李 芳，游斌杰，鄭 萍

（1.成都蜀星飼料有限公司，四川 成都 611633；2.重慶市畜牧科學(xué)院，重慶 402460；3.四川農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物營養(yǎng)研究所，四川 雅安 611130）

20 世紀(jì)80 年代以來，高劑量添加氧化鋅、硫酸銅作為有效控制仔豬腹瀉， 提高生產(chǎn)效率的飼用方案被畜牧業(yè)廣泛使用， 導(dǎo)致養(yǎng)殖業(yè)排放污染問題日益突出。 降低微量元素的使用量，降低氮、磷排放， 減少浪費(fèi)已成為飼料添加劑行業(yè)的重點(diǎn)研究方向， 抑制氧化鋅的高劑量添加方面最為突出。 2017 年6 月歐盟正式?jīng)Q定5 年內(nèi)全面停止高劑量氧化鋅在仔豬飼料中應(yīng)用。 2018 年7 月1日，我國正式實(shí)施2017 版《飼料添加劑安全使用規(guī)范》，將斷奶后前2 周仔豬配合飼料中氧化鋅含量由原來的2 250 mg/kg （以鋅計(jì)） 調(diào)整為1 600 mg/kg（以鋅計(jì)），這一含量對(duì)于生豬養(yǎng)殖業(yè)來說是極大挑戰(zhàn)。因此，尋找一種能有效替代高劑量氧化鋅的產(chǎn)品或方案顯得尤為重要。

近年來，不少研究發(fā)現(xiàn)，通過調(diào)整氧化鋅粒徑、 降低氧化鋅在胃酸中的損失等多種途徑可以提高仔豬抗腹瀉效能［1］。 就保育仔豬而言，添加540 mg/kg［2］、580 mg/kg［3］包被氧化鋅能夠提高仔豬生產(chǎn)性能。對(duì)于8 kg 左右的杜×長×大三元雜交仔豬來說，添加750 g/t 的納米氧化鋅具有相當(dāng)于2 800 g/t 普通氧化鋅的防腹瀉、促生長效果［4］。 另有研究證實(shí)， 添加300 mg/kg 納米氧化鋅能夠顯著（P＜0.05）降低21 日齡體重為（5.7±0.2）kg 的斷奶仔豬腹瀉率，改善腸黏膜形態(tài)結(jié)構(gòu)，效果與3 000 mg/kg 鋅（氧化鋅）相當(dāng)［5］。 也有研究表明納米氧化鋅的添加濃度為1 500 mg/kg 才能達(dá)到普通氧化鋅濃度為2 000 mg/kg 的效果［6］。該研究采用現(xiàn)代醫(yī)學(xué)包被技術(shù)， 開發(fā)出一種包被氧化鋅，通過與未包被氧化鋅對(duì)比，探究該包被氧化鋅對(duì)斷奶仔豬生長性能、血液生化指標(biāo)、微量元素排泄量的影響，為其在斷奶仔豬生產(chǎn)上的應(yīng)用提供依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

1.1.1 試驗(yàn)動(dòng)物 選取試驗(yàn)場自繁自養(yǎng)的體況良好平均體重為（7.26±0.46）kg 的28 日齡杜×長×大三元雜交斷奶仔豬60 頭作為試驗(yàn)對(duì)象。

1.1.2 氧化鋅種類及來源 普通氧化鋅（飼料級(jí)，鋅含量76.3%， 成都蜀星飼料有限公司提供）；高效包被氧化鋅按照專利《一種氧化鋅腸溶緩釋微丸及其制備方法、包含其的飼料組合物》（專利號(hào)：202011210355.5）生產(chǎn)，實(shí)測樣品含鋅50%。

1.1.3 主要試劑及儀器設(shè)備 優(yōu)級(jí)純鹽酸 （成都市科隆化學(xué)品有限公司）； 原子吸收分光光度計(jì)（GGX-6，北京海光有限公司）；高速離心機(jī)（TG-16，四川蜀科儀器有限公司）；EDTA 抗凝管、肝素鈉抗凝管（山東省成武縣醫(yī)用制品廠）；銅鋅—超氧化物歧化酶由南京建成生物工程研究院提供；雷杜RT-7200 全自動(dòng)血液分析儀（深圳雷杜生命科學(xué)股份有限公司）。

