何亦男

（榆林學院，陜西 榆林 719000）

作為植物發(fā)育、代謝過程的重要組成部分，內(nèi)生菌在對植物的脅迫、應用、代謝、生長方面發(fā)揮著重要作用。其組成特征和群落結(jié)構(gòu)也受到宿主植物的內(nèi)環(huán)境與基因影響。近些年，商業(yè)化內(nèi)生菌在植物馴化、植物栽培方面廣泛應用，并獲得了良好的效果。對內(nèi)生菌相關(guān)領(lǐng)域展開分析研究，能夠幫助人們認識影響植物品質(zhì)的因素，解決大量難以克服的問題。

1 植物內(nèi)生菌的定義

植物內(nèi)生菌（Endophyte）是指在全部或一定時期都處于發(fā)育正常狀態(tài)的植物器官、組織內(nèi)部生活發(fā)育的細菌或真菌。該類內(nèi)生菌大多存在與高等植物中，比如草本植物，雙、單中葉植物以及木本植物[1]，可成為潛在生防載體以及具有重要潛力的微生物農(nóng)藥，從而投入日常的使用環(huán)節(jié)中。

2 內(nèi)生菌多樣性

2.1 內(nèi)生細菌

當前已有超過129種，分屬于54個屬的內(nèi)生細菌在果樹及各種農(nóng)作物中被探知，常見屬主要有土壤桿菌屬、腸桿菌屬、芽孢桿菌屬等，大多為土壤微生物種類。

2.2 內(nèi)生放線菌

分離到內(nèi)生放線菌的有鏈霉菌和絲狀放線菌屬。

2.3 內(nèi)生真菌

一般情況下，植物內(nèi)生真菌大都屬于無性型，包括盤菌綱、腔菌綱、核菌綱以及衍生菌[2]。相關(guān)研究人員已在80多屬、幾百種禾本科植物之中，發(fā)現(xiàn)與其共生的內(nèi)生真菌。

3 農(nóng)業(yè)內(nèi)生真菌生物技術(shù)

在內(nèi)生真菌研究中，生物技術(shù)發(fā)揮著重要作用，除了涉及真菌同植物的相互作用，還有驅(qū)動生物分子合成的參與作用，這些分子能夠有效提高植物的免疫力。受到根系分泌物與根際沉積的分泌影響，高危生物種群往往居住在根際，根的平面會形成屏障，這一屏障會對擁有發(fā)絲菌絲、在根組織中滲透的微生物的類型進行選擇性篩選，成功定植后內(nèi)生群落將建立在植物組織內(nèi)。

在推動宿主植物的代謝和生理功能方面，內(nèi)生菌也發(fā)揮著重要的作用。比如控制植物病原體、固氮以及營養(yǎng)獲取等。相關(guān)工作人員通過對內(nèi)生菌分子方法進行研究，有效推動農(nóng)業(yè)生產(chǎn)力的提高。但真正分離和探索的內(nèi)生菌僅有一小部分。宏基因組學方法能夠?qū)?nèi)生植物的功能與結(jié)構(gòu)的多樣性進行分析，通過對其進行基因操作，檢測各種工業(yè)與農(nóng)業(yè)應用的新性狀[3]。此外，通過在生物肥料的使用中應用內(nèi)生真菌生物技術(shù)，可以營造更加安全的環(huán)境，增加農(nóng)作物產(chǎn)量，推動農(nóng)業(yè)健康發(fā)展。

4 內(nèi)生菌與植物的互作關(guān)系

內(nèi)生菌可以產(chǎn)生多樣化合物，從而被宿主利用吸收，對其生長、代謝產(chǎn)生影響，還能產(chǎn)生各種代謝物和生植物激素[4]。比如IAA、SA、GA以及ABA等，通過產(chǎn)生揮發(fā)性化合物、抗生素以及植物抗毒素，幫助植物加強應對生物脅迫的能力。內(nèi)生菌還能參與宿主P、N、C營養(yǎng)元素循環(huán)，幫助植物生長發(fā)育。

內(nèi)生菌可以通過“橫向基因轉(zhuǎn)移”或“誘導子”效應，對宿主代謝途徑與基因表達進行改變。通過化學識別系統(tǒng)，植物可以檢測內(nèi)生菌分子釋放，從而觸發(fā)植物產(chǎn)生信號轉(zhuǎn)導網(wǎng)絡(luò)，引發(fā)生物反應應答，改變相關(guān)基因活性。此外，內(nèi)生菌與植物之間通過橫向基因轉(zhuǎn)移交換作用，也可以改變植物的次生代謝產(chǎn)物。

內(nèi)生菌還可以通過“生物轉(zhuǎn)化”作用，影響宿主化合物。調(diào)查結(jié)果顯示某些內(nèi)生菌可以加工植物代謝物，使其轉(zhuǎn)換為另一種化合物，降解有毒化合物，并影響植物代謝。

