趙芳芳，孫艷麗，喬子純，賀 琰，代紅軍

（寧夏大學 農學院，寧夏 銀川 750021）

美樂（Vitis viniferaL.cv.Merlot）原產于法國波爾多，具有早熟、皮薄、果肉多汁等優(yōu)勢，是波爾多最受歡迎的葡萄品種之一[1-2]，用其釀造的葡萄酒，單寧質地柔順，有果香之味。該品種在寧夏賀蘭山東麓產區(qū)廣泛栽培，但常常因外在因素或管理不當造成果實著色不均、糖含量低，成熟度不佳，嚴重影響果實品質及商品價值[3]。為提高果實著色，改善果實品質，生產上多采用加強水肥管理、葉幕整形和調整采收期等技術手段[4-6]，而傳統(tǒng)的方法存在諸多弊端，亟待尋找一種更為新型、高效、便捷的方法。

油菜素內酯（24-Epibrassinolide，EBR）是一種國際公認的活性高且無毒的新型植物生長調節(jié)劑，因其微量即可以表現(xiàn)出較高的生理效應而廣受關注[7]，目前已在蘋果、甜瓜、香蕉、梨等的生產得到廣泛應用[8]。有研究表明，EBR處理可以有效提高無籽葡萄花青素含量，降低葉綠素含量，促進花色苷的積累[9]；王利廷等[10]研究認為，EBR可能通過降低內源ABA含量，從而促進葡萄著色與成熟；馬立娜等[11]研究發(fā)現(xiàn)，EBR處理可能通過激活苯丙烷代謝相關酶的活性，從而提高花色苷含量，改善果實色澤。但油菜素內酯在釀酒葡萄上的應用研究相對較少。本試驗通過使用不同質量濃度的EBR處理美樂葡萄果穗，研究其對果實著色率、花色苷含量、百粒質量重、糖酸含量及酚類物質含量的影響，以期篩選出能有效改善美樂葡萄品質的最佳EBR質量濃度。

1 材料與方法

1.1 試驗材料

試驗于2020年在寧夏銀川市永寧縣玉泉營農場（38°12′N105°99′E）葡萄試驗基地中進行。供試材料為5年美樂（Vitis vinifera L.cv.Merlot）。

1.2 試驗方法

試驗采用隨機區(qū)組設計，掛果期選取長勢一致的植株120株，設4個處理，每個處理3次重復，每個重復10株，清水處理為對照（CK）。以蒸餾水為溶劑，將EBR調配為0.2、0.4和0.6 mg/L的不同質量濃度（T1、T2、T3），再分別加入等量98%乙醇（0.1%）和吐溫80（0.1%）。將不同質量濃度EBR溶液噴施于果穗，直至果穗滴水為止。于花后60 d開始采樣，每隔7 d采一次。采樣時分別從長勢一致的同等部位，分別剪取等量葡萄果實，置于帶冰的泡沫箱中帶回實驗室，并用液氮超低溫處理后儲藏于-80℃冰箱。

1.3 指標測定

1.3.1 果實著色率和花色苷的提取與測定 果實著色率的測定參照DB13/T 5114—2019的方法?；ㄉ盏奶崛⒄諜棼愑12]等的方法?；ㄉ盏臏y定參照Sun[13]等的方法并加以改進。

1.3.2 果實品質指標測定 隨機選取300粒葡萄果實，用電子天平稱其質量并計算百粒質量。采用WYT-32型手持糖量折光儀測定可溶性固形物。糖組分的測定參考李利梅[14]等的方法進行測定。可溶性總糖含量的測定采用蒽酮硫酸法?？偹岬臏y定參照GB/T 12456-2008的方法，采用酸堿指示劑法測定。單寧及總酚含量的測定參考程云[15]的方法。

1.4 數(shù)據分析

采用Excel 2010、Sigmaplot12.5和SPSS 21對實驗數(shù)據進行分析處理。

2 結果與分析

2.1 EBR處理對葡萄果實著色的影響

2.1.1 EBR處理對葡萄果實著色率的影響 如圖1所示，果實發(fā)育過程中果實著色率隨天數(shù)的增加而增加，轉色期（90 d）時迅速增加，隨后緩慢上升。在果實成熟過程中，T1和T3處理上升趨勢始終高于CK且差異顯著，T2與CK無明顯差異；110 d時，T3處理著色率高達98.8%，與CK相比增加了13.03%，T1處理與CK相比增加了9.11%。

圖1 EBR處理對葡萄果實著色率的影響

2.1.2 EBR處理對葡萄果實花色苷含量的影響如圖2所示，在整個生長期，總花色苷含量始終呈上升趨勢。與CK相比，T1和T3處理在果實發(fā)育過程中花色苷含量始終高于CK，其中T3處理在轉色初期（74 d）花色苷含量迅速增加，且在整個過程中始終高于其余各組。T3處理組在果實成熟過程中均顯著提高了總花色苷含量，成熟期總花色苷含量依次為T3>T2>T1>CK。

