黃晉，吳汶芳，禚婭，孫金磊

（1.鶴壁市人民醫(yī)院檢驗(yàn)科，河南 鶴壁 458030；2.鄭州大學(xué)第一附屬醫(yī)院風(fēng)濕免疫科，河南 鄭州 450000）

系統(tǒng)性紅斑狼瘡（Systemic lupus erythematosus，SLE）是一種多發(fā)于育齡女性，多臟器、多系統(tǒng)受累的典型全身性自身免疫性疾病,其特征是產(chǎn)生多種自身抗體，導(dǎo)致多種主要器官（如腎臟、皮膚）的功能障礙[1]。SLE 普遍存在于亞洲人中，亞太地區(qū)的總體粗發(fā)病率（每年每10 萬(wàn)人）在0.9～3.1之間，流行率在4.3～45.3（每10 萬(wàn)人）之間[2]。SLE不能治愈，但可以通過(guò)藥物控制，盡管過(guò)去幾十年SLE的診斷和治療取得了進(jìn)步，生存率有所提高，但該病的相對(duì)死亡人口仍然很高[3]。感染(65.8%)是SLE 最常見(jiàn)的死亡原因，其次是狼瘡腎炎(48.6%)，血液學(xué)異常(18.1%)，神經(jīng)精神性狼瘡(15.8%)和間質(zhì)性肺炎(13.1%)[4]。迄今為止，SLE的發(fā)病機(jī)制尚未完全明確，但是，有研究表明，SLE患者病情活動(dòng)與血清學(xué)標(biāo)志物水平（如dsDNA、C-反應(yīng)蛋白、紅細(xì)胞、補(bǔ)體等）密切相關(guān)[5]。一些干預(yù)和流行病學(xué)研究已經(jīng)闡明,維生素D 缺乏也會(huì)增加SLE的風(fēng)險(xiǎn)[6]。用于評(píng)價(jià)維生素D水平的指標(biāo)有多種，例如，25-羥基維生素D（25-hydroxyvitamin D，25-OHD）、25-羥基維生素D3、1,25-二羥基維生素D 等，25-OH-D 是維生素D的主要循環(huán)形式，被認(rèn)為是總維生素D水平的最佳指標(biāo)，在多種疾病的發(fā)生和發(fā)展過(guò)程中起到重要的作用[5]。此外，SLE 中存在大量抗體，其中約25%具有抗中性粒細(xì)胞胞漿抗體（antineutrophil cytoplasmic antibody，ANCA）特異性[7]。ANCA 是一種機(jī)體針對(duì)單核細(xì)胞和中性粒細(xì)胞MPO 或PR3 抗原的自身免疫性抗體，是系統(tǒng)性血管炎的特征性抗體[7]。本研究中，我們分析了SLE患者血清中25-OH-D、ANCA的水平，并評(píng)估了其與SLE風(fēng)險(xiǎn)和疾病嚴(yán)重程度的關(guān)系。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取我院2017年1 月-2019年1月接收的100例符合入組及排除標(biāo)準(zhǔn)的SLE患者作為SLE 組,并按照SLE 疾病活動(dòng)指數(shù)（systemic lupus erythematosus disease activity index，SLEDAI）標(biāo)準(zhǔn)對(duì)患者是否處于活動(dòng)期進(jìn)行評(píng)估。SLE患者組中活動(dòng)期62例、非活動(dòng)期38例，女48例、男52例，平均年齡為48.56±8.93 歲，平均體質(zhì)量指數(shù)(body mass index，BMI)為23.95±0.98kg/m2，平均病程為5.67±0.85年。另外，選取100例健康對(duì)照組患者作為研究對(duì)象，其中女50例、男50例，平均年齡為49.01±9.13 歲，平均BMI 為24.35±1.03kg/m2。兩組資料比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。入組標(biāo)準(zhǔn)：(1) SLE患者均符合1982年美國(guó)風(fēng)濕病協(xié)會(huì)修訂的SLE 診斷標(biāo)準(zhǔn)[8]；(2) 入組前半年未使用維生素D 類(lèi)藥物；(3) 入組前半年未使用肼屈嗪、甲硫噠嗪、丙硫氧嘧啶藥物（此類(lèi)藥物可引起ANCN陽(yáng)性）；(4) 入組前1 個(gè)月無(wú)感染疾病史，未合并其他自身免疫性疾?。?5) 研究對(duì)象對(duì)本研究均知情并簽署知情同意書(shū)。排除標(biāo)準(zhǔn)：(1) 合并精神類(lèi)疾病疾病;(2) 合并其他自身免疫性疾??；(3) 嚴(yán)重心、肝、腎功能不全；(4) 處于妊娠或哺乳期女性；(5) 營(yíng)養(yǎng)不良患者；(6) 臨床資料不全；(7) 主動(dòng)申請(qǐng)退出本研究。

