盛 開

（吉林省吉林市糧油監(jiān)測站，吉林市 132000）

玉米赤霉烯酮（ZEN），又稱F-2毒素，是由鐮刀菌屬真菌產(chǎn)生的一種次級代謝產(chǎn)物，具有雌激素樣活性的非甾體類真菌毒素，起初發(fā)現(xiàn)于玉米赤霉病之中，后經(jīng)突變衍生出多種毒素種類。玉米赤霉烯酮主要通過被污染的谷物、肉及奶制品等進入人體，危害人體生殖系統(tǒng)的發(fā)育，會對動植物造成生殖毒害與致畸突變。為了人們的健康，對糧食中玉米赤霉烯酮的含量必須嚴(yán)格控制。

玉米赤霉烯酮廣泛存在于玉米、大米、小麥、豆類等糧油作物中，其污染范圍廣、程度深、危害大。為了控制玉米赤霉烯酮的危害，各國制定了其在糧油產(chǎn)品中的限量標(biāo)準(zhǔn)，以利于保障食品安全[1]。我國對玉米赤霉烯酮的最高限量為60μg/kg。為了控制玉米赤霉烯酮在糧食產(chǎn)品中的含量，近年來興起了一些快速、靈敏、準(zhǔn)確的玉米赤霉烯酮檢測方法。

1 化學(xué)檢測方法

1.1 薄層色譜法

薄層色譜法主要的優(yōu)點是成本低、過程簡便，因此是應(yīng)用較多的檢測方式。但該方法的檢測靈敏度卻是所有方法中最低的。薄層色譜法對玉米赤霉烯酮含量檢測的靈敏度極限為300 ng/g。在檢測過程中主要采用CHCl3、色譜硅膠、甲醇-三氯甲烷等方式，并在此過程中依次對樣品進行提取、層析凈化與洗脫。

1.2 氣相色譜—質(zhì)譜聯(lián)用法

氣相色譜—質(zhì)譜聯(lián)用法檢測靈敏度較高，不僅能對玉米赤霉烯酮、DES等進行檢測，二期還能夠同時對其他多種毒素進行檢測，該檢測法主要是采用比對法對結(jié)果進行評價，其結(jié)果具有很高的準(zhǔn)確度。該方法中主要是對樣品代謝物進行標(biāo)準(zhǔn)譜圖庫的比對，所用設(shè)備較為特別，因此在應(yīng)用中只能作為大型或官方檢測方法。氣相色譜—質(zhì)譜聯(lián)用法也是美國AOAC官方指定檢測方法。

1.3 高效液相色譜法

玉米赤霉烯酮具有熒光特性，因此可運用HPLC檢測其在樣品中的含量，該方法靈敏度較高，玉米赤霉烯酮檢測極限為0.31μg/kg。在該方法的檢測中，首先用乙腈-水提取樣品中玉米赤霉烯酮元素，經(jīng)凈化與濃縮后，再運用熒光檢測器對該元素進行檢測[2]。在此法過程中需要對玉米赤霉烯酮元素進行回收，回收率一般在88%～93%之間，樣品變異系數(shù)在1.5%～4.0%之間。

1.4 液譜和質(zhì)譜聯(lián)用法

與其他化學(xué)檢測方法相比較，液譜和質(zhì)譜聯(lián)用法有其獨具的優(yōu)勢，即該方法檢測靈敏度非常高，檢測結(jié)果精準(zhǔn)、可信。一些學(xué)者認為玉米赤霉烯酮提取之后凈化處理步驟應(yīng)適當(dāng)縮減，以便進一步提升毒素回收率以及靈敏度。但此法因檢測過程較為復(fù)雜，而且所需檢測設(shè)備較為昂貴，不適合大范圍推廣。

2 免疫學(xué)檢測方法

2.1 酶聯(lián)免疫吸附測定法

酶聯(lián)免疫吸附測定法（ELISA）是當(dāng)下檢測玉米赤霉烯酮最為常用的方法之一，其具有較強的優(yōu)勢，其檢測方便、準(zhǔn)確度高，多被運用于批量檢驗。此外，酶聯(lián)免疫吸附測定法檢測成本較低，具有較好的推廣前景。酶聯(lián)免疫吸附測定法獲得了世界上較多研究者的認可[3]。利用競爭酶聯(lián)免疫吸附測定法研制的檢驗試劑盒，能使回收率達到95%以上，最低檢驗濃度可達1 ng/mL。實驗證明，酶聯(lián)免疫吸附測定法與高效液相色譜法 這兩種檢測方法的結(jié)構(gòu)無明顯差異，均在允許范圍內(nèi)。因此，在需要大規(guī)模篩選檢測樣品時，可以使用ELISA法，此方法的應(yīng)用前景十分廣闊。

2.2 免疫膠體金快速診斷技術(shù)

