楊文霞，成 豫，理 云，陳林千雨， 陳芊如

(西北農(nóng)林科技大學(xué)動(dòng)物醫(yī)學(xué)院，陜西 楊凌 712100)

0 引言

目前，大腸埃希菌對(duì)抗菌藥物的耐藥性成為一個(gè)日益嚴(yán)重的全球性問題。有學(xué)者通過探討呋喃妥因在E.coli分離株的耐藥機(jī)制，結(jié)果表明，NFSA(突變位點(diǎn)多為I117T和G187D)和NFSB的突變是引起耐藥的主要機(jī)制。牛建寧等[1]研究顯示，雞源致病性E.coli對(duì)四環(huán)素類抗生素產(chǎn)生的多重耐藥性與耐藥基因tetA呈正相關(guān)。張純萍等[2]表明E.coli通過主動(dòng)外排作用對(duì)四環(huán)素耐藥。有學(xué)者評(píng)估瑞士大蘇黎世地區(qū)E.coli臨床分離株中氨基糖苷類和β-內(nèi)酰胺類耐藥性的共存。結(jié)果表明，AAC(3)和aph(3‘)基因型與廣譜β-內(nèi)酰胺酶(BSBL)產(chǎn)生頻繁相關(guān)，AAC(6’)基因與擴(kuò)展廣譜β-內(nèi)酰胺酶(ESBL)產(chǎn)生頻繁共存。研究健康屠宰動(dòng)物腸道菌群中E.coli(包括產(chǎn)生頭孢菌素酶的大腸埃希菌i)的表型和遺傳特征，證實(shí)抗性基因在家畜中存在并通過IncX1質(zhì)粒傳播到包括人和動(dòng)物病原體在內(nèi)的其他細(xì)菌。

1 大腸埃希菌

1.1 大腸埃希菌病

已知E.coli有8種，即EPEC、ETEC、EIEC、EHEC、EAEC、SEPEC、UPEC和PPEC。大腸埃希菌病是一種常見的腸道急性細(xì)菌病，由某些致病性菌株(特異性血清型)及其毒素引起。它不但在動(dòng)物群體流行廣泛，給行業(yè)帶來嚴(yán)重經(jīng)濟(jì)損失，而且還能攜帶其他致病菌的耐藥基因，充當(dāng)“基因儲(chǔ)存庫”，通過食物鏈等方式傳遞，影響食品品質(zhì)和人類健康。大腸埃希菌屬腸桿菌科，它能使多種糖發(fā)酵產(chǎn)生酸和氣體，同時(shí)它也是人體和動(dòng)物腸道中的一種正常駐留細(xì)菌。大腸埃希菌廣泛存在于自然界，是一種條件致病菌。當(dāng)機(jī)體免疫力下降或細(xì)菌侵入時(shí)，可成為一種機(jī)會(huì)性病原體，引起腸外感染，包括呼吸道感染、消化道感染、尿路感染、敗血癥等。

1.2 大腸埃希菌的形態(tài)及生物學(xué)特征

大腸埃希菌是一種中型革蘭陰性桿菌，活菌大小通常為(0.4～1.0)μm×(0.7～3.0)μm，染色菌大小通常為(1.1～1.5)μm×(2.0～6.0)μm，多數(shù)菌株有鞭毛，能活動(dòng)。有的菌株有致病菌毛、莢膜和微[3]。據(jù)報(bào)道，大腸桿菌上存在銅菌毛，它主要通過定植、組織嗜性以及生物膜形成等途徑致病。

1.3 大腸埃希菌的抵抗力

大腸桿菌能在天然水中存活數(shù)周甚至幾個(gè)月，其耐熱性強(qiáng)于其他腸桿菌科。有些細(xì)菌在55℃加熱60 min或60℃加熱15 min的環(huán)境下仍能存活，對(duì)磺胺、鏈霉素、氯霉素等多種抗生素敏感，但也容易因R因子的質(zhì)粒轉(zhuǎn)移而產(chǎn)生耐藥性。隨著大腸桿菌抗菌藥物的不斷發(fā)展，大腸桿菌的耐藥性逐漸增強(qiáng)，因此由大腸桿菌引起的醫(yī)院感染已成為世界各國共同面臨的難點(diǎn)問題。

