葉 飛，史桂霞，王曉艷，涂 珊，張志輝，曾麗雄

1中南大學(xué)湘雅三醫(yī)院心內(nèi)科，湖南 長(zhǎng)沙 410013；2長(zhǎng)沙衛(wèi)生職業(yè)學(xué)院，湖南 長(zhǎng)沙 410013

高血壓流行形勢(shì)日趨嚴(yán)峻，目前預(yù)計(jì)全球已逾10億高血壓患者，且每年超過(guò)900萬(wàn)例死亡與高血壓的并發(fā)癥有關(guān)［1］。腎交感神經(jīng)射頻消融術(shù)（RDN）是一項(xiàng)利用射頻能量選擇性去腎交感神經(jīng)而降低高血壓患者血壓的介入技術(shù)。腎交感傳入神經(jīng)的激活可減少腎血流量及水鹽排泄，傳出神經(jīng)的激活可能增加交感神經(jīng)系統(tǒng)活性，而RDN則可能通過(guò)逆?zhèn)魃鲜鰴C(jī)制降低血壓，去腎交感的降壓效應(yīng)在大量動(dòng)物實(shí)驗(yàn)及臨床研究中也得到驗(yàn)證［2-5］。而高血壓與動(dòng)脈僵硬關(guān)系密切、互為因果［6］，進(jìn)一步研究也發(fā)現(xiàn)，RDN在降低患者血壓的同時(shí)可降低血管阻力、改善動(dòng)脈僵硬度［7,8］。此外，有證據(jù)表明在正常人群中交感神經(jīng)活性與脈搏波傳導(dǎo)速度相關(guān)，且這種相關(guān)性獨(dú)立于血壓、年齡、心率等因素［9］。但現(xiàn)有研究并未揭示RDN改善血管功能與降壓效應(yīng)之間的關(guān)系，交感神經(jīng)活性等因素對(duì)于RDN改善血管功能作用的影響亦不明確，故本研究擬在高血壓犬模型構(gòu)建成功后，通過(guò)對(duì)其進(jìn)行RDN干預(yù)以明確RDN對(duì)高血壓犬血壓及動(dòng)脈硬度的影響，并探討其可能的作用機(jī)制。

1 材料和方法

1.1 主要試劑、材料和儀器

犬一氧化氮（NO）ELISA試劑盒、犬內(nèi)皮型一氧化氮合酶（eNOS）ELISA試劑盒、犬血管緊張素Ⅱ（Ang Ⅱ）ELISA試劑盒、犬去甲腎上腺素（NE）ELISA試劑盒（上海邦奕生物科技有限公司）；肌酐測(cè)定試劑盒（富士膠片和光純藥株式會(huì)社）；電子天平秤ES-1100（湘平科技發(fā)展有限公司）；BP 2010-E 型智能無(wú)創(chuàng)動(dòng)物血壓測(cè)試儀（Softron Biotechnology）；旋渦混合器（TAITEC）；麻醉呼吸機(jī)Sunny2100A（瑞得伊格爾科技有限公司）；低溫離心機(jī)H2050R-1（湘儀實(shí)驗(yàn)室儀器開(kāi)發(fā)有限公司）；超純水器Option-Q7（ELGA Labwater）；溫控水浴搖床OLS200（Grant）；723型分光光度計(jì)（上海精密儀器儀表有限公司）；酶聯(lián)免疫檢測(cè)儀（LABSYSTEMS DRAGON）；7600-020 型全自動(dòng)生化分析儀（日立）；RDN所用超滑導(dǎo)絲（泰爾茂株式會(huì)社）；一次性使用血管鞘（強(qiáng)生）；一次性使用Y型閥和三聯(lián)三通連通板（麥瑞通醫(yī)療設(shè)備有限公司）；腎血管造影導(dǎo)管（泰爾茂株式會(huì)社）；數(shù)字減影血管造影Allura Xper FD10（飛利浦）；射頻消融儀IBI 1500T及IBI腎動(dòng)脈消融導(dǎo)管（圣猶達(dá)醫(yī)療用品有限公司）；彩色多普勒超聲LOGIQ7（GE）。

