許永海 楊慶珣

深圳市寶安區(qū)中心醫(yī)院檢驗科，廣東深圳 518102

子宮內(nèi)膜異位癥是育齡婦女常見病多發(fā)病，其患率高達10%以上[1]，是由有活性的子宮內(nèi)膜組織（腺體和間質(zhì)）種植在子宮內(nèi)膜以外的位置引起一系列婦科臨床疾病，主要的臨床癥狀為在子宮內(nèi)膜以外的部位出現(xiàn)、生長、浸潤及反復(fù)出血，容易形成結(jié)節(jié)及包塊，有部分患者最終會引起盆腔疼痛、痛經(jīng)和不育等，給患者及社會造成沉重醫(yī)療負(fù)擔(dān)[2]。其發(fā)病機制比較復(fù)雜，并且其臨床復(fù)發(fā)率比較高[3]，有研究者認(rèn)為子宮內(nèi)膜異位癥有可能與自身抗體形成、激素紊亂及炎癥介質(zhì)水平升高有關(guān)[4-5]。白細(xì)胞介素-1β（interleukin-1β，IL-1β）為天然抗炎因子調(diào)控機體的炎癥因子；基質(zhì)金屬蛋白酶-7（matrix metalloproteinase-7，MMP-7）剪切包括細(xì)胞因子、趨化因子等多種非基質(zhì)底物[6]；多配體蛋白聚糖-1（recombinant syndecan-1，SDC-1）是MMP-7 的重要底物之一，在促進組織修復(fù)等方面發(fā)揮重要作用[7]。本研究通過檢測IL-1β、MMP-7 和SDC-1 在子宮內(nèi)膜異位癥患者異位內(nèi)膜組織和外周血中的表達，旨在探索三者在子宮內(nèi)膜異位癥發(fā)生及發(fā)展中的作用及其臨床意義。

1 資料與方法

1.1 一般資料

隨機選擇2019年1月—2020年12月在寶安區(qū)中心醫(yī)院住院的100 例活動期子宮內(nèi)膜異位癥患者作為研究對象，年齡25～45 歲，平均（32.3±6.2）歲，參照腹腔鏡診斷子宮內(nèi)膜異位癥的評分系統(tǒng)（revised American Fertility Society，r-AFS）的評分分期標(biāo)準(zhǔn)[8]，將研究對象分為輕度組（Ⅰ～Ⅱ期）和中重度組（Ⅲ～Ⅳ期），每組各50 例。納入標(biāo)準(zhǔn)：①均符合《子宮內(nèi)膜異位癥的診治指南》[9]的相關(guān)診斷標(biāo)準(zhǔn)；②患者有病史、臨床癥狀，影像學(xué)、腹腔鏡檢查及病理活檢等確診；③均為月經(jīng)周期規(guī)律；④患者各類實驗室檢查及病案資料均完整；⑤參與者均知情同意。排除標(biāo)準(zhǔn)：①合并嚴(yán)重的心、腦、肺、肝及腎等疾病者；②合并血液及自身免疫性疾??；③合并精神病及腫瘤；④絕經(jīng)期后及青春期前；⑤3 個月內(nèi)使用過生物制劑、糖皮質(zhì)激素和免疫抑制劑等；⑥放置宮內(nèi)節(jié)育器。同期選取50 例健康女性者作為對照組，年齡25～45 歲，平均（32.4±6.5）歲。各組的一般資料比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05），具有可比性。本研究獲得醫(yī)院醫(yī)學(xué)倫理委員會審核并批準(zhǔn)。

1.2 方法

1.2.1 標(biāo)本采集與處理 抽取所有入選者空腹靜脈血5 mL，置于生化試管中，然后于37.5℃的水浴箱（HH-600 檢驗科醫(yī)用型恒溫水浴箱，上海旌派儀器有限公司）之中水浴30 min，接著置于半徑15 cm，轉(zhuǎn)速為3500 r/min 的離心機（DT4-1 型低速離心機，由北京時代北利離心機有限公司提供）離心15 min，最后抽取上清血清液及時送檢。

1.2.2 相關(guān)因子檢測 IL-1β、MMP-7 和SDC-1 采用酶聯(lián)免疫吸附測定（enzyme-linked immunosorbent assay，ELISA）法檢測，儀器使用博科全自動酶免BIOBASE2000 分析儀（山東博科科學(xué)儀器有限公司），SDC-1 檢測試劑盒和IL-1β 檢測試劑盒由泉州市九邦生物科技有限公司提供，MMP7 檢測試劑盒由上海信裕生物技術(shù)有限公司提供，其檢測操作步驟均嚴(yán)格按照試劑及儀器說明書進行。