1.2 試驗(yàn)方法

1.2.1 試驗(yàn)設(shè)計(jì)及分組 試驗(yàn)豬60 頭，隨機(jī)分為3 組，包括基礎(chǔ)日糧組、普通氧化鋅組、高效包被氧化鋅組。 普通氧化鋅組在基礎(chǔ)日糧中加入普通氧化鋅1 966 mg/kg； 高效包被氧化鋅組在基礎(chǔ)日糧中添加高效包被氧化鋅1 000 mg/kg。 試驗(yàn)設(shè)計(jì)及分組見表1。 每個(gè)處理組設(shè)10 個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)2 頭豬。試驗(yàn)周期為35 d，7 d 預(yù)試期，正式試驗(yàn)期28 d。

表1 試驗(yàn)設(shè)計(jì)及分組 單位：mg/kg

1.2.2 基礎(chǔ)日糧設(shè)計(jì) 試驗(yàn)基礎(chǔ)日糧參考 《豬飼養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)》（NY/T 65—2004）［7］設(shè)計(jì)飼料配方，基礎(chǔ)日糧組成、營養(yǎng)成分見表2。

表2 基礎(chǔ)日糧組成及營養(yǎng)水平

1.2.3 試驗(yàn)動(dòng)物飼養(yǎng)管理 試驗(yàn)豬飼養(yǎng)在同一封閉豬舍內(nèi)，舍溫保持在25～28 ℃，適當(dāng)通風(fēng)，自由采食和飲水。試驗(yàn)期間豬場每天打掃衛(wèi)生，過道及周邊每天消毒1 次，圈舍每周消毒1 次。按豬場常規(guī)免疫操作程序進(jìn)行驅(qū)蟲、防疫。

1.2.4 樣品采集

1.2.4.1 血樣 試驗(yàn)結(jié)束日，所有仔豬前腔靜脈采血6～8 mL，2 mL 分裝進(jìn)EDTA 抗凝管， 用于檢測血紅蛋白含量；2 mL 分裝進(jìn)肝素鈉抗凝管， 用于血液中微量元素（銅、鐵、鋅）檢測；剩余血樣用離心機(jī)3 000 r/min 離心10 min，取上清液，置-20 ℃冰箱凍存， 用于銅鋅—超氧化物歧化酶（Cu，Zn-SOD）活性測定。

1.2.4.2 糞樣 試驗(yàn)結(jié)束前3 d， 每天收集豬糞便，分別標(biāo)記保存。 將3 d 糞便混勻，取20%烘干粉碎，備用，用于檢測糞便中銅、鋅、鐵、錳元素含量。

1.2.5 測定指標(biāo)及方法

1.2.5.1 生長性能指標(biāo) 試驗(yàn)開始與結(jié)束當(dāng)天8：00，對(duì)每頭仔豬進(jìn)行空腹（禁食12 h）稱重，計(jì)算平均日增重；試驗(yàn)結(jié)束時(shí)，統(tǒng)計(jì)仔豬采食量，計(jì)算每個(gè)重復(fù)仔豬的平均日采食量，計(jì)算料重比。

1.2.5.2 糞便評(píng)分和腹瀉率 試驗(yàn)期間每天對(duì)豬只糞便進(jìn)行評(píng)分，參考公式1 進(jìn)行糞便評(píng)分，參考公式2 計(jì)算腹瀉率。 腹瀉評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)見表3。

