金銳 張從合 朱全貴 蘇法

摘要 在我國，玉米的種植面積和產(chǎn)量均超過水稻和小麥，成為第一大糧食作物。同時，玉米也是食品、飼料、化工原料等重要原材料。因此，利用分子標(biāo)記輔助選擇技術(shù)（molecular marker-assisted selection，MAS）與常規(guī)育種相結(jié)合來獲得高產(chǎn)、優(yōu)質(zhì)、抗逆性強的玉米品種具有重要的意義。概述了常用的分子標(biāo)記技術(shù)以及MAS在玉米抗病和抗蟲育種中的應(yīng)用，同時分析了MAS的局限性，也展望了未來MAS的發(fā)展前景和優(yōu)勢，為我國種業(yè)企業(yè)服務(wù)或育種工作提供參考。

關(guān)鍵詞 玉米;分子標(biāo)記輔助選擇育種;抗病;抗蟲

中圖分類號 S 435.13? 文獻(xiàn)標(biāo)識碼 A? 文章編號 0517-6611（2021）16-0010-06

doi：10.3969/j.issn.0517-6611.2021.16.004?? 開放科學(xué)（資源服務(wù)）標(biāo)識碼（OSID）：

Application of Molecular Marker Assisted Selection in Maize Disease Resistance and Insect Resistance Breeding

JIN Rui， ZHANG Cong-he， ZHU Quan-gui et al

（Winall Hi-tech Seed Co.，Ltd.，Key Laboratory of New Maize Variety Creation，Ministry of Agriculture，Hefei，Anhui 230088）

Abstract The planting area and output of corn both surpass that of rice and wheat and become the largest food crop. At the same time， corn is also an important raw material for food， feed and chemical raw materials. Therefore， it is of great significance to use molecular marker-assisted selection technology （MAS） in combination with conventional breeding to obtain high-yield， high-quality， and highly resistant corn varieties. This article outlined the commonly used molecular marker technology and the application of MAS in corn disease resistance and insect resistance breeding. At the same time， it clarified the limitations of MAS and looked forward to the future development prospects and advantages of MAS.

Key words Corn;Molecular marker-assisted selection breeding;Disease resistance;Insect resistance

在我國，玉米是種植面積和總產(chǎn)量最高的糧飼兼用型作物，并在工業(yè)、食品、醫(yī)藥等行業(yè)具有廣泛的應(yīng)用。近年來，由全球氣候變化導(dǎo)致環(huán)境惡劣，世界范圍內(nèi)的玉米主產(chǎn)區(qū)病蟲害多發(fā)，再加上耕地面積有限，致使玉米產(chǎn)量受損，因而迫切需要抗逆性強、高產(chǎn)、優(yōu)質(zhì)的玉米新種質(zhì)。當(dāng)前我國玉米育種仍以常規(guī)育種為主，而常規(guī)育種存在育種周期長、可供選擇的優(yōu)良種質(zhì)稀少、選擇效率低等問題，無法滿足育種要求。分子標(biāo)記輔助選擇（molecular marker-assisted selection，MAS）將分子標(biāo)記技術(shù)與傳統(tǒng)育種相結(jié)合，與常規(guī)育種相比具有高效、可靠、安全等優(yōu)點，可以在作物全生育期進(jìn)行選擇，極大地縮短了育種年限。隨著國內(nèi)外分子標(biāo)記技術(shù)的發(fā)展與應(yīng)用，分子標(biāo)記輔助選擇在較難進(jìn)行表型鑒定的品種選育中和多個優(yōu)良性狀的聚合中發(fā)揮著越來越重要的作用。

1 DNA分子標(biāo)記的種類和特點

DNA分子標(biāo)記是分子水平上遺傳差異的直接表現(xiàn)。DNA分子標(biāo)記因檢測方式的差異性可分為四大類[1]。第一類是以 DNA- DNA分子雜交為核心的技術(shù)，不同的生物體DNA由特定限制性內(nèi)切酶切分為長度不同的DNA分子片段，以片段的長度作為衡量標(biāo)準(zhǔn)判斷差異。這類分子標(biāo)記具有穩(wěn)定性好、不受環(huán)境影響等優(yōu)點。其代表性標(biāo)記是RFLP[2];第二類是基于PCR的分子標(biāo)記。這類分子標(biāo)記具有特異性強、操作簡單方便和高效等優(yōu)點。按PCR標(biāo)記類型分為隨機引物（RAPD和ISSR）和特異引物（SSR、SCAR、STS），其中RAPD和SSR是應(yīng)用最為廣泛的分子標(biāo)記。第三類以限制性酶切和PCR技術(shù)相結(jié)合為基礎(chǔ)，主要包括AFLP;第四類以單核苷酸不同表現(xiàn)為基礎(chǔ)（SNPs）。目前，DNA芯片是該標(biāo)記的一種主要研究手段，且對其有更高的成本和技術(shù)要求。

1.1 SCAR分子標(biāo)記

SCAR分子標(biāo)記是由RAPD和RFLP技術(shù)孕育而生一種標(biāo)記手段。通過這2種技術(shù)分析后確定并復(fù)制目標(biāo)DNA的多態(tài)性片段，隨后對復(fù)制片段的兩端測序，根據(jù)測序結(jié)果設(shè)計含有原先 RAPD和 RFLP擴增片段的引物，一般引物長度為18～24 bp，這個引物應(yīng)含有原先 RAPD和 RFLP的擴增片段，然后再進(jìn)行擴增。由RAPD標(biāo)記轉(zhuǎn)化成SCAR標(biāo)記，該標(biāo)記呈顯性，表現(xiàn)為擴增片段的有無。由RFLP轉(zhuǎn)化為SCAR標(biāo)記，該標(biāo)記呈共顯性，表現(xiàn)為片段大小多態(tài)性。隨著分子生物學(xué)技術(shù)的不斷發(fā)展，一些AFLP和SSR標(biāo)記都已經(jīng)成功轉(zhuǎn)化為SCAR標(biāo)記。SCAR標(biāo)記的特點：①設(shè)計引物時，不用知道序列信息;②顯性遺傳，無法區(qū)分純合子和雜合子;③技術(shù)簡便，更加可靠;④能夠快速地檢測多個個體，且成本低、穩(wěn)定性高、試驗結(jié)果重現(xiàn)性好。SCAR標(biāo)記的以上優(yōu)點使其在雜種純度鑒定和MAS方面應(yīng)用較廣，尤其是在基因的精細(xì)定位和克隆方面發(fā)揮重要作用。