1.3 r-AFS 的評分標(biāo)準(zhǔn)

①Ⅰ期（微小病變）：1～5 分；②Ⅱ期（輕度）：6～15分；③Ⅲ期（中度）：16～40 分；④Ⅳ期（重度）：＞40 分[8]。

1.4 觀察指標(biāo)

①觀察并比較各組的IL-1β、MMP-7 和SDC-1表達水平；②分析IL-1β、MMP-7 和SDC-1 表達與子宮內(nèi)膜異位癥r-AFS 評分的關(guān)系。

1.5 統(tǒng)計學(xué)方法

應(yīng)用SPSS 20.0 中文版本for Windows 統(tǒng)計學(xué)軟件進行數(shù)據(jù)分析，計量資料用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（±s）表示，多組間比較采用F檢驗，兩兩比較采用LSD-t檢驗，相關(guān)性分析采用Spearman進行分析，以P＜0.05 為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 各組IL-1β、MMP-7 和SDC-1 表達水平的比較

三組的IL-1β、MMP-7 和SDC-1 表達水平比較，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）；中重度組的IL-1β、MMP-7 和SDC-1 表達水平均高于輕度組與對照組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）；輕度組的IL-1β、MMP-7和SDC-1 表達水平均高于對照組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）（表1）。

表1 各組IL-1β、MMP-7 和SDC-1 表達水平的比較（±s）

表1 各組IL-1β、MMP-7 和SDC-1 表達水平的比較（±s）

組別例數(shù)IL-1β（μmol/L）MMP-7（μg/L）SDC-1（μg/L）中重度組輕度組對照組F 值P 值50 50 50 t 中重度組與輕度組比較值P 中重度組與輕度組比較值t 中重度組與對照組比較值P 中重度組與對照組比較值t 輕度組與對照組比較值P 輕度組與對照組比較值36.93±6.23 18.81±3.49 10.32±3.67 35.654 0.009 30.721 0.016 42.151 0.003 27.765 0.017 26.14±4.27 16.39±6.26 9.33±2.34 30.123 0.014 26.324 0.018 34.212 0.012 22.451 0.021 29.83±3.62 13.62±2.38 10.65±1.06 17.123 0.031 16.123 0.038 18.342 0.025 14.654 0.043

2.2 IL-1β、MMP-7 和SDC-1 表達與子宮內(nèi)膜異位癥r-AFS 評分的關(guān)系

相關(guān)性分析顯示，MMP-7、IL-1β 和SDC-1 表達與子宮內(nèi)膜異位癥r-AFS 評分均呈顯著正相關(guān)（r=0.85、0.78、0.82，P＜0.05）（圖1～3）。

圖1 MMP-7 表達與子宮內(nèi)膜異位癥r-AFS 評分的相關(guān)性分析

3 討論

圖2 IL-1β 表達與子宮內(nèi)膜異位癥r-AFS 評分的相關(guān)性分析

圖3 SDC-1 表達與子宮內(nèi)膜異位癥r-AFS 評分的相關(guān)性分析

子宮內(nèi)膜異位癥是育齡婦科非常常見的慢性炎癥性疾病之一，屬于一種雌激素依賴性疾病[10]，其組織學(xué)特征是子宮內(nèi)膜樣組織出現(xiàn)或者種植在子宮腔之外的組織，并能夠與子宮內(nèi)膜發(fā)生類似的月經(jīng)性周期性生長、增殖與破壞[11]。雖然子宮內(nèi)膜異位癥為良性疾病，但是在臨床行為學(xué)上子宮內(nèi)膜異位癥具有類似惡性腫瘤種植、易復(fù)發(fā)、侵襲性和遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移的臨床生物學(xué)特點，隨著病情的發(fā)展，子宮內(nèi)膜異位癥晚期有可能會導(dǎo)致不孕癥或者卵巢癌等婦科惡性腫瘤[12]，給現(xiàn)代女性心身健康造成嚴(yán)重障礙及影響[13]。目前子宮內(nèi)膜異位癥的發(fā)病機制尚不明確，固在臨床上對子宮內(nèi)膜異位癥的診斷尚缺少高靈敏度及高特異性的生物標(biāo)志物，目前臨床診斷該疾病主要依靠腹腔鏡檢查及穿刺病理活檢，這兩種方案均為侵入性操作，其臨床創(chuàng)傷性大，副作用比較大，醫(yī)療費用比較貴，因此尋找子宮內(nèi)膜異位癥高靈敏度和特異性可靠的臨床診斷生物標(biāo)志物迫在眉睫，對于子宮內(nèi)膜異位癥的臨床預(yù)后評判也至關(guān)重要。