1.2 儀器與試劑 羅氏全自動(dòng)電化學(xué)發(fā)光免疫分析儀（型號(hào)：Cobas e601，購(gòu)于羅氏診斷產(chǎn)品上海有限公司）；熒光顯微鏡（型號(hào)：EUROStar II，購(gòu)于歐蒙醫(yī)學(xué)診斷中國(guó)有限公司）；25-OH-D 試劑盒購(gòu)于羅氏診斷產(chǎn)品上海有限公司；ANCA 試劑盒購(gòu)于歐蒙醫(yī)學(xué)診斷有限公司。

1.3 方法

1.3.1 血清中25-OH-D的檢測(cè) 采集5ml受試者的空腹靜脈血，3,000 rpm/min 離心10 min 收集血清，并在2h 內(nèi)按照25-OH-D 試劑盒說(shuō)明書(shū)，采用羅氏全自動(dòng)電化學(xué)發(fā)光免疫分析儀檢測(cè)受試者血清中的25-OH-D。

1.3.2 血清中ANCA的檢測(cè) 采集5ml受試者的空腹靜脈血，3000rpm/min 離心10min 收集血清，并采用間接免疫熒光法（indirect immunofluorescence technique，IIF）檢測(cè)受試者血清中的ANCA，ANCA試劑盒購(gòu)于歐蒙醫(yī)學(xué)診斷有限公司。

1.3.3 SLE 活動(dòng)性判斷 SLE 活動(dòng)性判斷按照SLEDAI 標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行評(píng)估，SLEDAI 是根據(jù)患者前10天內(nèi)的有關(guān)癥狀進(jìn)行計(jì)分，其中⑴記為8 分的有：抽搐、精神病、器質(zhì)性腦病綜合征、視覺(jué)障礙、腦神經(jīng)病變、狼瘡性頭痛、腦血管意外和血管炎者；⑵記為4 分的有：關(guān)節(jié)炎、肌炎、管型尿、血尿、蛋白尿和膿尿者；⑶記為2 分的有：皮疹、脫發(fā)、黏膜潰瘍、胸膜炎、心包炎、低補(bǔ)體和血清抗ds-DNA 升高者；⑷記為1 分的有：發(fā)熱、血小板減少和白細(xì)胞計(jì)數(shù)下降者。理論上SLEDAI 總積分為105 分，一般認(rèn)為積分為0～4 分者基本無(wú)活動(dòng)，5～9 分輕度活動(dòng)，10～14 分為中度活動(dòng)，≥15 分重度活動(dòng)[9]。本研究中把SLEDAI 評(píng)分>9 分判定為活動(dòng)期，SLEDAI 評(píng)分≤9 則為非活動(dòng)期[10]。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 采用SPSS 24.0 軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理分析。采用表示符合正態(tài)分布的計(jì)量資料，采用Forward Logistic 回歸分析各指標(biāo)與SLE活動(dòng)度的關(guān)系，計(jì)量資料組間比較采用t 檢驗(yàn)，計(jì)數(shù)資料組間比較采用卡方（χ2）檢驗(yàn)，P<0.05 為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 SLE 組及對(duì)照組血中各指標(biāo)檢測(cè)結(jié)果 研究結(jié)果顯示，SLE 組患者血清中25-OH-D 是15.85±2.91ng/ml,而對(duì)照組血清中25-OH-D 是23.43±3.01ng/ml，SLE 組患者血清中25-OH-D水平顯著低于對(duì)照組,且差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)；而SLE 組患者血清中ANCA 是26.98±1.96RU/ml，對(duì)照組血清中ANCA 是10.24+1.27RU/ml，SLE 組患者血清中ANCA水平顯著高于對(duì)照組，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)，見(jiàn)表1。

