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超高效液相色譜法在食品四環(huán)素類藥物殘留檢測(cè)中的應(yīng)用

2021-10-03 21:26李翠萍
食品安全導(dǎo)刊·中旬刊 2021年9期
關(guān)鍵詞:殘留應(yīng)用

李翠萍

摘 要:四環(huán)素類藥物殘留會(huì)危害人體健康,因此需要一種高效靈敏、快速準(zhǔn)確的檢測(cè)技術(shù)對(duì)其含量進(jìn)行嚴(yán)控。超高效液相色譜技術(shù)擁有靈敏度較高、溶劑使用量較少、分析速度較快、分離效率高等優(yōu)點(diǎn),在四環(huán)素類藥物殘留檢測(cè)中的應(yīng)用越來越廣泛。本文簡(jiǎn)單介紹了四環(huán)素類藥物殘留和超高效液相色譜技術(shù),簡(jiǎn)析了超高效液相色譜法在四環(huán)素類藥物殘留檢測(cè)中的應(yīng)用,以期為檢測(cè)四環(huán)素類藥物殘留提供一些參考。

關(guān)鍵詞:超高效液相色譜法;四環(huán)素類藥物;殘留;應(yīng)用

隨著社會(huì)的快速發(fā)展,人們生活水平逐漸提高,食品安全問題越來越受到重視。一些養(yǎng)殖戶受利益驅(qū)使,非法使用四環(huán)素類獸藥,導(dǎo)致四環(huán)素類獸藥殘留問題日益嚴(yán)重,四環(huán)素類獸藥殘留會(huì)嚴(yán)重傷害人們的健康。

1 四環(huán)素類藥物及四環(huán)素類藥物殘留概述

四環(huán)素類抗生素作為一種抑菌性廣譜抗生素,被廣泛用于防治革蘭氏陽性菌、革蘭氏陰性菌、立克次氏體、支原體和衣原體等所致的疾病,其不良反應(yīng)主要有消化道反應(yīng)、肝損害、腎損害、影響骨骼及牙齒的發(fā)育、局部刺激、過敏反應(yīng)、腸道菌群失調(diào)及與金屬離子形成絡(luò)合物等。

隨著人們生活水平逐漸提高,對(duì)動(dòng)物源食品的質(zhì)量要求也隨之提高。近年來,動(dòng)物源食品四環(huán)素類抗生素殘留問題逐漸成為人們關(guān)注的焦點(diǎn)。有研究表明四環(huán)素類抗生素可防治動(dòng)物疾病,提高生產(chǎn)效率,改善畜產(chǎn)品的質(zhì)量。然而,由于一些養(yǎng)殖人員缺乏科學(xué)知識(shí),一味追求經(jīng)濟(jì)利益,導(dǎo)致畜牧業(yè)中四環(huán)素類抗生素濫用現(xiàn)象普遍存在。濫用四環(huán)素類抗生素造成有害物質(zhì)在動(dòng)物源食品中產(chǎn)生殘留,對(duì)人體健康造成危害,損害生態(tài)環(huán)境,影響畜牧業(yè)的發(fā)展。目前,檢測(cè)四環(huán)素類抗生素殘留的方法有理化檢測(cè)法、免疫檢測(cè)法和微生物法等[1]。理化檢測(cè)法主要有超高效液相色譜法、氣相色譜法、高效液相色譜法、氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法、超高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法、高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法和高效毛細(xì)管電泳法等[2-5]。由于超高效液相色譜法具有高分離度、高分析速度、高靈敏度、易與質(zhì)譜串聯(lián)和方法轉(zhuǎn)換簡(jiǎn)便等優(yōu)勢(shì),廣泛應(yīng)用于四環(huán)素類藥物殘留的分析檢測(cè)。

2 超高效液相色譜法概述

超高效液相色譜是一種基于小顆粒填料的液相色譜技術(shù),其原理與高效液相色譜法大致相同,具有以下特點(diǎn)。①高性能、小顆粒微粒固定相。常見高效液相色譜的色譜柱如十八烷基硅膠鍵合柱的粒徑為5 μm,而超高效液相色譜的色譜柱粒徑可達(dá)3.5 μm,甚至1.7 μm,更加有利于物質(zhì)的分離。②超高壓輸液泵。由于超高效液相色譜的色譜柱粒徑減小,使壓力成倍增大。因此,超高效液相色譜的輸液泵也相應(yīng)改成超高壓輸液泵。③檢測(cè)器靈敏度高,并且采樣速度很快。④使用低交叉污染、低擴(kuò)散自動(dòng)進(jìn)樣器,并且配備了壓力輔助進(jìn)樣技術(shù)和針內(nèi)進(jìn)樣探頭。⑤優(yōu)化設(shè)計(jì)儀器整體系統(tǒng)。色譜工作站安裝有多種平臺(tái)軟件,使超高效液相色譜與高效液相色譜分析方法可自動(dòng)轉(zhuǎn)換。

與傳統(tǒng)的高效液相色譜法相比,超高效液相色譜法的速度是高效液相色譜法的9倍,靈敏度是高效液相色譜法的3倍,分離度是高效液相色譜法的1.7倍,減少了溶劑使用量,縮短了分析時(shí)間,降低了分析成本。目前,超高效液相色譜技術(shù)主要應(yīng)用于藥物分析、食品分析、生化分析、環(huán)境分析等領(lǐng)域,尤其是中藥研究領(lǐng)域,超高效液相色譜技術(shù)可以解決中藥組分復(fù)雜、分離困難等問題。

