宋明

（濟(jì)源動(dòng)物衛(wèi)生監(jiān)督所，河南 濟(jì)源 459000）

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)動(dòng)物

試驗(yàn)基地是河南省濟(jì)源市瑞星牧業(yè)有限公司天心種豬場(chǎng)，試驗(yàn)動(dòng)物是28日齡斷奶后、體重相近的杜長(zhǎng)大三元雜交豬48頭，試驗(yàn)期共47 d。

1.2 試驗(yàn)設(shè)計(jì)

本試驗(yàn)采用完全隨機(jī)設(shè)計(jì)的方法，試驗(yàn)選擇48頭健康的28日齡斷奶后的杜長(zhǎng)大三元雜交豬，根據(jù)公母各半、體重相近的原則隨機(jī)分為6組（對(duì)照組、試驗(yàn)Ⅰ-Ⅴ組），每組8頭。對(duì)照組飼喂基礎(chǔ)日糧，試驗(yàn)Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ組則分別在基礎(chǔ)日糧中添加0.5 g/㎏、1.0 g/㎏、1.5 g/㎏、2.0 g/㎏、2.5 g/㎏膨化殼聚糖銅微粒。試驗(yàn)基礎(chǔ)日糧參考NRC豬飼養(yǎng)養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)配制[1]，其原料組成和營(yíng)養(yǎng)水平見(jiàn)表1。

表1 基礎(chǔ)日糧組成及營(yíng)養(yǎng)水平（風(fēng)干基礎(chǔ)）

1.3 膨化殼聚糖銅微粒的構(gòu)建及其表征

首先利用膨化技術(shù)對(duì)殼聚糖進(jìn)行膨化處理。膨化殼聚糖銅微粒的制備，采用相關(guān)文獻(xiàn)[2]中介紹殼聚糖金屬配合物的方法進(jìn)行。取2.0 g經(jīng)膨化處理脫乙酰度 90%的殼糖于圓底燒瓶中，加50 mL蒸餾水，加入一定濃度的硫酸銅，用醋酸溶液調(diào)節(jié)pH值至3～4，分別置于22℃、30℃、40℃、50℃、60℃的恒溫水浴鍋中攪拌反應(yīng)4 h。反應(yīng)完畢后，用蒸餾水洗滌至濾液中無(wú)硫酸根離子（氯化鋇溶液檢驗(yàn)），用乙醇和丙酮洗滌，抽濾，55℃真空干燥得到殼聚糖銅配合物微粒。測(cè)定配合物中銅的含量，利用溴化鉀壓片法對(duì)膨化殼聚糖及膨化殼聚糖銅配合物進(jìn)行紅外光譜分析、并分析殼聚糖銅緩解性能。

1.4 飼養(yǎng)試驗(yàn)

對(duì)照組與各試驗(yàn)組均在相同的條件下飼養(yǎng)，飼養(yǎng)方式采用群飼、圈養(yǎng)，飼喂方法采用自由飲水，采食。開(kāi)始試驗(yàn)前對(duì)豬舍進(jìn)行消毒。試驗(yàn)期47 d，其中預(yù)試期7 d，正式期40 d，在此期間，對(duì)試驗(yàn)豬嚴(yán)格執(zhí)行防疫程序和驅(qū)蟲(chóng)。每日都要記錄消耗料的量，飼養(yǎng)結(jié)束后，供水禁止采食24 h后稱(chēng)重，計(jì)算試驗(yàn)豬的平均日采食量、日增重和料重比[3]。

1.5 屠宰試驗(yàn)

飼養(yǎng)試驗(yàn)結(jié)束后，隨機(jī)從每組中選擇體重相近的健康杜長(zhǎng)大三元雜交豬各2頭 （公母各1頭），共12頭進(jìn)行屠宰試驗(yàn)。宰前禁飼24 h,禁飼期間自由飲水,宰前稱(chēng)重。記錄宰前活重、胴體重。

