崔浩然，郭雪峰,2*，金 巍

（1.塔里木大學(xué)動(dòng)物科學(xué)學(xué)院，新疆阿拉爾 843300；2.塔里木畜牧科技兵團(tuán)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，新疆阿拉爾8 433002；3.南京農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物科技學(xué)院，江蘇南京 210032）

牛羊養(yǎng)殖是我國重要的產(chǎn)業(yè)支柱，對(duì)于我國脫貧攻堅(jiān)和提高人民生活水平有著舉足輕重的作用，在過去35 年間我國的牛肉產(chǎn)量增加25.03 倍，羊肉產(chǎn)量增加8.93 倍，我國現(xiàn)已是世界羊肉生產(chǎn)第一大國，牛肉生產(chǎn)第三大國[1]。我國未來在發(fā)展規(guī)模飼養(yǎng)的同時(shí)，還要推動(dòng)綠色養(yǎng)殖，減少畜牧養(yǎng)殖對(duì)環(huán)境的壓力，對(duì)牛羊養(yǎng)殖提出了更高的要求和更嚴(yán)格的規(guī)范[2]。

瘤胃作為反芻動(dòng)物重要的消化器官，是天然的發(fā)酵罐，內(nèi)部含有豐富的瘤胃微生物。瘤胃微生物菌群的結(jié)構(gòu)和相對(duì)豐度處于相對(duì)穩(wěn)定的動(dòng)態(tài)平衡，該平衡對(duì)于維持瘤胃內(nèi)環(huán)境穩(wěn)定、在反芻動(dòng)物的消化和吸收營養(yǎng)物質(zhì)過程中起著重要的作用[3-4]。隨著現(xiàn)代分子生物技術(shù)的發(fā)展，對(duì)反芻動(dòng)物瘤胃微生物的研究也日益深入。眾多研究指出，合理地調(diào)控瘤胃微生物菌群結(jié)構(gòu)能夠改善瘤胃發(fā)酵、減少飼料浪費(fèi)，對(duì)于畜牧生產(chǎn)有十分重要的意義[5-6]。本文介紹國內(nèi)外關(guān)于影響反芻動(dòng)物瘤胃微生物因素的相關(guān)研究進(jìn)展，旨在為畜牧養(yǎng)殖中合理調(diào)控瘤胃微生物菌群結(jié)構(gòu)、綠色高效養(yǎng)殖提供參考依據(jù)。

1 瘤胃微生物的組成與功能

瘤胃內(nèi)部存在著復(fù)雜多樣的微生物，包括細(xì)菌、原蟲、厭氧真菌以及少量噬菌體等，這些微生物與反芻動(dòng)物機(jī)體存在互作關(guān)系。如反芻動(dòng)物利用纖維素降解菌產(chǎn)生的纖維降解酶將飼糧中的纖維素消化降解轉(zhuǎn)化為揮發(fā)性脂肪酸（VFA）等物質(zhì)；瘤胃真菌產(chǎn)生多種酶參與纖維素和半纖維素的降解過程；原蟲能參與瘤胃中纖維素和淀粉的消化；因此，瘤胃內(nèi)的細(xì)菌、真菌和原蟲等相互協(xié)調(diào)、相互制約共同維持著瘤胃內(nèi)環(huán)境的平衡與穩(wěn)定[7-9]。穩(wěn)定的瘤胃微生物區(qū)系在維持機(jī)體的健康、提高動(dòng)物生產(chǎn)性能、改善動(dòng)物產(chǎn)品質(zhì)量等方面有重要意義。

2 影響反芻動(dòng)物瘤胃微生物區(qū)系的因素

反芻動(dòng)物的瘤胃微生物菌群結(jié)構(gòu)會(huì)在與外界環(huán)境接觸和交流中發(fā)生改變，同時(shí)會(huì)受日齡、品種、飼糧、飼養(yǎng)方式、飼料添加劑等因素的影響。Henderson 等[10]對(duì)來自35 個(gè)國家的32 種不同品種的742 頭反芻動(dòng)物（包括水牛、野牛、綿羊、山羊、鹿科、駱駝科）瘤胃微生物的研究發(fā)現(xiàn)，動(dòng)物的品種、地區(qū)以及飼糧均會(huì)影響瘤胃中微生物菌群結(jié)構(gòu)。

