孫昱，王亞丹，文海若*，汪祺*，馬雙成

1.國(guó)家藥品監(jiān)督管理局 藥品審評(píng)中心，北京 100022；2.中國(guó)食品藥品檢定研究院，北京 100050

中藥制劑普遍存在因藥材中化學(xué)成分含量的固有差異，導(dǎo)致制劑質(zhì)量產(chǎn)生波動(dòng)的情況。如何提高中藥制劑質(zhì)量的批間一致性，如何建立中藥制劑臨床相關(guān)的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)（例如功效成分、毒性成分的研究和控制），成為進(jìn)一步研究和加強(qiáng)中藥制劑質(zhì)量控制的關(guān)鍵問(wèn)題。為了更好地保證藥品的有效、安全、質(zhì)量可控，建議重點(diǎn)關(guān)注活性較強(qiáng)、安全性風(fēng)險(xiǎn)較高的中藥制劑品種。

本文對(duì)活性較強(qiáng)、安全性風(fēng)險(xiǎn)較高的雷公藤多苷片的質(zhì)量控制情況進(jìn)行研究。雷公藤俗稱斷腸草、山砒霜，有大毒。其根皮毒性遠(yuǎn)大于去皮的根心，傳統(tǒng)以去皮的雷公藤根心入藥。雷公藤多苷片為雷公藤去皮根部提取物經(jīng)色譜凈化后得到的粉末制成的中藥片劑。該制劑具有抗炎、抗腫瘤、免疫調(diào)節(jié)等作用[1]，臨床上用于風(fēng)濕熱瘀、毒邪阻滯所致的類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、腎病綜合癥、白塞氏三聯(lián)癥、麻風(fēng)反應(yīng)、自身免疫性肝炎等。臨床應(yīng)用時(shí)，其治療指數(shù)低、不良反應(yīng)發(fā)生率高且嚴(yán)重。雷公藤中成藥制劑可涉及多系統(tǒng)損害，主要發(fā)生在消化系統(tǒng)、血液系統(tǒng)、泌尿系統(tǒng)、心血管系統(tǒng)、生殖/內(nèi)分泌系統(tǒng)、神經(jīng)系統(tǒng)等[2-4]。雷公藤多苷片致不良反應(yīng)主要有白細(xì)胞減少、胃腸道反應(yīng)、月經(jīng)不調(diào)和肝功能異常[5]。

1 雷公藤多苷片相關(guān)的藥材及制劑質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)

雷公藤多苷片目前收錄于《國(guó)家基本藥物目錄》2018 年版[6]，全國(guó)有12 家生產(chǎn)企業(yè)及12 個(gè)批準(zhǔn)文號(hào)，規(guī)格均為10 mg，即每片含雷公藤多苷10 mg。10 個(gè)廠家產(chǎn)品正常生產(chǎn)[7]，現(xiàn)行標(biāo)準(zhǔn)為國(guó)家藥品標(biāo)準(zhǔn)（WS3-B-3350-98-2011）；2 個(gè)廠家停產(chǎn)，現(xiàn)行標(biāo)準(zhǔn)為國(guó)家藥品標(biāo)準(zhǔn)（WS3-B-3350-98）。

1.1 雷公藤藥材標(biāo)準(zhǔn)

通過(guò)對(duì)地方藥材標(biāo)準(zhǔn)[8]中收錄的雷公藤藥材標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行對(duì)比可知，大部分藥材標(biāo)準(zhǔn)未包含含量測(cè)定項(xiàng)，僅湖北省、福建省中藥材標(biāo)準(zhǔn)中分別制定了雷公藤甲素、雷公藤內(nèi)酯醇的含量下限。各地方藥材標(biāo)準(zhǔn)中，雷公藤的日服用量范圍較廣，為1～25 g，大部分雷公藤的日服用量＜9 g，見(jiàn)表1。

表1 雷公藤藥材標(biāo)準(zhǔn)

1.2 雷公藤多苷片的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)

