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養(yǎng)殖場非洲豬瘟病毒變異株防控技術(shù)指南

2022-01-20 05:44:04中國動物疫病預(yù)防控制中心,國家非洲豬瘟區(qū)域?qū)嶒?yàn)室
四川畜牧獸醫(yī) 2022年1期
關(guān)鍵詞:豬只豬瘟變異

1 病毒特點(diǎn)

非洲豬瘟病毒變異株包括基因缺失株、自然變異株、自然弱毒株等。與2018年傳入的非洲豬瘟病毒毒株相比,變異株基因組序列發(fā)生不同程度的改變,包括核苷酸突變、缺失、插入或短片段替換等,部分變異株失去紅細(xì)胞吸附活性。

從生物學(xué)特性看,部分病毒單基因缺失株的致病力與感染劑量呈相關(guān)性,病毒雙基因制發(fā)失株感染豬可間歇性排毒,病毒可以水平傳播。部分失去紅細(xì)胞吸附活性的變異株具有水平傳播能力,高劑量感染能引起亞急性或慢性病程,部分豬只死亡,低劑量感染引起非致死性的持續(xù)感染。從傳播性看,非洲豬瘟病毒變異株臨床傳播性與經(jīng)典毒株無明顯區(qū)別。從臨床特點(diǎn)看,臨床癥狀不典型,與2018 年傳入毒株有明顯差異,常表現(xiàn)為采食量下降、體表發(fā)紅、皮膚壞死、淋巴結(jié)腫大、肺炎等癥狀;顯微鏡下多器官特別是淋巴結(jié)和堅臟可見伴有梗塞和血栓的壞死和出血區(qū),以及慢性纖維化病變。從易感性看,妊娠母豬和育肥豬的易感性無明顯差異,妊娠母豬群體生產(chǎn)性能受影響較大。病毒感染潛伏期過后,母豬表現(xiàn)反復(fù)發(fā)燒,不食等癥狀,部分母豬出現(xiàn)流產(chǎn)、高比例死胎、乳房結(jié)痂等癥狀;初生仔豬活力差;育肥群靜止?fàn)顟B(tài)下的癥狀不顯著,應(yīng)激情況下可排毒,表現(xiàn)皮膚壞死,關(guān)節(jié)腫大,脾臟腫大、壞死等臨床癥狀和剖檢變化。

2 防控難點(diǎn)

2.1 隱蔽性強(qiáng) 非洲豬瘟病毒變異株感染潛伏期長,病豬初期無臨床表現(xiàn)或臨床癥狀不典型,致死率較低,不易被識別。感染變異株的豬群口腔排毒滯后,排毒不規(guī)律,采樣檢測很難及時發(fā)現(xiàn),導(dǎo)致豬群隱性帶毒并間歇性排毒,很難做到精準(zhǔn)清除,并且經(jīng)多次轉(zhuǎn)群、并群等操作,感染源可能遍布多棟豬舍,呈現(xiàn)多點(diǎn)同時發(fā)病的特點(diǎn)。實(shí)踐中,常有豬場在實(shí)時熒光定量PCR方法檢測時Ct 值較高,但因豬只臨床表現(xiàn)健康,未能及時采取有效措施,致使豬只在應(yīng)激和混合感染等因素誘發(fā)下發(fā)病。

2.2 檢測難度大 非洲豬瘟病毒變異株感染前期病毒滴度較低,感染后產(chǎn)生抗體延遲,常規(guī)鑒別診斷方法有局限性,在出現(xiàn)變異株的情況下,容易造成誤判。此外,過高頻次的全群普查也會增加交叉污染或擴(kuò)散風(fēng)險。因此如果監(jiān)測方案和檢測方法選擇不當(dāng),有可能造成病毒傳播和擴(kuò)散。

3 防控措施

3.1 加強(qiáng)臨床巡視 做好技術(shù)培訓(xùn),提高飼養(yǎng)人員識別能力,一旦發(fā)現(xiàn)豬只出現(xiàn)嗜睡、輕觸不起、采食量減少、拱料不食、發(fā)熱、皮膚發(fā)紅、關(guān)節(jié)腫脹、壞死、咳喘、腹式呼吸,育肥豬死淘率增高,母豬流產(chǎn)或出現(xiàn)死胎、木乃伊胎等可疑臨床表現(xiàn)時,第一時間采樣檢測。有條件的養(yǎng)殖場可使用紅外線熱成像儀對所有豬群進(jìn)行每日一次的體溫監(jiān)測,發(fā)現(xiàn)體溫異常豬只,及時進(jìn)行采樣檢測。通過每日體溫篩查,減少豬場采樣頻次,達(dá)到降本增效目的。

