陳富珍，李珂，趙蓉，嚴(yán)紅亞，黃建新，曹榮昌，王喬花，劉喜雨*

(1.大理農(nóng)林職業(yè)技術(shù)學(xué)院，云南 大理 671003；2.云南省畜牧獸醫(yī)科學(xué)院養(yǎng)禽與禽病研究所，云南 昆明 650224)

沙門氏菌病是與獸醫(yī)公共衛(wèi)生密切相關(guān)的一類常見人獸共患病，是由沙門氏菌屬細(xì)菌感染引起的，該菌主要通過(guò)污染的食物感染人類，引起嘔吐、腹瀉等癥狀。沙門氏菌傳染性較強(qiáng)，如控制不及時(shí)，易引起群體性感染，造成嚴(yán)重后果[1]。據(jù)統(tǒng)計(jì)，2014年，歐盟國(guó)家由于感染沙門氏菌需要住院的人數(shù)為88715人[2]。在我國(guó)，沙門氏菌感染率也非常高，常通過(guò)污染的豬肉、雞肉、雞蛋及其他畜產(chǎn)品引起人感染沙門氏菌，導(dǎo)致人類患病[3]。有資料統(tǒng)計(jì)，在中國(guó)，每年約3000萬(wàn)感染細(xì)菌性食源性疾病事件中，大約有75%的人是由于感染沙門氏菌引起的[4]。雞沙門氏菌病是不同血清型的沙門氏菌屬引起雞和火雞的一種急性或慢性細(xì)菌性傳染病，主要包括雞白痢、禽傷寒和禽副傷寒等[5]。雞沙門氏菌可以引發(fā)不同年齡雞群發(fā)病，并表現(xiàn)出差異性的臨床癥狀，成年階段的雞感染該疾病后，表現(xiàn)為發(fā)病過(guò)程緩慢、持續(xù)時(shí)間較長(zhǎng)或呈現(xiàn)慢性發(fā)病隱性感染，2～3周齡雛雞易感，常呈急性感染，發(fā)病急，死亡率高[6]。種雞感染沙門氏菌可經(jīng)蛋垂直傳播和水平傳播，雛雞沙門氏菌發(fā)病率在10%～100%[7]。家禽感染沙門氏菌后會(huì)導(dǎo)致生產(chǎn)性能下降、種蛋孵化率降低等，嚴(yán)重危害家禽健康，給養(yǎng)殖戶造成經(jīng)濟(jì)損失。雞沙門氏菌廣泛存在于自然界中，不僅能引起動(dòng)物感染發(fā)病，還能因食品污染造成人的食物中毒，因此，對(duì)雞沙門氏菌病開展流行病學(xué)調(diào)查具有重要意義。2019年，常志順等[8]對(duì)云南省雞病流行病學(xué)調(diào)查結(jié)果顯示云南省蛋雞和土雜雞養(yǎng)殖中，細(xì)菌病是主要的多發(fā)病和常見病，其中雞沙門氏菌病為9.80%，說(shuō)明云南省內(nèi)雞群普遍存在沙門氏菌感染。近幾年，大理州為促進(jìn)畜牧業(yè)綠色養(yǎng)殖快速發(fā)展，全力推動(dòng)禽蛋產(chǎn)業(yè)發(fā)展，養(yǎng)殖范圍廣，存欄數(shù)多，發(fā)生該類疾病會(huì)造成巨大經(jīng)濟(jì)損失。因此，本研究通過(guò)對(duì)大理州9個(gè)縣(市)的雞群進(jìn)行沙門氏菌血清抗體檢測(cè)，開展沙門氏菌血清學(xué)調(diào)查，了解大理州范圍內(nèi)雞沙門氏菌感染現(xiàn)狀，為大理州雞沙門氏菌的防控及凈化提供依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1試驗(yàn)樣品

2020—2021年，大理州9個(gè)縣(市)的4個(gè)規(guī)模化養(yǎng)殖場(chǎng)、17個(gè)散養(yǎng)場(chǎng)(戶)雞翅靜脈無(wú)菌采集血液樣品1424份，離心析出血清以備用，其中規(guī)?；u場(chǎng)1055份、散養(yǎng)場(chǎng)(戶)369份，詳細(xì)記錄公母、飼養(yǎng)方式等。

1.1.2試劑

雞沙門氏菌標(biāo)準(zhǔn)陽(yáng)性血清、陰性血清均購(gòu)自哈爾濱國(guó)生生物科技股份有限公司。雞沙門氏菌(SSYN001株)微量凝集試驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)抗原，為0.5%苯酚生理鹽水細(xì)菌懸液(1×109CFU/mL)，由云南省畜牧獸醫(yī)科學(xué)院養(yǎng)禽與禽病研究所提供。

