張麗萍，劉瑞玲，韓延超，陳杭君，吳偉杰，房祥軍，郜海燕

（浙江省農(nóng)業(yè)科學(xué)院食品科學(xué)研究所 農(nóng)業(yè)農(nóng)村部果品產(chǎn)后處理重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室中國(guó)輕工業(yè)果蔬保鮮與加工重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室 浙江省果蔬保鮮與加工技術(shù)研究重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室 杭州 310021）

藍(lán)莓（Vaccinium Spp），又稱龍果、甸果、篤斯等，屬杜鵑花科（Ericaceae）越橘屬（Vaccinium），內(nèi)含黃酮醇、多酚、抗壞血酸、花青素等多種營(yíng)養(yǎng)活性成分，具有抗氧化、改善視力等多種保健效用[1-2]。然而，藍(lán)莓采后容易遭到病原微生物的侵害，嚴(yán)重影響果實(shí)的感官性狀與營(yíng)養(yǎng)品質(zhì)，商品價(jià)值降低，導(dǎo)致極大的經(jīng)濟(jì)耗損。研究表明藍(lán)莓果實(shí)采后主要致病菌為灰霉菌[3-4]。

成熟藍(lán)莓果實(shí)表面覆蓋有一層白色霜狀蠟?zāi)5-6]。前期研究發(fā)現(xiàn)，外表皮蠟質(zhì)受損的藍(lán)莓對(duì)病原菌易感性增加，軟化、衰老加速，采后腐爛率、病情指數(shù)上升，導(dǎo)致果實(shí)品質(zhì)劣變，貯藏期縮短[6-9]。不同種類的藍(lán)莓表皮蠟質(zhì)晶體結(jié)構(gòu)沒有顯著差異，為致密的管狀蠟質(zhì)[5]。藍(lán)莓蠟質(zhì)的組成成分相似，主要為三萜類物質(zhì)和VLC 脂肪族類物質(zhì)；其中熊果酸和齊墩果酸在許多藍(lán)莓品種中占總蠟的50%以上，是藍(lán)莓表皮蠟質(zhì)中含量最高的三萜類化合物[10]。

不少研究發(fā)現(xiàn)角質(zhì)層蠟質(zhì)組分與果實(shí)病害之間有密切聯(lián)系。Yin 等[11]指出，蘋果梨表皮蠟質(zhì)中的不同極性組分能夠不同程度地抑制鏈格孢菌孢子及菌絲活性。Li 等[12]指出油酸甲酯、棕櫚酸甲酯等可能是梨皮中的主要抗真菌物質(zhì)。此外，角質(zhì)層組分可作為信號(hào)分子參與宿主對(duì)病原微生物侵染的調(diào)控[13]。Fauth 等[14]發(fā)現(xiàn)角質(zhì)單體可以作為H2O2激發(fā)劑，誘導(dǎo)植物體內(nèi)產(chǎn)生H2O2以提高抗病性。Thomas 等[15]發(fā)現(xiàn)植物蠟質(zhì)組分甾醇參與微生物與植物間的相互作用，在一定程度上抵御微生物侵染。然而，有關(guān)表皮蠟質(zhì)組分對(duì)寄主防御體系與抗病能力的影響尚不清晰。

齊墩果酸與熊果酸均可抑制多種植物致病真菌生長(zhǎng)。如：齊墩果酸能夠抑制小麥赤霉病菌、白菜黑斑病菌、番茄早疫病菌等的生長(zhǎng)[16]。熊果酸能夠抑制蘋果赤星病菌[17]、柑橘青霉菌[18]等的生長(zhǎng)。齊墩果酸與熊果酸均有較好的抗氧化效果[19-20]。作為藍(lán)莓表皮蠟質(zhì)的主要組分，二者極有可能參與果實(shí)抵御病原菌入侵的過程。本文用齊墩果酸與熊果酸分別處理蠟質(zhì)完整與蠟質(zhì)去除的藍(lán)莓，研究藍(lán)莓生理、生化指標(biāo)的變化，探究藍(lán)莓表皮蠟質(zhì)中主要成分齊墩果酸與熊果酸在藍(lán)莓果實(shí)抵御灰霉菌侵染過程中所起作用。

