邱雪梅 關 瑋 位秀麗, 劉 龍 楊 靖 汪靜杰

湖北醫(yī)藥學院基礎醫(yī)學院 1 病原生物學實驗室 2 醫(yī)學微生物教研室，湖北省十堰市 442000

醫(yī)學微生物學為病原生物學的重要組成部分，是一門理論與臨床相聯系的橋梁課程[1]。高校開設的醫(yī)學微生物學課程涵蓋理論課程與實驗操作實踐，兩部分內容相輔相成。近年來,醫(yī)學微生物學實驗教學的重要性日益凸顯，教師秉持以學生為中心的理念，不斷地優(yōu)化實驗內容，鞏固理論知識與解決臨床問題[2-3]。在實驗教學中，實驗教輔不只是傳統(tǒng)認識上僅承擔實驗準備任務的實驗人員，在教學改革中實驗內容優(yōu)化、實驗流程演練等方面均需其直接參與全過程，為實驗教學的開展提供前提基礎。教輔人員不僅在實驗準備、預實驗、實驗教學等方面發(fā)揮自己的優(yōu)勢，他們還是實驗室建設、平臺維護與更新的管理與執(zhí)行者[4]。筆者作為一名教輔人員，結合自己實際工作中的經驗與切身體會，淺析實驗教輔人員在醫(yī)學微生物實驗教學中的重要性與角色定位。本文內容可為教輔人員如何服務、促進實驗教學與改革提供思路，以期為提升高校的實驗教學質量提供理論參考。

1 在預實驗優(yōu)化環(huán)節(jié)中重要作用

教輔人員在正式試驗前進行預實驗演練，并比較預實驗結果與理論結果是否一致或偏差，有利于及時篩查實驗準備過程中的問題，以免盲目開展實驗教學所造成資源浪費及影響教學效果。若預實驗存在偏差或出現問題，通過重復實驗檢查確定實驗流程、實驗材料、試劑耗材等環(huán)節(jié)中的紕漏。筆者結合醫(yī)學微生物具體的實驗內容分析討論教輔人員有效開展預實驗對實驗教學的重要性。醫(yī)學微生物學實驗主要包括細菌的形態(tài)染色觀察、分離培養(yǎng)方法、細菌藥物敏感檢測、球菌與腸道細菌生化檢測等幾大部分內容。

1.1 經典細菌形態(tài)染色觀察 如革蘭氏染色實驗，主要鍛煉學生熟練使用顯微鏡觀察、染色操作要領并根據結果識別與觀察細菌形態(tài)與類型的能力。教輔人員在預實驗中重點關注染色效果、鏡下細菌分布與清晰度等重要指標，可篩查染色流程、試劑與菌液配制、顯微鏡設備運行等方面是否存在問題，以調整優(yōu)化菌液配制濃度與染色最佳時間等，使學生能在實驗操作時觀察到形象清晰的細菌顯微結構特征。

1.2 細菌的分離與培養(yǎng) 針對細菌的分離培養(yǎng)實驗，出于安全原因的考慮，所選用菌種材料為可代表兩種典型形態(tài)特征的檸檬色葡萄球菌與大腸桿菌。但該球菌生長相對于大腸桿菌，其單菌落少而小，這需教輔人員通過預實驗摸索配制混合菌液中兩者配比。根據所用兩種菌的生長特征及預實驗經驗，大腸桿菌∶檸檬色葡萄球菌菌液配比在1∶2～1∶3范圍內較合適；再根據實時條件調整優(yōu)化配比，使學生能清晰直觀地觀察到兩類代表性的菌落特征。同時為激發(fā)學生探索與主動性，在傳統(tǒng)內容中提供指定菌株環(huán)節(jié)之外可增加開發(fā)性的探索實驗內容，如我們在課程中加入了學生可以自由設計方案采集身體皮膚、口腔或自己隨身手機上細菌的內容，該類實驗的設置很好地鍛煉學生創(chuàng)新意識及動手能力。

1.3 球菌與腸道細菌生化檢測 如化膿性球菌與腸道桿菌的生化檢測類實驗，包括血漿凝固酶實驗、生化系列反應、肥達實驗等。每一項實驗內容都需教輔人員針對性在預實驗中關注特定細節(jié)。血漿凝固酶實驗中白色葡萄球菌可能出現凝集現象，生化反應試驗中發(fā)現與預期結果指標偏差，陰性與陽性結果顛倒；均需教輔人員鑒定細菌是否污染或出現變異現象。而在肥達試驗中，如實驗陽性結果不顯著或未出現，教輔人員需甄別是否免疫動物后的采集血清內抗體數量少。教輔人員在預實驗及時觀察實驗效果，并根據結果完善調整實驗方案與準備工作，有利于正式實驗圓滿完成、增加學生實驗實踐的滿意度。