有文獻(xiàn)報(bào)道，二維液相色譜結(jié)合四極桿飛行時(shí)間質(zhì)譜（LC×LC-QTOF-MS）用于雷公藤多苷片的化學(xué)成分分析，可用于表征、鑒定和半定量雷公藤多苷片中的化學(xué)成分（大部分為二萜、三萜和生物堿）[9]。雷公藤多苷片主要的活性成分如雷公藤甲素[10-11]、雷公藤紅素[12-13]既是有效成分也是毒性成分；而雷公藤內(nèi)酯甲文獻(xiàn)報(bào)道的臨床相關(guān)的活性或毒性信息較少。另有文獻(xiàn)提議，將雷公藤次堿作為雷公藤多苷片的生物活性和毒性成分[14]。

根據(jù)以上臨床相關(guān)的活性或毒性研究，建議進(jìn)一步進(jìn)行藥效毒理等實(shí)驗(yàn)，在此基礎(chǔ)上增加含量測(cè)定指標(biāo)，如雷公藤甲素、雷公藤紅素、雷公藤次堿，并制定含量范圍（上、下限）。如已將雷公藤甲素、雷公藤紅素、雷公藤次堿列入含量測(cè)定項(xiàng)，并提供研究資料證明雷公藤內(nèi)酯甲的臨床相關(guān)的活性和毒性較弱，則可考慮無(wú)需將雷公藤內(nèi)酯甲列入標(biāo)準(zhǔn)。雷公藤多苷片的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)（WS3-B-3350-98-2011）見(jiàn)表2。

表2 雷公藤多苷片的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)

雷公藤多苷提取物沒(méi)有批準(zhǔn)文號(hào)，雷公藤多苷片的現(xiàn)行標(biāo)準(zhǔn)中未附處方藥味中提取物的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，僅在20世紀(jì)90年代，浙江、上海等地方藥品標(biāo)準(zhǔn)中表述為“雷公藤多甙為雷公藤去皮根部提取物經(jīng)層析凈化后得到的粉末”。經(jīng)調(diào)研發(fā)現(xiàn)，雷公藤多苷提取物由雷公藤多苷片生產(chǎn)企業(yè)自行制備，生產(chǎn)工藝基本分為5 步：1）雷公藤根部去皮；2）乙醇提??；3）三氯甲烷或三氯甲烷-乙醇萃??；4）硅膠柱色譜分離；5）減壓干燥。但不同廠家在乙醇體積分?jǐn)?shù)、提取溫度、萃取溶劑、柱色譜餾分收集溶劑比例等技術(shù)參數(shù)方面存在差異[15]。

1.3 完善雷公藤多苷片質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的建議

1）建立臨床相關(guān)的功效及毒性成分（如雷公藤甲素、雷公藤紅素、雷公藤次堿）的含量范圍（上、下限）；2）進(jìn)行指紋圖譜研究，如中性成分（二萜、三萜及堿性）或酸性成分的指紋圖譜研究；3）生產(chǎn)工藝中如使用有機(jī)溶劑，需建立相應(yīng)的溶劑限度；4）考慮建立生物活性（或毒性）測(cè)定方法，從一定程度上反映雷公藤多苷片的有效性和安全性；5）對(duì)于已列入標(biāo)準(zhǔn)中含量測(cè)定項(xiàng)的檢測(cè)指標(biāo)（如雷公藤內(nèi)酯甲），可考慮無(wú)需將該含量測(cè)定指標(biāo)列入標(biāo)準(zhǔn)的鑒別項(xiàng)；6）建議研究制定處方藥味雷公藤多苷的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，并附于制劑質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)之后。

2 不同廠家雷公藤多苷片的質(zhì)量控制對(duì)比

2.1 化學(xué)成分含量測(cè)定或指紋圖譜研究

對(duì)不同廠家雷公藤多苷片的化學(xué)成分含量或指紋圖譜研究顯示，不同生產(chǎn)企業(yè)的雷公藤多苷片的質(zhì)量存在一定差異[16-18]。雷公藤多苷片制劑不同企業(yè)及相同企業(yè)不同批次間樣品崩解時(shí)限差異大，雷公藤甲素及雷公藤內(nèi)酯甲含量相差懸殊。雷公藤內(nèi)酯甲含量測(cè)定結(jié)果表明，該成分含量為11～62 μg/片，提示該產(chǎn)品整體質(zhì)量不穩(wěn)定[19]。

