■李園園 李 震 丁宇峰 李世堯 李紅美 吳紅翔

（江西農(nóng)業(yè)大學動物科學技術(shù)學院，江西南昌 330045)

安義瓦灰雞具有“灰羽、灰喙、灰脛”特征和耐粗飼、適應性強、肉質(zhì)鮮嫩等特點，且還具有藥用功效，廣受大家的喜愛[1]。然而其存在飼料轉(zhuǎn)化率低、飼養(yǎng)周期長、免疫力低等缺點，無法大規(guī)模推廣，因此研究一些活性物質(zhì)用于提高安義瓦灰雞的飼料轉(zhuǎn)化率、增強抵抗力具有重要作用。蚯蚓的蛋白質(zhì)含量通常為54%～65%，最高可達71%[2]。這些蛋白質(zhì)經(jīng)過酶水解成多種活性肽，更增加了蚯蚓的營養(yǎng)價值[3]。據(jù)報道，畜禽養(yǎng)殖中使用蚯蚓、蠅蛆、黃粉蟲以及黑水虻動物性蛋白飼料后，可降低飼養(yǎng)成本，改善畜產(chǎn)品品質(zhì)，還可在一定程度上緩解動物性蛋白質(zhì)飼料短缺的矛盾，實現(xiàn)廢棄物的資源化利用[4]。目前已從蚯蚓液中成功分離出同時對革蘭氏陽性菌、陰性菌和真菌都有廣譜、高效、不產(chǎn)生耐藥性功能的抗菌肽EABP-1[5-6]。研究表明，日糧中添加蚯蚓粉對生豬的生產(chǎn)性能有明顯的提高作用[7]。蚯蚓粉可以提高羅非魚的血清抗氧化免疫能力[8]。目前關于蚯蚓發(fā)酵液對安義瓦灰雞的生產(chǎn)性能、體尺指標、血清抗氧化及生化指標影響的研究還比較少見。試驗旨在研究不同添加水平的蚯蚓發(fā)酵液對安義瓦灰雞生長性能、體尺指標、血清抗氧化及生化指標的影響，為蚯蚓發(fā)酵液在地方雞種生產(chǎn)中的應用提供參考。

1 材料與方法

1.1 試驗材料

安義瓦灰雞購自江西安義龍富山實業(yè)公司；蚯蚓發(fā)酵液購自浙江倍康生物科技有限公司，經(jīng)過高溫發(fā)酵后獲得。經(jīng)檢測分析，蚯蚓發(fā)酵液中蛋白質(zhì)含量10.59 g/L、氨基酸總量（17種）1 259.09 mg/100 mL、鈣476.10 mg/L、鎂68.00 mg/L、銅0.071 mg/L、鋅3.07 mg/L、鐵8.90 mg/L、錳5.90 mg/L、維生素A 30 mg/100 mL、維生素D 3.72 mg/100 mL、維生素E 0.03 mg/100 mL等。

1.2 試驗動物與分組

選取60日齡體重相近且健康狀況良好的安義瓦灰雞120只（全部為母雞），隨機分為4個處理，每個處理5個重復，每個重復6只雞。試驗采用單因素完全隨機試驗設計，對照組（Ⅰ組）飼喂基礎日糧，試驗Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ組分別飼喂在基礎日糧中添加蚯蚓發(fā)酵液的試驗日糧（按0.01、0.02、0.03 mL/g添加蚯蚓發(fā)酵液）。基礎日糧為玉米-豆粕型，參照《中國飼料成分及營養(yǎng)價值表（2019年第30版）》和《雞飼養(yǎng)標準》（NY/T 33—2004）進行配制，其組成及營養(yǎng)水平見表1。試驗期28 d。

表1 基礎日糧組成及營養(yǎng)水平（風干基礎）

1.3 飼養(yǎng)管理

飼養(yǎng)試驗于江西農(nóng)業(yè)大學動物基地完成。試驗開始前，對雞舍及其用具進行徹底清掃和消毒。試驗期間，試驗雞采用舍內(nèi)籠養(yǎng)，自由采食與飲水，雞舍通風和環(huán)境符合衛(wèi)生要求，各組雞飼養(yǎng)管理和免疫接種程序按常規(guī)飼養(yǎng)規(guī)程進行。