膠體金免疫層析法（GICA）是一種快速免疫學(xué)檢測技術(shù)，目前在臨床上使用的檢測試劑已有10多種。目前，根據(jù)反應(yīng)模式及待測物的種類，膠體金免疫層析診斷技術(shù)分析方法有兩種。膠體金免疫層析檢測法的本質(zhì)是將檢測帶固定于硝酸纖維素膜上，其中檢測帶是已知的抗原，然后將檢測帶的兩端分別連接在樣品和吸水墊上。當(dāng)樣品擴散后，就會到達檢測線，從而發(fā)生變色反應(yīng)，會出現(xiàn)直觀紅色；反之則會與抗原發(fā)生顯示紅色條帶[4]。實驗結(jié)果顯示，當(dāng)含有混合毒素時，膠體金免疫層析法也能快速檢測出來。膠體金免疫層析法具有快速、可靠、敏感度高的特點，成為了免疫學(xué)檢測中一種新趨勢，該檢測方法操作簡單快速，有效節(jié)約了檢測成本。

3 生物傳感器法

生物傳感器是一類化學(xué)物質(zhì)檢測裝置，其原理是利用生物識別元件將相互作用轉(zhuǎn)化為可測信號。這些生物識別元件主要有酶、抗體、微生物、抗原、核酸、組織、細胞器、全細胞等。輸出信號一般是光學(xué)、電化學(xué)等。生物傳感器主要分為電化學(xué)、測溫、光學(xué)及壓電四種生物傳感器。均可應(yīng)用于現(xiàn)場即時檢測，并具有選擇性好、分析速度快、靈敏度高、成本低等特點[5]。其中光電生物傳感器能夠在不需要復(fù)雜預(yù)處理條件下檢測目標(biāo)，其應(yīng)用前景可觀。由于生物傳感器法具有干擾小、噪音低、靈敏度高等優(yōu)點，已成為檢測食品小分子污染物的理想選擇。

生物傳感器法靈敏度高，主要是基于模擬酶活性。其在玉米赤霉烯酮檢測方面潛力巨大。此法只是一項初步試驗，為了提高靈敏度，拓寬分析范圍，后續(xù)可考慮結(jié)合AuNP等納米材料或信號放大策略。Taghdisi等建立非靶向核酸適配體傳感器，可對玉米赤霉烯酮進行比色檢測。這種適配體傳感器對于玉米赤霉烯酮是一種很有前途的檢測分析技術(shù)。

4 噬菌體展示技術(shù)和時間分辨熒光技術(shù)檢測法

對于玉米赤酶霉烯酮檢測，當(dāng)下比較常用的免疫檢測方法還有噬菌體展示技術(shù)和時間分辨熒光技術(shù)。結(jié)合使用酶聯(lián)免疫吸附測定法技術(shù)，利用噬菌體展示技術(shù)進行真菌毒素檢測，可以起到非常好的效果，同時還使試驗成本有所降低[6]?？梢?，對于建立無毒真菌毒素體系檢測，噬菌體展示技術(shù)的應(yīng)用有著重要意義。

5 玉米赤霉烯酮檢測研究方向建議

近年來，食品和飼料中玉米赤霉烯酮污染造成的危害很大，尤其是對人類健康和生態(tài)環(huán)境安全造成嚴(yán)重威脅。因此，建立和完善相應(yīng)的檢測技術(shù)，并在此基礎(chǔ)上認真分析檢測工作的方向和方法，嚴(yán)格限定玉米赤霉烯酮含量，確保人類健康尤為必要和重要。隨著檢測技術(shù)的發(fā)展，聯(lián)用技術(shù)體現(xiàn)了其優(yōu)勢，檢測靈敏度和結(jié)果穩(wěn)定性得到進一步提高，實現(xiàn)了多種毒素同時檢測，但使用的儀器過于昂貴。適配體生物傳感器的方法彌補了傳統(tǒng)檢測方法的諸多不足，但還有待進一步發(fā)展與探究。近幾年超高效液相色譜系統(tǒng)進入了人們的視野，其速度快、分辨率和靈敏度非常高，適合于微量快速分析，具有良好的發(fā)展前景。

總之，若要實現(xiàn)對食品安全的監(jiān)管，還需進一步探索和研究，以提高玉米赤霉烯酮檢測應(yīng)用水平。建議今后從以下幾個方面展開研究：（1）滿足快檢需求。建立可視化分析方法，注意在比色等檢測技術(shù)基礎(chǔ)上進行，使日常監(jiān)管需要得到滿足。（2）實現(xiàn)高靈敏度和特異性[7]。要采用多種方法結(jié)合，進一步提高檢測方法的靈敏度和特異性。（3）多種毒素同時檢測。此方法可以有效節(jié)省檢測時間和成本。

6 結(jié)語

綜上所述，建立快速、準(zhǔn)確、低成本、高靈敏度的玉米赤霉烯酮檢測方法仍是食品安全領(lǐng)域的研究方向。應(yīng)用于檢測玉米赤霉烯酮的方法有多種，而且各有其優(yōu)點和不足，因此，需要在使用中根據(jù)實際和目標(biāo)方向選擇較為合適的檢測方法。超高效液相色譜系統(tǒng)優(yōu)點眾多，適合用于微量快速分析當(dāng)中，對其他檢測方法造成了沖擊，也給人們提供了新的選擇?；诖?，需要繼續(xù)深入研究，并建立完善的玉米赤霉烯酮檢測體系，以快速準(zhǔn)確的檢測辦法，滿足當(dāng)前社會綠色檢驗的需求。