李 霞，孫婷彥，周宗良，周宗俞

重慶市永川區(qū)疾病預(yù)防控制中心，重慶永川 402160

隨著時(shí)代的發(fā)展和科學(xué)技術(shù)的進(jìn)步，艾滋病病毒抗體篩查技術(shù)日臻完善，如快速檢測(cè)法、酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)法、化學(xué)發(fā)光(CIA)法等?？焖贆z測(cè)法由于操作簡(jiǎn)單、出結(jié)果所需時(shí)間短，且不需要特殊儀器等優(yōu)勢(shì)被我國(guó)疾病預(yù)防控制中心和醫(yī)療機(jī)構(gòu)廣泛應(yīng)用[1]。在實(shí)際工作中仍發(fā)現(xiàn)快速檢測(cè)法有新的問(wèn)題出現(xiàn)，需要認(rèn)真對(duì)待和解決，現(xiàn)將永川區(qū)疾病預(yù)防控制中心艾滋病確證實(shí)驗(yàn)室遇到的1例特殊案例報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1臨床資料 李某，女，69歲，漢族，農(nóng)民，已婚，初中文憑。因病到某區(qū)人民醫(yī)院住院進(jìn)行術(shù)前檢查時(shí)篩查出人類免疫缺陷病毒(HIV)抗體有反應(yīng)性，二次血樣被送到本中心進(jìn)行確證實(shí)驗(yàn)，初篩檢測(cè)結(jié)果見(jiàn)表1。

1.2確證實(shí)驗(yàn)室所用試劑和儀器 HIV1+2抗體確證試劑盒(條帶免疫法)MIKROGEN，批號(hào)LHI061901，有效期至2021年5月；HIV P24抗原及抗體檢測(cè)試劑盒(膠體硒法) Alere HIV Combo (雅培公司)，批號(hào)06685K200C，有效期至20211005;HIV1/2抗體檢測(cè)試劑(乳膠法，博拓生物)， 批號(hào) HIV19070010，有效期至2021年4月。Western blot實(shí)驗(yàn)儀器為上海迅達(dá)XD236蛋白印跡儀。實(shí)驗(yàn)室溫度為21 ℃，濕度61%，所有試劑從冰箱取出均在室溫條件下進(jìn)行了平衡，并嚴(yán)格按照試劑說(shuō)明書(shū)操作。加樣器按期進(jìn)行校準(zhǔn)，恒溫箱性能穩(wěn)定。