2.1 動(dòng)物因素

2.1.1 日齡 幼畜的瘤胃微生物會(huì)在出生后吮吸母乳和

接觸外界環(huán)境過程中迅速定殖，其豐度會(huì)隨著日齡的增長而發(fā)生變化。Fonty 等[11]研究發(fā)現(xiàn)，纖維降解菌和產(chǎn)甲烷菌在羔羊出生后3～4 d 便可以在瘤胃內(nèi)觀察到，且這些細(xì)菌的相對(duì)數(shù)量在出生后1 周左右就接近成熟瘤胃中觀察到的水平。Jami 等[12]研究發(fā)現(xiàn)，犢牛的瘤胃微生物菌群在出生后1 d 便開始逐步建立，隨著日齡的增長瘤胃內(nèi)乳酸桿菌（Lactobacillus）的豐度逐漸降低，而與纖維素降解相關(guān)的產(chǎn)琥珀酸絲狀桿菌（F.succinogenes）、白色瘤胃球菌（R.albus）、黃色瘤胃球菌（R.flavefaciens）的相對(duì)數(shù)量有增加趨勢(shì)，在斷奶后其瘤胃微生物的多樣性逐漸趨于穩(wěn)定。韓旭峰[13]研究發(fā)現(xiàn)，幼畜早期瘤胃內(nèi)的優(yōu)勢(shì)菌群主要以蛋白降解菌為主，在飼喂開食料之后參與淀粉代謝和纖維素降解的菌群開始增殖，與幼畜相比，成年動(dòng)物瘤胃牛鏈球菌（Streptococcus bovis）和脂解厭氧弧桿菌（Anaerovibrio lipolytica）的相對(duì)含量更高，其中脂解厭氧弧桿菌是瘤胃內(nèi)重要的脂肪降解菌，牛鏈球菌是反芻動(dòng)物瘤胃內(nèi)主要的淀粉降解菌，二者的相對(duì)含量與精飼料代謝能力相關(guān)。眾多研究表明，日齡是影響反芻動(dòng)物瘤胃微生物菌群結(jié)構(gòu)的重要因素，其主要原因是幼畜的瘤胃處于逐漸發(fā)育的過程。

2.1.2 母體效應(yīng) 反芻動(dòng)物幼畜的瘤胃微生物菌群不僅會(huì)受外界環(huán)境和飼養(yǎng)條件的影響，母體效應(yīng)也是影響幼畜瘤胃微生物的重要因素之一。De Barbieri 等[14]以不同結(jié)構(gòu)的飼糧飼喂懷孕的美利奴羊直至羔羊斷奶，發(fā)現(xiàn)改變母羊的飼糧能夠改變羔羊瘤胃內(nèi)菌群結(jié)構(gòu)的變化，其中椰子油飼糧組母羊的羔羊瘤胃內(nèi)普雷沃氏菌（Prevotella）的相對(duì)數(shù)量顯著高于蜂蜜飼糧組，但母體效應(yīng)的影響會(huì)在斷奶后隨著幼畜日齡的增長逐漸減弱。關(guān)于母體效應(yīng)的研究較少，其作用機(jī)理尚不明確。

2.1.3 品種 動(dòng)物的品種差異是影響瘤胃微生菌群結(jié)構(gòu)的重要因素。不同品種之間瘤胃微生菌群結(jié)構(gòu)具有相似性，但不同菌群的相對(duì)豐度存在一定差異。King 等[15]研究發(fā)現(xiàn)，在相同飼養(yǎng)條件下，娟姍牛和荷斯坦牛的瘤胃菌群結(jié)構(gòu)相似度很高，而娟姍牛瘤胃內(nèi)產(chǎn)甲烷短桿菌的相對(duì)豐度顯著高于荷斯坦牛。韓帥[16]研究發(fā)現(xiàn)，呼杜雜一代羔羊瘤胃內(nèi)總產(chǎn)甲烷菌、脂解厭氧弧桿菌、反芻月型單胞菌（Selenomonas ruminantium）、牛鏈球菌數(shù)目群高于呼倫貝爾羔羊。Cersosimo 等[17]研究指出，奶牛的瘤胃微生物菌群結(jié)構(gòu)受飼糧因素的影響更大。以上研究表明，不同品種動(dòng)物間存在的遺傳學(xué)差異會(huì)引起瘤胃內(nèi)部分菌落相對(duì)含量的差異，因此對(duì)不同品種的動(dòng)物采取不同的飼養(yǎng)管理是實(shí)際生產(chǎn)的關(guān)鍵，而且由動(dòng)物性因素造成的瘤胃菌群差異是可以在飼養(yǎng)過程中改變的。