1.2 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物

實(shí)驗(yàn)開(kāi)始2周前于上海實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心購(gòu)得10～12月齡同品系合格純種比格犬共16只，雌雄各半，均委托中南大學(xué)湘雅動(dòng)物部?jī)?nèi)分籠飼養(yǎng)。飼養(yǎng)間內(nèi)設(shè)有照明系統(tǒng)、排風(fēng)系統(tǒng)、飲水和投食等必要裝置，飼養(yǎng)環(huán)境設(shè)定為：溫度22±2 ℃，濕度（40～70）%，予以人工光照控制明暗周期各12 h。實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的管理及處置已經(jīng)中南大學(xué)湘雅三醫(yī)院倫理委員會(huì)批準(zhǔn)（倫理審批號(hào)2017-S099），符合動(dòng)物倫理管理要求。

1.3 實(shí)驗(yàn)方案

所有比格犬均打上耳標(biāo)編號(hào)，根據(jù)性別不同采用隨機(jī)數(shù)字表將16只犬按2∶1∶1的比例隨機(jī)分為RDN組（n=8）、假手術(shù)組（n=4，sham組）和對(duì)照組（n=4，control組）。將RDN組與假手術(shù)組比格犬均構(gòu)建成為高血壓犬，RDN組比格犬進(jìn)行RDN處理，術(shù)后3月復(fù)查腎動(dòng)脈造影；假手術(shù)組僅在導(dǎo)管室操作臺(tái)上行腎動(dòng)脈造影而不實(shí)施RDN。對(duì)照組比格犬不實(shí)施上述有創(chuàng)性干預(yù)處理。

1.4 高血壓犬動(dòng)物模型的構(gòu)建

采用高鹽高脂飼養(yǎng)方案在3月內(nèi)構(gòu)建成高血壓犬動(dòng)物模型。對(duì)照組犬持續(xù)給予普通配方犬糧進(jìn)行基礎(chǔ)飼養(yǎng)，而RDN組與假手術(shù)組比格犬在普通配方犬糧基礎(chǔ)上額外添加輔食并一直持續(xù)至實(shí)驗(yàn)結(jié)束。輔食富含鈉鹽及飽和脂肪酸，主要包括食用豬油、食鹽、犬用罐頭食品等，以滿足高鹽高脂飲食飼養(yǎng)的需要。

1.5 RDN的實(shí)施

1.5.1 術(shù)前準(zhǔn)備 對(duì)實(shí)驗(yàn)犬進(jìn)行背部及雙側(cè)腹股溝區(qū)備皮；然后應(yīng)用法國(guó)維克舒泰（7 mg/kg）和速眠新（0.1 mg/kg）肌肉注射麻醉；麻醉成功后，犬取仰臥位固定于操作臺(tái)上，并迅速行氣管插管，接麻醉呼吸機(jī)監(jiān)測(cè)心率、血壓及血氧飽和度，同時(shí)粘貼射頻消融電極背部貼片。

1.5.2 RDN 流程 腹股溝區(qū)常規(guī)消毒、鋪巾，采用Seldinger法穿刺股動(dòng)脈，置入6F動(dòng)脈鞘；然后在超滑導(dǎo)絲引導(dǎo)下沿鞘送入5F腎動(dòng)脈造影導(dǎo)管，將造影導(dǎo)管依次置于左右腎動(dòng)脈開(kāi)口處行選擇性腎動(dòng)脈造影；造影結(jié)束后撤回造影導(dǎo)管，Sham組完成上述流程后即結(jié)束操作、繼續(xù)下文所述術(shù)后處理，RDN 組則沿鞘置入6F RDC指引導(dǎo)管于腹主動(dòng)脈內(nèi)；沿指引導(dǎo)管將5F 4 mm電極標(biāo)準(zhǔn)射頻消融導(dǎo)管置于一側(cè)腎動(dòng)脈內(nèi)，由遠(yuǎn)至近依次沿著腎動(dòng)脈上、下、前、后壁進(jìn)行螺旋形消融，消融模式為溫度控制模式，溫度控制在45～55 ℃，功率設(shè)定為8 W，每側(cè)腎動(dòng)脈消融3～4個(gè)點(diǎn)，每個(gè)點(diǎn)消融2 min直至阻抗逐漸下降10%以上，在消融過(guò)程中，必要時(shí)可經(jīng)指引導(dǎo)管腔內(nèi)行選擇性腎動(dòng)脈造影以進(jìn)行定位；單側(cè)腎動(dòng)脈消融完畢后再按上述方法進(jìn)行對(duì)側(cè)腎動(dòng)脈消融；雙側(cè)腎動(dòng)脈消融結(jié)束后進(jìn)行雙側(cè)腎動(dòng)脈造影［10］。