5 內(nèi)生菌對藥用植物的影響

5.1 提高藥用植物抗逆性

內(nèi)生菌可以有效促進藥用植物對紫外線、pH值、病害、以及滲透壓的脅迫反應能力。例如二型花屬植物Dichant helium Lanugunasum只有和內(nèi)生真菌彎孢屬Curvularia proturata真菌共生，才能適應38℃地熱高溫，單獨培養(yǎng)則會因地熱過高而死[5]。由此可見，內(nèi)生菌可以有效提高藥用植物的抗逆性。

5.2 影響植物生物活性

內(nèi)生菌自生的代謝產(chǎn)物與宿主代謝產(chǎn)物會對藥用植物代謝產(chǎn)生很大的影響。比如Neofusicoccum australe內(nèi)生真菌可以從香桃木中分離出來，產(chǎn)生香桃木桐系列衍生物和化合物，其粗提物可以起到抗炎、抑制腫瘤增殖的作用，當它的代謝物分泌到植物內(nèi)部時，會對宿主植物的生物活性產(chǎn)生影響。

5.3 促進宿主活性代謝物積累

相關(guān)研究人員通過研究龍血樹、銀杏、喜樹、紅豆杉以及蒼術(shù)等藥材，發(fā)現(xiàn)內(nèi)生菌種群功能直接影響著這些藥材的活性成分積累。比如中藥龍血竭就是在受到真菌侵染的情況下，由龍血樹植物的免疫系統(tǒng)產(chǎn)生出來的防御性產(chǎn)物。相關(guān)工作人員將從龍血樹產(chǎn)生出來的真菌鏈孢霉接入到健康的落葉或是樹木上，能夠在短時間內(nèi)產(chǎn)生優(yōu)質(zhì)的龍血竭[6]。當前，我國云南等地區(qū)，普遍采用“輸液”的方法在龍血樹內(nèi)輸入真菌孢子，從而迅速培育出高質(zhì)量、高產(chǎn)量的龍血竭。

5.4 海生植物內(nèi)生真菌

有關(guān)學者研究馬來群島的海藻植物發(fā)現(xiàn)在64株內(nèi)生真菌中，有16%的內(nèi)生真菌具有抗真菌活性，72%具有抗細菌活性，77%可有效抑制癌細胞生長。研究結(jié)果顯示海生植物內(nèi)生真菌在清除污染、抗感染、酶抑制方面有重要作用。

6 內(nèi)生菌檢測

大部分的天然產(chǎn)物是內(nèi)生菌在特定的環(huán)境中生產(chǎn)出來的，出于提取操作和工藝等原因，往往不能被及時檢測出來。因此，如何迅速將生產(chǎn)擁有生物活性的內(nèi)生菌篩選出來，便成為一個重要的難題。當前主要有2種辦法。

第1種方法是對天然產(chǎn)物合成途徑關(guān)鍵酶進行基因水平檢測。例如非核糖體肽合成酶（NRPS）、多聚酮合酶（PKS）是分別負責2類化合物、微生物合成途徑的關(guān)鍵酶。這2種酶作為指標片段，可以對擁有潛在生物活性植物內(nèi)生菌進行初步篩選，但缺點是這種方法會導致通過“孤兒”“隱秘”途徑合成的化合物被遺漏。在正常的實驗室條件下，大多數(shù)真菌色素、毒素以及抗生素的合成途徑往往是不能被表達的，必須采取激活的方式。所以真菌次級代謝就會被低估。第2種方法是對內(nèi)生菌天然產(chǎn)物進行生物合成促進。例如相關(guān)工作人員使用組蛋白脫乙?；负虳NA轉(zhuǎn)甲基酶抑制劑對12種真菌進行處理，最后在11種真菌例發(fā)現(xiàn)了水平上調(diào)或新的化合物。

7 結(jié)語

通過研究發(fā)現(xiàn)，內(nèi)生菌在農(nóng)業(yè)、醫(yī)療行業(yè)有廣泛的應用價值。內(nèi)生菌可以產(chǎn)生多種生物活性物質(zhì)，在抗植物病蟲害、抗菌抗癌物質(zhì)方面為相關(guān)工作人員提供了新的生物資源。在農(nóng)業(yè)上，通過合理使用內(nèi)生菌生產(chǎn)的抗蟲劑、抗菌劑，可以有效防止植物發(fā)生病害，為農(nóng)產(chǎn)業(yè)的品質(zhì)提供了有效保障。在醫(yī)療上，人們越來越重視天然藥物。植物作為天然藥物的重要來源，在植物組織內(nèi)生長的內(nèi)生菌能產(chǎn)生大量活性物質(zhì)，生成抗癌基因，從而幫助醫(yī)療人員治療癌癥疾病，具有重大意義和價值。