2.2 飼糧因素

2.2.1 飼糧結(jié)構(gòu) Yá?ez-Ruiz 等[18]研究發(fā)現(xiàn)，羔羊的瘤胃微生菌群結(jié)構(gòu)受飼糧結(jié)構(gòu)的影響，產(chǎn)生的變化可以持續(xù)到動(dòng)物成年。Li 等[19]發(fā)現(xiàn)，飼糧的精粗比能夠影響反芻動(dòng)物的瘤胃微生物菌群結(jié)構(gòu)，飼喂高精料飼糧能夠促使綿羊瘤胃內(nèi)淀粉降解菌和蛋白質(zhì)降解菌的增殖，而纖維降解菌的生長受到抑制，其中脂解厭氧弧桿菌、反芻月型單胞菌、牛鏈球菌數(shù)顯著增加，而產(chǎn)甲烷短桿菌相對(duì)含量下降最明顯。瘤胃內(nèi)甲烷的產(chǎn)生量與飼料中的粗飼料比例呈正相關(guān)，大量的甲烷產(chǎn)生不僅會(huì)造成飼料資源浪費(fèi)也會(huì)給環(huán)境帶來一定壓力。王海榮[20]研究表明，不同精粗比的飼糧對(duì)蘇尼特綿羊瘤胃真菌、細(xì)菌的濃度和數(shù)量影響差異不顯著，但是纖維降解菌的相對(duì)含量隨精料增加呈下降趨勢(shì)，其中精粗比對(duì)產(chǎn)琥珀酸絲狀桿菌影響不顯著，對(duì)白色瘤胃球菌、黃色瘤胃球菌的影響更加顯著。產(chǎn)琥珀酸絲狀桿菌不僅是瘤胃內(nèi)重要的纖維降解菌，也參與部分淀粉的降解過程，因此產(chǎn)琥珀酸絲狀桿菌在高精比的飼糧結(jié)構(gòu)中其相對(duì)含量也不會(huì)顯著降低。胡紅蓮等[21]發(fā)現(xiàn)，隨著飼糧中非纖維性碳水化合物與中性洗滌纖維的比例（NFC/NDF）增高，奶山羊瘤胃細(xì)菌總數(shù)量有增加趨勢(shì)，其中嗜淀粉瘤胃桿菌（R.amylophilus）、牛鏈球菌、乳酸桿菌增加明顯，白色瘤胃球菌、黃色瘤胃球菌數(shù)量呈下降趨勢(shì)。李嵐捷[22]研究發(fā)現(xiàn)，隨著NFC/NDF 比例下降，犢牛瘤胃內(nèi)VFA中乙酸比例增加，丙酸比例降低，當(dāng)飼糧NFC 含量高時(shí)犢牛瘤胃內(nèi)優(yōu)勢(shì)菌群為厚壁菌門和擬桿菌門，并指出犢牛的瘤胃尚在發(fā)育階段，瘤胃內(nèi)的微生物以蛋白降解菌為主對(duì)纖維物質(zhì)的消化能力較弱。普宣宣等[23]研究發(fā)現(xiàn)，當(dāng)NFC/NDF 比例變大時(shí)卡拉庫爾羊瘤胃內(nèi)參與淀粉降解的微生物為鏈球菌屬和產(chǎn)琥珀酸絲狀桿菌的相對(duì)豐度會(huì)增加。有研究表明，在高精料飼糧下反芻動(dòng)物瘤胃內(nèi)牛鏈球菌、嗜淀粉瘤胃桿菌、乳酸桿菌、反芻月形單細(xì)胞菌和埃氏巨型球菌的相對(duì)數(shù)量會(huì)顯著增加，尤其是牛鏈球菌、乳酸桿菌的活躍會(huì)產(chǎn)生大量乳酸，引起反芻動(dòng)物的亞急性瘤胃酸中毒（Subacute Reminal Acidosis，SARA），而纖維降解菌（如黃色瘤胃球菌、白色瘤胃球菌和產(chǎn)琥珀酸絲狀桿菌）的數(shù)量會(huì)因缺少纖維素作為底物和瘤胃內(nèi)pH 下降而減少[24-26]。綜上所述，高精料的飼糧結(jié)構(gòu)會(huì)引起產(chǎn)酸菌的活躍，使瘤胃內(nèi)環(huán)境的pH 下降，微生物多樣性減少，并有可能引起瘤胃酸中毒，為實(shí)際產(chǎn)生中合理配比飼糧提供參考。