3.2 優(yōu)化監(jiān)測方案 針對變異株的病原特點(diǎn),優(yōu)化監(jiān)測方案。每日開展豬場場內(nèi)巡欄,監(jiān)測豬群臨床癥狀和體溫變化。定期開展場外環(huán)境采樣檢測。每周對豬群進(jìn)行病原和抗體監(jiān)測。監(jiān)測采樣時可對全群進(jìn)行20%~30%比率的抽樣檢測。在豬群進(jìn)行疫苗接種、轉(zhuǎn)群、云勢,或母豬分娩后,開展抽樣檢測。一旦豬只出現(xiàn)疑似臨床癥狀,立即采樣檢測。

3.1.1 育肥豬群 豬場發(fā)現(xiàn)臨床異常豬只后,立即對育肥豬群進(jìn)行大欄棉繩口腔液采樣,及時送檢進(jìn)行病原檢測。

3.1.2 產(chǎn)房 在母豬分免后,采集臍帶血、胎衣或胎衣等樣品以及母豬口鼻拭子聯(lián)合尾根血混樣樣品進(jìn)行病原檢測。

3.1.3 病死豬 在確保養(yǎng)殖場丙生物安全的情況下,及時采集病死豬淋巴結(jié)、肺臟等樣品在當(dāng)天送檢。有研究報道非洲豬瘟病毒變異株在豬淋巴結(jié)、且,肺臟病毒載量最高,采集相應(yīng)組織樣品進(jìn)行檢測,可提高檢出率。

3.1.4 環(huán)境 定期對豬場內(nèi)料槽、風(fēng)機(jī)等進(jìn)行環(huán)境樣品要測。國家非洲豬瘟區(qū)域?qū)嶒?yàn)室(廣州)研究發(fā)現(xiàn),養(yǎng)殖場內(nèi)料槽樣品的病毒核酸檢出時間早于豬只出現(xiàn)異常臨床癥狀的時間。

3.3 科學(xué)采樣檢測 國家非洲豬瘟區(qū)域?qū)嶒?yàn)室(廣州)研究發(fā)現(xiàn),采取口鼻拭子聯(lián)合尾根血混樣,或口鼻拭子聯(lián)合腹股溝淋巴結(jié)穿刺混樣的檢測采樣方法,可提高病原檢出率。同時還應(yīng)當(dāng)采集臨床異常豬的前腔靜脈血或尾靜脈血,分離血清后進(jìn)行非洲豬瘟病毒抗體檢測。

3.3.1 采樣 使用聚丙烯材質(zhì)拭子,避免作用頭部為棉花制品的拭子、含海藻酸鈣拭子以及木柄拭子,防止棉花纖維對蛋白質(zhì)吸附影響病毒洗脫效果及抑制PCR反應(yīng)的物質(zhì)影響檢測結(jié)果。

3.3.2 樣品保存 樣品保存管應(yīng)使用無菌、對核酸無吸附作用的螺旋蓋塑料管。每個樣品管應(yīng)再套一個樣品袋防止樣品泄露和污染。新鮮采集的臨床標(biāo)本應(yīng)在2~8 ℃條件下,在采集后2~4 h內(nèi)送至實(shí)驗(yàn)室。用于病毒分離和核酸檢測的樣品應(yīng)當(dāng)盡快進(jìn)行檢測,能在24 h內(nèi)檢測的樣品可置于4 ℃保存;24 h內(nèi)無法檢測的樣品則應(yīng)當(dāng)置于-70 ℃或以下保存(如無-70 ℃保存條件下,則于-20 ℃冰箱暫存)。

3.3.3 病原檢測方法 可采用非洲豬瘟病毒(P72/CD2v/MGF)三重實(shí)時熒光定量PCR 方法,也可采用發(fā)明專利CN112646934B提供的非洲豬瘟病毒(P72/EGFP/mCherry)三重監(jiān)察部時熒光定量PCR 方法檢測病毒核酸。對非常見基因變異組臨床癥狀特殊的病例,需進(jìn)一步送相關(guān)實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行全基因組測序鑒別。

3.3.4 抗體檢測方法 采用《非洲豬瘟診斷技術(shù)》(GB/T 18648)規(guī)定的間接ELISA、阻斷ELISA等方法進(jìn)行抗體檢測。

3.4 強(qiáng)化生物安全防護(hù)措施 我國非洲豬瘟防控實(shí)踐表明,落實(shí)好常態(tài)化防控措施能有效阻止非洲豬瘟病毒感染。針對非洲豬瘟病毒變異株的流行特點(diǎn),要持續(xù)從人、車、物、今朝等方面強(qiáng)化防控措施。