1 材料與方法

1.1 材料與試劑

1.1.1 材料與處理 藍(lán)莓：本試驗(yàn)用藍(lán)莓品種為“粉藍(lán)”，于新昌兆豐生態(tài)園藍(lán)莓基地采收。采收時(shí)戴手套，小心保護(hù)果實(shí)表皮蠟?zāi)ぁ＿x擇成熟度、大小相對(duì)均勻，無蟲害、損傷，表皮蠟質(zhì)完整的藍(lán)莓果實(shí)。

將篩選后的藍(lán)莓果實(shí)，隨機(jī)分成6 組，用75%酒精噴灑消毒、晾干后進(jìn)行如下處理：1）無菌水噴灑表面；2）250 mg/mL 齊墩果酸噴灑表面；3）250 mg/mL 熊果酸噴灑表面；4）藍(lán)莓去除表皮蠟質(zhì)，無菌水噴灑表面；5） 藍(lán)莓去除表皮蠟質(zhì)，250 mg/mL齊墩果酸噴灑表面；6） 藍(lán)莓去除表皮蠟質(zhì)，250 mg/mL 熊果酸噴灑表面。熊果酸與齊墩果酸處理濃度由前期預(yù)試驗(yàn)得出。

每個(gè)處理設(shè)置3 個(gè)生物學(xué)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)用果50 顆，在室溫下自然晾干，噴灑灰霉菌孢子懸浮液，晾干，放入25 ℃恒溫箱中貯藏。設(shè)置6 個(gè)取樣點(diǎn)，分別于0，2，4，6，8，10 d 取樣，以液氮速凍，凍存于-50 ℃，測(cè)定相關(guān)指標(biāo)。

去蠟處理：將50 顆藍(lán)莓浸入50 mL 氯仿中振搖30 s，揮干溶劑。

灰霉菌：為實(shí)驗(yàn)室保藏菌株，從自然發(fā)病的“燦爛”藍(lán)莓中分離獲得。

1.1.2 試劑 熊果酸（UA）、齊墩果酸（OA），純度＞95%，購(gòu)于阿拉丁試劑公司。β-巰基乙醇、聚乙二醇、福林酚等均為國(guó)產(chǎn)分析純級(jí)試劑。

1.2 儀器與設(shè)備

數(shù)碼糖度計(jì)（PAL-1 型），日本ATAGO 公司；物性分析儀（TA XT Plus 型），英國(guó)SMS 公司；自動(dòng)滴定儀（877 Titrino plus 型），瑞士萬通；電子精密天平（JA260SB 型），上海精科天美科學(xué)儀器有限公司；紫外-可見分光光度計(jì) （WFZ UV-2802型），尤尼柯儀器有限公司；高速低溫離心機(jī)（5430R 型），德國(guó)EPPENDORF 公司；低溫恒溫培養(yǎng)箱（MIR-254-PC 型），日本PANASONIC 公司。

1.3 指標(biāo)測(cè)定

1.3.1 可溶性固形物（TSS）與可滴定酸（TA） 將藍(lán)莓果實(shí)擠壓出汁，4 層紗布過濾。分別采用數(shù)顯糖度計(jì)與自動(dòng)酸堿滴定儀測(cè)定TSS 與TA，TA 結(jié)果換算為檸檬酸百分比（%）。

1.3.2 失重率與腐爛率 失重率為果實(shí)減輕質(zhì)量占第0 天果實(shí)總質(zhì)量的百分比（%）。腐爛率為腐爛果個(gè)數(shù)占總數(shù)的百分比（%）。

1.3.3 硬度 硬度由物性分析儀測(cè)定。選取P/2型不銹鋼探頭（d=0.2 cm），穿刺速度1.0 mm/s，下壓距離0.8 cm，下壓力5.0 g，取峰高力度作為硬度，單位為kg/cm2。試驗(yàn)重復(fù)10 次。