2.2 體內(nèi)藥效或毒性研究

對(duì)不同廠家雷公藤多苷片的體內(nèi)抗炎藥效和體內(nèi)肝腎毒性研究顯示，不同廠家雷公藤多苷片在抗炎藥效及肝腎毒性方面均存在較大差異[20]。不同廠家雷公藤多苷片在致小鼠急性肝損傷方面也存在差異[21]。

2.3 快速檢測(cè)研究

對(duì)不同廠家雷公藤多苷片的紫外光譜分析[22]、紅外光譜分析[23]顯示，同一廠家不同批號(hào)藥品質(zhì)量差別較小，不同廠家藥品的質(zhì)量差別較大。應(yīng)用紫外吸收光譜法或紅外吸收光譜法進(jìn)行檢測(cè)快速、無(wú)損，可考慮將其用于不同廠家雷公藤多苷片的快速鑒別分析。

2.4 提高雷公藤多苷片批間一致性的建議

建立臨床相關(guān)的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，即對(duì)臨床相關(guān)的功效/毒性化學(xué)成分進(jìn)行質(zhì)量研究和控制。在此基礎(chǔ)上，根據(jù)已選擇的含量測(cè)定指標(biāo)，可考慮依據(jù)《中藥均一化研究技術(shù)指導(dǎo)原則（試行）》[24]相關(guān)建議，對(duì)【處方】項(xiàng)下的“雷公藤多苷10 mg”進(jìn)行均一化處理。

3 結(jié)語(yǔ)

本文通過(guò)對(duì)雷公藤多苷片的質(zhì)量研究情況進(jìn)行分析可知，對(duì)于建立中藥制劑臨床相關(guān)的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，有以下提示。

3.1 研究對(duì)象的確定

1）可選擇亟待關(guān)注的毒性藥材相關(guān)制劑，特別是可能引起腎損害的藥材（如雷公藤、馬兜鈴、天仙藤、昆明山海棠、草烏、附子、尋骨風(fēng)）[25]，以及可能引起肝損害的藥材（如雷公藤、菊三七）[26]相關(guān)制劑。2）還可依據(jù)藥品上市后的不良反應(yīng)情況，特別關(guān)注高風(fēng)險(xiǎn)制劑品種（如中藥注射劑、中藥吸入制劑、中藥眼用制劑等），確定有待重點(diǎn)研究的品種。

3.2 確定臨床相關(guān)的功效/毒性成分并制定含量范圍

根據(jù)上市后不同廠家同品種的質(zhì)量對(duì)比情況，橫向分析該品種藥品中可能的功效成分和毒性成分，并結(jié)合動(dòng)物體內(nèi)活性研究或毒理實(shí)驗(yàn)，確定臨床相關(guān)的功效/毒性成分。建議對(duì)于活性較高且安全性較好、或活性較高且毒性較大的成分，制定含量范圍（上、下限）；對(duì)于活性較弱但毒性較大的成分，制定含量上限。

3.3 建立生物活性（或毒性）測(cè)定方法

對(duì)于存在較嚴(yán)重不良反應(yīng)，但暫時(shí)難以確定臨床相關(guān)化學(xué)成分的品種，可考慮對(duì)品種進(jìn)行活性和毒性的體外實(shí)驗(yàn)研究，如建立生物活性（或毒性）測(cè)定方法，以建立能體現(xiàn)藥品有效性和安全性的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。

3.4 中藥制劑臨床相關(guān)的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究關(guān)注點(diǎn)

通過(guò)積累已上市中藥制劑臨床相關(guān)的質(zhì)量控制研究數(shù)據(jù)，為中藥制劑臨床相關(guān)的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究關(guān)注點(diǎn)提供參考。如制劑中同時(shí)存在活性和/或毒性較強(qiáng)的化學(xué)成分/大類成分，以及活性和毒性較弱的化學(xué)成分/大類成分時(shí)，可重點(diǎn)對(duì)活性和/或毒性較強(qiáng)的化學(xué)成分/大類成分建立含量范圍（上、下限），而活性和毒性較弱的化學(xué)成分/大類成分則可作為輔助的含量測(cè)定指標(biāo)，不一定需列入標(biāo)準(zhǔn)，可視情況列入。