1.5.3 術(shù)后處理 撤管、拔鞘，傷口以無(wú)菌紗布覆蓋、壓迫止血、繃帶加壓包扎；肌肉注射青霉素預(yù)防術(shù)后感染。

1.6 指標(biāo)檢測(cè)

1.6.1 體質(zhì)量 清晨同一時(shí)間，在實(shí)驗(yàn)犬空腹、安靜狀態(tài)下采用電子秤進(jìn)行測(cè)量，單位為kg，重復(fù)測(cè)量3次，取平均值；基線時(shí)間為適應(yīng)性飼養(yǎng)1周后，高血壓犬建模成功后或RDN術(shù)前及RDN術(shù)后3月需統(tǒng)一測(cè)量體質(zhì)量，期間每2周進(jìn)行1次體質(zhì)量測(cè)量。

1.6.2 血壓和心率 測(cè)量時(shí)間同1.6.1。在實(shí)驗(yàn)犬空腹、安靜狀態(tài)下采用智能無(wú)創(chuàng)動(dòng)物血壓儀測(cè)量比格犬清醒時(shí)尾動(dòng)脈血壓。先將比格犬置于犬固定架上，設(shè)置好血壓儀的參數(shù)，待實(shí)驗(yàn)動(dòng)物犬完全平靜后將套袖輕輕放置于犬尾根部，儀器即可自動(dòng)測(cè)量并在液晶屏幕上顯示血壓及心率值，如此重復(fù)測(cè)量3次，取其平均值，記錄收縮壓（SBP）、舒張壓（DBP）及脈壓（PP）。

1.6.3 實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)指標(biāo) 采用酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定法測(cè)定實(shí)驗(yàn)犬血清NO、eNOS、Ang Ⅱ、NE的濃度，采用肌酐酶（HMMPS）法檢測(cè)血清肌酐濃度。所有實(shí)驗(yàn)犬均在基線、高血壓犬建模成功后及術(shù)后3月分批采血，采血途徑均取實(shí)驗(yàn)犬一側(cè)大隱靜脈，采血量為3 mL；成功采集到血標(biāo)本后，用低溫離心機(jī)以3000 r/min的轉(zhuǎn)速離心15 min后分離血清，將其置于超低溫保存箱保存?zhèn)溆谩?/p>

1.6.4 血管阻力指數(shù)（RI）檢測(cè)前讓實(shí)驗(yàn)犬充分飲水，背側(cè)備皮；實(shí)驗(yàn)犬處于安靜狀態(tài)下，將超聲探頭置于腎動(dòng)脈附近，緩慢調(diào)整探頭方向直至獲得穩(wěn)定清晰的信號(hào)。根據(jù)多普勒超聲儀軟件中自動(dòng)顯示的數(shù)值記錄腎動(dòng)脈收縮期峰值流速（PSⅤ）以及舒張末期流速（EDⅤ），再根據(jù)公式RI=1-EDⅤ/PSⅤ計(jì)算RI值。重復(fù)測(cè)量3次，取其平均值為RI值。

1.7 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

所有數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)均采用SPSS 20.0，定量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差的形式描述，各組前后比較采用配對(duì)t檢驗(yàn)，相關(guān)測(cè)定指標(biāo)的組間比較采用單因素方差分析，LSD法用于3組間兩兩比較檢驗(yàn)，若方差不齊則采用不等方差假設(shè)項(xiàng)下的Tamhane's T2或非參數(shù)檢驗(yàn)。血壓、RI、交感活性等指標(biāo)變化的相關(guān)性分析采用Pearson相關(guān)分析方法。所有數(shù)據(jù)均符合正態(tài)分布。P＜0.05認(rèn)為差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。