1.3.4 抗壞血酸（VC）、總酚與花色苷 VC 含量測(cè)定參考曹建康等[21]的方法，結(jié)果表示為100 g 藍(lán)莓樣品中含有的VC 的質(zhì)量（mg），單位為mg/100 g?？偡雍繙y(cè)定參考Swain[22]的Folin-Ciocalteau法，結(jié)果表示為每1 g 藍(lán)莓鮮樣所含沒食子酸的質(zhì)量（mg），單位為mg/g?；ㄉ蘸繙y(cè)定參考宋德群等[23]的方法，結(jié)果表示為每1 g 藍(lán)莓樣品所含矢車菊素-3-葡萄糖苷的質(zhì)量（mg），單位為mg/g。

1.3.5 丙二醛 （MDA） MDA 含量的測(cè)定參考Heath 等[24]的方法，結(jié)果以每1 g 藍(lán)莓鮮樣中含有的MDA 物質(zhì)的量表示，單位為nmol/g。

1.3.6 抗病相關(guān)酶活 苯丙氨酸解氨酶（PAL）、過氧化物酶（POD）、多酚氧化酶（PPO），與β-1，3-葡聚糖酶（GLU）、幾丁質(zhì)酶（CHT）活力測(cè)定均參照曹建康等[21]的方法。

1.3.7 數(shù)據(jù)處理與分析 所有數(shù)據(jù)均采用Excel 2016 整理分析，采用SPSS Statistics 20 進(jìn)行Duncan 方差分析與Person 相關(guān)性分析（P＜0.01 表示差異極顯著；P＜0.05 表示差異顯著）。采用Origin 2018 繪制圖片，不同字母表示不同處理差異顯著。

2 結(jié)果與討論

2.1 齊墩果酸與熊果酸對(duì)藍(lán)莓病害程度的影響

藍(lán)莓表皮蠟質(zhì)與果實(shí)感官、營(yíng)養(yǎng)等品質(zhì)緊密相關(guān)[5]。如圖1a 所示，除去表皮蠟質(zhì)后藍(lán)莓果實(shí)表皮呈現(xiàn)光滑的藍(lán)黑色，更易受病原菌的侵染，發(fā)生腐爛、出汁、皺縮、霉變等現(xiàn)象，而齊墩果酸與熊果酸處理對(duì)蠟質(zhì)完整果實(shí)與去蠟果實(shí)均能起到減少病害、維持品質(zhì)的作用。如圖1b 所示，第10 天，齊墩果酸組與熊果酸組分別比對(duì)照組低22.22%和23.46%。如圖1c 所示，去蠟處理使果實(shí)腐爛率升高，去蠟組腐爛率最高，第10 天高達(dá)59.33%，而齊墩果酸與熊果酸處理后去蠟藍(lán)莓腐爛率分別降低21.54%和27.55%，說明蠟質(zhì)中的齊墩果酸與熊果酸能夠提高果實(shí)抵御病原菌的能力，降低腐爛率。

圖1 齊墩果酸與熊果酸對(duì)蠟質(zhì)完整/去蠟藍(lán)莓病害程度（a）、蠟質(zhì)完整藍(lán)莓腐爛率（b）和去蠟藍(lán)莓腐爛率（c）的影響Fig.1 Effect of oleanolic acid and ursolic acid on diease degree of waxy intact / dewaxed blueberry （a），decay rate of waxy intact bluberry （b） and decay rate of dewaxed bluberry （c）