表3 糞便評(píng)分標(biāo)準(zhǔn) 單位：分

公式1：糞便級(jí)數(shù)評(píng)分=試驗(yàn)期內(nèi)某組糞便級(jí)數(shù)之和/飼養(yǎng)天數(shù)。

公式2：腹瀉率=試驗(yàn)期內(nèi)某組糞便級(jí)數(shù)之和/飼養(yǎng)頭數(shù)/飼養(yǎng)天數(shù)×100%。

1.2.5.3 血液生化指標(biāo)測定 全血血紅蛋白含量采用自動(dòng)血常規(guī)分析儀（雷杜RT-7200 全自動(dòng)血液分析儀）檢測；銅鋅—超氧化物歧化酶活性采用試劑盒檢測（南京建成生物工程研究院）；血液中銅、鐵、鋅元素含量采用原子吸收分光光度計(jì)法檢測，檢測方法參考《飼料中鈣、銅、鐵、鎂、錳、鉀、鈉和鋅含量的測定原子吸收光譜法》（GB/T 13885—2017）［8］。

1.2.5.4 皮毛指數(shù) 試驗(yàn)結(jié)束前3 d 對(duì)豬只皮毛進(jìn)行評(píng)分，并按照公式3 計(jì)算皮毛指數(shù)。評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)見表4。

表4 皮毛評(píng)分標(biāo)準(zhǔn) 單位：分

公式3： 皮毛指數(shù)=皮毛評(píng)分之和/（試驗(yàn)周期內(nèi)某組豬只頭數(shù)×飼養(yǎng)天數(shù)）。

1.2.5.5 糞便中微量元素含量 將糞便在65 ℃烘干，粉碎過40 目，待測。采用原子吸收分光光度計(jì)檢測糞便中銅、鐵、鋅、錳元素含量。檢測方法參考《飼料中鈣、銅、鐵、鎂、錳、鉀、鈉和鋅含量的測定原子吸收光譜法》（GB/T 13885—2017）［8］。

1.3 數(shù)據(jù)處理

采用SPSS 19.0 軟件對(duì)試驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行單因素方差分析，采用Duncan′s 法對(duì)平均值進(jìn)行多重比較。 試驗(yàn)數(shù)據(jù)用“平均值±標(biāo)準(zhǔn)差”表示。P＜0.05 表示差異顯著，P>0.05 表示差異不顯著，P＜0.01 表示差異極顯著。

2 結(jié)果與分析

2.1 高效包被氧化鋅對(duì)斷奶仔豬生長性能及腹瀉率的影響

斷奶仔豬生長性能及腹瀉率試驗(yàn)結(jié)果見表5。由表5 可知，與基礎(chǔ)日糧組相比，普通氧化鋅組和高效包被氧化鋅組均顯著（P＜0.05）提高仔豬平均日采食量、平均日增重，顯著（P＜0.05）降低料重比和腹瀉率。 普通氧化鋅組與高效包被氧化鋅組相比平均日采食量、平均日增重、料重比和腹瀉率差異不顯著（P>0.05），但高效包被氧化鋅組較普通氧化鋅組平均日增重更高， 料重比和腹瀉率更低。

表5 不同形式氧化鋅對(duì)斷奶仔豬生長性能及腹瀉率的影響

2.2 高效包被氧化鋅對(duì)血液指標(biāo)及皮毛指數(shù)的影響

全血血紅蛋白含量、 銅鋅—超氧化物歧化酶活性和血液中銅、鐵、鋅元素含量檢測結(jié)果以及皮毛指數(shù)評(píng)分統(tǒng)計(jì)結(jié)果見表6。 由表6 可知，全血血紅蛋白含量3 組差異不顯著（P＞0.05）；高效包被氧化鋅組銅鋅—超氧化物歧化酶（Cu，Zn-SOD）活性較基礎(chǔ)日糧組和普通氧化鋅組差異顯著 （P＜0.05）；血液中銅、鐵元素含量3 組差異不顯著（P＞0.05）；普通氧化鋅組血液中鋅元素含量顯著（P＜0.05）高于基礎(chǔ)日糧組和高效包被氧化鋅組。 高效包被氧化鋅組皮毛指數(shù)優(yōu)于普通氧化鋅組， 但各組差異不顯著（P＞0.05）。