2 結(jié)果

2.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物一般資料

對(duì)所有比格犬進(jìn)行基線資料的分析，結(jié)果顯示RDN組、假手術(shù)組及對(duì)照組比格犬的平均SBP差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P=0.868）；平均DBP 差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P=0.545）。3組比格犬基線水平的平均血壓、RI、體質(zhì)量、心率、血清肌酐濃度、eNOS濃度、NO濃度、Ang Ⅱ濃度及NE濃度差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P均＞0.05，表1）。

表1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物犬基線特征Tab.1 Baseline characteristics and blood biochemical profiles of the beagles(Mean±SD)

2.2 RDN對(duì)血壓的影響

2.2.1 收縮壓變化 經(jīng)3 月飼養(yǎng)，高血壓動(dòng)物模型均構(gòu)建成功，RDN 組及假手術(shù)組實(shí)驗(yàn)犬血壓均在140/90 mmHg以上。建模成功后，RDN組、假手術(shù)組及對(duì)照組比格犬的平均SBP差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P=0.001）。對(duì)建模成功至術(shù)后3月的SBP變化幅度分析，RDN組、假手術(shù)組、對(duì)照組的SBP變化幅度差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P=0.006），其中RDN組SBP降幅顯著大于假手術(shù)組與對(duì)照組（P＜0.05，圖1）。

圖1 RDN術(shù)前后實(shí)驗(yàn)動(dòng)物SBP的變化幅度Fig.1 Amplitude of mean SBP variation in the 3 groups after RDN.*P=0.004 vs control group;#P=0.013 vs sham group.

2.2.2 舒張壓變化 高血壓犬建模成功后，RDN組、假手術(shù)組及對(duì)照組的平均DBP 差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P=0.019）。從成功建模至術(shù)后3月，RDN組、假手術(shù)組、對(duì)照組的DBP變化幅度差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P=0.016），其中RDN組DBP降幅顯著大于對(duì)照組（P=0.007），但與假手術(shù)組比較，二者差異不顯著（P=0.052，圖2）。

圖2 RDN術(shù)前后實(shí)驗(yàn)動(dòng)物DBP的變化幅度Fig.2 Changes of mean DBP in the 3 groups after RDN.*P=0.007 vs control group;#P=0.052 vs sham group.

2.3 RDN對(duì)動(dòng)脈硬度的影響

建模成功后，RDN組、假手術(shù)組及對(duì)照組比格犬的平均RI差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P=0.006）。從建模成功后到術(shù)后3月，RDN組、假手術(shù)組及對(duì)照組的RI變化幅度差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P=0.043）。兩兩比較顯示，RDN組RI降幅均顯著大于與對(duì)照組及假手術(shù)組（P＜0.05，圖3）。

圖3 RDN術(shù)前后實(shí)驗(yàn)動(dòng)物RI的變化幅度Fig.3 Changes of mean RI in the 3 groups after RDN.*P=0.032 vs control group;#P=0.043 vs sham group.

2.4 RDN對(duì)血管內(nèi)皮功能的影響

建模成功后及RDN術(shù)后，實(shí)驗(yàn)動(dòng)物eNOS、NO及Ang Ⅱ的濃度組間比較均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P＞0.05，表2、3）。

表2 建模后實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的血管內(nèi)皮功能Tab.2 Vascular endothelial function of the beagles after modeling

表3 RDN術(shù)后實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的血管內(nèi)皮功能Tab.3 Vascular endothelial function of the beagles after RDN(Mean±SD)

2.5 RDN對(duì)交感活性的影響

建模成功后，RDN組、假手術(shù)組、對(duì)照組的平均NE濃度差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P=0.020），兩兩比較顯示RDN組NE濃度顯著高于對(duì)照組（P=0.014），而與假手術(shù)組無(wú)顯著差異（P=0.560）。

建模成功后至術(shù)后3月，RDN組、假手術(shù)組、對(duì)照組的NE濃度變化差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P=0.032），且RDN組NE濃度降幅顯著大于假手術(shù)組（P=0.014），但與對(duì)照組相比差異不顯著（P=0.080，圖4）。

圖4 RDN術(shù)前后實(shí)驗(yàn)動(dòng)物NE的變化幅度Fig.4 Changes of serum NE concentrations in the 3 groups after RDN.*P=0.080 vs control group;#P=0.014 vs sham group.