1.2 SSR分子標(biāo)記

SSR是基于PCR技術(shù)的第二代分子標(biāo)記，是目前使用最多的分子標(biāo)記技術(shù)，它一般是由幾個堿基對為重復(fù)單位組成的簡單重復(fù)序列，生物體基因組各個位置都有其存在，最常見就是雙核苷酸的重復(fù)單位。因為核苷酸序列重復(fù)次數(shù)、重復(fù)片段和序列的不同而產(chǎn)生的多態(tài)性差異，且多態(tài)性易于檢測，所以具有廣泛的應(yīng)用前景。SSR有以下幾個優(yōu)點：①SSR標(biāo)記的數(shù)量非常多，分布于生物的全基因組;②SSR標(biāo)記是共顯性標(biāo)記;③操作簡單方便，穩(wěn)定性和可信度高;④等位基因的位點較多。但SSR標(biāo)記開發(fā)必須要知道重復(fù)序列上、下游DNA的序列信息，但相比于其眾多優(yōu)點，缺點也顯得微乎其微。 隨著 SSR標(biāo)記技術(shù)的高密度遺傳連鎖圖的不斷完善及其被大規(guī)模的不斷開發(fā)，分子標(biāo)記輔助育種的可行性進(jìn)一步得到了提高，廣泛應(yīng)用于 QTL精細(xì)定位[3]。

1.3 SNP標(biāo)記

SNP指的是由單個核苷酸——A、T、C或G的改變而引起的DNA序列的改變。與傳統(tǒng)分子標(biāo)記相比，SNP在基因組中有分布廣、遺傳穩(wěn)定性好、代表性強、效率高等優(yōu)點，且其檢測手段不隨 DNA片段長度的變化而變化[4]。 早期使用SNP技術(shù)主要是以凝膠電泳為基礎(chǔ)，如CAPS標(biāo)記和AS-PCR標(biāo)記。目前SNP基因分型方法主要是直接測序法DNA和芯片。SNP其中一種檢測方法是直接測序法，效率可達(dá)100%，高通量測序已成為SNP檢測的重要方法之一;另一種是DNA芯片技術(shù)，其特點是快速高效和精確等。但SNP技術(shù)重復(fù)序列影響雜交的準(zhǔn)確性，同時成本也高，不適合大規(guī)模檢測和廣泛使用[5-7]。SNP作為第三代雜交技術(shù)，加快了物種序列的獲得，應(yīng)用前景廣闊。

2 MAS在玉米抗病育種上的應(yīng)用

2.1 MAS在南方銹病上的應(yīng)用

據(jù)報道，世界上共有3種銹?。耗戏戒P病、熱帶銹病和普通銹病。目前，南方銹病（ Puccinia polysora ?Underw）是我國的主要病害。該病害是以多堆柄銹菌引起的一種氣傳性真菌病害，主要侵害部位是玉米葉片[8]。1891年，該病首次被發(fā)現(xiàn)存在于摩擦禾屬（ Tripsacum ?L）[9]。我國于1972年在海南省發(fā)現(xiàn)玉米南方銹病，近年來，隨著耕作制度的變化，該病已成為我國玉米流行病害，且多發(fā)于黃淮海地區(qū)，造成玉米減產(chǎn)甚至絕收[10]。因此，利用分子標(biāo)記技術(shù)選育抗病品種是解決該病害最有效的途徑之一。

陳翠霞等[11]在不同環(huán)境下對10個骨干玉米自交系進(jìn)行了玉米南方銹病抗性鑒定，結(jié)果表明僅齊319對南方銹病表現(xiàn)為高抗，178為中抗，而其他自交系均感南方銹病。張發(fā)軍等[12]對17份玉米自交系進(jìn)行了玉米南方銹病抗性鑒定，其中有8份自交系對南方銹病表現(xiàn)為高抗，為培育抗南方銹病玉米雜交種和進(jìn)行遺傳研究奠定了材料基礎(chǔ)。李石初等[13]于2008和2009年分別對1 218份玉米自交系進(jìn)行了人工接種南方銹病抗性鑒定，其中高抗、抗病和中抗占比為17.98%，其余均表現(xiàn)不同程度感病。張斌[14]利用高抗材料齊319和多個感病自交系配置雜交組合，通過回交育種，得到良好的抗南方銹病的種質(zhì)資源。陳翠霞[15]利用齊319與感病品種340和魯原92構(gòu)建分離群體，通過SSR結(jié)合混池對其進(jìn)行分析，將抗病基因Rpp9-2定位在10號染色體上，且與標(biāo)記phi118和phi041緊密連鎖，隨后又進(jìn)一步對其進(jìn)行定位，又發(fā)現(xiàn)3個與南方銹病抗病基因緊密連鎖的SSR標(biāo)記。艾堂順等[16]以玉米抗病自交系P178、感病自交系G41構(gòu)建的BC2F5群體為材料，對qSCR10.01進(jìn)行精細(xì)定位，抗病基因位于標(biāo)記UMC1380和C（10）3595071之間，標(biāo)記間的物理距離為1.34 Mb。

2.2 MAS在玉米大斑病上的應(yīng)用

玉米大斑病是造成玉米減產(chǎn)最嚴(yán)重的病害之一，是由玉米大斑凸臍蠕孢菌[ Exserohilum turcicum （Pass.）Leonard et Suggs]侵染玉米引起的一種病害，主要發(fā)生在葉片部位[17]。1876年，該病在意大利發(fā)現(xiàn)以后，迅速蔓延至全世界，1899年，我國首次在東北發(fā)現(xiàn)該病害[18]。目前，我國已報道大斑病菌生理小種有0，1，2，3，N，12，13，1N，23，2N，3N，12N，123N，123，23N和13N共16個類型的生理小種[19]。由于大斑病生理小種的變異，因此通過分子標(biāo)記輔助選擇對玉米大斑病抗病材料進(jìn)行篩選，以期為培育大斑病抗病品種提供參考。

