董雪瑞，王宇翔，張浩杰，高瑩，王聰，謝磊

（杭州職業(yè)技術(shù)學(xué)院，浙江杭州 310018）

白術(shù)為菊科植物白術(shù)(Atractylodes macrocephala Koidz.)的干燥根莖。冬季下部葉枯黃、上部葉變脆時采挖，除去泥沙，烘干或曬干，再除去須根［1］，主產(chǎn)于安徽、浙江、河北等地，自古以浙江為原產(chǎn)區(qū)，后引種擴(kuò)散至江西、湖南、河北等地［2］。白術(shù)根莖含揮發(fā)油，油中主要成分為蒼術(shù)酮、蒼術(shù)醇、白術(shù)內(nèi)酯等，對治療肝硬化腹水、原發(fā)性肝癌、美尼爾氏綜合癥、慢性腰痛、急性腸炎及白細(xì)胞減少癥等有一定療效［3］。白術(shù)用途廣泛，除了醫(yī)療配方用藥外，還是40多種中成藥制劑的重要原料。因此，被廣泛應(yīng)用于制藥領(lǐng)域。

揮發(fā)油常用的提取方法有水蒸氣蒸餾法、有機(jī)溶劑提取法、超臨界CO2流體萃取技術(shù)以及超聲波萃取法等。超聲波萃取法耗時較短，功耗低，萃取溶劑升溫小，萃取效果好［4］。超聲波萃取具有如下突出特點(diǎn)：無需高溫，常壓萃取，安全性好，操作簡單易行，維護(hù)保養(yǎng)方便，萃取效率高，具有廣譜性，絕大多數(shù)的中藥材各類成份均可超聲萃取。超聲萃取的溶劑量小，對其成分分析精度、重復(fù)性要求高。

本實(shí)驗(yàn)采用GC/MS來分析白術(shù)提取物中所含的有效成分。依據(jù)氣質(zhì)聯(lián)用儀GC/MS法分析得到實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)，并與參考文獻(xiàn)進(jìn)行對比得到其中成分，得出各個安徽白術(shù)的主要成分含量差異，為后期各項(xiàng)研究奠定基礎(chǔ)。

1 實(shí)驗(yàn)部分

1.1 儀器、試劑與材料

7890A-5975C型GC/MS聯(lián)用儀，美國Agilent；KQ-50E型超聲儀，昆山；CP224S型分析天平；KQ3200B型超聲波清洗器。

甲醇，≥99.9%，色譜純，美國斯百全（Spectrum）。

白術(shù)，批號210302，經(jīng)浙江省醫(yī)藥保健品進(jìn)出口有限責(zé)任公司中藥部鑒定為菊科蒼術(shù)屬植物白術(shù)(Atrac-tylodes macrocephala Koidz.)的干燥根莖，康美藥業(yè)股份有限公司，安徽產(chǎn)。

1.2 樣品預(yù)處理

白術(shù)干燥，研磨，各自稱取1 g，放入頂空瓶中，再用2 mL的移液管移取甲醇2 mL到頂空瓶中，最后再用壓蓋器把頂空瓶壓實(shí)。用超聲波清洗器超聲60 min，超聲功率150 W，工作頻率40 Hz，使白術(shù)中的成分被超聲波充分地超聲出來。取一次性5 mL的注射器從頂空瓶中提取超聲萃取液，將有機(jī)膜安裝到注射器上過濾超聲萃取液，將過濾好的液體注射到進(jìn)樣瓶中密封并做好標(biāo)記，同時進(jìn)行平行實(shí)驗(yàn)，防止偏差過大。

1.3 GC/MS分析條件

氣相（GC)條件：色譜柱為Agilent technologies RTX-5石英毛細(xì)管柱（30 m×0.250 mm×0.10μm），載氣為N2和He，載氣流量1.0 mL/min。柱箱采用程序升溫，進(jìn)樣口250℃，柱溫95℃，保持1.0 min，以2℃/min升至200℃，再以15℃/min升至300℃保持3.0 min。分流比為不分流。溶劑延遲為2 min。