2.6 RDN組動(dòng)脈硬度變化與血壓、血管內(nèi)皮功能及交感活性變化的相關(guān)性分析

RDN組比格犬RI的變化與SBP、DBP、NO濃度、NE濃度的變化存在顯著相關(guān)（P＜0.05），而與eNOS濃度、AngⅡ濃度的相關(guān)性無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05，表4）。

表4 RDN組RI的變化與血壓、eNOS、NO、Ang Ⅱ及NE濃度變化的相關(guān)性Tab.4 Correlation analysis of the changes of RI in RDN group

2.7 RDN的安全性評(píng)價(jià)

RDN組有4條比格犬術(shù)后出現(xiàn)腹股溝血腫，通過(guò)壓迫止血后血腫吸收消失；RDN組和假手術(shù)組分別有8條、3條比格犬在術(shù)中可監(jiān)測(cè)到一過(guò)性心率減慢，最低至40 bpm，未予特殊處理后心率逐漸恢復(fù)正常，心率的一過(guò)性減慢考慮與麻醉藥品的心臟抑制作用有關(guān)。術(shù)后3個(gè)月3組比格犬復(fù)測(cè)體質(zhì)量、心率、血清肌酐差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。

3 討論

RDN采用血管介入技術(shù)，利用置于腎動(dòng)脈內(nèi)的消融導(dǎo)管頭端釋放射頻能量而對(duì)走行于腎動(dòng)脈外膜的交感神經(jīng)纖維造成透壁損傷，使其變性、壞死，以期達(dá)到持續(xù)降低動(dòng)脈血壓的目的。自RDN技術(shù)問(wèn)世以來(lái)，其作用效應(yīng)及相關(guān)機(jī)制引發(fā)了諸多爭(zhēng)議［11］。早期臨床研究顯示RDN可有效降低患者血壓［2,3,5］，而隨著Symplicity HTN-3研究結(jié)果的發(fā)布［12］，這一項(xiàng)技術(shù)的降壓效果備受質(zhì)疑，甚至一度陷入沉寂。近年來(lái)，SPYRAL HTN-OFF MED、SPYRAL HTN-ON MED、RADIANCE-HTN SOLO等一系列隨機(jī)對(duì)照臨床試驗(yàn)采用改進(jìn)的消融策略，其結(jié)果均顯示了RDN 降壓治療的有效性［13-15］。RDN的降壓作用在動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中也得到證實(shí)。有研究對(duì)9條肥胖性高血壓獵犬進(jìn)行了雙側(cè)RDN術(shù)，隨訪8周后發(fā)現(xiàn)收縮壓由術(shù)前的157±5 mmHg降至133±3 mmHg（P＜0.01），平均動(dòng)脈壓較術(shù)前亦降低了9 mmHg（P＜0.01）［16］。Linz等［17］也發(fā)現(xiàn)RDN能夠抑制阻塞性睡眠呼吸暫停綜合征實(shí)驗(yàn)豬血壓升高及心房顫動(dòng)的發(fā)生。本研究結(jié)果顯示，高血壓犬經(jīng)RDN治療后，其收縮壓、舒張壓均與基礎(chǔ)飼料喂養(yǎng)的對(duì)照犬類似，兩組比較均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，這表明RDN可抑制高鹽高脂飲食的升血壓作用，進(jìn)一步佐證了RDN的降壓效應(yīng)。高血壓是動(dòng)脈壓力的持續(xù)升高，可引起血管結(jié)構(gòu)的損害和動(dòng)脈硬化的形成，進(jìn)而可導(dǎo)致全身多處靶器官損害，同時(shí)血管功能的改變亦可能引起外周血管阻力增加而導(dǎo)致血壓持續(xù)升高，二者可謂相互作用、互為因果［6］。Brandt等［8］發(fā)現(xiàn)110例頑固性高血壓患者接受RDN術(shù)后，在6個(gè)月隨訪時(shí)不但血壓明顯下降，反映血管僵硬度的指標(biāo)如脈搏波傳導(dǎo)速度、主動(dòng)脈增強(qiáng)指數(shù)較對(duì)照組也均有顯著降低。Ott等［7］的研究結(jié)果也提示RDN在降低患者血壓同時(shí)可降低血管阻力、改善動(dòng)脈僵硬度。Tsioufis等［18］對(duì)9頭家豬實(shí)施了RDN術(shù)，以了解RDN對(duì)腎臟血流動(dòng)力學(xué)影響的急慢性效應(yīng)，結(jié)果發(fā)現(xiàn)無(wú)論是術(shù)后即刻還是術(shù)后一月，RDN均能夠改善腎血流動(dòng)力學(xué)狀況，其中RI值出現(xiàn)了顯著降低。RI作為腎臟疾病終點(diǎn)事件的預(yù)測(cè)因子，可反映腎臟內(nèi)灌注情況的變化，也能夠反映全身動(dòng)脈僵硬程度，RI值的升高提示動(dòng)脈僵硬度增加、血管順應(yīng)性的下降和亞臨床動(dòng)脈硬化的發(fā)生［19］。本研究發(fā)現(xiàn)，RDN可顯著降低高血壓犬的RI值，提示RDN能夠降低外周血管阻力、改善動(dòng)脈彈性。同時(shí)，我們也看到，隨著RDN組和假手術(shù)組實(shí)驗(yàn)動(dòng)物犬血壓逐漸升高，RI值也較對(duì)照組出現(xiàn)了顯著的升高，而經(jīng)RDN治療后高血壓犬逐步恢復(fù)了與對(duì)照組相當(dāng)?shù)腞I水平。這也說(shuō)明血壓的升高伴隨著外周血管阻力的增加和血管彈性功能的下降，而血壓下降的同時(shí)亦并存動(dòng)脈硬度的改善。

