌。通過(guò)四甲基偶氮唑鹽法得到β-欖香烯與雷公藤聯(lián)合給藥的最佳比例40∶1，對(duì)人結(jié)腸癌Lovo、HT-29細(xì)胞的半數(shù)抑制濃度半數(shù)抑制濃度（median inhibition concentration，IC50）分別為（11.7±0.6）、（27.4±1.2）μg/mL，聯(lián)合指數(shù)（combination index，CI）分別為0.61、0.72。該微乳與Lovo細(xì)胞孵育4 h后的攝取量為7.2 μg/mg，是β-欖香烯＋雷公藤紅素給藥組的3.3倍。該微乳能夠引發(fā)59.2%的Lovo細(xì)胞凋亡，對(duì)荷Lovo大腸癌裸鼠的腫瘤生長(zhǎng)有明顯的抑制作用。相比單獨(dú)使用雷公藤紅素，該微乳給藥組裸鼠的腫瘤組織HE染色切片出現(xiàn)大量的細(xì)胞壞死，Ki-67免疫組化切片顯示腫瘤細(xì)胞增殖被明顯抑制。另外有研究者構(gòu)建了轉(zhuǎn)鐵蛋白和葉酸雙重修飾的薏苡仁油-雷公藤紅素微乳，平均粒徑為（52.52±0.11）nm，多分散指數(shù)為0.124±0.019，Zeta電位為（-21.50±1.70）mV，且具有較好的體外穩(wěn)定性。細(xì)胞實(shí)驗(yàn)表明，該微乳對(duì)MCF-7、A549細(xì)胞的IC50分別為0.77、0.85 μmol/L，游離雷公藤紅素對(duì)MCF-7細(xì)胞的IC50值（1.52 μmol/L）高于各微乳組，提示微乳可能通過(guò)攝取增強(qiáng)來(lái)提高細(xì)胞毒性[84]。

2.2.3 與其他治療方式聯(lián)合用于藥物遞送系統(tǒng) 除了與常規(guī)的化療藥物和中藥活性成分聯(lián)合，雷公藤紅素還可以聯(lián)合靶向腫瘤微環(huán)境的載體實(shí)現(xiàn)靶向協(xié)同抗腫瘤。Tan等[85]將親脂性陽(yáng)離子(4-羧丁基)三苯基溴化膦與類糖脂結(jié)合物偶聯(lián)，得到線粒體靶向結(jié)合物，再負(fù)載弱酸性藥物雷公藤紅素后，得到CTPP-線粒體靶向結(jié)合物/雷公藤紅素膠束，對(duì)線粒體堿性pH值（8.0）有選擇性的響應(yīng)。受膠束疏水核心與雷公藤紅素之間較弱的相互作用所控制，在pH值為8.0時(shí)，雷公藤紅素具有較高的溶解性，該膠束對(duì)線粒體堿性pH有較強(qiáng)的選擇性。但在pH值為7.4、5.0時(shí)，藥物有緩慢的釋放行為，減少藥物在細(xì)胞質(zhì)和溶酶體中的滲漏。體內(nèi)實(shí)驗(yàn)中，以MCF-7裸鼠移植瘤為模型，該膠束的抑瘤率為80.17%，明顯高于類糖脂結(jié)合物/雷公藤紅素（58.35%）和雷公藤紅素（54.89%）。光敏感型納米材料目前研究熱點(diǎn)之一，其中TiO2納米纖維作為生物相容性最好的半導(dǎo)體納米材料之一，可以作為一種良好的光敏劑材料，在藥物載體和光動(dòng)力療法治療疾病等領(lǐng)域顯示出潛在的應(yīng)用前景。研究者將TiO2納米纖維引入雷公藤紅素后對(duì)所制備的納米進(jìn)行表征，其表面呈針狀，寬度約為80 nm，長(zhǎng)度為200～5000 nm。當(dāng)雷公藤紅素和TiO2納米纖維結(jié)合后，在紫外線照射下HepG2細(xì)胞的凋亡率增加到43.9%，與對(duì)照組比較有顯著性差異。納米纖維與雷公藤紅素形成的納米復(fù)合材料還可以增強(qiáng)雷公藤紅素對(duì)HepG2細(xì)胞的細(xì)胞毒作用，降低藥物消耗，從而降低相關(guān)藥物的不良反應(yīng)[86]。