孫瑞東等[20]通過人工接種大斑病的方法，在2年內(nèi)對185份玉米自交系大斑病進(jìn)行抗性鑒定，篩選出高抗16份材料，且自交系Y6和J1577可以穩(wěn)定遺傳。李曉光等[21]對國內(nèi)434份玉米種質(zhì)進(jìn)行大斑病抗性鑒定，結(jié)果高抗和中抗品種占73.7%，為選育大斑病抗病品種提供重要種質(zhì)資源。陳曉旭等[22]在2013和2014年連續(xù)2年通過人工接種大斑病病菌對東北60份主要玉米種質(zhì)進(jìn)行抗性鑒定，結(jié)果表明有28份材料表現(xiàn)出抗性，且通過進(jìn)一步比較，證明國內(nèi)抗病種質(zhì)要優(yōu)于國外種質(zhì)。程品冰[23]利用與Ht3抗性基因連鎖的SCAR標(biāo)記5C-509656和與HtN抗性基因連鎖的SCAR標(biāo)記SC-S13314對100份抗性資源進(jìn)行鑒定，結(jié)果有20份材料中攜帶Ht3基因，10份材料中攜帶HtN基因，且與基因推導(dǎo)方法的結(jié)果一致。鄭祖平等[24]以黃早四×Mo17為親本構(gòu)建的包含239份RIL群體，利用103 個SSR標(biāo)記對其進(jìn)行大斑病抗病鑒定，通過CIM作圖方法檢測到2號染色體有3個QTL，分別與標(biāo)記bnlgl520、umc1635 和bnlg125緊密連鎖;8號染色體有2個QTL，分別與標(biāo)記umc1327和bnlg2235緊密連鎖。田志強等[25]以P178和G41為親本構(gòu)建的BC5F2群體，利用KASP標(biāo)記對大斑病進(jìn)行QTL定位，結(jié)果在1、2、8、9這4條染色體上定位到6個QTL，貢獻(xiàn)率為4%～23%，且存在2個可穩(wěn)定遺傳的QTL。高瑞[26]構(gòu)建3個DH群體，利用Bin標(biāo)記對大斑病進(jìn)行QTL定位，在DH1群體中，在5號和8號染色體上共檢測到2個QTL，可解釋表型變異為12.88%～14.97%;在DH2群體中，在1、2、5、9號染色體上共檢測到4個QTL，可解釋表型變異為8.31%～16.56%;在DH3群體中，在1號和2號染色體中共檢測到2個QTL，可解釋表型變異為15.34%～18.49%。

2.3 MAS在玉米小斑病上的應(yīng)用

玉米小斑?。⊿outhern corn leaf blight，SCLB）是世界玉米主產(chǎn)區(qū)的重要病害之一，是由半知菌類長蠕孢屬真菌（ Helminthosporium maydis ?Nisi kado）引起的一種真菌性病害，目前已報道O、T、C、S這4個小種[27-30]。玉米小斑病對玉米造成嚴(yán)重減產(chǎn)，因此對其進(jìn)行分子標(biāo)記輔助育種及QTL定位研究具有重要意義。

杜學(xué)林等[31]對20個玉米重要種質(zhì)進(jìn)行篩選，得到2個中抗小斑病種質(zhì)，為防治小斑病和抗病育種提供理論依據(jù)。蔣鋒等[32]利用抗病自交系T14和感病自交系T18為親本及F2群體對小斑病進(jìn)行QTL定位，結(jié)果在4號和6號染色體上共定位到5個抗小斑病QTL。仲愷農(nóng)業(yè)工程學(xué)院選育出玉米自交系PT01、PT02、PT03、PT04為雜交親本材料，配置228株4交F2群體，利用SSR標(biāo)記對小斑病進(jìn)行QTL定位。結(jié)果在2、4、6、7號4條染色體上檢測到6個單位面積病斑數(shù)QTL，貢獻(xiàn)率為8.39%～53.7%;在2、4、6號3條染色體上檢測到5個病斑數(shù)QTL，貢獻(xiàn)率為7.6%～45.2%[33]。陳趣[34]以T8和T33為親本配置的雜交組合，利用SSR標(biāo)記通過對200株F2群體進(jìn)行抗小斑病QTL定位，在全株病斑葉面積檢測到4個QTL，貢獻(xiàn)率為8.95%～11.32%;在全株病斑面積檢測到7個QTL，貢獻(xiàn)率為4.86%～15.93%。

2.4 MAS在莖腐病上的應(yīng)用

玉米莖腐病又稱青枯病，是在世界玉米主產(chǎn)區(qū)普遍流行的一種土傳性病害，嚴(yán)重影響玉米生產(chǎn)[35]。因此，對玉米莖腐病的防治具有重要意義，而MAS是培育抗莖腐病玉米品種的前提條件[36]。

王富榮等[37]對1 550份玉米品種進(jìn)行莖腐病抗性鑒定，經(jīng)過重復(fù)鑒定，得到76份具有穩(wěn)定抗性的自交系。楊洋等[38]在2013—2016年對1 213份玉米種質(zhì)進(jìn)行莖腐病抗性鑒定，得到207份抗莖腐病種質(zhì)，占總數(shù)的17.1%。宋燕春等[39]利用人工接種的方式對287份玉米自交系進(jìn)行莖腐病抗性鑒定，結(jié)果具有中抗水平的自交系171份，占總數(shù)的60%。Pè等[40]利用自交系B89和33-16的F2∶3家系，通過95個RFLP和10個RAPD標(biāo)記構(gòu)建的遺傳連鎖圖，定位了5個抗禾谷鐮孢莖腐病的QTL，分別位于1、3、4、5、10號染色體上。王萍[41]以1145和Y331為親本配置雜交組合，利用RAPD技術(shù)將莖腐病的抗性基因Rpi1定位在第4染色體上，與OPZ191500緊密連鎖。Yang等[42]利用1145和Y331為親本及其后代群體F2和BC1F1，利用SSR和RFLP標(biāo)記將抗病基因RFG1定位到mmc0241和bnl3.03之間，遺傳距離分別為3.0和2.0 cM。Yang等[43]以1145和Y331為親本，配置BC6F1和BC8F1為后代群體，分別對 qRfg1和qRfg2 進(jìn)行精細(xì)定位，將 qRfg1 定位在SSR334和SSR58標(biāo)記之間，物理距離500 kb;將 qRfg2 定位在SSRZ319和CAPSZ459標(biāo)記之間，物理距離300 kb。Ma等[44]利用H127R和C7-2為親本及后代RIL群體為材料，在3號染色體上定位到一個新的QTL-qRfg3。王金萍等[45]對159份玉米自交系進(jìn)行莖腐病抗性鑒定，檢測到的4個抗莖腐病QTL及其緊密連鎖的11個分子標(biāo)記，結(jié)果發(fā)現(xiàn)分子標(biāo)記 STS01（qRfg1）、STSZ479（qRfg2）、bnlg1866（RpiQI319-1）和 bnlg1716（RpiQI319-2）的陽性檢測結(jié)果與田間表型符合度較高，可作為抗莖腐病分子檢測的有效標(biāo)記。

2.5 MAS在玉米矮花葉病上的應(yīng)用

玉米矮花葉病（maize dwarf mosaic virus，MDMV）是世界上玉米產(chǎn)區(qū)普遍發(fā)生的病毒病害之一。1963年首先在美國俄亥俄州被發(fā)現(xiàn)，隨后席卷全球，我國于1968年首次在河南發(fā)現(xiàn)該病，造成玉米減產(chǎn)甚至絕收，培育抗病品種是防治該病害的最有效途徑[46-48]。

