張欣欣 唐美君 肖強(qiáng)

摘要：茶尺蠖核型多角體病毒是一種重要的病原微生物，可以感染茶尺蠖和灰茶尺蠖幼蟲致其死亡。文章介紹了茶尺蠖核型多角體病毒的發(fā)現(xiàn)、形態(tài)特征、作用機(jī)理和使用技術(shù)等，為茶尺蠖核型多角體病毒的應(yīng)用提供參考。

關(guān)鍵詞：茶尺蠖核型多角體病毒;形態(tài)特征;作用機(jī)理;使用技術(shù)

The Nemesis of the Tea Geometrids

——Ectropis obliqua Nucleopolyhedrovirus

ZHANG Xinxin1，2， TANG Meijun1， XIAO Qiang1*

1. Tea Research Institute， Chinese Academy of Agricultural Sciences， Hangzhou 310008， China;

2. Graduate School of the Chinese Academy of Agricultural Sciences， Beijing 100081， China

Abstract： The Ectropis obliqua nucleopolyhedrovirus （EoNPV） is a pathogenic agent of the tea geometrids and a potential

agent for the integrated pest management strategies， which can infect tea geometrids and cause their death. This

manuscript introduced the discovery process， morphological characteristics， mechanism and application techniques of EoNPV， which provided some suggestions for the application of EoNPV.

Keywords： Ectropis obliqua nucleopolyhedrovirus， morphological characteristics， mechanism， application techniques

茶尺蠖（Ectropis obliqua）和灰茶尺蠖（E. grisescens）是我國茶園中兩種主要的食葉類害蟲，以幼蟲咀食茶樹嫩葉和成葉為害，使葉片形成不規(guī)則的缺刻，幼蟲食量大，暴食期將茶樹老葉、嫩莖全部吃光，只剩光禿禿的茶桿，似火燒狀，嚴(yán)重影響茶樹的生長發(fā)育，有時(shí)甚至導(dǎo)致茶樹死亡。

茶尺蠖核型多角體病毒（Ectropis obliqua Nucleopolyhedrovirus，EoNPV）是一種重要的病原微生物，可感染茶樹主要害蟲茶尺蠖和灰茶尺蠖幼蟲致其死亡。在田間看到茶尺蠖幼蟲倒掛在樹枝上的現(xiàn)象，就是由于感染病毒造成的，在自然界這是一種生物相克現(xiàn)象，把這種病毒經(jīng)人工繁殖后，就可用于防治茶尺蠖灰茶尺蠖。

一、茶尺蠖核型多角體病毒的發(fā)現(xiàn)

1977年，在安徽的宣城、郎溪、廣德及屯溪一帶，茶園中出現(xiàn)了茶尺蠖流行性病情，幼蟲在感病初期癥狀不明顯，后生長受到抑制，取食減少，臨近死亡時(shí)，體內(nèi)液化，流出膿液，吸附于植株上，懸垂死亡（圖1）。趙燁烽等[1]從死蟲標(biāo)本上分離得到病毒多角體顆粒，根據(jù)病癥和侵染蟲體部位的觀察，初步確定其為一種核型多角體病毒，這是茶尺蠖核型多角體病毒在我國首次報(bào)道。隨后，我國科學(xué)家陸續(xù)對(duì)其開展了研究，朱國凱等[2]經(jīng)過鑒定，進(jìn)一步確定其為一種核型多角體病毒，即茶尺蠖核型多角體病毒，屬桿狀病毒科（Baculoviridae）、桿狀病毒屬（Baculovirus）、核型多角體病毒A亞組。

二、茶尺蠖核型多角體病毒形態(tài)特征

茶尺蠖核型多角體病毒是一種共價(jià)閉合環(huán)狀雙鏈DNA病毒，外形呈三角形、四邊形、多邊形或圓形等形狀，大小不等，表面光滑。多角體外被有多角體膜，多角體內(nèi)包含隨機(jī)分布的病毒粒子，包埋于晶格排列的多角體蛋白中，病毒粒子外形呈桿狀[3]（圖2），它只能專一感染相應(yīng)的昆蟲，不會(huì)影響到人類。

三、茶尺蠖核型多角體病毒的作用機(jī)理

核型多角體病毒一般在繁殖過程中存在2種病毒粒子，出芽型病毒粒子（Budded Virus，BV）和包含體衍生病毒粒子（Occluded Virus，ODV）。2種粒子的核內(nèi)雙鏈DNA完全一致，ODV包埋于多角體蛋白中，負(fù)責(zé)病毒在昆蟲個(gè)體之間的傳播，BV沒有多角體蛋白，負(fù)責(zé)病毒在昆蟲體內(nèi)細(xì)胞與組織間傳播[4]。核型多角體病毒借助這兩種粒子完成在宿主體內(nèi)的增殖和種群內(nèi)的擴(kuò)散。當(dāng)昆蟲取食帶有病毒包涵體的葉片后，包涵體侵入中腸上皮細(xì)胞，以膜融合的方式進(jìn)行感染，且在該細(xì)胞細(xì)胞核內(nèi)進(jìn)行復(fù)制增殖。在DNA復(fù)制后期，核衣殼開始組裝成BV或者ODV [5]。BV從中腸上皮細(xì)胞基底部通過血淋巴系統(tǒng)，到達(dá)其他部位細(xì)胞，并通過內(nèi)吞作用、膜融合、胞飲作用一種或多種方式侵入細(xì)胞，進(jìn)行感染，ODV留在中腸細(xì)胞內(nèi)，待宿主死亡后，再釋放到周圍的環(huán)境中并開始下一輪的感染循環(huán)，可保持病毒在外環(huán)境中的穩(wěn)定存在[6]。

