楊惠宇，趙 瑩，潘發(fā)林

（長(zhǎng)春市水產(chǎn)品質(zhì)量安全檢測(cè)中心，吉林長(zhǎng)春 130033）

0 引言

食品安全與百姓的生活息息相關(guān)，水產(chǎn)品在養(yǎng)殖以及運(yùn)輸過程由于藥物濫用、水體污染等種種原因?qū)е卖~肉中殘留一系列如抗生素、激素、以及貝類、藻類毒素等，為了確保和改善水產(chǎn)品質(zhì)量安全，人們對(duì)水產(chǎn)品檢測(cè)的效率和準(zhǔn)確度的要求不斷提高，高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜技術(shù)（HPLC-MS/MS）以其高效、靈敏、準(zhǔn)確度高等技術(shù)優(yōu)勢(shì)成為了水產(chǎn)品檢測(cè)的確證方法。

1 高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜技術(shù)

高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法（HPLC-MS/MS）是一種集高效分離和多組分定性、定量為一體的檢測(cè)方法，對(duì)高沸點(diǎn)、不揮發(fā)和熱不穩(wěn)定化合物的分離和鑒定具有獨(dú)特優(yōu)勢(shì)，因而特別適用于藥物殘留的定量和確證分析，其靈敏度最低可達(dá)ng/kg級(jí)。目前質(zhì)譜儀主要分為四級(jí)質(zhì)譜、離子阱質(zhì)譜、傅里葉變換質(zhì)譜等，在水產(chǎn)品藥物殘留檢測(cè)方面常用的為三重四級(jí)桿質(zhì)譜儀。

高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜技術(shù)的原理是混合樣品中的各組分通過色譜柱流出的時(shí)間不同，從而實(shí)現(xiàn)各組分的分離，各組分再一次到達(dá)離子源的位置，并且不斷離子化的過程。儀器將離子信號(hào)轉(zhuǎn)換成電信號(hào)，并傳輸給計(jì)算機(jī)系統(tǒng)，對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行處理，產(chǎn)生不同的質(zhì)譜峰，通過峰面積的計(jì)算進(jìn)行定量檢測(cè)?？傮w說來，高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜技術(shù)是將色譜與質(zhì)譜的優(yōu)勢(shì)結(jié)合起來的一種技術(shù)，同時(shí)也規(guī)避了二者單獨(dú)使用時(shí)的缺陷。對(duì)于一些干擾性很強(qiáng)且不易在色譜柱上分離的物質(zhì)高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜技術(shù)可以很好的解決這個(gè)問題，串聯(lián)質(zhì)譜技術(shù)可以將待測(cè)物的分子離子破碎，同時(shí)產(chǎn)生豐富的碎片，從而確定目標(biāo)化合物并對(duì)其進(jìn)行定量分析，且分析速度快，靈敏度高，該方法已成為分析檢測(cè)中最有效的方法[1]。

2 高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜技術(shù)在水產(chǎn)品安全檢測(cè)中的應(yīng)用

高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜技術(shù)已發(fā)展為水產(chǎn)品質(zhì)量安全檢測(cè)領(lǐng)域的一種常規(guī)技術(shù)，下面將其在抗生素類、激素類、毒素以及農(nóng)藥等有害物質(zhì)中的應(yīng)用進(jìn)行綜述。

2.1 水產(chǎn)品中抗生素的檢測(cè)

我國(guó)水產(chǎn)養(yǎng)殖多以分散的家庭經(jīng)營(yíng)為主，從業(yè)人員素質(zhì)偏低，安全意識(shí)不足，在養(yǎng)殖過程中“治”過于“防”，一旦水產(chǎn)品發(fā)生病害多憑經(jīng)驗(yàn)盲目用藥。同時(shí)很多養(yǎng)殖者并不清楚哪些是違禁藥物品，導(dǎo)致水產(chǎn)品中殘留過量抗生素，嚴(yán)重威脅人類健康。因此對(duì)于水產(chǎn)品中抗生素的檢測(cè)任重而道遠(yuǎn)。

抗生素種類繁多，且一種水產(chǎn)品中可能殘留多種藥物，這給水產(chǎn)品中抗生素殘留檢測(cè)帶來了一定的困難，因此檢測(cè)人員一直致力于研究新的檢測(cè)方法，如同時(shí)測(cè)定水產(chǎn)品多種抗生素的方法。黃原飛等[2]使用分子印跡聚合物固相萃取方法，利用超高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法同時(shí)測(cè)定水產(chǎn)品中11種氨基糖苷類藥物殘留，檢出限為1.0～10.0 μg/kg，回收率為78.4%～109.6%，該方法靈敏度高且重現(xiàn)性好。萬譯文等人[3]使用分散固相萃取的方法，利用液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜法建立了一種快速測(cè)定水產(chǎn)品中磺胺類、青霉素類、喹諾酮類抗生素的方法，該方法的檢出限為0.6～2.8 ng/g，定量限為1.5～6.0 ng/g，平均回收率為63.1%～99.8%，重現(xiàn)性和選擇性較好，使用于該類抗生素的檢測(cè)。

2.2 水產(chǎn)品中激素類的檢測(cè)

