袁曉娟,楊先富，汪忠榮

(黔東南州動物疫病預防控制中心，貴州 凱里 556000)

小反芻獸疫(PPR)是由小反芻獸疫病毒(PPRV) 引起山羊、綿羊、野生小反芻獸的高度接觸性傳染病，以高熱稽留、眼鼻分泌物增加、口腔糜爛、腹瀉和肺炎為特征。該病發(fā)病率和死亡率極高，我國在2014年就有20多個省(市)陸續(xù)發(fā)生小反芻獸疫疫情，其中就包括貴州省黔東南州從江縣、凱里市、榕江縣、黃平縣4個縣，給我州養(yǎng)羊業(yè)造成了巨大的經濟損失，防疫形勢嚴峻。疫情的發(fā)生給養(yǎng)羊業(yè)造成了巨大的經濟損失，所以搞好小反芻獸疫免疫及免疫抗體水平，提前做好疫病風險防控分析、積極有效做好疫病防控工作，保證扶貧產業(yè)發(fā)展，使我州養(yǎng)羊業(yè)朝著健康、生態(tài)、穩(wěn)定的方向發(fā)展。

1 材料與方法

1.1 待檢血清

血清樣品共5 358份，采集自黔東南州16個縣規(guī)模羊場及散養(yǎng)戶已免疫羊及屠宰場，其中規(guī)模場1 312份，散養(yǎng)戶2 975份，屠宰場1 071份。對采集的血清樣本于-20℃冰箱凍存?zhèn)溆谩?/p>

1.2 眼鼻拭子的采集

病原學樣品共3740份，采集自黔東南州16個縣規(guī)模羊場及散養(yǎng)戶，其中規(guī)模場500份，散養(yǎng)戶3 240份。對待檢活動物采集眼鼻分泌物置于滅菌甘油生理鹽水中，-80℃冰箱凍存?zhèn)溆谩?/p>

1.3 主要試劑與儀器

羊小反芻獸疫抗體檢測試劑盒，購自深圳市康百得生物科技有限公司(產品批號分別為20171109、20180507、20191021)；羊小反芻獸疫病原檢測試劑盒，北京世紀元亨小反芻獸疫病毒實時熒光RT-PCR檢測試劑盒(產品批號為別為PPR20170923P、PPR20181113P、PPRV20191031P)。主要儀器：酶標儀、全自動核酸提取儀、實時熒光定量PCR儀、生化培養(yǎng)箱、臺式高速離心機等。

1.4 方法及判定

使用前將所有試劑恢復室溫，小反芻獸疫抗體檢測用競爭ELISA法；病毒核酸檢測用實時熒光定量PCR方法。嚴格按照試劑盒說明書進行操作和結果判定。

2 結果與分析

2.1 2017～2019年黔東南州16個縣(市)小反芻獸疫抗體檢測結果

2017～2019年對黔東南州區(qū)域內16縣(市)進行了小反芻獸疫免疫抗體檢測，本次共采集5 358份血清樣本，抗體合格數(shù)為4 384份，總合格率為81.8%，各縣市的抗體合格率除雷山縣(68.3%)，其余15縣均在70%以上，達到了農業(yè)部規(guī)定的最低標準。詳情見表1。

表1 2017-2019年黔東南州16個縣(市)小反芻獸疫抗體檢測結果

2.2 2017～2019年不同場(戶)小反芻獸疫抗體檢測結果

2017～2019年黔東南州16個縣來自不同場(戶)的羊血清共5 358份，合格4384份，合格率為81.8%；規(guī)模場1 312份，合格1 162份，合格率為88.6%。散養(yǎng)戶2 975份，合格2 398份，合格率為80.6%。屠宰場1 071份，合格824份，合格率為76.9%。詳情見表2。

表2 2017-2019年黔東南州不同場(戶)小反芻獸疫抗體檢測結果

2.3 16縣(市)不同場點小反芻獸疫抗體檢測結果

對16個縣不同場點的羊血清樣品進行了小反芻獸疫抗體檢測，由結果可以看出：麻江縣、黃平縣、施秉縣、鎮(zhèn)遠縣、天柱縣、黎平縣、榕江縣7縣規(guī)模場和散養(yǎng)場的小反芻獸疫抗體合格率較高，7縣中規(guī)模場最高達100%，散養(yǎng)戶最高達90.5%。綜合來看，黎平縣、榕江縣整體合格情況較好，優(yōu)于其他縣市。詳情見表3。