2.2 齊墩果酸與熊果酸對(duì)藍(lán)莓品質(zhì)的影響

如圖2a 所示，藍(lán)莓持續(xù)失重，去蠟藍(lán)莓失重率高，齊墩果酸處理與熊果酸處理能夠大幅減緩果實(shí)失重率的升高。這與對(duì)歐洲李[25]、柑橘[26]等果實(shí)中的研究結(jié)果一致。貯藏第10 天時(shí)，對(duì)照組、齊墩果酸組、熊果酸組、去蠟組、去蠟+齊墩果酸組與去蠟+熊果酸組失重率分別為7.41%，4.90%，5.63%，7.81%，6.18%，7.04%。類似的，Parsons 等[27]對(duì)辣椒失水與角質(zhì)層組分的關(guān)系的研究表明：失水率與總?cè)萍隅薮己砍收嚓P(guān)，與烷烴與三萜加甾醇比值呈負(fù)相關(guān)。綜上，藍(lán)莓表皮蠟質(zhì)組分中的齊墩果酸與熊果酸有防止水分散失作用，利于果實(shí)品質(zhì)保持。

硬度可以直觀反映果實(shí)發(fā)生衰老、軟化和劣變的程度。從圖2b 可以看出貯藏期藍(lán)莓果實(shí)硬度輕微下降，去除蠟質(zhì)后硬度略有降低，且齊墩果酸組與熊果酸組果實(shí)硬度略低于無菌水處理組，差別并不顯著（P＞0.05），說明藍(lán)莓表皮蠟質(zhì)中的齊墩果酸與熊果酸對(duì)延緩果實(shí)硬度降低不明顯。

可滴定酸（TA）能夠間接說明果實(shí)劣變程度。由圖2c 可看出，藍(lán)莓TA 含量呈上升趨勢(shì)，尤其去蠟果實(shí)在第4 天后TA 急速上升。蠟質(zhì)受損后，藍(lán)莓對(duì)病原菌易感性增大，急劇代謝產(chǎn)酸；而齊墩果酸與熊果酸處理后，延緩了果實(shí)TA 含量的升高，并顯著低于無菌水處理。上述結(jié)果說明在病原菌侵染過程中，齊墩果酸與熊果酸處理可以減緩TA升高。

可溶性固形物（TSS）能夠體現(xiàn)果蔬的成熟及質(zhì)量情況。由圖2d 所示，藍(lán)莓果實(shí)去除表皮蠟質(zhì)后，對(duì)病原菌易感性增加，糖類等物質(zhì)消耗代謝為TSS，TSS 保持較高水平，然而很快又被消耗，迅速降低。而齊墩果酸與熊果酸處理能夠調(diào)控果實(shí)代謝系統(tǒng)，增加果實(shí)抗病能力，降低病原菌的破壞程度，延緩TSS 降低，因此TSS 含量高于無菌水處理。綜上，藍(lán)莓表皮蠟質(zhì)中的齊墩果酸與熊果酸在維持果實(shí)TSS 中起重要作用。

圖2 齊墩果酸與熊果酸對(duì)藍(lán)莓果實(shí)失重率（a）、硬度（b）、TA（c）和TSS（d）的影響Fig.2 Effects of oleanolic acid and ursolic acid on weight loss （a），firmness （b），TA（c） and TSS （d） of blueberry

2.3 齊墩果酸與熊果酸對(duì)藍(lán)莓活性物質(zhì)的影響

藍(lán)莓果實(shí)內(nèi)存在多種多酚類物質(zhì)，可控制病原菌分泌的酶類活性物質(zhì)，其氧化產(chǎn)物具有抗菌作用，是果實(shí)體內(nèi)重要防御素之一[28-29]。由圖3a 可知，除去蠟組外，其余組總酚含量在貯藏前期均有所上升；去蠟+齊墩果酸組與去蠟+熊果酸組始終顯著高于去蠟組（P＜0.05），齊墩果酸組和熊果酸組均高于對(duì)照組。這可能是因?yàn)橄炠|(zhì)中的齊墩果酸與熊果酸能夠產(chǎn)生信號(hào)以調(diào)控酚類物質(zhì)，抵御灰霉菌侵染。綜上，齊墩果酸與熊果酸可以誘導(dǎo)藍(lán)莓果實(shí)酚類物質(zhì)變化，抵御病原菌侵染。

