(山東省臨朐縣動物衛(wèi)生監(jiān)督所 262600)
小反芻獸疫也稱小反芻獸假性牛瘟、肺腸炎、口炎肺腸炎復(fù)征,是由PPRV(小反芻獸疫病毒)引起小反芻獸的一種急性、發(fā)熱性、高度接觸性傳染病,主要感染山羊和綿羊等小反芻動物,小反芻獸疫病毒(PPRV) 屬于副黏病毒科麻疹病毒屬,與牛瘟病毒、人麻疹病毒、犬瘟熱病毒等屬于同屬類病毒。病毒粒子呈現(xiàn)多樣性,其中最常見的表現(xiàn)形式為粗糙球形;病毒主要由核衣殼和外部囊性膜組成,核衣殼長度約為1000nm,平均直徑為500nm,表現(xiàn)為螺旋對稱性,主要由核衣殼蛋白、大蛋白和磷蛋白構(gòu)成。外部囊性膜厚度為8~14nm,囊膜中有明顯的纖突,主要成分為無神經(jīng)氨酸酶和血凝酶。
病毒不耐高溫,在50℃環(huán)境下30min 即可喪失感染性,但在酸堿度環(huán)境中相對穩(wěn)定,在pH4-10 區(qū)間內(nèi)可以保持較長時間的活性,該病毒對一般消毒劑如酒精、乙醚和化學(xué)滅活劑等都具備較高的敏感性,在酚類物質(zhì)作用下,24h 內(nèi)可以將其滅活,失去感染宿主的能力和致病性。
小反芻獸疫的天然宿主是綿羊和山羊,一般認(rèn)為山羊更易感,也有研究稱它們易感性幾乎相當(dāng),但綿羊的發(fā)病率和死亡率卻偏髙。野生動物也有被感染的報道,主要有單峰駱駝、湯氏瞪羚、印度水牛等。需要注意的是大家畜中牛一般呈現(xiàn)亞臨床感染,并能產(chǎn)生抗體;豬感染后既不表現(xiàn)出臨床癥狀,也不排毒。至今尚未曾見到人感染本病的報道。硩硦
患病動物和隱性感染的動物是小反芻獸疫的主要傳染源,未表現(xiàn)臨床癥狀的病羊最為危險。病畜或帶病畜的呼吸道、消化道均可排毒。
該病主要經(jīng)呼吸系統(tǒng)傳播,具有高度的接觸傳染性。既可通過直接接觸等感染進(jìn)行水平傳播,也可通過精液、乳汁等感染進(jìn)行垂直傳播,還可通過家畜調(diào)運、引種及野生動物的遷徙等跨區(qū)域傳播。被這些分泌物、排泄物污染的水源、溝槽、墊料等雖然都會成為傳播媒介,但并不會長時間保持傳染性,因此小反芻獸疫傳播距離非常有限。
小反芻獸疫傳染性強,傳播速度快,沒有明顯的季節(jié)性,四季均發(fā),在雨季和干燥寒冷的季節(jié)更為頻發(fā),易感羊群發(fā)病率在60%以上,且病死率可達(dá)50%以上,嚴(yán)重者可達(dá)100%,該病常以零散疫點的形式發(fā)生,在某些年份呈暴發(fā)流行之后,一般有5~6 年的緩和期。該病主要導(dǎo)致小反芻動物的腹瀉、發(fā)熱、腸炎和口炎等,是一種急性高度接觸性傳播類疾病,其中羊感染性小反芻獸疫也被稱為假性羊瘟。小反芻獸疫在非洲、中東和亞洲等多地發(fā)生過,對養(yǎng)殖產(chǎn)業(yè)造成了巨大的影響。2007 年在我國西藏阿里地區(qū)于爆發(fā)過該病,患病羊數(shù)量達(dá)到6000 余只,死亡1500 余只,嚴(yán)重制約了當(dāng)?shù)匮蝠B(yǎng)殖業(yè)的發(fā)展,并且?guī)砹司薮蟮慕?jīng)濟損失。
該病可通過臨床癥狀及病理學(xué)變化診斷,發(fā)病后病畜表現(xiàn)體溫升高,呼吸困難;眼、鼻大量排出分泌物,初呈水樣后呈膿樣,口腔黏膜充血,口、鼻腔黏膜出現(xiàn)大量部分粘連的極其微小的略呈灰色的壞死點、糜爛斑;病畜發(fā)熱2~3d 后開始腹瀉,并伴隨嚴(yán)重脫水、消瘦、虛脫;懷孕母羊可發(fā)生流產(chǎn)。
剖檢可見膿性黏膜炎、結(jié)膜炎、支氣管肺炎,肺尖肺炎;消化道黏膜常見嚴(yán)重的充血、潰爛及出血,有時大腸縱向折疊頂部出現(xiàn)嚴(yán)重的出血,有時形成斑馬樣條紋;腸淋巴組織發(fā)生壞死、萎縮,腸系膜淋巴結(jié)輕微腫大、水腫;腎和膀胱可見充血;母羊可見陰戶甚至陰道糜爛。肺臟組織組織學(xué)檢查可見多核巨細(xì)胞及細(xì)胞內(nèi)嗜酸性包涵體出現(xiàn)。上述方法可作出懷疑或初步診斷,如需確診需要進(jìn)行對該病進(jìn)行特異性診斷。