2 在實驗準備中角色的不可替代性

實驗課程教學前的準備過程作為實驗教輔人員的基本工作，該過程看似簡單，實則細致煩瑣；其實驗準備的質量直接關乎實驗教學效果好壞。實驗準備前教輔人員首先應了解教學對象的專業(yè)背景，分析各專業(yè)教學大綱中對本專業(yè)學生的具體要求。其次需摸底各專業(yè)班級學生理論課程的進度與知識掌握程度。充分了解學生專業(yè)架構與學情分析，為實驗材料準備與選擇、如何設置實驗環(huán)節(jié)、教學過程如何側重融合理論知識等提供理論依據。結合自身的工作內容，簡述教輔人員在具體實驗準備環(huán)節(jié)中的角色重要性。

2.1 實驗試劑的準備 醫(yī)學微生物實驗課程涉及的實驗內容復雜，所需的各種試劑種類繁多，教輔人員需準確了解相關試劑的理化性質，在此基礎上合理使用試劑，根據不同實驗所需的試劑類型以針對性地選擇對應的配制方法及是否現配現用等。教輔人員掌握并運用這些要領關乎實驗質量。

2.2 實驗材料的準備 醫(yī)學微生物學實驗課程會涉及各種不同的材料，基本材料準備包括：不同實驗菌株培養(yǎng)與菌液配制、示教菌平板接種、動物免疫接種及采血純化獲得抗體以及相關試劑盒等耗材的準備與檢查。在實驗材料準備中，教輔人員各項成熟的技能操作與涉及獲取抗體等動物實驗方案的制定，均體現了教輔人員的主導作用與重要性，直接影響實驗的成敗好壞。

2.3 儀器設備使用與檢查 醫(yī)學微生物學實驗教學中使用最為普遍、基本儀器包括各類型顯微鏡、高壓滅菌鍋等常用實驗設備。教輔人員熟練操作使用設備與調試設備的能力在服務于教學中的作用凸顯，教學過程中出現簡單故障時及時排查解決，可在設備維修工程師處理前的過渡期保障教學有序進行。

3 在實驗教學與改革中發(fā)揮特有優(yōu)勢

醫(yī)學微生物學實驗教學主要由教師完成，近年實驗教輔在實驗教學與改革中也逐漸發(fā)揮重要作用。當前高校實驗教輔隊伍能力不斷提升、結構逐步優(yōu)化，教輔人員基本都具有碩士甚至博士學歷；其專業(yè)知識扎實、職業(yè)素養(yǎng)較高，在全過程主導實驗準備的同時，還可發(fā)揮優(yōu)勢勝任實驗教學工作。經驗豐富的實驗教輔人員參與到實驗教學過程，注入“新鮮血液”；教輔人員對實驗工作的高度融合參與在教學工作中可很好發(fā)揮其優(yōu)勢、豐富創(chuàng)新教學模式，能有效地促進實驗教學質量。

其次，教輔人員參與教學融合實驗細節(jié)，傳授切身經驗提升學生能力并以反饋問題服務于實驗準備工作的優(yōu)化改良。教輔人員在教學中與學生直接交流對話，可發(fā)現學生在實驗理論與實踐技能上存在的問題、易犯錯的環(huán)節(jié)。一方面能結合自己全程實驗準備的經歷與切身體會，直觀詳細地反饋解釋學生出現問題、異常情況的原因所在，可及時引導啟發(fā)學生主動思考并修正錯誤，充分發(fā)揮以學生為中心，使深入掌握操作要領。另一方面，掌握教學中學生出現的高頻問題，為反哺輔助實驗準備過程的細節(jié)優(yōu)化提供直接依據，最終促進實驗內容改革與教學實施過程針對性的改良。

此外，實驗教輔承擔著實驗室管理工作，相對于教研室教師，因接受過系統(tǒng)培訓與規(guī)范學習，對實驗室規(guī)章條例與規(guī)范管理運行更熟悉。既可延伸理論知識、傳授學生微生物學相關實驗室的規(guī)章制度及生物安全知識，又能更好地處理應對生物安全相關問題。 教輔人員熟悉掌握了生物安全事故應急處理預案知識，在學生實驗過程中如出現突發(fā)事故(如菌液灑出、試管破裂、手指劃破等)及儀器設備出現故障等，能更快更好地處理解決，保障教學順暢。

4 實驗室管理及平臺運行的執(zhí)行者

病原生物學實驗室作為醫(yī)學微生物學實驗教學場所，其實驗室管理涵蓋硬件設備設施與軟件平臺、規(guī)章制度體系。在實驗室負責人領導下，教輔人員是最直接的參與人和執(zhí)行者，其管理水平直接影響實驗教學能否有序進行。實驗設備、儀器平臺更新維護與實驗菌種等重要資源的保存，保障實驗室的生物安全以及實驗室管理規(guī)章制度與條例的制定完善，均直接決定著實驗室的正常運行與否。