質(zhì)譜(MS)條件：電子轟擊（EI）離子源，電離能量70 eV，溫度：230℃。掃描范圍m/z 50～650；傳輸線溫度280℃。

2 結(jié)果與討論

2.1 實(shí)驗(yàn)的重現(xiàn)性

取白術(shù)樣品3份，在甲醇溶劑中，40 Hz超聲60 min，考查其色譜峰保留時間和相對峰面積的重現(xiàn)性（用相對標(biāo)準(zhǔn)偏差RSD表示）。結(jié)果表明：色譜峰調(diào)整保留時間的相對標(biāo)準(zhǔn)偏差（RSD)均在0.30%以內(nèi)，峰面積的相對標(biāo)準(zhǔn)偏差（RSD)均在0.85%以內(nèi)。因此，此方法具有較好的重現(xiàn)性。

2.2 GC/MS分析

白術(shù)萃取液經(jīng)注射器打入汽化室瞬間高溫汽化，經(jīng)載氣帶入毛細(xì)管進(jìn)行高效分離，再經(jīng)質(zhì)譜分析，MS譜圖通過計(jì)算機(jī)自動檢索與標(biāo)準(zhǔn)圖譜（NIST 14標(biāo)準(zhǔn)質(zhì)譜庫）對照，查得較為接近的組分，根據(jù)其匹配度與已有文獻(xiàn)，再利用M/Z解析圖譜，確定得到具體的鑒定組分，并用色譜峰面積歸一化法計(jì)算各成分的相對百分含量。結(jié)合圖1可知，目前從安徽白術(shù)中提取出來化學(xué)組分的主要成分為：烯類、酮類、有機(jī)酸類、酯類。烯類和酮類的相對百分含量分別為18.18%，64.28%，其他化合物占總含量的17.54%，蒼術(shù)酮和3-(1，1-二甲基烯丙基)-6-羥基香豆素與3，5，11-烯含量最高分別為47.21%，12.41%，7.29%，是含量最高的3個組分。白術(shù)揮發(fā)油主成分之一的蒼術(shù)酮，具有抗腫瘤、降血壓、保護(hù)呼吸系統(tǒng)、抗炎、鎮(zhèn)痛、抗氧化、保肝、抗流感病毒、除螨等廣譜良好的藥理活性［5］，但實(shí)際上，除此之外還有很多成分具有藥用功效。

圖1 放大后的安徽白術(shù)的化學(xué)成分總離子流色譜圖

試驗(yàn)表明，安徽產(chǎn)地白術(shù)的主要藥效成分為蒼術(shù)酮。陸家佳等［6］報(bào)道白術(shù)的水蒸氣蒸餾（SD）提取物以蒼術(shù)酮的含量最高，達(dá)36.6l%，其次是β-桉油醇（15.861%），并含α-桉葉醇（11.287%）。張強(qiáng)等［7］利用高分辨毛細(xì)管氣相色譜/質(zhì)譜（HRCGC/MS）聯(lián)用技術(shù)，分離并鑒定了白術(shù)揮發(fā)油中成分,發(fā)現(xiàn)蒼術(shù)酮含量最高，為61%。李忠文等［8］采用超臨界CO2萃取白術(shù)揮發(fā)油成分及用氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用（GC-MS）分析其化學(xué)成分，發(fā)現(xiàn)在萃取率最高的條件下，蒼術(shù)酮是含量最高的主要成分之一。尹華等［9］采用HPLC-DAD分析方法測定白術(shù)中蒼術(shù)酮、白術(shù)內(nèi)酯Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ在各自的最大吸收波長下的含量，發(fā)現(xiàn)生白術(shù)中蒼術(shù)酮含量最高。試驗(yàn)結(jié)果與資料報(bào)道基本相符［4-9］。

3 結(jié)論

本試驗(yàn)對白術(shù)采用超聲波萃取，方法簡單，有效，其GC/MS分析結(jié)果可以作為依據(jù)，為后續(xù)的產(chǎn)地識別和溯源、藥理分析等研究奠定基礎(chǔ)。