1.4 測定指標及方法

1.4.1 生長性能的測定

試驗期間，每天以重復為單位，記錄各組安義瓦灰雞的日采食量，0、14、28 d空腹稱重，計算其平均日采食量（ADFI）、平均日增重（ADG）及料重比（F/G）。

1.4.2 體尺指標的測定

在試驗的第28 d，每個重復隨機選取3只安義瓦灰雞，對其進行體直長、體斜長、胸寬、胸圍、胸深、脛長、脛圍的體尺指標測定。

1.4.3 血清抗氧化、生化指標的測定

在試驗的第28 d分別從每個重復中隨機選擇3只安義瓦灰雞，每組15只，共60只，進行空腹12 h，翅靜脈采血5 mL，室溫靜置1 h，3 000 r/min離心10 min，吸取血清（上清液）分裝于200 μL EP管中，置于-20 ℃保存。測定血清丙二醛（MDA）、過氧化氫酶（CAT）、總蛋白（TP）、白蛋白（ALB）、球蛋白（GLB）含量并計算白球比（A/G），測定谷丙轉(zhuǎn)氨酶、谷草轉(zhuǎn)氨酶、三酰甘油、總膽固醇（T-CHO）、血清尿素氮含量。試劑盒均購自南京建成生物工程研究所。

1.5 數(shù)據(jù)統(tǒng)計分析

試驗數(shù)據(jù)用Excel 2010進行初步分析，采用SPSS 20.0軟件進行單因子方差分析（one-way ANOVA），用LSD 方法進行多重比較，試驗數(shù)據(jù)用“平均值±標準差”表示，P<0.05為差異顯著，P>0.05為差異不顯著。

2 結(jié)果與分析

2.1 蚯蚓發(fā)酵液對安義瓦灰雞生長性能的影響（見表2）

表2 蚯蚓發(fā)酵液對安義瓦灰雞生長性能的影響

由表2 可知，當日糧中添加0.01、0.02、0.03 mL/g的蚯蚓發(fā)酵液時對安義瓦灰雞的生長性能各指標無顯著影響（P>0.05）。

2.2 蚯蚓發(fā)酵液對安義瓦灰雞體尺指標的影響（見表3）

表3 蚯蚓發(fā)酵液對安義瓦灰雞體尺指標的影響(cm)

由表3 可知，當日糧中添加0.01、0.02、0.03 mL/g濃度的蚯蚓發(fā)酵液時對安義瓦灰雞的體尺指標無顯著影響（P>0.05）。

2.3 蚯蚓發(fā)酵液對安義瓦灰雞血清抗氧化指標的影響（見表4）

由表4 可知，與Ⅰ組相比，試驗Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ組MDA含量顯著降低（P<0.05），分別降低31.76%、43.68%和51.32%（P<0.05）；對過氧化氫酶的含量無顯著影響（P>0.05）。

表4 蚯蚓發(fā)酵液對安義瓦灰雞血清抗氧化指標的影響

2.4 蚯蚓發(fā)酵液對安義瓦灰雞血清生化指標的影響（見表5）

由表5 可知，與Ⅰ組相比，試驗Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ組顯著提高總蛋白、白蛋白、總膽固醇的含量（P<0.05）；試驗Ⅱ、Ⅲ組顯著提高白球比（P<0.05）；對其他指標的影響不顯著（P>0.05）。