1.6 樣品收集和保存

小腸樣品采集：取出小腸置于解剖盤(pán)中。找出十二指腸、空腸和回腸，在各腸段中部截取3.0 cm長(zhǎng)的腸段樣品，用線扎緊腸段兩端，之后放入-20℃冰箱中用于分析消化酶?jìng)溆肹4]。

1.7 統(tǒng)計(jì)分析

以試驗(yàn)處理為單位，用SAS統(tǒng)計(jì)軟件的ANOVA程序進(jìn)行方差分析，用Duncan法進(jìn)行多重比較[5]。結(jié)果用平均值±標(biāo)準(zhǔn)差表示。

2 結(jié)果分析

2.1 膨化殼聚糖銅對(duì)十二指腸消化酶活性的影響

膨化殼聚糖銅對(duì)杜長(zhǎng)大三元雜交豬十二指腸消化酶活性的影響見(jiàn)表2。由表2可知，與對(duì)照組相比，試驗(yàn)Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ組蛋白酶活性分別提高了1.75%、3.49%、4.61%、3.94%、1.91%， 且差異均顯著(P<0.05)；脂肪酶活性分別提高了 4.09%、8.37%、14.4%、12,1%、5.41%，且差異均顯著(P<0.05);淀粉酶活性分別提高了3.13%、5.31%、8.47%、7.38%、4.53%，且差異均顯著(P<0.05)。試驗(yàn)結(jié)果顯示，試驗(yàn)Ⅲ組蛋白酶、脂肪酶、淀粉酶活性均顯著高于試驗(yàn)Ⅰ、Ⅱ、Ⅳ、Ⅴ組。

表2 膨化殼聚糖銅對(duì)十二指腸消化酶活性的影響

2.2 膨化殼聚糖銅對(duì)回腸二糖酶活性的影響

膨化殼聚糖銅對(duì)杜長(zhǎng)大三元雜交豬回腸二糖酶活性的影響見(jiàn)表3。由表可知，與對(duì)照組相比，試驗(yàn)Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ組麥芽糖酶活性分別提高了2.75%、6.39%、8.61%、7.85%、4.94%，且差異均顯著(P<0.05)；蔗糖酶活性分別提高了4.55%、13.6%、20.8%、18.5%、8.76%，且差異均顯著(P<0.05)；乳糖酶活性分別提高了 15.2%、27.5%、44，8%、34.67%、18.9%，且差異均顯著(P<0.05)。試驗(yàn)結(jié)果顯示，試驗(yàn)Ⅲ組麥芽糖酶、蔗糖酶、乳糖酶活性均顯著高于試驗(yàn)Ⅰ、Ⅱ、Ⅳ、Ⅴ組。

表3 膨化殼聚糖銅對(duì)回腸二糖酶活性的影響

2.3 膨化殼聚糖銅對(duì)空腸二糖酶活性的影響

膨化殼聚糖銅對(duì)杜長(zhǎng)大三元雜交豬空腸二糖酶活性的影響見(jiàn)表4。由表可知，與對(duì)照組相比，試驗(yàn)Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ組麥芽糖酶活性分別提高了2.34%、4.45%、6.32%、5.34%、4.05%，且差異均顯著(P<0.05);蔗糖酶活性分別提高了 7.40%、14.6%、22.6%、18.28%、12.2%，且差異均顯著(P<0.05)；乳糖酶活性分別提高了 18.6%、33.6%、55.8%、42.65%、22.9%，且差異均顯著(P<0.05))。試驗(yàn)結(jié)果顯示，試驗(yàn)Ⅲ組麥芽糖酶、蔗糖酶和乳糖酶活性均顯著高于試驗(yàn)Ⅰ、Ⅱ、Ⅳ、Ⅴ組。