抗壞血酸（VC）是果實(shí)內(nèi)清除活性氧的一種重要的抗氧化劑[30]。在果蔬受到微生物脅迫時(shí)，活性氧爆發(fā)，VC 能夠維持其活性氧代謝平衡。如圖3b 所示，去蠟藍(lán)莓果實(shí)VC 含量遠(yuǎn)低于蠟完好的藍(lán)莓果實(shí)。其中，熊果酸組去蠟+熊果酸組VC 含量顯著比對(duì)照組高（P＜0.05），而對(duì)照組與熊果酸組、去蠟組與去蠟+熊果酸組并無顯著性差異（P＞0.05）?？梢?，表皮蠟質(zhì)受損加速藍(lán)莓VC 流失，熊果酸利于VC 含量的保持，而齊墩果酸對(duì)VC 含量的影響不顯著。

圖3c 反映藍(lán)莓貯藏期間總花色苷含量的變化情況。去蠟果實(shí)花色苷含量在第2 天急劇降低。貯藏期間，齊墩果酸組始終顯著比對(duì)照組高（P＜0.05）。去蠟+齊墩果酸組始終高于去蠟組，并不顯著（P＞0.05）。熊果酸處理的果實(shí)，花色苷含量變化無明顯規(guī)律。推測(cè)可能是齊墩果酸與其它蠟質(zhì)組分協(xié)同調(diào)控藍(lán)莓花色苷，而熊果酸對(duì)花色苷影響并不顯著。

圖3 齊墩果酸與熊果酸對(duì)藍(lán)莓果實(shí)總酚（a）、抗壞血酸（b）和花色苷（c）的影響Fig.3 Effects of oleanolic acid and ursolic acid on total phenols （a），ascorbic acid （b）and anthocyanins （c） of blueberry

2.4 齊墩果酸與熊果酸對(duì)藍(lán)莓膜脂過氧化的影響

丙二醛（MDA）可以反映果實(shí)細(xì)胞膜脂過氧化與膜結(jié)構(gòu)被破壞的程度[31]。由于病原菌的侵染以及成熟衰老的進(jìn)行，藍(lán)莓中MDA 含量不斷上升，如圖4所示。其中，蠟質(zhì)受損果實(shí)更易發(fā)生劣變，MDA 大量積累。與無菌水處理相比，熊果酸與齊墩果酸處理能夠有效減緩MDA 的升高。第10 天時(shí)，對(duì)照組、齊墩果酸組、熊果酸組、去蠟組、去蠟+齊墩果酸組、去蠟+熊果酸組MDA 含量分別為4.80，3.69，2.91，9.90，6.10，6.61 nmol/g，齊墩果酸組、熊果酸組顯著比對(duì)照組低（P＜0.05），去蠟+齊墩果酸組、去蠟+熊果酸組顯著比去蠟組低（P＜0.05）。結(jié)果表明，齊墩果酸與熊果酸能夠抑制藍(lán)莓細(xì)胞膜脂過氧化，降低MDA 的含量。

圖4 齊墩果酸與熊果酸對(duì)藍(lán)莓果實(shí)MDA 的影響Fig.4 Effect of oleanolic acid and ursolic acid on MDA of blueberry

2.5 齊墩果酸與熊果酸對(duì)藍(lán)莓抗病相關(guān)酶活的影響

2.5.1 多酚氧化酶（PPO）與過氧化物酶（POD） PPO 能夠催化酚類物質(zhì)氧化生成醌類化合物，抑制病原菌分泌果膠和纖維素分解酶，降低果實(shí)病害程度[29]。如圖5a 所示，PPO 活性前期呈現(xiàn)上升趨勢(shì)，后期呈下降趨勢(shì)。蠟質(zhì)完整的藍(lán)莓PPO 酶活顯著高于去蠟藍(lán)莓（P＜0.05）。齊墩果酸與熊果酸處理的果實(shí)PPO 酶活顯著高于相應(yīng)無菌水處理的果實(shí)（P＜0.05）。說明蠟質(zhì)中的齊墩果酸與熊果酸能夠調(diào)控寄主的PPO 活性，從而提高果實(shí)抗病性。

