曹 允

（北京農(nóng)業(yè)職業(yè)學(xué)院，北京 102442）

益氣軟肝方作為傳統(tǒng)中藥方劑在臨床應(yīng)用多年，有一定的抗纖維化、預(yù)防肝硬化的作[1]。本實驗旨在評價益氣軟肝方對高濃度酒精造成的急性肝損傷的護肝療效，并為研究中藥對小鼠肝損傷的護肝效果提供方法和支持。

1 材料和方法

1.1 材料

1.1.1 藥物黃芪、白術(shù)、丹參、川芎、桃仁、鱉甲、生牡蠣、炙甘草（均購于北京宣內(nèi)藥品有限責(zé)任公司）、護肝片（202005074，0.35 g/片，葵花藥業(yè)）、白酒（46°，牛欄山）

1.1.2 實驗動物SPF級昆明種小鼠20只，8～9月齡，雌雄各半，由北京維通利華公司提供。

1.1.3 儀器設(shè)備微納芯全自動生化儀、灌胃器、中藥煎煮鍋。

1.2 方法

1.2.1 藥物的制備（1）益氣軟肝方的制備：精密稱取黃芪250 g、白術(shù)100 g、丹參100 g、川芎50 g、桃仁75 g、鱉甲150 g、生牡蠣250 g、炙甘草50 g，于1 200 ml純化水中加入鱉甲和生牡蠣先煎煮1 h后，將其它藥材加入再煎煮1 h。煎煮后中藥藥液灌裝于密閉瓶中備用。（2）藥物對照品的制備：取5 g護肝片研細(xì)，加7 ml生理鹽水，每次灌胃前混勻。

1.2.2 小鼠肝損模型取小鼠60只，喂養(yǎng)2 d適應(yīng)環(huán)境。所有小鼠以46°白酒每天以0.015 ml/g進行灌胃，連續(xù)灌胃1周，檢測其中15只小鼠的肝功能。

1.2.3 益氣軟肝方對肝損小鼠護肝的療效實驗余下小鼠隨機分3組，每組15只。第1組每天以基礎(chǔ)飼料喂養(yǎng)，不給藥物作為陽性對照組；第2組每天以0.015 ml/g灌胃益氣軟肝方藥液，作為試驗組；第3組每天以0.015 ml/g灌胃護肝片溶液，作為藥物對照組。所有小鼠連續(xù)灌胃1周后檢測肝功能。

1.2.4 數(shù)據(jù)分析所有數(shù)據(jù)經(jīng)過Excel2010初步整理計算后，采用SPSS（Version16.0）軟件，對小鼠肝臟功能指標(biāo)進行單因素方差分析。數(shù)據(jù)以平均值±標(biāo)準(zhǔn)誤表示，P＜0.05表示差異顯著。

2 結(jié)果與分析

2.1 小鼠肝損后肝功檢測指標(biāo)

小鼠經(jīng)高濃度白酒灌胃一周后，通過全自動生化儀檢測其肝功能后發(fā)現(xiàn)，小鼠的肝臟有損傷，主要表現(xiàn)在球蛋白（GLB）、谷丙轉(zhuǎn)氨酶（ALT）、谷草轉(zhuǎn)氨酶（AST）、間接膽紅素的異常升高，對肝臟其它指標(biāo)如γ-谷氨?；D(zhuǎn)移酶（γ-GGT）未見明顯影響。實驗結(jié)果見表1。

表1 小鼠肝損后肝功能指標(biāo)（n=15）

2.2 用保肝藥后小鼠肝功能檢測指標(biāo)

（1）肝損小鼠進行一周灌藥護肝試驗后，陽性對照組小鼠（未給藥）GLB無明顯改善，ALT、AST逐漸恢復(fù)，但依然在比較高的水平，間接膽紅素比之前還有所升高。

（2）試驗組（益氣軟肝方）GLB略有下降但依然偏高，ALT和AST恢復(fù)到正常水平，恢復(fù)水平較陽性對照組差異明顯（P＜0.05）；間接膽紅素偏高但比陽性對照組回落的快，且差異明顯（P＜0.05）；對γ-GGT的影響與陽性對照組相較差異不顯著（P＞0.05）。