血管功能的改變與動(dòng)脈硬化的形成和血管內(nèi)皮的作用息息相關(guān)［20］。血管內(nèi)皮是血管壁的生理屏障，還具有重要的合成分泌功能，可直接調(diào)控和影響血管舒縮功能。內(nèi)皮可分泌產(chǎn)生AngⅡ等血管活性物質(zhì)調(diào)控血管的舒張、收縮，以維持血管張力和保持其順應(yīng)性［21］。其中AngⅡ是重要的血管收縮因子，該物質(zhì)可直接作用于血管平滑肌細(xì)胞，抑制NOS合成NO，NO分泌減少可引起血管舒張功能下降、動(dòng)脈僵硬度增加，同時(shí)AngⅡ可以激活交感神經(jīng)系統(tǒng)釋放去甲腎上腺素而引起血管收縮［22］。多種心血管危險(xiǎn)因素則可通過(guò)氧化應(yīng)激等方式降低NO的生物活性，而最終導(dǎo)致血管結(jié)構(gòu)和功能發(fā)生改變［23］。血管功能減退、動(dòng)脈壁粘滯度增加也被證實(shí)與嚴(yán)重的內(nèi)皮功能障礙有關(guān)［24］。本研究對(duì)內(nèi)皮功能進(jìn)行了評(píng)價(jià)以期能夠進(jìn)一步明確RDN對(duì)血管功能影響的機(jī)制。研究結(jié)果未顯示血管內(nèi)皮功能在不同實(shí)驗(yàn)動(dòng)物組之間存在有顯著差異，RDN改善動(dòng)脈僵硬度的作用與血管內(nèi)皮功能改變似無(wú)直接關(guān)聯(lián)。我們發(fā)現(xiàn)高血壓比格犬出現(xiàn)了NE濃度的明顯升高，而經(jīng)RDN治療后，高血壓犬雖未能恢復(fù)與對(duì)照組相似的水平，但較未經(jīng)RDN治療者的NE水平顯著降低，這表明RDN通過(guò)去腎交感神經(jīng)的方式能夠顯著降低機(jī)體交感活性。而近期有研究報(bào)道交感系統(tǒng)活性與中心和外周動(dòng)脈僵硬存在密切關(guān)系［25］。本研究進(jìn)一步分析結(jié)果顯示RI值的變化與血壓、血清NO以及NE濃度均存在顯著相關(guān)性，其中，RI與血壓、血清NE濃度水平存在正相關(guān)，意指血壓升高越明顯、交感活性越高，伴隨而來(lái)的血管阻力會(huì)越大、動(dòng)脈功能受損也越嚴(yán)重；血清NO濃度與RI存在負(fù)相關(guān)，表明血管內(nèi)皮的合成分泌功能對(duì)于動(dòng)脈彈性具有重要的保護(hù)作用。上述結(jié)果表明，RDN改善血管彈性的作用與神經(jīng)、體液因素均存在相關(guān)性，且這一作用可能與降低交感活性、促進(jìn)NO合成有關(guān)。