1.2 方法

1.2.1試驗(yàn)方法

采用云南省畜牧獸醫(yī)科學(xué)院養(yǎng)禽與禽病研究所實(shí)驗(yàn)室構(gòu)建的沙門氏菌微量凝集試驗(yàn)方法進(jìn)行。96孔U型反應(yīng)板中加入25μL/孔的0.5%苯酚生理鹽水；每行第一孔加入待檢血清25μL，倍比稀釋至第6孔，棄去25μL；最后按25μL /孔加入上述制備的雞沙門氏菌微量凝集試驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)抗原，同時(shí)設(shè)立陽(yáng)性和陰性血清對(duì)照，置濕盒中37℃培養(yǎng)18～24h，觀察試驗(yàn)結(jié)果。結(jié)果判定標(biāo)準(zhǔn)參照NY/T 2838—2015判定標(biāo)準(zhǔn)和美國(guó)國(guó)家家禽改良計(jì)劃，微孔板的孔中出現(xiàn)明顯的絮狀沉淀為陽(yáng)性反應(yīng)；孔中出現(xiàn)大而明顯的紐扣狀沉淀為陰性反應(yīng)；記錄樣品陽(yáng)性反應(yīng)凝集孔數(shù)n，當(dāng)n≥4時(shí)，判定為陽(yáng)性(+)，當(dāng)n≤3時(shí)，判為陰性(-)[9]。

1.2.2數(shù)據(jù)處理

利用Excel 2010中統(tǒng)計(jì)學(xué)函數(shù)對(duì)相關(guān)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)和描述。

2 結(jié)果

2.1 各雞場(chǎng)雞群檢測(cè)結(jié)果

1 424份血清中，檢出陽(yáng)性血清469份，平均陽(yáng)性率為32.94%，其中規(guī)模養(yǎng)雞場(chǎng)、散養(yǎng)場(chǎng)(戶)飼養(yǎng)雞的血清陽(yáng)性率分別為30.14%、40.92%(見表1)。由此可見規(guī)?；u場(chǎng)和散養(yǎng)場(chǎng)(戶)均存在沙門氏菌的流行，但散養(yǎng)場(chǎng)(戶)飼養(yǎng)雞群感染率更高。

表1 各雞場(chǎng)雞群沙門氏菌檢測(cè)結(jié)果

2.2 公母雞群檢測(cè)結(jié)果

按照公母對(duì)9個(gè)縣(市)采集的1424份血清樣品檢測(cè)結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計(jì)：母雞血清樣品754份，陽(yáng)性樣品264份，個(gè)體陽(yáng)性率為35.01%；公雞血清樣品670份，陽(yáng)性樣品205份，個(gè)體陽(yáng)性率為30.60%(見表2)。由結(jié)果可見母雞群沙門氏菌抗體陽(yáng)性率高于公雞群。

表2 公母雞群沙門氏菌血清抗體檢測(cè)結(jié)果

2.3 不同養(yǎng)殖方式雞群檢測(cè)結(jié)果

按照養(yǎng)殖方式對(duì)檢測(cè)結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計(jì)發(fā)現(xiàn)：籠養(yǎng)蛋雞沙門氏菌感染率為31.90%，散養(yǎng)土雜雞沙門氏菌感染率為33.52%。由表3可知不同養(yǎng)殖方式對(duì)雞群沙門氏菌的感染有一定影響。

表3 不同養(yǎng)殖方式雞群沙門氏菌檢測(cè)結(jié)果

2.4 各地區(qū)雞群檢測(cè)結(jié)果

本次共檢測(cè)了大理州9個(gè)縣(市)不同雞群1 424份血清樣品，根據(jù)區(qū)域進(jìn)行統(tǒng)計(jì)發(fā)現(xiàn)：雞沙門氏菌在大理州范圍內(nèi)普遍存在，9個(gè)縣(市)的規(guī)?；B(yǎng)殖場(chǎng)和散養(yǎng)場(chǎng)(戶)均檢測(cè)出陽(yáng)性樣品，各縣的場(chǎng)(戶)陽(yáng)性率介于17.29%～44.64%，其中云龍縣陽(yáng)性率最高，祥云縣陽(yáng)性率最低。詳細(xì)結(jié)果見表4。