（3）藥物對照組小鼠（護肝片）GLB、間接膽紅素?zé)o明顯改善且有提升，ALT和AST恢復(fù)到正常水平。

（4）試驗組與藥物對照組相比，前者對GLB的療效較好，且差異顯著（P＜0.05）；對ALT和AST療效兩組均能恢復(fù)至正常水平；對間接膽紅素療效較藥物對照組好，且差異顯著（P＜0.05）。實驗結(jié)果見表2。

表2 藥物對肝損小鼠護肝療效比較（n=15）

3 討論與結(jié)論

（1）急性肝損傷是指肝細(xì)胞出現(xiàn)急性損傷或壞死，出現(xiàn)肝功能的異常。多數(shù)患者血清ALT、AST、GGT等會因為肝損傷而出現(xiàn)升高。導(dǎo)致肝損傷的原因較多，常見的病因有藥物、疾?。ㄈ绺窝祝┗蛘呔凭?。目前針對急性肝損傷常用的治療方案有對因治療、護肝降酶治療及防治并發(fā)癥。在治療急性肝損傷中，越來越多的中藥顯示出顯著的療效，比如虎眼萬年青總皂苷、草果、菱角殼水提混合物、阿銳布水提物對急性肝損傷有治療作用[2～4]。益氣軟肝方中包含黃芪、鱉甲有補氣固表、調(diào)節(jié)陰虛之功效；白術(shù)、炙甘草有健脾胃、調(diào)氣虛之功效；丹參、川芎、桃仁則有活血、強血行氣之功效；生牡蠣則有強肝解毒之功效。方劑中各類藥物配伍合用，發(fā)揮強肝補氣、活血解郁之效。

（2）肝功能檢測項目主要包括轉(zhuǎn)氨酶，如谷丙轉(zhuǎn)氨酶、谷草轉(zhuǎn)氨酶，白蛋白，球蛋白、白球比值，膽紅素等多項指標(biāo)，每一項內(nèi)容和參考值結(jié)果對比分析，可以判斷出肝臟是否出現(xiàn)了問題及嚴(yán)重程度。急性肝損傷患者的ALT及AST指標(biāo)會明顯上升，尤其是ALT水平會顯著上升，GGT指標(biāo)變化不明顯[5]。在本試驗中，經(jīng)過灌胃一周的小鼠ALT與AST都顯著升高，ALT升高幾乎1倍，說明肝細(xì)胞在受到高濃度酒精破壞后發(fā)生壞死。肝損傷后陽性對照組小鼠的ALT和AST逐漸恢復(fù)接近正常水平，但依然在參考值高限邊緣，提示戒除酒精后小鼠肝臟有一定自我恢復(fù)能力，但需要較長的時間；藥物對照組給1周護肝片后ALT和AST均恢復(fù)至正常水平；試驗組給1周益氣軟肝方后ALT和AST也恢復(fù)至正常水平，但降低水平不及藥物對照組。

（3）膽紅素濃度越高，肝細(xì)胞的損傷越重，膽汁淤積的發(fā)生率越高。有些人群高間接膽紅素血癥肝功能損傷是可逆的[6]。在本試驗中，灌胃一周的小鼠間接膽紅素有所升高，提示出現(xiàn)肝損傷后膽紅素代謝出現(xiàn)障礙；后期無論是給藥組或不給藥組對間接膽紅素效果均不佳，可能是護肝時間過短，膽紅素代謝障礙無改善。

（4）肝臟球蛋白升高主要見肝臟出現(xiàn)炎癥，本試驗中酒精造成的肝損傷是出現(xiàn)球蛋白升高的主要原因。后期給藥與自愈都未在短期內(nèi)對炎癥有比較好的效果，益氣軟肝方組恢復(fù)的要稍強一些。

4 結(jié)論

中藥益氣軟肝方對酒精造成的急性肝損傷有一定的保護療效，能在1周內(nèi)恢復(fù)ALT和AST至正常水平。對于酒精造成的肝臟炎癥，中藥無法在短期內(nèi)改善，益氣軟肝方的恢復(fù)炎癥的效果相較于護肝片效果稍佳。因此，對于酒精造成的急性肝損傷，在臨床中應(yīng)該首先戒酒，然后建議使用中藥方劑保護肝臟。