譚偉思，王富海，王文芳，趙冠耀

（佛山市高明區(qū)人民醫(yī)院藥學(xué)部，廣東 佛山 528500）

1 資料與方法

1.1 一般資料

本次研究的對(duì)象是2018 年1 至2020 年1 月期間在佛山市高明區(qū)人民醫(yī)院接受手術(shù)治療的60 例胃癌患者和同期在該院進(jìn)行體檢的60 例健康人。將其中的60 例胃癌患者設(shè)為觀察組，將其中的60 例健康人設(shè)為對(duì)照組。觀察組患者的納入標(biāo)準(zhǔn)是：1）對(duì)本次研究的內(nèi)容知情，并簽署了自愿參加本次研究的《知情同意書》；2）未接受過放療、化療[2]。其排除標(biāo)準(zhǔn)是：1）合并有感染；2）具有其他類型的腫瘤疾病史；3）服用過糖皮質(zhì)激素和免疫抑制劑[3]；4）合并有心、腎、肝功能障礙；5）具有精神疾病史；6）處于妊娠期或哺乳期；7）拒絕參與本次研究。在觀察組患者中，有男性患者35 例，女性患者25 例；其中，年齡最小的37 歲，年齡最大的79 歲，平均年齡為（62.31±5.05）歲；腫瘤TNM 分期為Ⅰ～Ⅱ期、Ⅲ期的患者分別有35 例、25 例。在對(duì)照組健康人中，有男性38 例，女性22 例；其中，年齡最小的35 歲，年齡最大的82 歲，平均年齡為（62.29±5.12）歲。兩組研究對(duì)象的一般資料相比，P＞0.05，具有可比性。

1.2 檢測(cè)方法

在兩組研究對(duì)象入院后，均采集其空腹?fàn)顟B(tài)下的靜脈血5 mL。將采集到的靜脈血樣本分別放到2 個(gè)試管中，編號(hào)為A 管與B 管。將A 管放到離心機(jī)中離心處理15 min，離心機(jī)的轉(zhuǎn)速為3000 r/min。分離出血清后，采用酶聯(lián)免疫吸附法對(duì)血清中1,25-(OH)2-VitD3的水平進(jìn)行檢測(cè)。根據(jù)試劑盒的說明書進(jìn)行檢測(cè)操作。在B 管中取100 μL 的血液樣本，在此試管中添加由20μL 藻紅蛋白標(biāo)記的單克隆抗體及2 mL 的溶血?jiǎng)?，使紅細(xì)胞被破壞。利用磷酸鹽緩沖溶液對(duì)細(xì)胞進(jìn)行洗滌、固定，通過流式細(xì)胞技術(shù)對(duì)程序性細(xì)胞死亡受體1（PD-1）、CD4+、CD8+的水平進(jìn)行檢測(cè)[4]，并計(jì)算CD4+/CD8+。

1.3 觀察指標(biāo)

1）比較兩組研究對(duì)象外周血1,25-(OH)2-VitD3、PD-1、CD4+、CD8+的水平及CD4+/CD8+。2）分析觀察組患者外周血1,25-(OH)2-VitD3的水平與其外周血PD-1、CD4+、CD8+水 平 及CD4+/CD8+的 相 關(guān) 性。3）比 較 觀 察組患者中不同腫瘤分期的患者外周血1,25-(OH)2-VitD3、PD-1、CD4+、CD8+的水平及CD4+/CD8+。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用SPSS 20.0 統(tǒng)計(jì)軟件處理本次研究中的所有數(shù)據(jù)。計(jì)量資料用±s表示，用t檢驗(yàn)。計(jì)數(shù)資料用% 表示，用χ2檢驗(yàn)。P＜0.05 表示差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組研究對(duì)象外周血1,25-(OH)2-VitD3、PD-1、CD4+、CD8+水平及CD4+/CD8+的比較

觀察組患者外周血1,25-(OH)2-VitD3、PD-1、CD4+的水平均低于對(duì)照組健康人，P＜0.05 ；其外周血CD8+的水平高于對(duì)照組健康人，P＜0.05。詳見表1。

表1 兩組研究對(duì)象外周血1,25-(OH)2-VitD3、PD-1、CD4+、CD8+水平及CD4+/CD8+的比較（± s）

表1 兩組研究對(duì)象外周血1,25-(OH)2-VitD3、PD-1、CD4+、CD8+水平及CD4+/CD8+的比較（± s）

組別 1,25-(OH)2-VitD3（μg/L） PD-1（%） CD4+（%） CD8+（%） CD4+/CD8+對(duì)照組（n=60） 37.23±5.08 62.29±3.87 33.52±4.10 23.29±4.26 1.29±0.30觀察組（n=60） 26.32±4.20 56.81±4.10 24.10±5.42 26.29±5.17 0.80±0.22 t 值 12.821 7.529 10.737 3.469 10.202 P 值 0.000 0.000 0.000 0.001 0.000