3.4.1 人員管理 人員在進(jìn)場前3 d不得去菜市場、豬場、屠宰廠(場)、無害化處理廠(場)及動物產(chǎn)品交易市場等生物安全高風(fēng)險場所。根據(jù)不同區(qū)域生物安全等級進(jìn)行人員管理,人員遵循單向流動原則,禁止逆向進(jìn)入生物安全更高級別區(qū)域。

進(jìn)入辦公、生活區(qū)域人員要更換干凈消毒過的衣服及鞋靴,洗手消毒并有效淋浴后,方可進(jìn)場,淋浴時必須注意指甲的清洗。實(shí)踐表明,一次有效的淋?。ㄣ逶÷逗拖窗l(fā)水淋浴5 min以上)可以消除人員體表攜帶的病毒。隨身物品經(jīng)消毒后入場,嚴(yán)禁攜帶豬肉制品入場。未經(jīng)允許,禁止進(jìn)入生產(chǎn)區(qū)。進(jìn)入生產(chǎn)區(qū)前,人員要在生產(chǎn)區(qū)淋浴間元澡,所攜帶物品須經(jīng)生產(chǎn)區(qū)物資消毒間消毒后,方可帶入。

進(jìn)入豬舍的流程:人員按照規(guī)定路線進(jìn)入各自工作區(qū)域,禁止進(jìn)入未被授權(quán)的工作區(qū)域。每棟豬舍入口處都應(yīng)該放置消毒盆(桶)、洗手消毒盆。進(jìn)出豬舍前注意洗水,清洗、消毒工作靴,程序?yàn)橄人⑾葱住⑿嫖畚?,后在腳踏消毒盆(桶)浸泡消毒。人員離開生產(chǎn)區(qū),將工作服放置含有消毒劑的桶中浸泡消毒。嚴(yán)禁飼養(yǎng)人員互串宿舍。

3.4.2 車輛管理 豬場車輛管理主要包括外來運(yùn)豬車、飼料運(yùn)送車、收集死豬、豬糞車、私家車等外部車輛;內(nèi)部運(yùn)豬車、拉料車、運(yùn)死豬、豬糞車等內(nèi)部車輛。外部車輛進(jìn)入場區(qū)需經(jīng)徹底清洗、消毒、烘干。

3.4.2.1 外來運(yùn)豬車管理:外來運(yùn)豬車應(yīng)為在畜牧獸醫(yī)部門一夜情的備案車輛,經(jīng)過清洗、消毒及干燥后,方可接近豬場出豬臺或中轉(zhuǎn)站(臺)。運(yùn)輸后對車輛所經(jīng)道路進(jìn)行徹底消毒。

3.4.2.2 飼料運(yùn)送車管理:飼料運(yùn)送車停放在場區(qū)外安全距離,對車體和車輪進(jìn)行消毒,卸下飼料后,由場內(nèi)人員對飼料外包裝表面消毒。建議設(shè)置中轉(zhuǎn)料塔、場內(nèi)飼料運(yùn)輸車,飼料可從場外直接輸送到中轉(zhuǎn)料塔,運(yùn)輸車輛不必進(jìn)入豬場內(nèi)。

3.4.2.3 內(nèi)部運(yùn)豬車管理:選擇場內(nèi)空間相對獨(dú)立的地點(diǎn)進(jìn)行車輛洗消和停放。運(yùn)豬車使用完畢后立即到指定地點(diǎn)清洗、消毒及干燥。流程包括:清洗,確保表面無污物;清潔劑處理有機(jī)物;消毒劑噴灑消毒;充分干燥。

3.4.2.4 死豬及豬糞運(yùn)輸車管理:死豬及豬糞運(yùn)輸車專場專用。交接死豬/豬糞時,避免與外部車輛接觸,交接地點(diǎn)距離場區(qū)大于100~200m。使用后,車輛及時清洗、消毒及干燥,并消毒車輛所經(jīng)道路。

3.4.3 物資管理 豬場物資管理主要包括食材、生活物資、獸藥疫苗、飼料、設(shè)備以及其他入場物資的管理。

3.4.3.1 入場食材管理:在入場食材的選取上,要求食材生產(chǎn)、流通背景清晰、可控,無病原污染;禁止生鮮豬肉及制品入場;蔬菜和瓜果類食材無泥土、無爛葉,禽類和魚類食材無血水,經(jīng)食品消毒處理后入場。進(jìn)入生產(chǎn)區(qū)的飯菜,應(yīng)由豬場廚房提供熟食,生鮮食材禁止進(jìn)入。飯菜容器經(jīng)消毒后進(jìn)入。