Kuntze等[49]通過人工接種矮花葉病毒，對122份玉米自交系進(jìn)行抗性鑒定，篩選出3個具有完全抗性自交系D21、D32和FAP1360A。林肯恕[50]對220份玉米重要種質(zhì)進(jìn)行抗性鑒定，結(jié)果篩選到包括黃早4和獲白在內(nèi)的15份優(yōu)良抗病自交系。吳建宇[51]通過對我國主要育種材料的48個骨干自交系進(jìn)行矮花葉病抗性鑒定，也證明黃早4具有較好的抗病性。張成和等[52]鑒定了831份玉米材料，其中中抗及以上自交系共249份，占總數(shù)的30%。Scott等[53]于1971年將GA209、ArkH44、MP319等自交系的抗病基因定位于6號染色體上。Louie[54]和Mcmullen等[55]利用分子標(biāo)記將自交系Pa405的抗病基因Mdm1定位于6號染色體上，并證明該基因與RFLP標(biāo)記Umc85和Bn16.29緊密連鎖。Xia等[56]用D32×D145的219個F2單株和94個標(biāo)記構(gòu)建了標(biāo)記連鎖圖譜，根據(jù)F3家系的2年抗病性的鑒定，對SCMV進(jìn)行QTL分析，檢測到5個QTL，分別位于3、5、6、10染色體上，其中以染色體3和6上的QTL效應(yīng)較大。2003年，王鳳格[57]利用黃早四×掖107群體，發(fā)現(xiàn)有3條染色存在抗病QTL，分別是第3，6和10染色體上，其中第3和第6的QTL效應(yīng)較大。呂香玲等[58]利用掖478與中白O1的近等基因系BC4F2群體，在玉米第3和第6染色體上發(fā)掘了3個QTLs。席章營等[59]利用海9-21和掖478的BCzF群體，在抗病白交系海9-21上存在一個的隱性抗病基因，位于第3染色體短臂3.04～3.05區(qū)域，在SSR標(biāo)記umc1965和bn1g420之間，遺傳距離分別為45.7和6.5 cM。王永霞[60]在利用F2群體對抗病基因RSCMVl和RSCMV2初步定位的基礎(chǔ)上，分別以感病親本Mo17和抗病親本四一為輪回親本和供體親本，對玉米矮花葉病抗病基因RSCMV1和RSCMV2進(jìn)行分了標(biāo)記的開發(fā)和定位，結(jié)果證明SCMV1抗病基因在umc1018和umc2311之間，SCMV2抗病基因在umc1693和bnlg1601之間，為最終分離這2個抗病基因奠定基礎(chǔ)。

2.6 MAS在玉米絲黑穗病上的應(yīng)用

玉米絲黑穗病是在世界玉米主產(chǎn)區(qū)常見的一種土傳性病害，最早于1876年在意大利發(fā)現(xiàn)該病害，隨后迅速在世界范圍內(nèi)傳播，我國首次發(fā)現(xiàn)該病害是在20世紀(jì)70年代，主要危害北方春玉米[61]。該病害對玉米品種是毀滅性的，因此選育抗病品種是防治該病害的最佳途徑。柏光曉等[62]對51-3份玉米重要種質(zhì)進(jìn)行絲黑穗病抗性鑒定，結(jié)果僅有3份材料表現(xiàn)為高抗。譚康等[63]利用136對重復(fù)性佳的SSR標(biāo)記對貴州省10份常用玉米自交系進(jìn)行絲黑穗病抗性鑒定，發(fā)現(xiàn)自交系T32和齊3169表現(xiàn)為高抗并可以穩(wěn)定遺傳。張建國[64]對黑龍江農(nóng)業(yè)科學(xué)院選育的龍早群通過多次雜交、回交及自交等方法選育出6份高抗絲黑穗病、配合力優(yōu)且品質(zhì)優(yōu)質(zhì)和農(nóng)藝性狀好的玉米自交系，通過試驗篩選出3個可以用于對玉米種質(zhì)進(jìn)行抗絲黑穗病種質(zhì)鑒定的分子標(biāo)記umc1386、umc1525和umc2077。王春明等[65]利用人工接種的方式，在2013—2014年對甘肅省97份玉米重要自雜交種進(jìn)行絲黑穗病抗性鑒定，篩選出6份高抗材料。石紅良[66]利用齊319和M17這2個抗病品種與感病品種黃早4為親本構(gòu)建2個BC3群體，通過AFLP-BSA標(biāo)記對絲黑穗病進(jìn)行QTL定位，檢測到有一個抗玉米絲黑穗病主效QTL-Bin2.09，且在標(biāo)記bnlg1893附近;隨后開發(fā)2個STS標(biāo)記，進(jìn)一步將該QTL定位在Bin1.09區(qū)域內(nèi)。高樹仁[67]對133份玉米常見種質(zhì)和24個國內(nèi)外群體進(jìn)行了絲黑穗病抗性鑒定，采用SSR標(biāo)記和AFLP標(biāo)記技術(shù)對抗玉米絲黑穗病基因進(jìn)行了QTL定位，檢測到Bin1.03、Bin2.09、Bin3.04-3.05 和Bin8.02-8.03區(qū)域均有抗絲黑穗病QTL。Lübberstedt等[68]采用 CIM方法分別在6、8和9號3個染色體上定位了3個QTL;在第1、2、3、4、5、6、2和8號染色體上定位了8個QTL，貢獻(xiàn)率13%～44%。Brewbaker等[69]采用CIM作圖法進(jìn)行檢測，定位到1個QTL，貢獻(xiàn)率為10.6%，位于標(biāo)記RFLP asg3附近的染色體binl.04區(qū)域內(nèi)。吉林省農(nóng)業(yè)科學(xué)院與中國農(nóng)業(yè)大學(xué)合作，利用高抗自交系吉1037與感病自交系黃早四為親本構(gòu)建分離群體，將抗病基因定位在bin2.09和bin5.03區(qū)域內(nèi)，利用SNP、CAPS 、STS 共6個標(biāo)記，最終將主效QTL定位在STS6及STS8的170 kb抗病區(qū)段qSHRl范圍內(nèi)，在這2個標(biāo)記之間重新開發(fā)14個分子標(biāo)記，每個標(biāo)記平均物理距離10 kb[70]。

3 MAS在抗蟲育種上的應(yīng)用

蟲害是影響玉米產(chǎn)量及品質(zhì)最嚴(yán)重的因素之一，其中玉米螟的危害最大。玉米螟（ Ostrinia furnacalis ），又名鉆心蟲。根據(jù)其分布和種類不同，主要分為歐洲玉米螟（ECB）、西南玉米螟（SWCB）和亞洲玉米螟（ACB）。亞洲玉米螟是我國的主要蟲害。