2.2 觀察組患者1,25-(OH)2-VitD3 水平與其共信號(hào)分子及T 細(xì)胞亞群水平的相關(guān)性

觀察組患者外周血1,25-(OH)2-VitD3的水平與外周血CD4+、PD-1 的水平及CD4+/CD8+均呈正相關(guān)，與其外周血CD8+的水平呈負(fù)相關(guān)。詳見表2。

表2 觀察組患者1,25-(OH)2-VitD3 水平與其共信號(hào)分子及T 細(xì)胞亞群水平的相關(guān)性

2.3 不同腫瘤分期的觀察組患者1,25-(OH)2-VitD3、PD-1、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+的比較

觀察組中腫瘤分期為Ⅰ～Ⅱ期的患者其外周血1,25-(OH)2-VitD3、PD-1、CD4+的水平及CD4+/CD8+均高于觀察組中腫瘤分期為Ⅲ期的患者，P＜0.05。觀察組中腫瘤分期為Ⅰ～Ⅱ期的患者其外周血CD8+的水平低于觀察組中腫瘤分期為Ⅲ期的患者，P＜0.05。詳見表3。

表3 不同腫瘤分期的觀察組患者1,25-(OH)2-VitD3、PD-1、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+的比較（± s ）

表3 不同腫瘤分期的觀察組患者1,25-(OH)2-VitD3、PD-1、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+的比較（± s ）

腫瘤分期 1,25-(OH)2-VitD3（μg/L） PD-1（%） CD4+（%） CD8+（%） CD4+/CD8+Ⅰ～Ⅱ期（n=35） 26.13±3.97 56.75±3.95 24.07±4.96 26.37±5.23 0.79±0.26Ⅲ期（n=25） 22.58±4.72 46.89±4.50 20.14±5.54 38.18±4.98 0.51±0.19 t 值 10.399 10.128 10.051 10.141 10.327 P 值 0.011 0.029 0.031 0.018 0.025

3 討論

在免疫調(diào)節(jié)、細(xì)胞分化刺激、抑制血管新生、抑制腫瘤增殖、加快腫瘤凋亡等生理過程中，維生素D 均起到了重要的作用。有研究人員通過調(diào)查接受不同劑量放療腫瘤患者的預(yù)后發(fā)現(xiàn)，適量的放療有助于提高患者體內(nèi)維生素D 的水平，降低其病情復(fù)發(fā)的風(fēng)險(xiǎn)[5]。當(dāng)惡性腫瘤患者外周血維生素D 的水平偏高時(shí)，其總體生存率較高[6]。維生素D 被視為一種新型的免疫調(diào)節(jié)劑。維生素D 可結(jié)合T 淋巴細(xì)胞上的維生素D 受體與抗原呈遞細(xì)胞，調(diào)節(jié)T 淋巴細(xì)胞等免疫細(xì)胞的增殖、分化。T 淋巴細(xì)胞在抗胃癌發(fā)生、發(fā)展的過程中可起到重要的作用[7]。T 淋巴細(xì)胞的功能下降，可使免疫系統(tǒng)殺傷和識(shí)別腫瘤細(xì)胞的能力下降，進(jìn)而造成胃癌的進(jìn)展[8]。有研究者認(rèn)為，為惡性腫瘤患者使用維生素D 進(jìn)行治療，能夠改善其體內(nèi)T 淋巴細(xì)胞的功能，從而起到抗腫瘤的作用。研究發(fā)現(xiàn)，臨床上可以通過調(diào)節(jié)胃癌患者體內(nèi)T 淋巴細(xì)胞的功能而達(dá)到抗癌的目的。本次研究的結(jié)果顯示，觀察組患者外周血1,25-(OH)2-VitD3、PD-1、CD4+的水平均低于對(duì)照組健康人，其外周血CD8+的水平高于對(duì)照組健康人。胃癌患者外周血1,25-(OH)2-VitD3的水平偏低，可導(dǎo)致其自身免疫功能降低。從而會(huì)加重其病情[9]。

共信號(hào)分子是細(xì)胞表面的主要生物學(xué)活性糖蛋白，能夠直接調(diào)控T 細(xì)胞受體信號(hào)通路。在通常情況下，共信號(hào)分子可以刺激或抑制T 細(xì)胞活化情況。共信號(hào)分子可分為共刺激分子與共抑制分子。PD-1 屬于共信號(hào)分子，程序性細(xì)胞死亡配體1（PD-L1）屬于共抑制信號(hào)。PD-1 與PD-L1 結(jié)合后，能夠有效地抑制T 細(xì)胞的活性[10]。

本次研究的結(jié)果證實(shí)，與健康人相比，胃癌患者外周血1,25-(OH)2-VitD3的水平更低。胃癌患者外周血1,25-(OH)2-VitD3的水平與其外周血PD-1、CD4+的水平及CD4+/CD8+均呈正相關(guān)，與其外周血CD8+的水平呈負(fù)相關(guān)。