2.2.2 飼糧蛋白質(zhì)水平和來源 飼糧中蛋白質(zhì)水平和來源也會(huì)影響反芻動(dòng)物的瘤胃微生物區(qū)系相對(duì)結(jié)構(gòu)。Renata 等[27]以3 種不同蛋白水平飼糧飼喂內(nèi)洛爾牛，發(fā)現(xiàn)高蛋白水平飼糧能夠引起瘤胃內(nèi)產(chǎn)琥珀酸絲狀桿菌和纖溶芽孢桿菌的相對(duì)數(shù)量和豐度增加，而白色瘤胃球菌的相對(duì)數(shù)量和豐度減少。但是，唐鵬[28]研究表明，陜北白絨山羊的瘤胃微生物豐度會(huì)隨著飼糧中蛋白水平的提高而降低，擬桿菌門的豐度顯著高于對(duì)照組，其中普雷沃氏菌增加最顯著。王海榮[20]研究發(fā)現(xiàn)，不同氮源飼糧對(duì)瘤胃內(nèi)原蟲數(shù)量影響更加顯著。以上研究表明，高蛋白水平飼糧能夠引起纖維降解菌（如黃色瘤胃球菌、白色瘤胃球菌等）相對(duì)含量降低，而產(chǎn)琥珀酸絲狀桿菌、纖溶芽孢桿菌和普雷沃氏菌等相對(duì)含量會(huì)增加，其中普雷沃氏菌參與淀粉和蛋白質(zhì)的分解作用，受蛋白質(zhì)水平的影響最為顯著。

2.2.3 飼糧中粗飼料種類 反芻動(dòng)物飼喂不同種類的粗飼料能夠影響反芻動(dòng)物的瘤胃菌群結(jié)構(gòu)。李玲玉[29]研究發(fā)現(xiàn)，微貯稻草組西門塔爾雜交牛瘤胃液中細(xì)菌的平均菌群豐度和多樣性高于新鮮玉米秸稈組，而真菌菌群豐度和多樣性低于新鮮玉米秸稈組。張畢陽[30]發(fā)現(xiàn)，在飼糧中添加燕麥干草可以提高纖維降解菌的相對(duì)含量，而以淀粉為發(fā)酵底物的瘤胃原蟲相對(duì)數(shù)量會(huì)減少。張冬強(qiáng)[31]研究發(fā)現(xiàn)，改變飼糧中苜蓿草粉的比例不會(huì)改變波爾山羊瘤胃微生物擬桿菌門和厚壁菌門的優(yōu)勢(shì)，其微生物的多樣性和豐度會(huì)隨著飼糧中苜蓿草粉比例的增加而增加，其原因可能是飼料中特有的活性物質(zhì)產(chǎn)生的影響，如苜蓿草粉中含有苜蓿皂苷、苜蓿葉蛋白等活性物質(zhì)，對(duì)瘤胃微生物的增殖有一定促進(jìn)作用。以上研究表明，飼喂不同類型的粗飼料會(huì)影響反芻動(dòng)物瘤胃微生物菌群結(jié)構(gòu)的變化，其原因與飼糧類型及其所含的活性物質(zhì)密切相關(guān)。