4.1 實驗室儀器設備管理及維護 我校所轄病原生物學實驗室擁有眾多儀器設備，包括生物安全柜、高壓滅菌鍋、顯微鏡、數碼互動系統(tǒng)等。實驗教學中使用最基本、常用的光學顯微鏡數量達五百余臺；高壓蒸汽滅菌器同樣使用頻率高，且具較高危險系數。包括像顯微鏡、高壓滅菌鍋等所有需用到的儀器設備在實驗教學中的檢查與維護調試，確定功能是否正常并根據需要定期維修與更換。教輔人員在這些方面起到的統(tǒng)籌規(guī)劃作用，維系著實驗教學的連貫性。

4.2 實驗試劑的合理管理 試劑藥品是實驗室的重要組成部分，其管理好壞直接影響實驗室安全[5-6]。病原生物學實驗室所含試劑藥品中涉及部分易燃易爆品(酒精)、腐蝕品(鹽酸、氫氧化鈉、氫氧化鉀)及毒害品(甲醛、二甲苯)等。教輔人員應參照標準化學實驗室保管試劑藥品去規(guī)定嚴格管理，這要求教輔人員必須學習并掌握專業(yè)的知識。在試劑管理過程中，教輔人員按規(guī)章遵照化學?；返拇娣殴芾碓瓌t、分類細則、規(guī)范使用管理習慣、試劑合理標記等多方面建立健全的管理體系，保障實驗室規(guī)范化與安全。

4.3 菌種資源的安全管理與保藏 病原生物學實驗室的不同種類菌種是實驗所需的常用材料，更是實驗室的重要菌種資源。首先菌種材料是滿足實驗教學用耗的基本素材，在使用中需考慮菌株對人員的安全評估與管理。另一方面各菌種材料還可為教輔人員開展科學研究提供很好的菌株資源。加強對實驗室涉及的菌種的管理與保藏顯得尤為重要。

生物安全是微生物實驗室管理的重中之重[7-8]?；趯W生與實驗人員的安全，在實驗教學中從選用安全菌株角度出發(fā)，對實驗內容進行了改革，已將高致病性菌株的實驗進行了剔除或調整。但目前實驗室所保留實驗的必需菌株中部分為條件致病菌，菌種管理責任需落實到具體教輔人員身上，且實行雙鎖專人專管制度。教輔人員還需按規(guī)定正確方法與流程處理實驗結束后的廢棄菌種。故教輔人員對于實驗室與教學過程的生物安全保障非常關鍵。

實驗菌株在使用、傳代過程中易發(fā)生污染、變異衰退甚至死亡，可能使優(yōu)良菌種丟失。教輔人員針對不同菌種類型選擇合適的保藏方法，盡可能保持其原有性狀和活力穩(wěn)定，使菌株優(yōu)良性狀不退化，以滿足菌株能持續(xù)應用于實驗教學與科學研究的要求。實驗教輔在菌株保藏中做到科學規(guī)范，如采用超低溫冰箱長期保存、4℃冰箱短期保存以便即時用于就近時間段內的實驗教學[9]。同時教輔人員針對不同保藏方法需定期轉接種，保證菌株活力的延續(xù)。

5 結語

醫(yī)學微生物學是醫(yī)學院校的一門重要的專業(yè)課程，包括理論課程與實踐操作，兩者相輔相成。實驗教學直接關乎學生對該學科的實踐操作技能的掌握程度。實驗教輔在醫(yī)學微生物實驗課程中作用舉足輕重，首先在教學場所病原生物學實驗室中承擔多種重要角色，保障實驗室與平臺正常運行。同時還直接參與實驗教學準備的全過程、主導實驗方案設計的優(yōu)化調整；每一個環(huán)節(jié)的細節(jié)都決定著實驗教學的成效，直接影響著學生吸收知識與動手能力鍛煉的效果。此外，實驗教輔實驗操作經驗豐富，實驗技能知識完備，在直接參與實驗課程講授指導上可充分發(fā)揮自身優(yōu)勢，提升實驗教學質量。

綜上所述，實驗教輔人員在醫(yī)學微生物學實驗教學中具有十分重要的地位，其能力高低直接影響其實驗教學的順利開展，其重要角色貫穿于該實驗課程的始終。作為醫(yī)學微生物學教輔人員，需不斷在實驗準備、預實驗、實驗教學改良、實驗室管理等方面提高自身能力、豐富專業(yè)理論知識，發(fā)揮自己的專業(yè)特長，以期更好地構建與完善病原生物學實驗室平臺體系、優(yōu)化實驗室管理模式，最終服務于促進實驗教學質量、提高學生實踐與創(chuàng)新能力。