茶尺蠖核型多角體病毒對(duì)宿主有較強(qiáng)的專一性，目前發(fā)現(xiàn)僅感染茶尺蠖和灰茶尺蠖這2個(gè)近緣種，對(duì)其他生物十分安全[7-8]。從1983年開始，我國科學(xué)家陸續(xù)研究明確了茶尺蠖核型多角體病毒的結(jié)構(gòu)、理化性質(zhì)等，并使其劑型化，應(yīng)用于田間取得了較好的防治效果[9-12]。目前茶尺蠖核型多角體病毒已取得生物農(nóng)藥登記，通用名為茶核·蘇云菌懸浮劑。該產(chǎn)品在茶園中連續(xù)施用幾年之后，可逐步達(dá)到茶尺蠖、灰茶尺蠖和天敵之間的生態(tài)平衡，后效作用顯著。

四、茶尺蠖核型多角體病毒殺蟲劑的使用技術(shù)

茶核·蘇云菌懸浮劑（圖3）宜在茶尺蠖或灰茶尺蠖第一代或第五代、第六代的1齡幼蟲期噴施，以蟲口密度小、發(fā)生整齊的第一代防治為最佳[10]。施用時(shí)應(yīng)均勻噴霧，建議防治茶尺蠖施藥量每公頃1 125～1 500 mL，防治灰茶尺蠖施藥量每公頃2 250～3 000 mL。

使用時(shí)應(yīng)注意以下2點(diǎn)：一是在自然條件下茶尺蠖核型多角體病毒對(duì)高溫和紫外線較敏感，照射時(shí)間越長，病毒活性會(huì)下降，宜在晴天傍晚或陰天施用，以減輕日照的殺傷力[13];二是噴施茶尺蠖核型多角體病毒后，病毒在蟲體內(nèi)有一個(gè)增殖過程，因此需要5～7 d幼蟲才會(huì)逐漸死亡。

參考文獻(xiàn)

[1] 趙燁烽， 侯建文. 茶尺蠖病毒病的觀察測定和田間試驗(yàn)簡報(bào)[J]. 中國茶葉， 1980， 2（3）： 14-17.

[2] 朱國凱， 侯建文， 趙燁烽， 等. 茶尺蠖核型多角體病毒的鑒定[J]. 微生物學(xué)通報(bào)， 1981， 8（3）： 102-103.

[3] 張益民， 王學(xué)蘭， 張世敏， 等. 茶尺蠖核型多角體病毒超微結(jié)構(gòu)的初步研究[J]. 科學(xué)通報(bào)， 1985（24）： 1918-1920.

[4] KEDDIE B ANDREW， APONTE GREGORY W， VOLKMAN LO-

Y E. The pathway of infection of Autographa californica nuclear pol-

yhedrosis virus in an insect host[J]. Science， 1989， 243（4899）：

1728-1730.

[5] WASHBURN JAN O， CHAN ERIC Y， VOLKMAN LOY E， et al.

Early synthesis of budded virus envelope fusion protein GP64

enhances Autographa californica multicapsid nucleopolyhedrovirus

virulence in orally infected Heliothis virescens[J]. Journal of Virology，

2003， 77（1）： 280-290.

[6] KHURAD A M， MAHULIKAR A， RATHOD M K， et al. Vertical

transmission of nucleopolyhedrovirus in the silkworm， Bombyx mori

L. [J]. Journal of Invertebrate Pathology， 2004， 87（1）： 8-15.

[7] 趙懷宇， 陳棣華， 張立人. 茶尺蠖核型多角體病毒的血清學(xué)研究[J]. 病毒學(xué)雜志， 1986（3）： 52-59.

[8] 陳棣華， 孫繼山， 張益民. 茶尺蠖核型多角體病毒對(duì)三種有益昆蟲的安全性試驗(yàn)[J]. 中國茶葉， 1986， 8（4）： 38-39.

[9] 葉恭銀， 胡萃. 適用于高溫季節(jié)的茶尺蠖核型多角體病毒制劑的篩選[J]. 植物保護(hù)學(xué)報(bào)， 1991（3）： 215-220.

[10] 唐美君. 茶尺蠖病毒制劑生產(chǎn)與應(yīng)用技術(shù)的研究及推廣[D]. 杭州： 浙江大學(xué)， 2008.

[11] 洪北邊， 殷坤山. 茶尺蠖核型多角體病毒制劑的配制及室內(nèi)和田間防治試驗(yàn)[J]. 中國茶葉， 1988， 10（1）： 13-15.

[12] 徐健， 肖強(qiáng)， 劉琴， 等. 茶尺蠖病毒Bt生物農(nóng)藥尺蠖清的研制與應(yīng)用[J]. 江蘇農(nóng)業(yè)科學(xué)， 2005（6）： 56-58.

[13] 殷坤山， 肖強(qiáng)， 唐美君， 等. 溫度、光、pH值對(duì)茶尺蠖病毒活性的影響[J]. 茶葉， 2004（2）： 85-87.