2.3 飼料添加劑

2.3.1 益生菌 益生菌作為一種綠色、安全、可靠的飼料添加劑已經(jīng)在生產(chǎn)實(shí)踐中得到廣泛應(yīng)用，在飼糧中添加益生菌是能夠影響瘤胃微生物菌群結(jié)構(gòu)的重要因素[32]。丁赫等[33]研究發(fā)現(xiàn)，在杜×寒雜交羊的飼糧中添加復(fù)合益生菌制劑夠增加瘤胃微生物菌群的多樣性，瘤胃液中擬桿菌門、疣微菌門和互養(yǎng)菌門的相對(duì)豐度增加，而變形菌門的相對(duì)豐度降低。李常瑞[34]研究發(fā)現(xiàn)，在低精料飼糧中添加復(fù)合益生菌能使綿羊瘤胃內(nèi)總細(xì)菌數(shù)及產(chǎn)琥珀酸絲狀桿菌、黃色瘤胃球菌、乳酸桿菌相對(duì)豐度增加，其中纖維降解菌（產(chǎn)琥珀酸絲狀桿菌、黃色瘤胃球菌）相對(duì)豐度的增加能夠促進(jìn)高纖維飼糧消化；而在高精料飼糧中添加復(fù)合益生菌能使綿羊瘤胃內(nèi)厭氧真菌、產(chǎn)琥珀酸絲狀桿菌、嗜淀粉瘤胃桿菌的相對(duì)豐度升高，而牛鏈球菌、總產(chǎn)甲烷菌的相對(duì)豐度降低，其中產(chǎn)琥珀酸絲狀桿菌、嗜淀粉瘤胃桿菌、牛鏈球菌參與瘤胃內(nèi)的淀粉降解過程，牛鏈球菌是瘤胃內(nèi)主要的乳酸生成菌，牛鏈球菌數(shù)量的減少能夠減少反芻動(dòng)物瘤胃乳酸中毒的風(fēng)險(xiǎn)；在不同飼糧中添加復(fù)合益生菌能夠提高瘤胃pH、降低氨態(tài)氮（NH3-N）濃度、提高VFA 濃度。上述研究表明，在不同飼糧中添加復(fù)合益生菌對(duì)反芻動(dòng)物瘤胃微生物的多樣性有促進(jìn)作用，有利于營養(yǎng)物質(zhì)的消化吸收，而且在高精料飼糧下添加益生菌能夠提高瘤胃液pH，減少反芻動(dòng)物瘤胃酸中毒的風(fēng)險(xiǎn)。

2.3.2 其他添加劑 陳丹丹[35]發(fā)現(xiàn)，在綿羊飼糧中添加桑葉黃酮（MLF）、白藜蘆醇（Res）、大蒜素（AL）和茶皂素（TS）能夠提高瘤胃揮發(fā)性脂肪酸濃度，添加MLF、Res 能夠提高瘤胃NH3-N 濃度，添加AL、TS 能夠降低瘤胃NH3-N 濃度，4 種添加物均能夠使瘤胃液總細(xì)菌數(shù)量增加，纖維分解菌（如產(chǎn)琥珀酸絲狀桿菌、黃色瘤胃球菌、白色瘤胃球菌、溶纖維丁酸弧菌）的相對(duì)豐度增加，產(chǎn)甲烷菌和原蟲數(shù)量減少，促進(jìn)纖維飼料在瘤胃內(nèi)的降解。有研究發(fā)現(xiàn)，在飼糧中添加牛至精油能夠降低瘤胃中瘤胃內(nèi)總細(xì)菌數(shù)量增加，白色瘤胃球菌的相對(duì)數(shù)量會(huì)增多，而產(chǎn)琥珀酸絲狀桿菌數(shù)量降低，瘤胃內(nèi)NH3-N 濃度降低，而且具有抗氧化功能和免疫功能的牛至精油能夠促進(jìn)羔羊的胃腸道發(fā)育[36-37]。Song 等[38]發(fā)現(xiàn)，在飼糧中添加外源性纖溶酶能夠提高樂至黑山羊飼料酸性洗滌纖維（ADF）和中性洗滌纖維（NDF）的消化率，降低瘤胃NH3-N 濃度，增加瘤胃VFA 的濃度，在高NDF 飼糧中添加纖維素酶會(huì)使瘤胃產(chǎn)琥珀酸絲狀桿菌的豐度降低，主要原因可能是纖維素酶會(huì)參與纖維素的降解過程，會(huì)與纖維降解菌形成競(jìng)爭關(guān)系。張智安等[39]發(fā)現(xiàn)，在湖羊的基礎(chǔ)飼糧中添加蜜蜂肽能夠顯著提高湖羊的日增重，提高湖羊瘤胃中反芻獸新月形單胞菌的數(shù)量，反芻獸新月形單胞菌是乳酸利用菌，反芻獸新月形單胞菌在瘤胃內(nèi)的相對(duì)豐度與瘤胃酸中毒密切相關(guān)。高雨飛[40]發(fā)現(xiàn)，在高精料飼糧中添加煙酸能夠使瘤胃細(xì)菌的豐富度和多樣性降低，但會(huì)使原蟲數(shù)量增加，抑制丁酸產(chǎn)生菌的增殖，使瘤胃pH 升高，減少瘤胃酸中毒的風(fēng)險(xiǎn)。以上研究表明，適當(dāng)?shù)奶砑觿┛梢愿纳屏鑫肝⑸锶郝涞慕M成，能夠提高飼料消化率，促進(jìn)揮發(fā)性脂肪酸的產(chǎn)生，增強(qiáng)免疫力，維持動(dòng)物機(jī)體健康，其中煙酸、蜜蜂肽等添加劑能夠提高瘤胃pH，減少反芻動(dòng)物瘤胃酸中毒的風(fēng)險(xiǎn)。