POD 在果蔬組織受到病原微生物侵染時(shí)做出相應(yīng)的應(yīng)答反應(yīng)[28]。藍(lán)莓POD 活性變化如圖5b 所示，蠟質(zhì)完整的3 組果實(shí)前期上升、后期下降，而去除蠟質(zhì)的3 組果實(shí)POD 活性持續(xù)下降。齊墩果酸與熊果酸處理能夠提高果實(shí)POD 酶活；第10天，齊墩果酸組與熊果酸組比對(duì)照組分別高75.17%和125.65%，去蠟+齊墩果酸組與去蠟+熊果酸組比去蠟組分別高133.61%和197.48%。推測(cè)蠟質(zhì)中的齊墩果酸與熊果酸能夠激發(fā)果實(shí)POD的應(yīng)答反應(yīng)。

圖5 齊墩果酸與熊果酸對(duì)藍(lán)莓果實(shí)PPO（a）與POD（b）酶活的影響Fig.5 Effects of oleanolic acid and ursolic acid on PPO （a） and POD （b） activities of blueberry

2.5.2 幾丁質(zhì)酶（CHT）與β-1，3-葡聚糖酶（GLU） CHT 廣泛存在于果蔬體內(nèi)，通過降解幾丁質(zhì)破壞病原真菌的細(xì)胞壁，來增強(qiáng)果蔬抗病害能力[32]。由圖6a 可知，前期，去蠟+齊墩果酸與去蠟+熊果酸兩組CHT 活性迅速升高，未去除蠟質(zhì)的3 組果實(shí)CHT 活性差別不大；后期，齊墩果酸組顯著高于去蠟組（P＜0.05），去蠟+齊墩果酸組與去蠟+熊果酸組CHT 活性始終高于對(duì)照組，而熊果酸組波動(dòng)較大。這說明灰霉侵染過程中，蠟質(zhì)組分中的齊墩果酸與熊果酸不同程度地參與CHT 的調(diào)控。

GLU 與果蔬采后抗病性有密切聯(lián)系，許多非生物因子及生物因子都能誘導(dǎo)GLU 活性的變化[32]。如圖6b 所示，GLU 活性整體呈前期升高后期降低的趨勢(shì)，且去蠟的3 組果實(shí)高于蠟質(zhì)完整的3 組果實(shí)。第4 天后，齊墩果酸組、熊果酸組始終顯著高于對(duì)照組（P＜0.05），去蠟+齊墩果酸組、去蠟+熊果酸組GLU 活性始終顯著高于去蠟組（P＜0.05）。說明蠟質(zhì)中的齊墩果酸與熊果酸在果實(shí)抵御病原菌侵染過程中與誘導(dǎo)GLU 活性升高有關(guān)。

圖6 齊墩果酸與熊果酸對(duì)藍(lán)莓果實(shí)CHT（a）與GLU（b）酶活的影響Fig.6 Effects of oleanolic acid and ursolic acid on CHT （a） and GLU （b） activities of blueberry

2.5.3 苯丙氨酸解氨酶（PAL） PAL 與植物抵御病原微生物侵害的能力有重要聯(lián)系[33]。由圖7可知，在侵染過程中，由于果實(shí)衰老、腐爛嚴(yán)重，去除蠟質(zhì)的3 組藍(lán)莓果實(shí)的PAL 活性始終低于表皮蠟質(zhì)完整的3 組藍(lán)莓果實(shí)。后期齊墩果酸與熊果酸處理的果實(shí)PAL 活性均高于相應(yīng)無菌水處理的果實(shí)。其中，第6 天，去蠟+熊果酸組PAL 酶活顯著比去蠟組高（P＜0.05）。第8 天，熊果酸組顯著比對(duì)照組高（P＜0.05）。在第6、10 天，齊墩果酸組PAL 酶的活性顯著比對(duì)照組高（P＜0.05）。第8 天，去蠟+齊墩果酸組顯著高于去蠟組 （P＜0.05）?？梢?，齊墩果酸與熊果酸均能誘導(dǎo)PAL 活性升高，二者誘導(dǎo)效果并不顯著。