圖2 EBR處理對葡萄果實花色苷含量的影響

2.2 EBR處理對葡萄果實品質的影響

2.2.1 EBR處理對葡萄果實百粒質量和可滴定酸的影響 如圖3所示，隨著天數(shù)的增加，百粒質量呈上升趨勢，在104 d達到最大。75～97 d百粒質量增長迅速，說明果實進入迅速生長期，除T2處理外，其余處理均高于CK；在104 d經EBR處理的果實百粒質量顯著高于CK，110 d時經EBR處理的百粒質量均高于CK，但差異不顯著。果實可滴定酸含量隨天數(shù)的增加呈下降趨勢。67～97 d，其含量迅速下降，97～110 d下降趨勢較為緩和，各處理之間差異不顯著，說明EBR對果實可滴定酸的影響作用不明顯。

圖3 EBR處理對葡萄果實百粒重和可滴定酸的影響

2.2.2 EBR處理對葡萄果實單產和酚類物質含量的影響 如圖4所示，在整個生長階段，各處理果實中單寧含量總體呈先降后升趨勢。90 d（轉色初期）之前，EBR處理組單寧含量下降迅速；90～104 d（轉色期）下降趨勢平緩；在104 d，果實中單寧含量最小，各處理間差異不顯著；110 d（成熟期），經EBR處理的果實單寧含量均高于CK，其中T3處理與CK相比其含量增加了27.5%。各處理果實中總酚含量總體呈波動變化趨勢，T3處理在90 d時其含量最小，其余組在104 d時最?。?10 d各處理總酚含量均有所上升，與CK相比，T3處理差異顯著，比CK增加了30.8%。說明T3處理有利于提高果實酚類物質含量。

圖4 EBR處理對葡萄果實單寧和酚類物質含量的影響

2.2.3 EBR處理對葡萄果實可溶性總糖和可溶性固形物含量的影響 如圖5所示，在整個生長階段，各處理果實中可溶性總糖含量呈上升趨勢。在60～97 d，其含量上升幅度較大，但各處理間差異性不顯著；在97～104 d，可溶性總糖含量幾乎無變化；在104～110 d，其含量迅速增加，除T1處理外，其余處理均高于CK，T3處理與CK相比增加了11.4%，說明T3處理有利于提高果實可溶性糖含量。各處理果實可溶性固形物含量均呈上升趨勢，在60~90 d，可溶性固形物積累速率較快，在75 d，T3與CK差異顯著，CK其可溶性固形物含量增加了12.5%，說明外源EBR處理明顯促進了可溶性固形物的積累；在90～104 d，可溶性固形物積累速率趨于平緩，在110 d其含量達到最大值，但各處理間差異不顯著。

圖5 EBR處理對葡萄果實可溶性總糖和可溶性固形物含量的影響

2.3 糖含量與花色苷含量相關性分析

由表1可知，T1處理的果實中可溶性總糖和花色苷呈顯著正相關，說明T1可增加可溶性總糖和花色苷的相關性；T2處理的果實中還原糖和花色苷呈顯著正相關，說明T2處理增加了還原糖與花色苷的相關性；T3處理的果實中可溶性總糖、蔗糖和花色苷呈顯著正相關，說明T3處理增加了可溶性總糖、蔗糖與花色苷的相關性。

表1 糖含量和葡萄果皮花色苷的相關性分析

3 討論

花色苷是釀酒葡萄外在品質的主要指標，花色苷的含量直接影響葡萄酒顏色的深淺。胡春霞[16]等將EBR噴施于鮮食葡萄葉面，果實提前著色，果皮全部轉紅率提高2倍以上。趙現(xiàn)華等[17]用外源EBR處理蛇龍珠葡萄，結果表明其可增加糖含量，降低可滴定酸的含量，同時可促進花色苷的積累和果實成熟。本研究表明，經EBR處理的果實花色苷含量高，始熟期著色率高，成熟期著色均勻。因此，EBR處理可改善果實著色，這與前人研究結果一致。

在釀酒葡萄中生青味常常是影響酒體品質的最主要因素，而造成這一問題的主要原因是葡萄內在品質問題[18]。有研究表明，植物生長調節(jié)劑在果實生長過程中可降低可滴定酸含量和可溶性固形物含量[19-20]。本研究表明，外源EBR處理降低了果實可滴定酸含量，提高了可溶性總糖和可溶性固形物的含量，在成熟期，0.6 mg/L處理顯著高于對照，說明EBR處理可以促進糖分積累，改善果實品質，同時這可能也是其提高果實百粒質量的重要原因。有研究表明，果實中單寧含量在轉色初期逐漸上升，轉色后期逐漸降低，酚類物質含量則在轉色初期迅速增高，而在轉色期相對較低，由此可知，葡萄果實中酚類物質含量在轉色初期大量積累，而進入轉色期則有所減少[21-22]。本試驗中，轉色初期積累增多，在轉色期逐漸降低，這與前人研究結果相似。葡萄果實中單寧和總酚含量在成熟時略有上升，這說明經EBR處理的釀酒葡萄果實中酚類物質含量在轉色期積累較少，但隨著果實的成熟又逐漸增多，這與前人研究結果略有差異[23]。

4 結論

EBR處理可以促進葡萄果皮花色苷的積累，改善果實著色；也可以提高可溶性固形物和可溶性糖的含量，促進酚類物質合成，降低可滴定酸含量，提高果實品質，其中0.6 mg/L處理表現(xiàn)較優(yōu)。