歐洲玉米螟主要危害歐洲、美洲和非洲地區(qū)的玉米。Bohn等[71]利用D06為父本和D408為母本作為雙親配置雜交組合，選取226個F3群體，調(diào)查蛀莖隧道長度和莖稈損傷率作為表型，進(jìn)行QTL定位，檢測到6個與蛀莖隧道長度相關(guān)、5個與莖稈損傷率相關(guān)的QTL，貢獻(xiàn)率為50%，且多為加性效應(yīng)。后來，Bohn等[71]又對該親本配置的雜交群體F2：3與D171進(jìn)行側(cè)交，獲得204個后代并對其進(jìn)行分子標(biāo)記輔助選擇和QTL定位，共發(fā)現(xiàn)6個與莖稈損傷率有關(guān)的QTL，貢獻(xiàn)率為27.4%。Jampatong等[72]用抗病自交系Mo47和感病親本B73Ht為雙親，構(gòu)建 244個F2：3群體為QTL定位群體，與前人研究不同的是，得到的結(jié)果是對于一代玉米螟進(jìn)行MAS比較好的是4.01和6.02區(qū)間內(nèi)的QTL，而對于二代玉米螟進(jìn)行MAS較好的是位于5.05、5.08 和9.02區(qū)間的QTL。Krakowsky等[73]對利用易感自交系B73和抗性自交系De811為親本構(gòu)建的191個RIL群體進(jìn)行研究，發(fā)現(xiàn)研究ECB抗性的最大的問題是沒有找到一致的檢測環(huán)境。西南玉米螟主要危害美洲地區(qū)玉米。Groh等[74]利用抗病自交系CML67和感病自交系CML131為親本構(gòu)建170個RIL群體進(jìn)行QTL定位，結(jié)果針對葉侵食損傷這一性狀，在側(cè)交群體中檢測到4個QTL，且有 2個與RIL中檢測到的一致。Khairallah等[75]用抗病自交系CML139和感病自交系Ki3為親本構(gòu)建 472個F3群體，對SWCB具有抗性的QTL進(jìn)行了檢測，檢測到5個染色體上11個與株高相關(guān)的QTL，貢獻(xiàn)率為43%，檢測到的QTL除加性效應(yīng)外，還有顯性和半顯性效應(yīng)。Brooks等[76]利用2個不同的后代群體，對西南玉米螟和秋季赫蟲作比較，2個群體的種植模式相同，結(jié)果發(fā)現(xiàn)在第1、5、7、9號染色體上發(fā)現(xiàn)的QTL對2種害蟲均有抗性，而抗SWCB于第5、9號染色體被檢測到。亞洲玉米螟（ACB）是影響我國玉米產(chǎn)量和品質(zhì)的重要害蟲，導(dǎo)致玉米減產(chǎn)10%～30%，嚴(yán)重時甚至絕收。于永濤[77]利用2對親本分別構(gòu)建大小為120個F2：3和114個F2：3群體為作圖群體，通過80個SSR標(biāo)記和12個AFLP標(biāo)記進(jìn)行QTL定位，檢測到3個與葉片侵害度有關(guān)的QTL，分別在1、5和8號染色體上;檢測到3個與莖稈蟲孔數(shù)有關(guān)的QTL，分別位于4和10號染色體上;檢測到2個與莖稈隧道長度有關(guān)的QTL，分別在4和8號染色體上。這些性狀的QTL貢獻(xiàn)率為7.7%～51.8%。此外，該研究還發(fā)現(xiàn)檢測到的QTL均多在1、4、5、8、10號染色體上，且Bin1.02-1.03和Bin8.20-8.03是2個群體共有的QTL。根據(jù)以上研究推測，不同地區(qū)的玉米螟抗性機理之間存在一定的相關(guān)性，各玉米螟抗性有相同的QTL，再進(jìn)行MAS選擇時，要綜合考慮具有多效性的QTL，提高育種效率，加快育種進(jìn)程。

4 利用分子標(biāo)記輔助選擇育成的玉米品種

傳統(tǒng)育種主要依賴作物表現(xiàn)型的選擇，而環(huán)境因素、基因間的互作等因素都會影響表型選擇效率。對于品質(zhì)、株型性狀等數(shù)量性狀而言，僅通過表現(xiàn)型來選擇會更加困難，因此采用以DNA多態(tài)性為基礎(chǔ)的分子標(biāo)記來對作物選擇效率會更高且更加準(zhǔn)確，其中MAS更被廣泛接受。

在改良玉米品質(zhì)中，Hao等[78]為了提高鄭單958的含油量，利用MAS將高油自交系By 804的一個QTL-qHO6的有利等位基因?qū)豚崋?58、鄭58和長7-2的雙親中。通過回交6代，選育出鄭58-qHO6和長7-2-qHO6這2個親本自交系。2個改良自交系的含油量都有所增加。因此，經(jīng)改良的鄭單958-qHO 6由鄭58-qHO6向長7-2-qHO6雜交的含油量達(dá)4.5%，相對含量和絕對含量分別比原鄭單958提高了0.71%和18%。MAS在培育高維生素A的雜交玉米上也有優(yōu)勢，印度育種者將crtRB1的等位基因從β-胡蘿卜素含量高的自交系導(dǎo)入到普通玉米中，回交2代后子代背景回復(fù)率就有90%，β-胡蘿卜素的含量最高增加了17.5 μg/g，雜交后代的β-胡蘿卜素的含量從原來的2.6 μg/g增長到21.7 μg/g[79]。在玉米抗逆育種中，李玉杰[80]利用抗粗縮病自交系90110為供體親本，與12個感病自交系為輪回親本進(jìn)行雜交和回交，除個別后代群體，其余抗性均高于輪回親本。通過MAS首次成功地改良了我國骨干玉米自交系粗縮病抗性，且僅需要一代的自交與選擇就能提供一批高抗粗縮病的玉米種質(zhì)。北京市農(nóng)林科學(xué)院玉米研究中心以抗玉米絲黑穗病吉1037 和抗莖腐病1145為供體親本，玉米自交系京24為輪回親本，利用分子標(biāo)記輔助選擇技術(shù)和回交轉(zhuǎn)育技術(shù)，獲得5 份單抗絲黑穗病和2 份單抗莖腐病的玉米自交系京24，且改良后的京24與輪回親本的背景一致[81]。通過標(biāo)記輔助的基因聚合，抗玉米葉枯病和南方銹病基因/QTL 也被聚合到 5 個優(yōu)良玉米品系中，Ribaut等[82]利用分子標(biāo)記輔助回交育種（MABC），對含有2 200個單株的4個世代的3個群體進(jìn)行選擇，4代的背景回復(fù)率達(dá)85%，其中最佳的5個MABC衍生雜交種的平均產(chǎn)量至少比對照雜種高50%。Zhao等[83]在玉米2號染色體上發(fā)現(xiàn)了一個主要的抗玉米絲黑穗病QTL（qHSR 1），以Ji1037為供體親本，利用MAS技術(shù)將qHSR 1具有高產(chǎn)潛力但對黑穗病感病的10個玉米自交系進(jìn)行抗性改良。每10個高產(chǎn)系都與完全抗黑穗病的供體親本Ji1037雜交，然后與各自的輪回親本進(jìn)行5代回交。10個轉(zhuǎn)化自交系在黑穗病抗性上均表現(xiàn)出明顯的提高。此外，由轉(zhuǎn)化系配制的雜交種對黑穗病的抗性也顯著提高，而對其他農(nóng)藝性狀的抗性基本保持不變。Xu等[84]利用多代回交和MAS技術(shù)將玉米粗縮?。∕RDD）數(shù)量性狀位點qMrdd8導(dǎo)入3個優(yōu)良玉米自交系中。BC4F2和BC3F2的植株，以及那些輪回親本基因組恢復(fù)率最高的植株來構(gòu)建轉(zhuǎn)化的純合自交系。2017年，7個轉(zhuǎn)化自交系和5個雜交種表現(xiàn)出對MRDD的抗性增強，而其他農(nóng)藝性狀在非致病性脅迫條件下沒有受到影響。