表5 蚯蚓發(fā)酵液對安義瓦灰雞血清生化指標的影響

3 討論

3.1 蚯蚓發(fā)酵液對安義瓦灰雞生長性能及體尺指標的影響

蚯蚓液中含有豐富的抗菌肽、蛋白水解酶和纖溶酶等多種小分子活性物質(zhì)，同時含有多種礦物質(zhì)和豐富的維生素，是優(yōu)良的飼料添加劑[9]。Istiqomah 等[10]研究表明，加入蚯蚓粉、發(fā)酵米糠和脫脂牛奶為飼料會降低鵪鶉的料重比，提高飼料利用率。李娟等[11]研究發(fā)現(xiàn)，在飲水中添加蚯蚓液對彭縣黃雞的生長具有促進作用，能提高飼料利用率。雷小文等[12]研究表明，3%蚯蚓液有助于寧都黃雞飼料轉(zhuǎn)化率的提高，具有明顯的促生長作用。本試驗結(jié)果顯示，各個添加水平的蚯蚓發(fā)酵液對安義瓦灰雞的生長性能及體尺指標無顯著差異，與前人的試驗結(jié)果不一致，這可能與安義瓦灰雞是地方雞種再加上都是母雞，本身的生長速度就不快有關，還與飼喂時間較短有關。

3.2 蚯蚓發(fā)酵液對安義瓦灰雞血清抗氧化指標的影響

一般情況下，動物代謝過程產(chǎn)生的活性氧自由基會被體內(nèi)固有抗氧化系統(tǒng)清除，自由基的生成和清除處于動態(tài)平衡中，一旦平衡被破壞，過量的自由基攻擊細胞膜、蛋白質(zhì)、DNA等生物大分子，引起細胞損傷和凋亡[13]。丙二醛是機體脂質(zhì)氧化的產(chǎn)物，其含量和機體的氧化程度呈正相關，丙二醛含量越高機體受氧化損傷的程度越大[14]。已有研究表明，飼喂一定水平的蚯蚓提取物給小鼠，能夠增強小鼠的抗氧化能力和免疫能力[15]。徐麒麟等[16]研究表明，在飼料中添加蚯蚓提取物，可以增強成華豬的血清抗氧化能力。本試驗中，添加0.01、0.02、0.03 mL/g的蚯蚓發(fā)酵液均可以顯著降低血清中丙二醛的含量。這與上述研究所述相類似?？傮w表明添加適量的蚯蚓發(fā)酵液能夠提高雞的抗氧化能力。這可能與蚯蚓體內(nèi)所含的抗氧化活性肽有關[17]。

3.3 蚯蚓發(fā)酵液對安義瓦灰雞血清生化指標的影響

血清生化指標是反映機體物質(zhì)代謝變化和組織功能正常的重要指標之一[18]。血清總蛋白由白蛋白和球蛋白組成，白蛋白由肝合成，具有黏性和膠質(zhì)性，在動物體內(nèi)有著運輸營養(yǎng)物質(zhì)、維持滲透壓平衡等重要功能[19]；當肝功能受損時，血清白蛋白比例下降，其下降程度與肝損傷程度呈正相關[20]。球蛋白是機體重要的免疫蛋白，是動物機體體液免疫的重要組成部分[21]。本研究中蚯蚓發(fā)酵液提高了安義瓦灰雞血清總蛋白、白蛋白及白球比，這與前人報道的蚯蚓液增加公番鴨血清總蛋白、白蛋白、白球比的結(jié)果一致[22]。表明蚯蚓發(fā)酵液可以增強安義瓦灰雞體內(nèi)的蛋白質(zhì)代謝。膽固醇是動物體內(nèi)腎上腺皮質(zhì)激素、性激素、膽汁酸及維生素D等生理活性物質(zhì)合成的重要原料，也是構(gòu)成細胞膜的主要成分；血清中三酰甘油和總膽固醇水平在一定程度上反映了動物體內(nèi)脂類代謝狀況[23-24]。本研究中，蚯蚓發(fā)酵液的添加提高了安義瓦灰雞血清膽固醇的含量。說明蚯蚓發(fā)酵液的添加使安義瓦灰雞體內(nèi)的脂質(zhì)代謝處于高水平狀態(tài)，這與蚯蚓發(fā)酵液中所含的各種酶和多糖有關。

4 結(jié)論

在飼糧中添加蚯蚓發(fā)酵液可改善安義瓦灰雞的抗氧化能力和生化指標。推薦蚯蚓發(fā)酵液添加量0.02 mL/g。