3.4.3.2 入場獸藥疫苗管理:嚴(yán)格掃行進(jìn)場消毒,疫苗及有溫度要求的藥品,拆掉外層包裝,使用消毒劑浸泡消毒后再轉(zhuǎn)入儲存或立即使用。其他常規(guī)藥品,拆掉外層包裝,經(jīng)烘干、或臭氧、或熏蒸消毒,轉(zhuǎn)入儲存或立即使用。嚴(yán)格按照說明書或規(guī)程儲存、使用疫苗及藥品,疫苗瓶和注射器等醫(yī)療廢棄物及時無害化處理。

3.4.3.3 飼料管理:禁止從疫區(qū)購買玉米等飼料原料,確保飼料無病原污染。了解購進(jìn)的全價飼料是否含有動物源性飼料添加劑,避免飼料中添加動物源性飼料添加劑,特別是乳豬料。飼料經(jīng)充分干燥或加熱熟化后使用,所有飼料包裝袋均充分消毒(臭氧或熏蒸)。禁止飼喂餐有別于剩余物。

3.4.4 豬群管理 避免場外散養(yǎng)或放養(yǎng):避免場外散養(yǎng)和放養(yǎng)模式,防止家豬與野豬接觸,采食丟棄的垃圾食物。實(shí)施“全進(jìn)全出”管理制度:“全進(jìn)全出”模式是豬場飼養(yǎng)管理、減少疫病循環(huán)傳播的核心。

3.4.4.1 引進(jìn)豬只管理:堅持自繁自養(yǎng)。引種時要嚴(yán)格采取檢測和隔離措施。引種前需經(jīng)過非洲豬瘟等重大動物疫病檢測,抗原、抗體檢測結(jié)果合格,可進(jìn)行場外或場內(nèi)特定區(qū)域隔離檢疫,確認(rèn)方全方可引種。對僅飼養(yǎng)育肥的豬場,全部空欄消毒后再購入仔豬,應(yīng)到非疫區(qū)的有良好聲譽(yù)和信用的正規(guī)養(yǎng)殖場,經(jīng)官方獸醫(yī)檢疫合格后方可購進(jìn),密切關(guān)注豬只健康情況。

3.4.4.2 每日臨床巡視排查:做好非洲豬瘟的日常巡視排查,便于早發(fā)現(xiàn)、早檢測、早處理。養(yǎng)殖場戶要加強(qiáng)學(xué)習(xí)和掌握非洲豬瘟防控知識,每天進(jìn)行健康檢查。一旦發(fā)現(xiàn)豬只精神不好,厭食,體溫升高,皮膚發(fā)紅,皮膚壞死斑塊,關(guān)節(jié)腫大,母豬流產(chǎn)、乳房結(jié)痂等臨床癥狀,發(fā)病、死亡豬只增多的情況,可采集口腔液、糞便拭子等送檢,發(fā)現(xiàn)陽性要及時向當(dāng)?shù)匦竽莲F醫(yī)部門報告。

3.4.4.3 豬只轉(zhuǎn)運(yùn)管理:豬只轉(zhuǎn)運(yùn)一般包括斷奶豬轉(zhuǎn)運(yùn)、淘汰豬轉(zhuǎn)運(yùn)、育肥豬出欄轉(zhuǎn)運(yùn)以及后備豬轉(zhuǎn)運(yùn)。根據(jù)是否自有和可控,將運(yùn)輸車輛分為兩類:自有可控車輛可在豬場出豬間(臺)進(jìn)行豬只轉(zhuǎn)運(yùn),及非自有車輛不可接近豬場出豬間(臺),由自有車輛將豬只轉(zhuǎn)運(yùn)到中轉(zhuǎn)站(臺)交接。

3.4.4.4 售豬管理:禁止生豬販運(yùn)人員、承運(yùn)人員等外來人員,以及外來拉豬車輛進(jìn)入養(yǎng)殖場。避免場內(nèi)外人員交叉。豬場趕豬人員嚴(yán)禁接觸出豬間(臺)靠近場外生豬車輛的一側(cè),外來人員禁止接觸出豬間(臺)靠近場內(nèi)一側(cè)。售豬前、后,立即對出豬間(臺)、停車處、趕豬通道和裝豬區(qū)進(jìn)行全面清洗消毒。注意硬化出豬間(臺)及附近區(qū)域、趕豬通道,方便沖洗、消毒,采取防鼠、防雨水倒流等措施。〔中國動物疫病預(yù)防控制中心,國家非洲豬瘟區(qū)域?qū)嶒?yàn)室(廣州)〕■

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