目前臨床上尚缺乏明確方法或效應(yīng)指標(biāo)用于RDN消融終點(diǎn)及即時(shí)療效的判定，但研究顯示消融導(dǎo)管記錄的阻抗變化可以在手術(shù)過(guò)程中提供即時(shí)反饋而可用于監(jiān)測(cè)和評(píng)估RDN消融效果［26,27］。消融過(guò)程中阻抗逐漸下降10～20%表明導(dǎo)管良好的組織貼靠和有效的消融，而阻抗迅速下降意味著導(dǎo)管貼靠不佳、阻抗迅速升高則提示局部焦痂形成。在心臟消融手術(shù)中，術(shù)者可以采用壓力感應(yīng)導(dǎo)管通過(guò)觀察導(dǎo)管貼靠壓力實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)消融效果，但由于比格犬腎動(dòng)脈內(nèi)徑細(xì)小，無(wú)法置入壓力感應(yīng)導(dǎo)管而只能采用口徑較小的非壓力感應(yīng)消融導(dǎo)管，因此本研究采用監(jiān)測(cè)阻抗變化的方法以確保消融效果。另外，動(dòng)物實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)表明從腎動(dòng)脈血管內(nèi)腔到腎交感神經(jīng)距離的中位數(shù)為2.1 mm、第75百分位數(shù)為4.4 mm［28］。在保證導(dǎo)管良好貼靠的情況下，RDN 術(shù)中6 W/60 s 的消融方式可以達(dá)到平均6.5 mm的組織損傷深度［26］，而實(shí)現(xiàn)絕大部分腎交感神經(jīng)的消融損傷。參考類似研究的消融方案［27,29］，我們采用8 W/120 s的消融策略，在監(jiān)測(cè)溫度和阻抗的情況下沿著腎動(dòng)脈進(jìn)行螺旋形分區(qū)消融以期達(dá)到有效地去腎交感神經(jīng)治療目標(biāo)。我們的前期研究結(jié)果也驗(yàn)證了這一方法的可行性和可靠性［10］。

本研究亦存在一定局限性，如未能進(jìn)一步明確RDN對(duì)血壓及血管功能影響的具體分子機(jī)制及作用通路，也未能揭示血壓降低與交感活性改變之間的因果關(guān)系；此外，由于比格犬體型較小，血管條件較差，未必能夠完全反映高血壓患者機(jī)體真實(shí)改變的情況。

綜上所述，對(duì)于高鹽高脂飲食構(gòu)建的高血壓犬模型，RDN能夠安全有效降低其血壓和改善動(dòng)脈僵硬度，其中對(duì)動(dòng)脈硬度的改善可能與交感活性和血壓的降低及促進(jìn)NO合成有關(guān)。本研究對(duì)于RDN影響血管功能的作用機(jī)制提供了一定的理論依據(jù)。