表1 SLE 組及對(duì)照組血清中25-OH-D和ANCA的檢測(cè)結(jié)果()

表1 SLE 組及對(duì)照組血清中25-OH-D和ANCA的檢測(cè)結(jié)果()

2.2 活動(dòng)期與非活動(dòng)期患者血清中各指標(biāo)檢測(cè)結(jié)果 研究結(jié)果顯示，SLE 活動(dòng)期患者血清中25-OH-D 是13.83±2.54 ng/ml，而非活動(dòng)期患者血清中25-OH-D 是19.86±3.93ng/ml，SLE 活動(dòng)期患者血清中25-OH-D水平顯著低于非活動(dòng)期，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)；而SLE 活動(dòng)期患者血清中ANCA 是30.24±2.59 RU/ml，非活動(dòng)期患者血清中ANCA 是20.62+2.41 RU/ml，SLE 活動(dòng)期患者血清中ANCA水平顯著高于SLE 非活動(dòng)期，且差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)，見(jiàn)表2。

表2 活動(dòng)期與非活動(dòng)期患者血清中各指標(biāo)檢測(cè)結(jié)果（）

表2 活動(dòng)期與非活動(dòng)期患者血清中各指標(biāo)檢測(cè)結(jié)果（）

2.3 SLE 疾病活動(dòng)程度的單因素分析 研究結(jié)果顯示，SLE 活動(dòng)期患者的性別、年齡、BMI及病程上與非活動(dòng)期患者差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)；而在SLEDAI 評(píng)分上有顯著差異，且差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)，見(jiàn)表3。

表3 SLE 疾病活動(dòng)的單因素分析

2.4 SLE 疾病活動(dòng)程度的多因素分析 以是否為活動(dòng)期為因變量，與SLE 疾病活動(dòng)程度有關(guān)的25-OH-D、ANCA及SLEDAI 評(píng)分作為自變量，采用Forward Logistic 回歸分析，結(jié)果顯示，25-OH-D水平與SLE 活動(dòng)性呈負(fù)相關(guān)，ANCA水平與SLE 活動(dòng)性呈正相關(guān)，見(jiàn)表4。

表4 SLE 疾病活動(dòng)的多因素分析

3 討論

SLE 是臨床常見(jiàn)的慢性自身免疫性疾病，其發(fā)病機(jī)制尚未完全揭示,一些遺傳，免疫，內(nèi)分泌和環(huán)境因素均與疾病機(jī)制有關(guān)[11]。全球范圍內(nèi),SLE的患病率為每10 萬(wàn)人12 至50例，且因地區(qū)和種族而異[12]。據(jù)報(bào)道，在發(fā)達(dá)國(guó)家，SLE的發(fā)生率增加，美國(guó)幾個(gè)地區(qū)的數(shù)據(jù)表明，在20 世紀(jì)下半葉，SLE的發(fā)病率至少增加了三倍[13]。同時(shí)，SLE 是一種具有多種表型的多系統(tǒng)疾病，臨床特征可能從僅粘膜皮膚受累的非常輕度的疾病到多器官受累的非常嚴(yán)重的危及生命的疾病[11]。SLE 是無(wú)法治愈的，只能通過(guò)藥物等其他手段維持SLE患者的正常生活，而進(jìn)行疾病的活動(dòng)度評(píng)估是確定治療方案的前提。因此，如何有效評(píng)估疾病活動(dòng)程度對(duì)SLE患者具有重要的意義。