3 結(jié)語(yǔ)

隨著越來(lái)越多中藥活性成分抗腫瘤研究的開展，中藥在抗腫瘤方面的作用在國(guó)內(nèi)外都得到了普遍認(rèn)可。雷公藤紅素作為一種目前研究比較深入且具備較好成藥性的中藥活性成分，具有廣譜、多途徑、多靶點(diǎn)等特點(diǎn)，可以有效地抑制惡性腫瘤細(xì)胞和異種移植物。然而目前其作用機(jī)制仍有一部分尚未得到充分論證，為了進(jìn)一步提高其在未來(lái)臨床實(shí)踐中的潛力，對(duì)于其抗腫瘤機(jī)制和免疫學(xué)靶點(diǎn)的研究是必不可少的。雖然雷公藤紅素具有良好的抗腫瘤作用，但還沒有上市藥品，主要是由于毒性較大，口服給藥后會(huì)引起胃腸道不良反應(yīng)，且易產(chǎn)生全身性的不良反應(yīng)，并且有報(bào)道發(fā)現(xiàn)，雷公藤紅素容易造成嚴(yán)重的器官毒性，如心臟、肝臟和神經(jīng)系統(tǒng)毒性，其有效劑量和毒性劑量還有待進(jìn)一步探究[87-89]。另外，雷公藤紅素為難溶性物質(zhì)，口服生物利用度較低，上述因素嚴(yán)重限制了該藥物的臨床應(yīng)用。

腫瘤發(fā)病機(jī)制復(fù)雜，單一的藥物治療難以達(dá)到預(yù)期的效果且容易產(chǎn)生耐藥性或嚴(yán)重的不良反應(yīng)，使得抗腫瘤藥物的療效和長(zhǎng)期使用相當(dāng)有限。通過(guò)藥物聯(lián)合應(yīng)用由于其作用機(jī)制不同，可以同時(shí)調(diào)節(jié)多種信號(hào)通路，從而起到協(xié)同增效的作用同時(shí)減少M(fèi)DR現(xiàn)象和不良反應(yīng)的發(fā)生。因此藥物的聯(lián)合治療已經(jīng)成為腫瘤治療的一種有效途徑，具有廣闊的前景。但聯(lián)合用藥易受不同藥物體內(nèi)代謝特性的影響，致到達(dá)腫瘤部位的藥量較少。納米遞藥系統(tǒng)可同時(shí)轉(zhuǎn)運(yùn)2種或多種藥物，增加藥物溶解性，改善藥物的藥動(dòng)學(xué)和藥理特性，提高藥物靶向性從而限制藥物在腎臟、肝臟、脾臟和其他非靶向器官中的蓄積等特點(diǎn)。因此，采用雷公藤紅素聯(lián)合用藥納米遞藥系統(tǒng)為藥物研發(fā)以及臨床運(yùn)用提供了新道路。

即便如此，納米遞藥系統(tǒng)仍存在一些問題需要解決：（1）載藥率過(guò)低。在制備納米的時(shí)候注意材料的選擇，如選擇配體修飾及多孔結(jié)構(gòu)的材料；此外制備工藝的考察篩選出最佳處方可以在一定程度上改善載藥率過(guò)低的問題；（2）在安全性方面，使用獲得上市許可的生物相容性較好的納米材料構(gòu)建納米釋藥系統(tǒng)有望回避載體的安全性問題，尋找特異性更好的受體及相關(guān)配體也可以減少納米載體在其他正常組織中的分布，從而減少毒性；（3）代謝不穩(wěn)定。納米在進(jìn)入人體以后還容易與一些蛋白形成蛋白冠，使得納米粒被網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)清除。多數(shù)納米載體特異性釋藥性能差，藥物被突然釋放，導(dǎo)致局部濃度過(guò)高產(chǎn)生較大的毒性。因此，如何改良藥物的緩控釋放性能，避免頻繁給藥，維持合適的血藥濃度，增加治療的穩(wěn)定性也是今后的研究方向。

利益沖突所有作者均聲明不存在利益沖突