在水產(chǎn)行業(yè)中，除抗生素外激素殘留問題也是食品安全監(jiān)控的重點(diǎn)，許多水產(chǎn)養(yǎng)殖戶為了縮短養(yǎng)殖時(shí)間，帶來更多的經(jīng)濟(jì)效益，在養(yǎng)殖飼料中直接添加多種激素。而激素濫用導(dǎo)致的殘留會(huì)通過食物鏈進(jìn)入人體內(nèi)，嚴(yán)重危害人類健康，會(huì)導(dǎo)致肝臟受損、發(fā)育缺陷、還會(huì)產(chǎn)生內(nèi)分泌相關(guān)疾病等，因此各國(guó)制定了相關(guān)法規(guī)禁止使用激素類藥物，檢測(cè)人員也在激素檢測(cè)方面進(jìn)行了相關(guān)的研究。于慧娟等[4]通過同位素稀釋法，利用液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜技術(shù)對(duì)水產(chǎn)品中27種雌激素、孕激素和雄激素進(jìn)行檢測(cè)，該方法檢出限為0.5～2 μg/kg，添加量在2 μg/kg和10 μg/kg情況下，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差分別為5.3%～15%和2.3%～8.2%，平均回收率分別為73.0%～120%和79.0%～108%，該方法操作簡(jiǎn)單且靈敏度高，適用于檢測(cè)水產(chǎn)品中激素類的定量分析。

2.3 水產(chǎn)品中毒素類的檢測(cè)

在水產(chǎn)養(yǎng)殖中常見的毒素主要有貝類毒素、藻類毒素、真菌毒素、有機(jī)物分解有毒物質(zhì)等。藻類毒素以微囊藻毒素最為普遍，且危害性較大，該毒素不僅影響水生態(tài)環(huán)境，還會(huì)通過食物鏈傳遞，對(duì)養(yǎng)殖業(yè)以及人類健康造成威脅。貝類本身不產(chǎn)生毒素，但如果攝食了有毒藻類或與有毒藻類共生，則可能在體內(nèi)續(xù)集毒素，形成貝類毒素；真菌毒素多見于飼料管理不當(dāng)而導(dǎo)致的霉變；有機(jī)物分解毒素多見于水體污染，進(jìn)而導(dǎo)致水產(chǎn)品的間接污染，因此對(duì)該類毒素的檢測(cè)進(jìn)行了一系列的研究。陳立堅(jiān)等[5]建立了高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法同時(shí)測(cè)定水產(chǎn)品中7中微囊藻毒素，該方法定量限為0.2～0.5 μg/kg，回收率為71.5%～106%，該方法前處理操作簡(jiǎn)單，且準(zhǔn)確度高，適用于水產(chǎn)品中微囊藻毒素的檢測(cè)。

2.4 水產(chǎn)品中農(nóng)藥的檢測(cè)

近年來，稻田養(yǎng)殖水產(chǎn)品的模式逐漸興起，這種養(yǎng)殖方式可以實(shí)現(xiàn)種養(yǎng)互利共生，為養(yǎng)殖戶創(chuàng)造更多的經(jīng)濟(jì)效益。與此同時(shí)，在農(nóng)耕過程中農(nóng)藥、殺蟲劑的不合理使用對(duì)水產(chǎn)品的質(zhì)量安全產(chǎn)生一定的威脅，進(jìn)而威脅到人類的健康，為了更好的保障我國(guó)稻田水產(chǎn)品的質(zhì)量安全，建立一種有效的檢測(cè)方法尤為重要。劉慧慧等[6]建立了水產(chǎn)品中13種磺酰脲類除草劑的超高液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜的檢測(cè)方法，該方法檢出限為1.0 μg/kg，定量限為2.0 μg/kg，加標(biāo)回收率為75.45%～118.3%，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差為2.1%～14.5%。該方法穩(wěn)定，適用于13種磺酰脲類除草劑的同時(shí)測(cè)定。

2.5 水產(chǎn)品中麻醉劑的檢測(cè)

麻醉劑可以抑制中樞神經(jīng)系統(tǒng)，減少某些器官的組織活動(dòng)，在一定程度上具有鎮(zhèn)靜作用，一些不法商家為了提高水產(chǎn)品的存活率、降低運(yùn)輸成本，在養(yǎng)殖和運(yùn)輸過程中使用鎮(zhèn)靜劑，以減少因環(huán)境改變而造成的應(yīng)激反應(yīng)，但其安全性尚存在爭(zhēng)議，因此，建立一種準(zhǔn)確便捷的檢測(cè)方法具有實(shí)際意義，目前常用的鎮(zhèn)靜劑有丁香酚、苯佐卡因等。吳少明等[7]建立了同時(shí)測(cè)定水產(chǎn)品中6中丁香酚的超高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜方法，該方法檢出限在0.1～0.3 μg/kg之間，平均回收率在83.9%～105.4%之間，相對(duì)標(biāo)注偏差在1.8%～6.9%之間，該方法靈敏度高、結(jié)果準(zhǔn)確可靠，適用于水產(chǎn)品中丁香酚的檢測(cè)。

3 結(jié)語

綜上所述，液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)作為一種高效、高靈敏度、高準(zhǔn)確度和操作簡(jiǎn)便的分析方法，被廣泛的應(yīng)用于水產(chǎn)品質(zhì)量安全檢測(cè)領(lǐng)域，該技術(shù)綜合了液相色譜對(duì)復(fù)雜化合物的高分離能力和質(zhì)譜對(duì)化合物準(zhǔn)確的鑒別功能，可實(shí)現(xiàn)多種化合物的同時(shí)測(cè)定，有效的縮短了檢測(cè)時(shí)間，因此，對(duì)于需要處理復(fù)雜基質(zhì)的水產(chǎn)品檢測(cè)工作而言，液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜技術(shù)無疑將成為首選的最佳檢測(cè)手段，并且可以預(yù)見液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)將在水產(chǎn)品檢測(cè)中受到更多的關(guān)注和更廣泛的應(yīng)用。