表4 膨化殼聚糖銅對(duì)空腸二糖酶活性的影響

3 討論

3.1 膨化殼聚糖銅對(duì)杜長(zhǎng)大三元雜交豬十二指腸消化酶活性的影響

十二指腸內(nèi)容物、營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)在小腸內(nèi)被消化時(shí)主要依賴(lài)體內(nèi)消化酶的作用。本試驗(yàn)結(jié)果表明,飼料中添加膨化殼聚糖銅，能顯著提高杜長(zhǎng)大三元雜交豬十二指腸內(nèi)容物中蛋白酶、脂肪酶和淀粉酶的活性，從而可促進(jìn)杜長(zhǎng)大三元雜交豬對(duì)飼料中蛋白質(zhì)、脂肪和碳水化合物三大營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的充分消化與吸收，進(jìn)而提高了飼料養(yǎng)分的表觀消化率[6]。因此,膨化殼聚糖銅是通過(guò)提高十二指腸內(nèi)容物中消化酶的活性,來(lái)促進(jìn)豬對(duì)飼料養(yǎng)分的消化與吸收,進(jìn)而促進(jìn)其生長(zhǎng),提高飼料利用效率。

3.2 膨化殼聚糖銅對(duì)杜長(zhǎng)大三元雜交豬回腸二糖酶活性的影響

膨化殼聚糖銅對(duì)杜長(zhǎng)大三元雜交豬回腸二糖酶活性的影響不是十分的明顯。結(jié)果表明，試驗(yàn)組Ⅲ的效果最明顯，所以1.5 g/㎏膨化殼聚糖銅微粒添加量是最適合的。不只是膨化殼聚糖銅對(duì)消化酶的活性有影響，pH值的變化對(duì)消化酶的活性也有一定的影響，同時(shí)，其他因素（如溫度、采食量、日糧組成和各種抗?fàn)I養(yǎng)因子等）也會(huì)對(duì)消化酶的活性也有一定的影響[7]。

從本試驗(yàn)研究結(jié)果可以看出，膨化殼聚糖銅對(duì)豬營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的代謝和腸道消化酶活性確實(shí)有一定的影響。有試驗(yàn)表明，膨化殼聚糖銅能夠理氣消食，益脾健胃，增強(qiáng)新陳代謝，促進(jìn)血液循環(huán)，而且能顯著提高飼料干物質(zhì)、粗蛋白質(zhì)、粗脂肪表觀消化率和腸道內(nèi)容物中總蛋白水解酶、脂肪酶和淀粉酶的活性，從而改善仔豬的養(yǎng)分消化率，促進(jìn)仔豬生長(zhǎng)發(fā)育[8]。

3.3 膨化殼聚糖銅對(duì)杜長(zhǎng)大三元雜交豬空腸二糖酶活性的影響

空腸黏膜二糖酶活性、回腸黏膜二糖酶活性在碳水化合物利用方面起至關(guān)重要的作用。沒(méi)有黏膜二糖酶的存在就沒(méi)有糖類(lèi)物質(zhì)的徹底分解,更沒(méi)有單糖的吸收、轉(zhuǎn)化和利用。本試驗(yàn)結(jié)果表明,試驗(yàn)組能使杜長(zhǎng)大三元雜交豬空腸黏膜蔗糖酶、麥芽糖酶和乳糖酶活性與對(duì)照組相比顯著升高。這可能與其對(duì)腸黏膜組織的形態(tài)結(jié)構(gòu)的保護(hù)作用有關(guān)。只有健康的腸黏膜形態(tài)與結(jié)構(gòu),才有益于黏膜二糖酶的分泌,才能使養(yǎng)分的消化、吸收得以顯著提高,進(jìn)而促進(jìn)了豬的生長(zhǎng)。

4 結(jié)論

在本試驗(yàn)條件下，日糧中加入1.5 g/㎏膨化殼聚糖銅微粒為最佳添加量，對(duì)豬腸道消化酶活性提高的效果最明顯。