表6 不同形式氧化鋅對(duì)斷奶仔豬血液指標(biāo)及皮毛指數(shù)的影響

2.3 高效包被氧化鋅對(duì)糞便中微量元素的影響

糞便中銅、鐵、錳、鋅元素含量的檢測結(jié)果見表7。 由表7 可知，各組糞便中銅、鐵、錳元素含量差異不顯著（P＞0.05）；各組間的鋅元素含量差異極顯著（P＜0.01），普通氧化鋅組與基礎(chǔ)日糧組相比高出近4 倍。

表7 包被氧化鋅對(duì)斷奶仔豬糞便中微量元素含量的影響 單位：mg/kg

3 討論

3.1 高效包被氧化鋅對(duì)斷奶仔豬生長性能與腹瀉率的影響

丹麥科學(xué)家Poulsen 最先發(fā)現(xiàn)飼糧中含鋅量為2 500 mg/kg（氧化鋅）時(shí)可降低斷奶仔豬腹瀉的發(fā)病率［9-11］。 隨后國內(nèi)外大量研究表明，添加氧化鋅（3 000 mg/kg）能夠提高仔豬日增重、飼料采食量、飼料效率。 該研究發(fā)現(xiàn)，添加高效包被氧化鋅1 000 mg/kg 的試驗(yàn)結(jié)果與添加1 966 mg/kg 普通氧化鋅的效果相當(dāng)，且在料重比、腹瀉率、日均日增重等指標(biāo)上表現(xiàn)更優(yōu)，與前人研究結(jié)果一致［12-13］。生物醫(yī)學(xué)研究表明，鋅有利于促進(jìn)細(xì)胞分化、增殖以及蛋白質(zhì)同化， 氧化鋅可以用于急性或亞急性皮炎、輕度皮膚潰瘍等治療，具有收斂保護(hù)作用。然而長時(shí)間使用高劑量氧化鋅對(duì)仔豬后期生長具有不良影響［14-15］。 高效包被氧化鋅組的氧化鋅添加量較低，降低氧化鋅在體內(nèi)的沉積量，同時(shí)也降低氧化鋅的毒副作用，更有利于發(fā)揮抗腹瀉作用。

3.2 高效包被氧化鋅對(duì)血液指標(biāo)的影響

該研究發(fā)現(xiàn)， 與基礎(chǔ)日糧組相比普通氧化鋅組和高效包被氧化鋅組銅鋅—超氧化物歧化酶活性顯著（P＜0.05）提高，說明鋅有利于提高機(jī)體抗氧化能力。 普通氧化鋅組血鋅含量最高，顯著（P＜0.05）高于基礎(chǔ)日糧組和高效包被氧化鋅組，說明長期使用高劑量普通氧化鋅可能會(huì)導(dǎo)致機(jī)體鋅中毒，影響動(dòng)物生長發(fā)育，與何小佳等［16］研究結(jié)果一致。

3.3 高效包被氧化鋅對(duì)糞便中微量元素的影響

微量元素的吸收利用水平普遍較低， 不同微量元素存在競爭拮抗關(guān)系， 高濃度鋅元素可以抑制鐵和銅的吸收［17-18］，與該研究結(jié)果存在一定差異， 原因可能是短時(shí)間內(nèi)鋅元素的競爭優(yōu)勢并未充分體現(xiàn)。有研究表明，高劑量氧化鋅的使用會(huì)導(dǎo)致糞便中鋅排出量成倍增加，嚴(yán)重超過土地承載能力，污染土壤［19］，該試驗(yàn)與前人研究結(jié)果一致。通過降低氧化鋅的添加量，能夠顯著（P＜0.05）降低糞便中鋅含量。

4 結(jié)論

仔豬日糧中添加低劑量高效包被氧化鋅能夠顯著（P＜0.05）降低斷奶仔豬腹瀉率，提高仔豬生長性能，改善皮毛指數(shù)，提高機(jī)體抗氧化能力，極顯著（P＜0.01）降低糞便中鋅排放，減少環(huán)境污染。