5 展望

MAS是玉米育種工作中必不可少的部分，隨著玉米育種技術(shù)的發(fā)展，更要將現(xiàn)代生物技術(shù)與傳統(tǒng)育種相結(jié)合。MAS在目前的應(yīng)用上，多數(shù)還是單基因控制的優(yōu)良性狀的改良，對于主效基因的導(dǎo)入已經(jīng)取得不錯的進(jìn)展，但在多個優(yōu)良性狀上的聚合還有所欠缺。由于穩(wěn)定的SSR標(biāo)記較少以及高成本的SNP鑒定體系，因此通過MAS得到的優(yōu)良種質(zhì)資源較少。在傳統(tǒng)育種中，要利用好分子標(biāo)記育種技術(shù)、基因編輯技術(shù)以及轉(zhuǎn)基因育種技術(shù)等解決傳統(tǒng)育種在獲得高產(chǎn)優(yōu)質(zhì)、抗性好的新種質(zhì)上的難題。相信隨著玉米轉(zhuǎn)基因育種放開、SNP的完善和普及，以及基因克隆和全基因組關(guān)聯(lián)分析（GWAS）的應(yīng)用，在未來幾年內(nèi)，分子標(biāo)記輔助選擇育種與其他生物技術(shù)聯(lián)系會更加密切，玉米育種工作會迎來新的技術(shù)革命。

參考文獻(xiàn)

[1] 陳兆波.分子標(biāo)記的種類及其在作物遺傳育種中的應(yīng)用[J].現(xiàn)代生物醫(yī)學(xué)進(jìn)展，2009，9（11）：2179-2181，2148.

[2] BOTSTEIN D，WHITE R L，SKOLNICK M，et al.Construction of a genetic linkage map in man using restriction fragment length polymorphisms[J].Am J Hum Genet，1980，32（3）：314-331.

[3] 劉國棟.基于SSR的棉花品種分子檢測技術(shù)體系的建立與應(yīng)用[D].濟(jì)南：山東師范大學(xué)，2017.

[4] 周琳，段玉，文博，等.SNP分子標(biāo)記及其在木本植物遺傳育種的應(yīng)用[J].亞熱帶植物科學(xué)，2018，47（2）：187-193.

[5] DRENKARD E，RICHTER B G，ROZEN S，et al.A simple procedure for the analysis of single nucleotide polymorphisms facilitates map-based cloning in ?Arabidopsis [J].Plant Physiol，2000，124（4）：1483-1492.

[6] THIEL T，KOTA R，GROSSE I，et al.SNP2CAPS：A SNP and INDEL analysis tool for CAPS marker development[J].Nucleic Acids Res，2004，32（1）：1-5.

[7] HELYAR S J，LIMBORG M T，BEKKEVOLD D，et al.SNP discovery using next generation transcriptomic sequencing in atlantic herring（ Clupea harengus ）[J].PLoS One，2012，7（8）：1-11.

[8] JULIATTI F C，F(xiàn)IGUEIR A A，ALVESO.Severity evaluation methods for southern polysora corn rust [J].Biosci J，2016，32（4）：969-977.

[9] RENFRO B L.Maize rusts[M]//CASELA C R，RENFRO B，KRATTIGER A F.Diagnosing maize diseases in Latin America.Ithaca，NY：ISAAA Briefs，1998（9）：8-14.

[10] ZHANG Y，XU L，ZHANG D F，et al.Mapping of southern corn rust-resistant genes in the W2D inbred line of maize（ Zea mays ?L.）[J].Mol Breed，2010，25（3）：433-439.

[11] 陳翠霞，楊典洱，于元杰，等.南方玉米銹病及其抗性鑒定[J].植物病理學(xué)報，2003，33（1）：86-87.

[12] 張發(fā)軍，孟昭東，穆春華，等.抗南方銹病玉米自交系的篩選及評價[J].山東農(nóng)業(yè)科學(xué)，2008，40（9）：77-79.

[13] 李石初，杜青.玉米種質(zhì)資源抗南方玉米銹病鑒定初報[J].現(xiàn)代農(nóng)業(yè)科技，2010（21）：187，189.

[14] 張斌.分子標(biāo)記輔助選擇玉米兼抗粗縮病和南方銹病的育種材料[D].濟(jì)南：山東大學(xué)，2012.

[15] 陳翠霞.南方玉米銹病的抗病性鑒定、抗病基因的遺傳分析、分子標(biāo)記和精細(xì)定位[D].泰安：山東農(nóng)業(yè)大學(xué)，2002.

[16] 艾堂順，田志強，李會敏，等.玉米南方銹病抗病QTL鑒定和效應(yīng)分析[J].河南農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報，2018，52（4）：514-518.

[17] 高衛(wèi)東，戴法超.玉米大斑病研究的新進(jìn)展[J].植物病理學(xué)報，1993，23（3）：193-195.

[18] 楊耿斌.我國玉米大斑病生理小種動態(tài)與抗玉米大斑病材料篩選[J].農(nóng)業(yè)科技通訊，2014（6）：35-37.