3 超高效液相色譜法在食品四環(huán)素類藥物殘留中的應(yīng)用

陳艷等[6]利用超高效液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法對(duì)鹵肉制品中的四環(huán)素、金霉素、強(qiáng)力霉素、土霉素等四環(huán)素類藥物殘留進(jìn)行檢測(cè)并建立了相關(guān)方法。結(jié)果表明,在濃度0.1~

10 μg/mL,四環(huán)素、金霉素、強(qiáng)力霉素、土霉均呈現(xiàn)良好的線性關(guān)系,線性相關(guān)系數(shù)大于0.99。在50 μg/kg、100 μg/kg、200 μg/kg3個(gè)濃度的添加水平下,四環(huán)素、金霉素、強(qiáng)力霉素、土霉素的平均回收率在76.7%~103.7%,相對(duì)平均偏差為3.2%~4.6%。采用此方法測(cè)定了樂山地區(qū)220份市售鹵肉制品中的四環(huán)素類藥物殘留量,并對(duì)測(cè)定結(jié)果進(jìn)行了質(zhì)量安全性分析,結(jié)果顯示四環(huán)素類藥物的含量均在國家標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定范圍內(nèi)。說明該方法選擇性強(qiáng)、重現(xiàn)性好且靈敏度高,可用于測(cè)定市售鹵肉制品中的四環(huán)素類藥物殘留。皮璟漁等[7]采用超高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法對(duì)鴨蛋中的四環(huán)素、二甲胺四環(huán)素、鹽酸金霉素、去甲基金霉素、土霉素、甲烯土霉素和多西環(huán)素等7種四環(huán)素類藥物殘留進(jìn)行檢測(cè)分析。結(jié)果表明,在10~100 ng/mL濃度范圍內(nèi),7種四環(huán)素類藥物殘留具有良好的線性關(guān)系,檢出限為0.2~1 μg/kg,平均加樣回收率為84.3%~94.1%,精密度為0.9%~2.7%,相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差為1.7%~7.7%。表明該方法可用于檢測(cè)分析鴨蛋中的四環(huán)素類藥物殘留。劉柏林等[8]借用超高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法對(duì)禽類食品中的4種四環(huán)素與11種喹諾酮獸藥殘留進(jìn)行了測(cè)定分析。結(jié)果表明,在0.1~50.0 μg/L濃度范圍內(nèi),15種獸藥殘留線性關(guān)系良好,線性相關(guān)系數(shù)均大于0.992 7,相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差在0.51%~15.3%,平均回收率在60.6%~117.9%,檢出限達(dá)到0.05~0.20 μg/kg。表明該方法適合于檢測(cè)分析禽類食品中多種四環(huán)素與喹諾酮獸藥殘留。采用此方法對(duì)安徽省市售的2016—2018年雞蛋和雞肉樣品中四環(huán)素與喹諾酮?dú)埩暨M(jìn)行了檢測(cè),并對(duì)其食品安全指數(shù)進(jìn)行了評(píng)估,發(fā)現(xiàn)雞蛋和雞肉中四環(huán)素類和喹諾酮類國際食品標(biāo)準(zhǔn)均值都小于1,說明其膳食風(fēng)險(xiǎn)較低。方靈等[9]采用超高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法測(cè)定分析了牛奶中四環(huán)素類、大環(huán)內(nèi)酯類、磺胺類、氯霉素類和喹諾酮類5類38種抗生素藥物殘留。結(jié)果表明,在各自的線性濃度范圍內(nèi),38種抗生素具有良好的線性關(guān)系,相關(guān)系數(shù)均大于0.99,在3個(gè)(1.0 μg/kg、5.0 μg/kg、10.0 μg/kg)加標(biāo)水平下,平均回收率在70.7%~94.9%,定量下限達(dá)到0.10~1.0 μg/kg,相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差在4.0%~9.4%。說明該方法重現(xiàn)性好、靈敏度高且操作簡(jiǎn)單,能滿足牛奶中多種抗生素藥物殘留的檢測(cè)需求。石春紅[10]等采用超高效液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法對(duì)動(dòng)物源性食品中四環(huán)素、土霉素等4種四環(huán)素類藥物殘留量進(jìn)行檢測(cè)。結(jié)果表明,在5~200 μg/L濃度范圍內(nèi),4種四環(huán)素類藥物均呈現(xiàn)良好的線性關(guān)系,相關(guān)系數(shù)均大于0.995,平均回收率在92.7%~107.2%,相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差小于8%,檢出限達(dá)2.5 μg/kg。說明本方法靈敏度高、重現(xiàn)性好、簡(jiǎn)單快速,適合于快速測(cè)定動(dòng)物源性食品中四環(huán)素類藥物殘留。

4 結(jié)語

超高效液相色譜法具有分離度高、分析速度快、方法轉(zhuǎn)換簡(jiǎn)便、靈敏度高和易與質(zhì)譜串聯(lián)等優(yōu)勢(shì),促進(jìn)了食品獸藥殘留研究領(lǐng)域的發(fā)展。由于食品種類繁多,成分復(fù)雜,所以分離比較困難,而這些問題可以通過超高效液相色譜法得到解決。在同樣的檢測(cè)條件下,超高效液相色譜儀的分辨率更高,能檢測(cè)到更多色譜峰,并且超高效液相色譜儀能分離的色譜峰比高效液相色譜儀多出一倍,但是檢測(cè)過程中由于儀器內(nèi)部的壓力過大,也導(dǎo)致其產(chǎn)生一些問題,如儀器老化速度加快,泵的使用壽命相對(duì)降低等。隨著科學(xué)技術(shù)的不斷發(fā)展,這些問題會(huì)逐漸得到解決,未來超高效液相色譜技術(shù)會(huì)越來越普及,得到質(zhì)的飛躍和提升。

參考文獻(xiàn)

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