2 耐藥機(jī)制

2.1 耐藥性

耐藥性(drug resistance)就是人們所熟知的抗藥性，指的是寄生蟲、微生物和腫瘤細(xì)胞等在抗菌藥物作用下細(xì)菌的耐受性，其會(huì)降低藥效并產(chǎn)生毒副作用，是世界范圍內(nèi)的醫(yī)療危機(jī)。當(dāng)細(xì)菌產(chǎn)生了耐藥性后，很容易導(dǎo)致藥物的作用下降，增加臨床治療工作的困難。按照耐藥性發(fā)生的原因可以將大腸埃希菌的耐藥性可分為天然、獲得性耐藥性。前者為細(xì)菌固有，僅由細(xì)菌本身的染色體基因決定；后者則由質(zhì)粒介導(dǎo)，通過影響細(xì)菌代謝途徑逃避抗菌藥物的殺滅作用。

2.2 耐藥機(jī)制

2.2.1 產(chǎn)生滅活酶或同工酶

滅活酶或同工酶會(huì)使抗生素發(fā)生水解、修飾等作用，失去抗菌活性而產(chǎn)生耐藥性。對(duì)青霉素和頭孢菌素類抗生素，β-內(nèi)酰胺酶能作用于β-內(nèi)酰胺環(huán)使酰胺鍵斷裂而失去抗菌活性[4]。氨基糖苷修飾酶(乙酰轉(zhuǎn)移酶、核苷轉(zhuǎn)移酶和磷酸轉(zhuǎn)移酶)，能使氨基糖苷類抗生素中游離羥基磷酸化、核苷化，失去抑制蛋白質(zhì)合成的能力。而氯霉素乙酰轉(zhuǎn)移酶使其乙?；?jīng)過非酶分子內(nèi)重排等不能與細(xì)菌的核糖體結(jié)合，從而缺乏抗菌活性。大環(huán)內(nèi)酯類抗生素的內(nèi)酯環(huán)會(huì)被紅霉素酯酶或大環(huán)內(nèi)酯磷酸轉(zhuǎn)移酶破壞，導(dǎo)致藥物失活。

2.2.2 作用靶點(diǎn)突變

對(duì)于氨基糖苷類抗生素，除E.coli基因突變使核糖體蛋白(S12)改變外，還有生成16SrRNA甲基化酶(質(zhì)粒介導(dǎo))使自身堿基甲基化，都導(dǎo)致藥物與細(xì)菌16SrRNA的親和性降低，從而產(chǎn)生耐藥性。對(duì)于喹諾酮類，主要是編碼DNA回旋酶的基因突變，使E.coli空間結(jié)構(gòu)改變，阻止藥物進(jìn)入作用區(qū)，或發(fā)生一系列變化阻礙與酶的作用而產(chǎn)生耐藥性。對(duì)四環(huán)素類抗生素，通常是產(chǎn)生核蛋白體(保護(hù)蛋白質(zhì)的合成)而影響抗菌活性?；前奉愃幬锖涂咕鲂﹦t會(huì)干擾E.coli的葉酸代謝過程，進(jìn)而影響核酸代謝。

2.2.3 細(xì)菌外膜通透性改變

通透性的改變直接影響藥物通過菌體外膜。E.coli突變導(dǎo)致的外膜某種特異膜孔蛋白(如OmpF、OmpC等 )發(fā)生結(jié)構(gòu)或數(shù)量改變后，使該蛋白通道關(guān)閉甚至消失，從而導(dǎo)致對(duì)多種抗生素耐藥。

2.2.4 主動(dòng)外排作用

外排泵是一類構(gòu)造特殊的膜轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白質(zhì)，能將多種抗生素從細(xì)菌的細(xì)胞質(zhì)中擠出來，包括β-內(nèi)酰胺類、四環(huán)素類、氟喹諾酮類、氨基糖苷類和磷霉素等，從而阻止藥物在菌體內(nèi)聚積。目前，外排泵分為5個(gè)家族：RND、SMR、MFS、ABC和MATE，在E.coli中以RND家族為主。

3 結(jié)語

現(xiàn)實(shí)生活中，養(yǎng)殖戶隨意選藥、用藥，甚至濫用藥物現(xiàn)象；獸藥市場秩序不良，同一有效成分命名不規(guī)范、產(chǎn)品有效成分含量不足等，都會(huì)促使細(xì)菌耐藥現(xiàn)象的產(chǎn)生。因此，定期監(jiān)測和加強(qiáng)宣傳教育，對(duì)于我國抗生素藥物的有效管理和使用十分必要。另外在實(shí)際生產(chǎn)中還應(yīng)考慮聯(lián)合用藥，輪換用藥，合理使用抗生素，并研制新型抗生素等，以減少耐藥性的發(fā)生。