目前,常用的實驗室診斷技術(shù)主要有病毒分離、聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)、酶聯(lián)免疫吸附試驗、病毒中和試驗、瓊脂凝膠免疫擴散、對流免疫電泳、膠體金試紙以及其他檢測方法,其中聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)和競爭ELISA 應(yīng)用廣泛,是世界動物衛(wèi)生組織指定的標(biāo)準(zhǔn)檢測方法。在血清學(xué)檢測中,商品化的ELISA 試劑盒具有較高的特異性和敏感性,可以檢測病毒的N 或H 蛋白的抗體,可以評估群體血清水平。但是,現(xiàn)在仍然沒有一種血清學(xué)方法能夠區(qū)分受感染動物和預(yù)防接種動物。
3.2.1 病原學(xué)診斷硩硦
小反芻獸疫病原學(xué)診斷方法目前主要采取病毒分離鑒定、捕獲酶聯(lián)免疫吸附試驗、瓊脂凝膠免疫擴散、對流免疫電泳等方法。1995 年,F(xiàn)orsyth 和其他的研究人員一起建立了用于鑒別診斷的RT-PCR 的方法。Forsyth 和Barrett 在研究的過程中根據(jù)N 基因和F 基因進(jìn)行了引物設(shè)計,并且構(gòu)建了以PCR 為基礎(chǔ)的檢測手段進(jìn)行RT-PCR 檢測,使用RT-PCR 進(jìn)行病毒檢測的手段不斷得到推廣和應(yīng)用,得到了人們的廣泛關(guān)注和認(rèn)可。cDNA(互補脫氧核糖核酸)探針法和RT-PCR 兩種方法在病毒檢測和核算分析中得到了廣泛應(yīng)用,尤其是后者具備操作簡便的特點,可以借助序列檢測的方式來對病毒強弱程度進(jìn)行分析,可以用來與牛瘟病毒的鑒別診斷。George A 等以M 或N 基因建立的單一RT-PCR 和多重PCR 更為敏感。由SaravananP 等建立的PCR-ELISA 方法,能檢測早期感染的小反芻獸疫病毒,因為其采用一種標(biāo)記的探針檢測病毒核酸擴增產(chǎn)物,其靈敏度比常規(guī)RT-PCR 増髙10 倍。我國毛立等建立了小反芻獸疫病毒特異、敏感的RT-PCR 診斷方法。此外,實時熒光定量PCR和環(huán)介導(dǎo)等溫擴增(LAMP)技術(shù)也可用于PPRV 的特異性的檢測。硩硦
3.2.2 免疫學(xué)診斷硩硦
一般,抗體滴度檢測需采集雙份血清進(jìn)行試驗,抗體滴度升高4 倍以上才具有示病意義。目前常用方法有ELISA 試驗、中和試驗、熒光抗體試驗、瓊脂免疫擴散試驗等。在患病畜血清中,針對N 蛋白的抗體占主導(dǎo)地位,其抗原性穩(wěn)定。國內(nèi)邱文英[1]等建立了靈敏度高、特異性強的單抗競爭性ELISA 方法。血細(xì)胞凝集試驗、乳膠凝集試驗和病毒中和試驗也是用于小反芻獸疫抗體檢測的方法。其中,病毒中和試驗是國際貿(mào)易中要求必須進(jìn)行的一項檢測,其靈敏度高、特異性強,但缺點是非常耗時,影響其在實際工作中的推廣和應(yīng)用。硩
近年來,鑒于小反芻獸疫給家畜養(yǎng)殖帶來的危害與經(jīng)濟損失,在實際生產(chǎn)中,已越來越為廣大養(yǎng)殖戶所重視。在寧夏[2],從2014 年2 月起,全區(qū)范圍內(nèi)對所有養(yǎng)殖、調(diào)運環(huán)節(jié)羊只使用小反芻獸疫疫苗進(jìn)行強制免疫。通過此類方法,2014~2017 年,小反芻獸疫全年免疫密度維持100%,抗體陽性率超過70%以上。目前,全國各地基本都在使用此類方法,在疫苗運輸、使用、貯藏等等環(huán)節(jié)加強監(jiān)管,各市、縣(區(qū))動物疾病預(yù)防控制中心做好免疫效果監(jiān)測評價的同時,陸續(xù)推出的重大疫病應(yīng)急預(yù)案、嚴(yán)格的消殺工作以及強制免疫程序,這在很大程度上阻斷了該病的傳播及發(fā)生,也為有效防控該病打下了堅實的基礎(chǔ)。