[19] 石鳳梅，馬立功.黑龍江省玉米大斑病菌小種生理分化的研究[J].黑龍江農(nóng)業(yè)科學(xué)，2013（2）：63-65.

[20] 孫瑞東，臧振原，慈佳賓，等.玉米自交系對大斑病菌的抗性鑒定及抗性來源分析[J].作物雜志，2020（2）：65-70.

[21] 李曉光，董本春，王曉薔，等.玉米種質(zhì)對玉米大斑病的抗性鑒定與評價[J].安徽農(nóng)業(yè)科學(xué)，2018，46（16）：141-142，148.

[22] 陳曉旭，岳輝，王作英，等.遼寧省抗玉米大斑病骨干自交系的篩選與評價[J].農(nóng)業(yè)科技通訊，2016（6）：107-108.

[23] 程品冰.玉米抗大斑病種質(zhì)的抗性基因分析[D].北京：中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院，2007.

[24] 鄭祖平，劉小紅，黃玉碧，等.玉米大斑病抗性基因的QTL定位[J].西南農(nóng)業(yè)學(xué)報，2007，20（4）：634-637.

[25] 田志強，艾堂順，鄧策，等.玉米自交系P178的大斑病抗性QTL定位和效應(yīng)分析[J].河南農(nóng)業(yè)科學(xué)，2018，47（2）：73-76，97.

[26] 高瑞.Bin標(biāo)記和QTL對玉米大斑病全基因組選擇預(yù)測精度的影響研究[D].沈陽：沈陽農(nóng)業(yè)大學(xué)，2019.

[27] 王曉鳴，晉齊鳴，石潔，等.玉米病害發(fā)生現(xiàn)狀與推廣品種抗性對未來病害發(fā)展的影響[J].植物病理學(xué)報，2006，36（1）：1-11.

[28] HOOKER A L，SMITH D R，LIM S M，et al.Physiological races of ?Helminthosporium maydis ?and disease resistance[J].Plant Dis Rep，1970，54：1109-1110.

[29] HOOKER A L.Southern leaf blight of corn-present status and future prospects[J].J Environ Qual，1972，1（3）：244-249.

[30] ULLSTRUP A J.History of southern corn leaf blight[J].Plant Dis Rep，1970，54：1100-1102.

[31] 杜學(xué)林，邢光耀.不同玉米品種對小斑病抗性研究[J].種子，2005，24（9）：65-66.

[32]? 蔣鋒，劉鵬飛，張金鳳，等.玉米小斑病抗性的遺傳分析與QTL定位[C]//中國農(nóng)業(yè)產(chǎn)業(yè)經(jīng)濟(jì)發(fā)展協(xié)會.2010植物免疫機制研究及其調(diào)控研討會論文集.北京：北京晟勛炎國際會議服務(wù)中心，2010：100-109.

[33] 林歡.玉米小斑病抗性和葉片性狀的分子標(biāo)記定位[D].廣州：仲愷農(nóng)業(yè)工程學(xué)院，2013.

[34] 陳趣.甜玉米小斑病抗性及主要農(nóng)藝性狀QTL定位[D].廣州：仲愷農(nóng)業(yè)工程學(xué)院，2015.

[35] YANG Q，YIN G M，GUO Y L，et al.A major QTL for resistance to ?Gibberella ?stalk rot in maize[J].Theorp Appl Genet，2010，121（4）：673-687.

[36] 王曉鳴，戴法超，朱振東，等.玉米自交系和雜交種的抗病特性研究[J].中國農(nóng)業(yè)科學(xué)，2000，33（Z1）：132-140.

[37] 王富榮，石秀清.玉米品種抗莖腐病鑒定[J].植物保護(hù)學(xué)報，2000，27（1）：59-62.

[38] 楊洋，陳國康，郭成，等.玉米種質(zhì)資源抗腐霉莖腐病鑒定[J].作物學(xué)報，2018，44（8）：1256-1260.

[39] 宋燕春，裴二芹，石云素，等.玉米重要自交系的腫囊腐霉莖腐病抗性鑒定與評價[J].植物遺傳資源學(xué)報，2012，13（5）：798-802.

[40] P M E，GIANFRANCESCHI L，TARAMINO G，et al.Mapping quantitative trait loci（QTLs）for resistance to ?Gibberella zeae ?infection in maize[J].Mol Gen Genet，1993，241（1/2）：11-16.

[41] 王萍.玉米腫囊腐霉莖基腐病抗性基因的分子標(biāo)記研究及其初步定位[D].北京：中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院，2000.

[42] YANG D E，ZHANG C L，ZHANG D S，et al.Genetic analysis and molecular mapping of maize（ Zea mays ?L.）stalk rot resistant gene ?Rfg1 [J].Theor Appl Genet，2004，108（4）：706-711.

[43] YANG Q，YIN G M，GUO Y L，et al.A major QTL for resistance to ?Gibberella ?stalk rot in maize[J].Theor Appl Genet，2010，121（4）：673-687.

[44] MA C，MA X N，YAO L S，et al. qRfg3 ，a novel quantitative resistance locus against ?Gibberella ?stalk rot in maize[J].Theor Appl Genet，2017，130（8）：1723-1734.

[45] 王金萍，劉永偉，孫果忠，等.抗莖腐病分子標(biāo)記在159份玉米自交系中的驗證及實用性評價[J].植物遺傳資源學(xué)報，2017，18（4）：754-762.

[46] WILLIAMS L E，ALEXANDER L J.Maize dwarf mosaic，a new corn disease[J].Phytopathology，1965，55（7）：802-804.

[47] JANSON B F，ELLETT C W.A new corn disease in Ohio[J].Plant Disease Reporter，1963，47（12）：1107-1108.

[48] 高文臣，魏寧生.玉米矮花葉病研究進(jìn)展[J].西北農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報，2000，28（1）：86-91.

[49] KUNTZE L，F(xiàn)UCHS E，GRNTZIG M，et al.Resistance of early-maturing European maize germplasm to sugarcane mosaic virus（SCMV）and maize dwarf mosaic virus（MDMV）[J].Plant Breed，1997，116（5）：499-501.

[50] 林肯恕.玉米矮花葉病抗性鑒定的研究[J].中國農(nóng)業(yè)科學(xué)，1989，22（1）：57-61.

[51] 吳建宇.玉米對矮花葉病抗性的鑒定和遺傳研究[D].南京：南京農(nóng)業(yè)大學(xué)，1997.

[52] 張成和，劉愛國，張曉青，等.河北省玉米自交系和雜交種對矮花葉毒病的抗性鑒定[J].河北農(nóng)業(yè)科學(xué)，1992（3）：13-16.