圖7 齊墩果酸與熊果酸對(duì)藍(lán)莓果實(shí)PAL 酶活的影響Fig.7 Effect of oleanolic acid and ursolic acid on PAL activities of blueberry

2.6 相關(guān)性分析

Person 相關(guān)性分析表明藍(lán)莓果實(shí)的腐爛率與失重率、TA 含量、MDA 含量呈極顯著正相關(guān)（P＜0.01），與硬度呈顯著負(fù)相關(guān)（P＜0.05），與TSS、VC、總酚、花色苷呈極顯著負(fù)相關(guān)（P＜0.01），說明病原菌侵染是導(dǎo)致藍(lán)莓果實(shí)細(xì)胞膜脂過氧化、營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)流失、質(zhì)量下降的重要原因。

此外，腐爛率與藍(lán)莓果實(shí)的CHT 活性呈極顯著正相關(guān)（P＜0.01），與PPO 活性、POD 活性、PAL活性呈極顯著負(fù)相關(guān)（P＜0.01），說明在宿主抵御病原物侵染過程中，PPO、POD、PAL、CHT 等酶發(fā)生應(yīng)答反應(yīng)，以應(yīng)對(duì)生物脅迫。藍(lán)莓果實(shí)去蠟后，不僅物理屏障被破壞，而且可能喪失了蠟質(zhì)組分中的信號(hào)分子，導(dǎo)致更容易受到灰霉菌孢子的影響，誘導(dǎo)防御體系發(fā)生應(yīng)答反應(yīng)。而藍(lán)莓表皮蠟質(zhì)中的齊墩果酸與熊果酸極有可能是作為一種信號(hào)分子，誘導(dǎo)調(diào)控藍(lán)莓果實(shí)相關(guān)抗病酶活，以提高果實(shí)抗病能力。Chu 等[34]研究表明貯藏過程中藍(lán)莓表皮蠟質(zhì)中三萜類化合物含量從68.69%上升到73.67%，其中熊果酸的相對(duì)含量明顯增多，這可能與果實(shí)激活體內(nèi)防御系統(tǒng)、抵御病原菌侵染有關(guān)。

圖8 相關(guān)性分析Fig.8 Correlation analysis

3 結(jié)論

去除藍(lán)莓表皮覆蓋著的白色蠟?zāi)ず?，果?shí)更易受到灰霉菌的侵染，腐爛率、TA、失重率等升高，TSS、VC、總酚、總花色苷等降低，極大地影響果實(shí)的商品價(jià)值。而齊墩果酸與熊果酸能夠在灰霉菌侵染過程中誘導(dǎo)果實(shí)應(yīng)答反應(yīng)，對(duì)防御酶活（PPO、POD、PAL、CHT、GLU） 的激活起到積極作用，提高果實(shí)抗病能力，減緩果實(shí)劣變。同時(shí)，齊墩果酸與熊果酸能夠降低果實(shí)膜脂過氧化程度（MDA），維持果實(shí)品質(zhì)（TSS、TA、硬度、發(fā)病率、失重率）與活性物質(zhì)（VC、總酚、總花色苷）。由此說明，外表皮蠟質(zhì)與藍(lán)莓果實(shí)抗病性有重要聯(lián)系，蠟質(zhì)中的齊墩果酸與熊果酸對(duì)提高藍(lán)莓果實(shí)采后抗病性，維持果實(shí)品質(zhì)有重要作用。然而，有關(guān)藍(lán)莓外表皮蠟質(zhì)中的齊墩果酸與熊果酸影響果實(shí)防御應(yīng)答反應(yīng)機(jī)理還需進(jìn)一步研究。