Reynolds JA 等[14]人報(bào)道，維生素D 缺乏會(huì)導(dǎo)致SLE的疾病活動(dòng)和發(fā)病率，維生素D 抑制了SLE患者外周血單個(gè)核細(xì)胞自身抗體的產(chǎn)生，因此，維生素D 缺乏癥可能會(huì)增強(qiáng)SLE 中的炎癥反應(yīng)，從而增強(qiáng)疾病活動(dòng)性和血管僵硬。25-OH-D 是維生素D的主要活性形式，Guan 等[15]人報(bào)道，與健康對(duì)照相比，SLE患者的25-OH-D水平顯著降低。Eloi M 等[16]人研究表明，與健康對(duì)照組相比，SLE患者的25-OH-D 血清濃度顯著降低，25-OH-D 血清濃度在疾病活動(dòng)性比例上也有顯著差異。Emerah AA 等[17]人也報(bào)道了較高的SLE 活性評(píng)分和較低的血清25-OH-D 濃度相關(guān)。我們的結(jié)果顯示，SLE 組患者血清中25-OH-D水平顯著低于對(duì)照組，SLE 活動(dòng)期患者血清中25-OH-D水平顯著低于非活動(dòng)期，與以往的研究結(jié)論一致。另外盧等[18]人和李等[5]人的研究表明，SLE 組患者血清中25-OH-D水平顯著低于對(duì)照組，SLE 活動(dòng)期患者血清中25-OH-D水平顯著低于非活動(dòng)期，25-OH-D水平與SLE 疾病活動(dòng)性呈負(fù)相關(guān)。另外，Dutta C 等[19]人研究表明，維生素D 缺乏的SLE患者更可能具有高的疾病活動(dòng)性，且SLEDAI 得分與25-OH-D 值呈負(fù)相關(guān)。我們的研究也顯示，25-OH-D水平與SLE 活動(dòng)性呈負(fù)相關(guān)，說(shuō)明25-OHD水平升高是SLE 活動(dòng)期的獨(dú)立性保護(hù)因素。

ANCA 是一種重要的自身抗體，多存在于系統(tǒng)性血管炎患者，部分SLE患者血清中也存在A(yíng)NCA，在腎炎和中樞神經(jīng)系統(tǒng)受累的SLE患者中最常見(jiàn)，且SLE的ANCA 陽(yáng)性與疾病活動(dòng)性和嚴(yán)重程度相關(guān)[7]。Pradhan 等[20]人報(bào)道了ANCA與SLE疾病活動(dòng)呈正相關(guān)，并可能被用作區(qū)分狼瘡性腎炎和無(wú)腎炎的SLE的標(biāo)準(zhǔn)。SU 等[21]人和李等[5]人的研究也表明，ANCA與SLE 疾病活動(dòng)呈正相關(guān)。我們的結(jié)果顯示，SLE 組患者血清中ANCA水平顯著高于對(duì)照組，SLE 活動(dòng)期患者血清中ANCA水平顯著高于SLE 非活動(dòng)期，ANCA水平與SLE 活動(dòng)性的正相關(guān)，表明ANCA水平升高是SLE 活動(dòng)期的獨(dú)立性危險(xiǎn)因素，與以往的研究一致。但也有研究表明，ANCA的水平與SLE 疾病活動(dòng)不存在關(guān)聯(lián)。Nishiya K 等[22]人報(bào)道，SLE患者中的ANCA與臨床特征無(wú)關(guān)。Fauzi 等[23]人也未能發(fā)現(xiàn)ANCA陽(yáng)性與SLE 疾病活動(dòng)之間存在顯著關(guān)聯(lián)?；颊叩倪x擇標(biāo)準(zhǔn)可能是造成結(jié)果差異的重要因素。