[53] SCOTT G E，ROSENKRANZ E.A new method to determine the number of genes for resistance to maize dwarf mosaic in maize[J].Crop Sci，1982，22（4）：756-761.

[54] LOUIE R.Effects of genotype and inoculation protocols on resistance evaluation of maize to maize dwarf mosaic virus strains[J].Phytopathology，1986，76（8）：769-773.

[55] MCMULLEN M D，LOUIE R.The linkage of molecular markers to a gene controlling the symptom response in maize to maize dwarf mosaic virus[J].Mol Plant Microbe Interact，1989，2（6）：309-314.

[56] XIA X C，MELCHINGER A E，KUNTZE L，et al.Quantitative trait loci mapping of resistance to sugarcane mosaic virus in maize[J].Phytopathology，1999，89（8）：660-667.

[57] 王鳳格.玉米矮花葉病抗性QTL的初步分析[D].北京：中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院，2001.

[58] 呂香玲，李新海，郝轉(zhuǎn)芳，等.基于近等基因?qū)胂蛋l(fā)掘玉米抗甘蔗花葉病毒主效基因[J].玉米科學(xué)，2007，15（3）：9-14.

[59] 席章營，張書紅，李新海，等.一個新的抗玉米矮花葉病基因的發(fā)現(xiàn)及初步定位[J].作物學(xué)報，2008，34（9）：1494-1499.

[60] 王永霞.玉米矮花葉病抗病基因的分子標(biāo)記開發(fā)及定位[D].鄭州：河南農(nóng)業(yè)大學(xué)，2009.

[61] 高潔.特用玉米抗絲黑穗病遺傳分析及其病菌致病性的遺傳多樣性[D].長春：吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)，2005.

[62] 柏光曉，任洪，蘭仲模，等.貴州玉米種質(zhì)資源的抗病性鑒定與評價[J].種子，2007，26（3）：51-54.

[63] 譚康，李春紅，楊梅，等.10份貴州常用玉米自交系絲黑穗病抗性鑒定及遺傳多樣性分析[J].南方農(nóng)業(yè)學(xué)報，2019，50（11）：2384-2391.

[64] 張建國.高抗玉米絲黑穗病種質(zhì)創(chuàng)新及相關(guān)分子標(biāo)記的篩選和驗證[J].黑龍江農(nóng)業(yè)科學(xué)，2011（7）：7-9.

[65] 王春明，郭滿庫，郭成，等.玉米雜交種抗大斑病和絲黑穗病鑒定與評價[J].西北農(nóng)業(yè)學(xué)報，2019，28（2）：183-190.

[66] 石紅良.玉米抗絲黑穗病分子標(biāo)記開發(fā)與主效抗病基因定位[D].雅安：四川農(nóng)業(yè)大學(xué)，2009.

[67] 高樹仁.玉米抗絲黑穗病遺傳分析及數(shù)量性狀基因定位[D].長春：吉林大學(xué)，2005.

[68] LBBERSTEDT T，XIA X C，TAN G，et al.QTL mapping of resistance to ?Sporisorium reiliana ?in maize[J].Theor Appl Genet，1999，99（3/4）：593-598.

[69] BREWBAKER J L，LU X W.Molecular mapping of QTLs conferring resistance to ?Sphacelotheca reiliana （Kühn）Clint[J].Maize genetics cooperation newsletter，1999，73：36.

[70] 李莉.玉米絲黑穗病抗性種質(zhì)創(chuàng)制與選擇[D].長春：吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)，2012.

[71] BOHN M，SCHULZ B，KREPS R，et al.QTL mapping for resistance against the European corn borer（ Ostrinia nubilalis ?H.）in early maturing European dent germplasm[J].Theor Appl Genet，2000，101（5/6）：907-917.

[72] JAMPATONG C，MCMULLEN M D，BARRY B D，et al.Quantitative trait loci for first-and second-generation European corn borer resistance derived from the maize inbred Mo47[J].Crop Sci，2002，42（2）：584-593.

[73] KRAKOWSKY M D，LEE M，WOODMAN-CLIKEMAN W L，et al.QTL mapping of resistance to stalk tunneling by the European corn borer in RILs of maize population B73 × De81[J].Crop Sci，2004，44（1）：274-282.

[74] GROH S，KHAIRALLAH M M，GONZLEZ-DE-LEN D，et al.Comparison of QTLs mapped in RILs and their test-cross progenies of tropical maize for insect resistance and agronomic traits[J].Plant Breed，1998，117（3）：193-202.

[75] KHAIRALLAH M M，BOHN M，JIANG C，et al.Molecular mapping of QTL for southwestern corn borer resistance，plant height and flowering in tropical maize[J].Plant Breed，1998，117（4）：309-318.

[76] BROOKS T? D，BUSHMAN B S，WILLIAMS W P，et al.Genetic basis of resistance to fall armyworm（Lepidoptera：Noctuidae）and southwestern corn borer（Lepidoptera：Crambidae）leaf-feeding damage in maize[J].J Econ Entomol，2007，100（4）：1470-1475.

[77] 于永濤.玉米對亞洲玉米螟抗性的QTL分析[D].保定：河北農(nóng)業(yè)大學(xué)，2003.

[78] HAO X M，LI X W，YANG X H，et al.Transferring a major QTL for oil content using marker-assisted backcrossing into an elite hybrid to increase the oil content in maize[J].Mol Breed，2014，34（2）：739-748.

[79] 國際農(nóng)業(yè)生物技術(shù)應(yīng)用服務(wù)組織（ISAAA）.科學(xué)家利用標(biāo)記輔助導(dǎo)入技術(shù)開發(fā)富含維生素A的玉米品種[J].中國生物工程雜志，2015，35（1）：121.

[80] 李玉杰.利用分子標(biāo)記技術(shù)改良玉米粗縮病抗性[D].濟(jì)南：山東大學(xué)，2010.

[81] 余輝，宋偉，趙久然，等.分子標(biāo)記輔助選擇育成的玉米自交系京24單抗絲黑穗病和莖腐病改良材料性狀分析[J].分子植物育種，2014，12（1）：56-61.

[82] RIBAUT J M，RAGOT M.Marker-assisted selection to improve drought adaptation in maize：The backcross approach，perspectives，limitations，and alternatives [J].J Exp Bot，2007，58（2）：351-360.

[83] ZHAO X R，TAN G Q，XING Y X，et al.Marker-assisted introgression of qHSR1 to improve maize resistance to head smut[J].Mol Breed，2012，30（2）：1077-1088.

[84] XU Z N，HUA J G，WANG F F，et al.Marker-assisted selection of ?qMrdd8 ?to improve maize resistance to rough dwarf disease[J].Breed Sci，2020，70（2）：183-192.