2.4 飼養(yǎng)管理模式 我國畜牧生產(chǎn)中常見的飼養(yǎng)模式主要有舍飼、定時(shí)散放、全生態(tài)散養(yǎng)和放牧后補(bǔ)飼等，不同的飼養(yǎng)方式也是影響瘤胃微生物區(qū)系的重要因素之一[41]。張娟等[42]研究發(fā)現(xiàn)，阿爾巴斯白絨山羊舍飼育肥可增加部分瘤胃微生的相對(duì)豐度，其中產(chǎn)琥珀酸絲狀菌、脂解厭氧弧桿菌數(shù)量的增加最顯著。Cui 等[43]研究發(fā)現(xiàn)，舍飼燕麥干草組綿羊瘤胃細(xì)菌群落豐富度和多樣性顯著高于自然放牧組，且僅在舍飼組瘤胃內(nèi)發(fā)現(xiàn)了放線菌。韓帥[16]研究發(fā)現(xiàn)，在放牧補(bǔ)飼羔羊瘤胃內(nèi)脂解厭氧弧桿菌相對(duì)豐度較放牧組顯著增加，總細(xì)菌、黃色瘤胃球菌、反芻月型單胞菌、牛鏈球菌和嗜淀粉瘤胃桿菌的數(shù)量高于放牧組。孫國平[44]研究發(fā)現(xiàn)，舍飼方式下成年絨山羊瘤胃中產(chǎn)琥珀酸絲狀桿菌和原蟲的數(shù)量和瘤胃液中總細(xì)菌數(shù)量均高于放牧組。脂解厭氧弧桿菌是瘤胃內(nèi)唯一的脂肪降解菌，其數(shù)量與飼料營養(yǎng)品質(zhì)密切相關(guān)，牛鏈球菌、嗜淀粉瘤胃桿菌是瘤胃內(nèi)主要的淀粉降解菌，其數(shù)量會(huì)隨飼糧結(jié)構(gòu)中的精料比例增加而增加[45]。因此，由飼養(yǎng)管理方式引起的瘤胃菌群結(jié)構(gòu)的差異，其原因可能是舍飼模式下能夠提供良好的飼養(yǎng)管理、豐富合理的飼糧，能更好地維持反芻動(dòng)物的瘤胃微生物菌群的多樣性。

3 小 結(jié)

瘤胃微生物在反芻動(dòng)物消化營養(yǎng)物質(zhì)和維持機(jī)體健康方面都扮演著十分重要的角色，而瘤胃微生物菌群結(jié)構(gòu)會(huì)受諸多因素的影響，合理的調(diào)控瘤胃微生物菌群結(jié)構(gòu)，不僅能夠提高反芻動(dòng)物的健康水平，還能改善反芻動(dòng)物產(chǎn)品更好地滿足生產(chǎn)生活的需求。目前對(duì)瘤胃微生物菌群的調(diào)控尚在探索階段，而且瘤胃內(nèi)微生數(shù)量十分巨大，且結(jié)構(gòu)復(fù)雜，尚有許多微生物的功能和相互作用尚不明了，對(duì)瘤胃微生物菌群的調(diào)控是否能廣泛應(yīng)用生產(chǎn)實(shí)踐，尚需進(jìn)一步深入研究。