袁 艷 鄭州大學(xué)附屬兒童醫(yī)院 河南省兒童遺傳代謝性疾病重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室 鄭州兒童醫(yī)院兒科，河南省鄭州市 450000

麻疹是麻疹病毒引起、小兒多見(jiàn)的急性呼吸道傳染病，成人較少見(jiàn)。目前，該病以小范圍散發(fā)為主，具有極強(qiáng)的傳染性，臨床以發(fā)熱、咳嗽、流鼻涕等主要表現(xiàn)，還可有特殊的麻疹黏膜斑及廣泛的皮膚斑丘疹，通常經(jīng)治療后均可痊愈，但有小部分患者會(huì)并發(fā)肺炎、中耳炎等，甚至并發(fā)腦炎等嚴(yán)重并發(fā)癥。研究表明，麻疹后患兒機(jī)體免疫狀態(tài)發(fā)現(xiàn)較明顯的改變[1]。輔助性T細(xì)胞17(Th17)是近年來(lái)新發(fā)現(xiàn)的一種T細(xì)胞亞群,其在自身免疫性疾病和機(jī)體防御反應(yīng)中發(fā)揮重要作用。Th17細(xì)胞的特征性細(xì)胞因子白介素-17(IL-17)對(duì)中性粒細(xì)胞有極強(qiáng)的趨化作用，可促進(jìn)多種細(xì)胞釋放炎性因子,誘導(dǎo)氣管黏膜分泌大量黏液，使氣道高反應(yīng)性增強(qiáng)[2]。目前，Th17細(xì)胞、IL-17水平與麻疹病情嚴(yán)重程度關(guān)系的報(bào)道較為少見(jiàn)，故本文欲通過(guò)對(duì)不同病情麻疹患兒的外周血Th17細(xì)胞、IL-17水平進(jìn)行檢測(cè)，分析兩者含量與麻疹病情的關(guān)系，為麻疹的臨床治療提供依據(jù)，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 對(duì)象和方法

1.1 研究對(duì)象 收集2015年5月—2019年2月在我院兒科就診的麻疹患兒151例。納入標(biāo)準(zhǔn)：(1)符合第8版《諸福棠實(shí)用兒科學(xué)》中的診斷標(biāo)準(zhǔn)[3]，血清中麻疹抗體IgM檢測(cè)陽(yáng)性；(2)發(fā)病后3～6d入院，有明顯麻疹癥狀；(3)年齡≤14歲。排除標(biāo)準(zhǔn)：(1)近1個(gè)月內(nèi)接受免疫抑制劑及糖皮質(zhì)激素治療者。(2)近2周內(nèi)患有感染性疾病或免疫性疾病者。(3)發(fā)病前曾有肝臟疾病或肝損害史。(4)并發(fā)細(xì)菌性肺炎同時(shí)伴肝臟損害的患兒(因此類患兒較少故將其排除研究)。將其納入麻疹組，其中男92例，女59例；年齡4個(gè)月～14歲(6.2±1.3)歲；并發(fā)細(xì)菌性肺炎37例，并發(fā)肝臟損害45例。并發(fā)細(xì)菌性肺炎[4]患兒同時(shí)伴有以下癥狀：(1)咳嗽,咳黃膿痰；(2)麻疹癥狀消退時(shí)體溫未下降或下降后再升高；(3)胸部拍片顯示：肺部存在感染性病灶；(4)白細(xì)胞及中性粒細(xì)胞水平升高；(5)痰細(xì)菌培養(yǎng)陽(yáng)性。并發(fā)肝功能損害患兒伴有丙氨酸轉(zhuǎn)氨酶升高。另外收集同期在我院門(mén)診體檢的健康兒童60例作為對(duì)照組，其中男41例，女19例；年齡3個(gè)月～14歲(6.5±1.8)歲。兩組兒童性別、年齡比較無(wú)明顯差異(P>0.05)，具有可比性?；純杭议L(zhǎng)均知情同意，并簽署知情同意書(shū)。

1.2 方法

1.2.1 標(biāo)本采集：采集麻疹患兒就診當(dāng)日、對(duì)照組兒童體檢當(dāng)日的外周靜脈血5ml，均分為2份，1份保存在含有EDTA2的試管中,用于Th17細(xì)胞檢測(cè)，另1份直接離心獲得血清后檢測(cè)IL-17水平。

1.2.2 外周血Th17細(xì)胞檢測(cè)：采用FACSAriall流式細(xì)胞儀(美國(guó)BD公司)檢測(cè)，具體步驟：取抗凝血50μl,加入等體積RPMI1640液，混勻,加4μl刺激劑, 在5% CO2、37℃環(huán)境下中孵育5h；取出細(xì)胞，加入20μl FITC,室溫避光培養(yǎng)30min,加入100μl破膜劑,震蕩混勻,室溫下維持5min,加入20μl藻紅蛋白(PE)的抗人IL-17。洗滌、重懸、上機(jī)檢測(cè)。

1.2.3 血清IL-17水平檢測(cè)：取外周血標(biāo)本離心3 000r/min獲得血清后,用ELISA 法檢測(cè)，嚴(yán)格按照試劑盒說(shuō)明書(shū)操作，試劑盒由上海恒遠(yuǎn)生物技術(shù)有限公司提供。

2 結(jié)果

2.1 兩組外周血Th17細(xì)胞及血清IL-17對(duì)比 麻疹組患兒外周血Th17細(xì)胞占比及血清IL-17水平明顯高于對(duì)照組(P<0.05)，見(jiàn)表1。