表3 黔東南州16縣不同場(戶)小反芻獸疫抗體檢測結果

2.4 16縣(市)不同場點小反芻獸疫病原學檢測結果

2017～2019年共采集3740份眼鼻拭子進行PPR病原學監(jiān)測，結果顯示全部為PPR病原陰性，未出現(xiàn)野毒感染。

表4 2017～2019年黔東南州不同場(戶)小反芻獸疫病原學檢測結果

3 討論

通過對黔東南州2017-2019年16個縣(市)的小反芻獸疫抗體的監(jiān)測，疫苗免疫后小反芻獸疫抗體總體陽性率達81.8%，達到國家農業(yè)部標準(70%以上)，3年的免疫合格率呈現(xiàn)不規(guī)律性，群體保護率普遍較高，效果令人滿意。從監(jiān)測結果看，全州有15個縣(市)樣品的抗體合格率均在70%以上，對羊群的保護效果基本滿意。值得注意的是，雷山縣3年的免疫抗體合格率都不理想，防疫較為薄弱，究其原因可能是當?shù)卣畬Ψ揽毓ぷ鞑粔蛑匾暎O(jiān)測頻率不夠，對抗體監(jiān)測不合格的養(yǎng)殖場(戶)沒有進行補免以及對新調入的羊群漏免等。2017～2019年，16縣抗體合格率高低不等，黎平、榕江3年抗體合格率相對穩(wěn)定，這與當?shù)卣坝嘘P部門的重視密切相關，防控經驗值得各縣借鑒。雖然平均抗體合格率都在70%以上，但是情況也不容樂觀，免疫抗體合格率不達標在2017年有8個縣，2018年1個縣，2019年2個縣，總體呈好的方向發(fā)展，這與防疫人員及養(yǎng)殖場(戶)主防疫意識增強有一定的關系。

從2017～2019年黔東南州16個縣(市)不同場(戶)的小反芻獸疫抗體監(jiān)測數(shù)據(jù)上看：3年的小反芻獸疫抗體平均合格率均在70%以上，免疫效果規(guī)模場高于散養(yǎng)戶，散養(yǎng)戶高于屠宰場，但由于屠宰場采樣未區(qū)分規(guī)模場及散養(yǎng)戶采樣數(shù)量及比重，代表性不足，為科學評估免疫效果，所以下一步應區(qū)分規(guī)模場及散養(yǎng)戶樣品來源，增強效果評估的規(guī)范性。

從監(jiān)測結果看，我州規(guī)模養(yǎng)殖場羊的抗體合格率高于散養(yǎng)戶，且16個縣(市)規(guī)模場抗體合格率均達到70%以上，散養(yǎng)戶高低不等，說明農村散養(yǎng)戶疫苗免疫仍處于薄弱環(huán)節(jié)。原因可能是：(1)小反芻獸疫疫苗是弱毒活疫苗，該疫苗該毒株對熱敏感，穩(wěn)定性較差，而我州大部分縣市冷鏈系統(tǒng)冷鏈系統(tǒng)不完善，容易造成疫苗失效。規(guī)模場有良好的疫苗保存條件，而散養(yǎng)戶則需要防疫員上門，防疫員只有疫苗箱，保存很難達到要求。(2)散養(yǎng)戶免疫意識不強有關。(3)與飼養(yǎng)環(huán)境和管理水平有關。

通過3年來PPR病原學監(jiān)測可以發(fā)現(xiàn)，在3 740份樣品中，均未檢出PPR病原陽性，我州未出現(xiàn)野毒感染，同時證明疫苗生物安全性是良好的，未出現(xiàn)疫苗排毒現(xiàn)象。

4 總結

小反芻獸疫防控措施主要采取病例撲殺和疫苗免疫相結合。針對免疫效果較差的地區(qū)應及時進行補免，有學者通過試驗證實，二次免疫不僅可以增強免疫效果，且對已經產生的小反芻獸疫抗體不會產生中和抵消作用，可明顯提高免疫抗體合格率。健康羊在隱性感染的情況下，接種疫苗是沒有效果的，甚至可能把這個隱性感染病毒給激發(fā)出來，造成羊群發(fā)病。所以更應該強調加強引種檢疫和飼養(yǎng)管理、改善養(yǎng)殖環(huán)境，推崇自繁自養(yǎng)。加大監(jiān)督力度，加強基層技術人員及養(yǎng)殖戶小反芻獸疫防控的宣傳和指導，提高防控意識。