表4 不同地區(qū)雞沙門氏菌檢測(cè)結(jié)果

3 討論

對(duì)采自大理州9個(gè)縣(市)雞群的1424份血清樣品通過(guò)沙門氏菌微量凝集試驗(yàn)進(jìn)行抗體檢測(cè)。結(jié)果顯示：大理州各縣(市)雞群均有不同程度的沙門氏菌感染，個(gè)體平均陽(yáng)性率為32.94%。不同縣(市)雞群沙門氏菌的陽(yáng)性率介于17.29%～44.64%，存在一定的差異，可能和當(dāng)?shù)貧夂?、環(huán)境、水源、交通等因素有關(guān)，需要進(jìn)一步檢測(cè)。云龍、彌渡、漾濞、巍山幾個(gè)縣陽(yáng)性率高，主要原因：一是采集的樣本容量??；二是所采樣本飼養(yǎng)條件、環(huán)境差；而祥云、劍川、洱源、南澗這幾個(gè)縣養(yǎng)殖規(guī)?；潭雀?，基礎(chǔ)設(shè)施、條件都相對(duì)好一些，雞群沙門氏菌陽(yáng)性檢出率則低。通過(guò)調(diào)查發(fā)現(xiàn)，規(guī)?；B(yǎng)雞場(chǎng)雞群陽(yáng)性率為30.14%，低于散養(yǎng)場(chǎng)(戶)陽(yáng)性率(40.92%)，主要是規(guī)?；B(yǎng)雞場(chǎng)更加注重雞群的日常管理和檢疫環(huán)節(jié)，嚴(yán)格篩選、進(jìn)行種蛋入庫(kù)前的消毒工作等。而散養(yǎng)場(chǎng)(戶)多采用自繁自養(yǎng)模式，養(yǎng)殖數(shù)量少，基本沒有防疫檢疫的意識(shí)，造成雞沙門氏菌在雞群中的垂直傳播和雛雞群中的水平傳播。從雞群的公母統(tǒng)計(jì)結(jié)果看，母雞個(gè)體陽(yáng)性率明顯高于公雞個(gè)體陽(yáng)性率，可能是母雞飼養(yǎng)周期長(zhǎng)，接觸病原體機(jī)會(huì)增多，加之垂直傳播和隱形感染帶毒。飼養(yǎng)方式上，目前蛋雞養(yǎng)殖基本都采用離地籠養(yǎng)，雞糞分離，規(guī)模化養(yǎng)殖程度高，不僅有效利用空間，還方便統(tǒng)一管理，基本上會(huì)定期清掃、消毒，養(yǎng)殖環(huán)境相對(duì)干凈、干燥，不利于沙門氏菌生長(zhǎng)，能大大降低沙門氏菌在雞群間的水平傳播。調(diào)查采樣時(shí)發(fā)現(xiàn)，散養(yǎng)場(chǎng)(戶)的飼養(yǎng)條件非常簡(jiǎn)陋，飼養(yǎng)方式很隨意化，衛(wèi)生條件較差，基本沒有消毒措施，還有部分散養(yǎng)場(chǎng)(戶)將畜禽混在一起飼養(yǎng)，糞污混合，蚊蠅亂飛，這些都有利于沙門氏菌繁殖、相互傳播，引發(fā)沙門氏菌病。

由上述調(diào)查結(jié)果可知，大理州部分縣(市)雞沙門氏菌感染率較高，流行情況較為嚴(yán)重。分析以上造成雞沙門氏菌普遍感染、流行的原因，減少大理州雞沙門氏菌感染，有效控制該病傳播，仍需不斷探索。第一，需要不斷提高養(yǎng)殖戶的養(yǎng)殖知識(shí)，雞沙門氏菌可以垂直傳播，因此，在選種蛋時(shí)需要嚴(yán)格選種，盡量從沙門氏菌已經(jīng)凈化的種雞場(chǎng)引種，同時(shí)，進(jìn)欄前要嚴(yán)格檢疫、消毒，減少種蛋垂直傳播和雛雞間水平傳播。第二，飼養(yǎng)管理要細(xì)心，防重于治，養(yǎng)殖效果的好壞與日常管理技術(shù)、飼料配比、水質(zhì)優(yōu)劣、飼養(yǎng)環(huán)境相關(guān)指標(biāo)的控制有很大的關(guān)系。第三，積極優(yōu)化飼養(yǎng)條件，完善養(yǎng)殖設(shè)施，添置滅蚊蠅燈，放置擋鼠板、安裝防鳥網(wǎng)等，減少動(dòng)物間相互傳播。第四，改善養(yǎng)殖環(huán)境，注重衛(wèi)生消毒，在養(yǎng)殖場(chǎng)周圍設(shè)立防疫隔離帶，盡量遠(yuǎn)離其他同類養(yǎng)殖場(chǎng)，雞舍及周圍環(huán)境要定期大掃除、定期帶雞消毒等。第五，防控疾病要合理用藥，現(xiàn)在很多養(yǎng)殖戶，一旦雞群發(fā)生類似疾病，未確診就開始大量使用廣譜抗生素，造成普遍耐藥，使得很多藥物不能有效防控該病，而且后期易導(dǎo)致肉源性食品藥物殘留超標(biāo)，危害人類的健康，因此，藥物使用需要篩選，依場(chǎng)因病制定合理的用藥規(guī)范。第六，制定合理的防控措施，成年雞感染沙門氏菌多隱性感染，臨床癥狀不明顯，易被忽略，容易造成病原長(zhǎng)期存在和蔓延，需要定期抽檢，及時(shí)淘汰陽(yáng)性雞。雞沙門氏菌病的防治不僅關(guān)系雞群的健康還影響?zhàn)B禽業(yè)的發(fā)展，需要引起重視。