表1 兩組外周血Th17細(xì)胞及血清IL-17對(duì)比

2.2 有并發(fā)癥患兒與無(wú)并發(fā)癥患兒與對(duì)照組Th17細(xì)胞及血清IL-17對(duì)比 麻疹并發(fā)肺炎患兒、并發(fā)肝臟損害患兒外周血Th17細(xì)胞占比及血清IL-17水平明顯高于無(wú)并發(fā)癥患兒和對(duì)照組(P<0.05)，無(wú)并發(fā)癥患兒雖高于對(duì)照組，但差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，見(jiàn)表2。

表2 有并發(fā)癥患兒、無(wú)并發(fā)癥患兒與對(duì)照組Th17細(xì)胞及血清IL-17對(duì)比

3 討論

麻疹是兒童最常見(jiàn)的傳染病之一，它是由麻疹病毒引起的急性呼吸道傳染病。隨著兒童麻疹疫苗的普遍接種，其發(fā)病率與病死率明顯降低[5]。但局部地區(qū)仍有散發(fā)流行。近年來(lái)因人口流動(dòng)的增加，漏種率也逐漸升高，致使發(fā)病率有所上升。

麻疹病毒的抗原穩(wěn)定性極強(qiáng)，通過(guò)飛沫傳播，引起感染者氣道黏膜單核細(xì)胞浸潤(rùn)，出現(xiàn)炎癥反應(yīng)。研究證實(shí)，麻疹患兒存在特異性的IgG和IgM升高現(xiàn)象，而且CD4+、CD8+等細(xì)胞被激活，導(dǎo)致急性期中性粒細(xì)胞移動(dòng)能力降低，白細(xì)胞總數(shù)、血小板計(jì)數(shù)減少，補(bǔ)體系統(tǒng)被抑制等免疫反應(yīng)紊亂癥狀的發(fā)生。麻疹發(fā)生過(guò)程中伴有炎癥損傷、免疫抑制改變，麻疹病毒侵入機(jī)體后，體液免疫和細(xì)胞免疫均被激活，這一過(guò)程中Th細(xì)胞發(fā)揮著重要作用[6]。Th17細(xì)胞是近年來(lái)新發(fā)現(xiàn)的一種不同于Th1、Th2細(xì)胞的CD4+T 細(xì)胞亞群,其主要效應(yīng)細(xì)胞因子為IL-17[7]。Th17細(xì)胞主要通過(guò)分泌IL-17參與氣道炎癥性疾病的發(fā)生過(guò)程。

肺炎是麻疹常見(jiàn)并發(fā)癥之一，主要是因麻疹病毒感染后患兒機(jī)體免疫功能紊亂，增加了細(xì)菌感染的風(fēng)險(xiǎn)，而肺炎發(fā)生后數(shù)天會(huì)出現(xiàn)更強(qiáng)烈的應(yīng)激反應(yīng)，加重代謝紊亂[8]。本文結(jié)果顯示，麻疹并發(fā)肺炎患兒的外周血Th17 細(xì)胞和IL-17 水平較對(duì)照組明顯升高(P<0.05)；而無(wú)并發(fā)癥患兒較對(duì)照組升高并不明顯(P>0.05)，提示Th17 細(xì)胞及IL-17在麻疹并發(fā)細(xì)菌性肺炎和肝功能損害過(guò)程中發(fā)揮重要作用，其機(jī)制可能是：細(xì)菌入侵氣道黏膜后，刺激樹(shù)突狀細(xì)胞分泌大量的IL-6，誘導(dǎo)Th0細(xì)胞向Th17細(xì)胞分化，導(dǎo)致Th17細(xì)胞增加及活性增強(qiáng)，同時(shí)產(chǎn)生大量促炎因子IL-17。IL-17趨化大量中性粒細(xì)胞至氣道，對(duì)細(xì)菌產(chǎn)生吞噬、清除作用，同時(shí)誘導(dǎo)防御素-2β等多種抗菌肽釋放[9]?？梢?jiàn)，Th17 細(xì)胞及IL-17 對(duì)麻疹并發(fā)肺炎患兒氣道有一定的保護(hù)作用。

本文結(jié)果還發(fā)現(xiàn)，麻疹并發(fā)肝功能損害患兒的外周血Th17 細(xì)胞和IL-17 水平較對(duì)照組明顯升高(P<0.05)；而無(wú)并發(fā)癥患兒較對(duì)照組升高并不明顯(P>0.05)，說(shuō)明Th17 細(xì)胞和IL-17參與了麻疹并發(fā)肝功能損害過(guò)程。肝功能損害也是麻疹常見(jiàn)的并發(fā)癥，機(jī)體感染麻疹病毒后會(huì)產(chǎn)生免疫復(fù)合物沉積于肝組織中，導(dǎo)致肝功能損害，但這種損害是暫時(shí)的，不同于乙肝病毒等所引起的肝功能損害[10]。Th17 細(xì)胞和IL-17可能在免疫復(fù)合物沉積到肝組織中發(fā)揮促進(jìn)作用。

綜上所述，麻疹患兒存在不同程度的免疫抑制，其外周血Th17細(xì)胞及IL-17不同程度升高，但并非肺炎及肝功能損害時(shí)升高程度更明顯，故通過(guò)動(dòng)態(tài)檢測(cè)Th17細(xì)胞和IL-17能預(yù)示病情嚴(yán)重程度及治療效果評(píng)估。