促炎細(xì)胞因子是導(dǎo)致子宮內(nèi)膜異位癥損傷產(chǎn)生和加重的主要因素。本研究結(jié)果顯示，子宮內(nèi)膜異位癥患者的IL-1β、MMP-7 和SDC-1 表達量均高于健康對照者，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）。IL-1 是體內(nèi)作用最強的炎癥介質(zhì)之一，其主要由活化的多種免疫性細(xì)胞及血管內(nèi)皮細(xì)胞分泌產(chǎn)生的關(guān)鍵性炎癥細(xì)胞因子，IL-1 主要有IL-1α 與IL-1β 兩種亞型[14]，分泌型的IL-1β 是IL-1 在體內(nèi)血液循環(huán)中存在的主要形式，具有非常廣泛的生物學(xué)作用，在子宮內(nèi)膜異位癥患者的體內(nèi)能夠誘導(dǎo)下游幾百種二級炎癥介質(zhì)的合成與表達，進而對子宮內(nèi)膜異位癥的炎癥起促進與放大效應(yīng)，參與子宮內(nèi)膜異位癥典型的病理損傷進展。細(xì)胞外基質(zhì)降解是子宮內(nèi)膜異位癥轉(zhuǎn)移、侵襲、種植和進展的最重要機制，機體通過降解細(xì)胞外基質(zhì)破壞子宮內(nèi)膜微環(huán)境，促進子宮內(nèi)膜細(xì)胞遷移是子宮內(nèi)膜轉(zhuǎn)移和種植的常見方式。MMP-7 又稱基質(zhì)溶解素是基質(zhì)金屬蛋白酶重要的家族成員，在正常組織中不表達或低表達，與許多腫瘤的轉(zhuǎn)移、侵襲和種植密切相關(guān)[15]，主要是由中性粒細(xì)胞與巨噬細(xì)胞分泌，MMP-7能有效降解基底膜和細(xì)胞外基質(zhì)中膠原蛋白Ⅳ，可廣泛參與子宮內(nèi)膜異位組織浸潤以及炎癥細(xì)胞的遷移過程。SDC-1 是一種表達于上皮細(xì)胞表面的硫酸乙酰肝素蛋白多糖細(xì)胞黏附分子，當(dāng)子宮內(nèi)膜細(xì)胞異位轉(zhuǎn)移及侵襲時，SDC-1 則從細(xì)胞表面脫落，使子宮內(nèi)膜異位癥患者血清SDC-1 水平明顯高于健康對照者，SDC-1 為基質(zhì)蛋白提供黏附結(jié)合位點，屬于黏附分子整合素跨膜結(jié)合蛋白聚糖蛋白成員，增強細(xì)胞間的黏附力度，維持細(xì)胞表型，抑制細(xì)胞的移行，參與細(xì)胞的黏附、細(xì)胞增殖、血管生成和炎癥反應(yīng)的調(diào)節(jié)[16]。本研究結(jié)果顯示，隨著子宮內(nèi)膜異位癥的臨床癥狀加重而患者血清IL-1β、MMP-7 和SDC-1 水平逐漸升高，臨床較重型的患者明顯高于臨床較輕型，IL-1β、MMP-7和SDC-1 表達與子宮內(nèi)膜異位癥的臨床癥狀r-AFS評分值呈正相關(guān)（P＜0.05），提示IL-1β、MMP-7 和SDC-1 是監(jiān)測子宮內(nèi)膜異位癥嚴(yán)重程度的指標(biāo)，因此，本研究認(rèn)為IL-1β、MMP-7 和SDC-1 上調(diào)可能促進了子宮內(nèi)膜異位癥中異位內(nèi)膜細(xì)胞的黏附、轉(zhuǎn)移、侵襲和種植的過程，血清IL-1β、MMP-7 和SDC-1 三個指標(biāo)的高表達可能在子宮內(nèi)膜異位癥的發(fā)生發(fā)展和侵襲轉(zhuǎn)移中起著至關(guān)重要的作用。

綜上所述，IL-1β、MMP-7 和SDC-1 在子宮內(nèi)膜異位癥中呈高表達，三者可能相互協(xié)同，促進子宮內(nèi)膜異位病灶的發(fā)生和發(fā)展。