表1 HIV初篩結(jié)果

2 確證實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)情況

2020年11月19日，艾滋病確證實(shí)驗(yàn)室人員對(duì)該周渝西片區(qū)所有篩查實(shí)驗(yàn)室送檢的HIV抗體初篩有反應(yīng)性標(biāo)本進(jìn)行確證實(shí)驗(yàn)。在對(duì)確證標(biāo)本進(jìn)行結(jié)果判定時(shí)，為了保證結(jié)果及送檢標(biāo)本的準(zhǔn)確性，會(huì)用快速檢測(cè)試劑對(duì)所有確證標(biāo)本再進(jìn)行一次復(fù)核，觀察結(jié)果能不能相互吻合[2]。此次筆者發(fā)現(xiàn)1例確證為陽(yáng)性的標(biāo)本用膠體硒法做出來(lái)為陰性，而用博拓生物的快速檢測(cè)試劑檢測(cè)顯示為有反應(yīng)性。為什么膠體硒法的結(jié)果與醫(yī)院的幾次篩查結(jié)果、本中心的確證結(jié)果不一致，筆者首先考慮是不是送錯(cuò)樣了，于是通知送檢醫(yī)院對(duì)患者進(jìn)行重新抽血，并在溯源中發(fā)現(xiàn)李某2014年已在本中心艾滋病確證實(shí)驗(yàn)室做過(guò)確證實(shí)驗(yàn)并出具了HIV-1抗體陽(yáng)性的報(bào)告，期間有服藥，并有CD4和病毒載量檢測(cè)結(jié)果。2020年11月26日，筆者對(duì)重新送檢的李某血樣和2020年11月19日的血樣再次進(jìn)行了確證實(shí)驗(yàn)，實(shí)驗(yàn)結(jié)果與2020年11月19日實(shí)驗(yàn)條帶一致，仍判讀為HIV-1抗體陽(yáng)性，膠體硒法檢測(cè)同樣是陰性，博拓生物的快檢檢測(cè)條帶為有反應(yīng)性。這個(gè)結(jié)果值得深思，確證陽(yáng)性的標(biāo)本為什么膠體硒法為陰性？試劑過(guò)期了？查看試劑包裝顯示在效期內(nèi)。操作錯(cuò)誤？為了驗(yàn)證是否存在操作錯(cuò)誤，從以往確證為陽(yáng)性的標(biāo)本里隨機(jī)篩選了30個(gè)標(biāo)本，在同樣的溫濕度條件和操作臺(tái)上，新開(kāi)封一袋同一批號(hào)膠體硒試劑進(jìn)行檢測(cè)，同時(shí)也檢測(cè)了李某的標(biāo)本，20～40 min內(nèi)多次讀取結(jié)果，室溫條件下隨機(jī)篩選的30個(gè)陽(yáng)性標(biāo)本均顯示為有反應(yīng)性，李某的標(biāo)本依然是陰性，證明筆者沒(méi)有操作失誤，只能考慮試劑“漏檢”。立即向Alere試劑廠家反映具體情況，廠家建議重新再做檢測(cè)，并把試劑條置于37 ℃的恒溫箱等待20～40 min后觀察結(jié)果，30 min后觀測(cè)到試劑條顯示為有反應(yīng)性，證明試劑沒(méi)有漏檢，只是需要特殊處理，這種情況在以前實(shí)驗(yàn)過(guò)程中沒(méi)有遇到過(guò)。出現(xiàn)這種特殊情況，究其原因，查閱Alere膠體硒產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)時(shí)發(fā)現(xiàn)有一條檢驗(yàn)方法局限性的說(shuō)明，即一些服用抗反轉(zhuǎn)錄病毒藥物的已知HIV感染患者，使用快速檢測(cè)試劑盒進(jìn)行檢測(cè)時(shí)出現(xiàn)了假陰性的結(jié)果[3-5]。李某的標(biāo)本需要特殊處理才能顯示出陽(yáng)性帶，可能與患者本身在服藥有關(guān)，這方面的研究由于本中心實(shí)驗(yàn)室條件及筆者自身能力有限不做討論。

3 討 論

如果初篩時(shí)像李某這種特殊的標(biāo)本最先用Alere膠體硒法檢測(cè)，而大部分實(shí)驗(yàn)室使用快速檢測(cè)試劑條都沒(méi)有放恒溫箱的習(xí)慣，那么肯定存在漏檢。HIV初篩實(shí)驗(yàn)的干擾條件越來(lái)越多，初篩實(shí)驗(yàn)室一定要注意，避免患者在同一時(shí)段輾轉(zhuǎn)不同的醫(yī)療機(jī)構(gòu)看病時(shí)由于各個(gè)醫(yī)療機(jī)構(gòu)使用的HIV抗體初篩方法的不同而造成定性結(jié)果不同引起糾紛。且很多HIV感染者由于自身對(duì)HIV認(rèn)知有限，即使在服藥也不會(huì)告知醫(yī)生，如果因服藥造成HIV抗體篩查時(shí)出現(xiàn)假陰性，那么醫(yī)院的醫(yī)生護(hù)士在對(duì)這部分患者進(jìn)行治療時(shí)就存在很高的暴露風(fēng)險(xiǎn)。因此，在HIV抗體篩查過(guò)程中，為了盡可能避免漏檢，建議最好使用2種HIV抗體篩查法同時(shí)進(jìn)行檢測(cè)[6]。