王為東，譚 倩2，馬洪霞，趙 暉，張 禎，公為菊

(1蒙陰縣人民醫(yī)院，山東 蒙陰 276200；2 山東醫(yī)學(xué)高等專(zhuān)科學(xué)校，山東 臨沂276000)

目前，乳腺浸潤(rùn)性導(dǎo)管癌(Invasive Ductal Carcinoma，IDC)已成為女性最常見(jiàn)的惡性腫瘤之一。近年來(lái)，免疫治療惡性腫瘤已成為臨床熱點(diǎn)之一。研究發(fā)現(xiàn)，CD47在惡性腫瘤中的高表達(dá)有助于腫瘤細(xì)胞逃避巨噬細(xì)胞的吞噬，使腫瘤具有更大的侵襲性及不良的預(yù)后。本研究主要探討CD47在IDC中表達(dá)及臨床意義。

1 資料與方法

1.1一般資料 選取本院2015年1月—2018年12月收集的137例原發(fā)性IDC患者癌組織(已經(jīng)福爾馬林處理，石蠟包埋)，患者均為女性；年齡29-77歲，中位年齡52歲；TNM分期：Ⅰ期37例，Ⅱ期56例，Ⅲ/Ⅳ44例；組織學(xué)分級(jí)：Ⅰ級(jí)4例，Ⅱ級(jí)91例，Ⅲ級(jí)42例；腋窩淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移67例，無(wú)轉(zhuǎn)移70例。隨訪24-72個(gè)月。

1.2方法 組織芯片的構(gòu)建：采用組織芯片技術(shù)，取樣針直徑2.0 mm，組織芯片間距1 mm。免疫組織化學(xué)：采用羅氏Bench Mark GX全自動(dòng)免疫組化染色機(jī)，CD47鼠抗人單克隆抗體來(lái)自中杉金橋公司，ER、PR、HER-2、Ki-67抗體來(lái)自羅氏公司，二抗采用羅氏公司全自動(dòng)染色機(jī)封閉抗體。按照說(shuō)明書(shū)操作。

1.3指標(biāo)評(píng)定 所有免疫組化切片均由兩位副主任醫(yī)師以上病理診斷醫(yī)師單獨(dú)判讀，根據(jù)染色比例及染色強(qiáng)度分別賦分，然后將兩項(xiàng)結(jié)果相乘，總分≥5分為陽(yáng)性，<5分為陰性。①染色細(xì)胞比例：≤5%為0分，6%-25%為1分，26%-50%為2分，51%-75%為3分，>75%為4分。②染色強(qiáng)度：無(wú)著色為0分，弱陽(yáng)性為1分，中度強(qiáng)度著色為2分，強(qiáng)著色為3分[1]。

1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)采用SPSS17.0統(tǒng)計(jì)軟件處理，定性資料用χ2檢驗(yàn)和Pearson相關(guān)分析，生存分析用Kaplan-Meier和Log-rank檢驗(yàn)。

2 結(jié)果

2.1CD47的表達(dá)與相關(guān)指標(biāo)的關(guān)系 CD47的陽(yáng)性表達(dá)共67例，在不同組織學(xué)分級(jí)、臨床分期、腋窩淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移方面有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，不同年齡及腫瘤大小方面的表達(dá)沒(méi)有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；CD47的表達(dá)與ER、HER-2及Ki-67的表達(dá)不一致，與PR的表達(dá)一致。見(jiàn)表1。

表1 CD47的陽(yáng)性表達(dá)在相關(guān)指標(biāo)中的分布[n(%)]

2.2CD47的表達(dá)與術(shù)后無(wú)瘤生存時(shí)間及總生存時(shí)間的關(guān)系 CD47陽(yáng)性表達(dá)組平均無(wú)瘤生存時(shí)間及總生存時(shí)間與陰性表達(dá)相比均縮短。見(jiàn)表2。

表2 不同CD47表達(dá)者無(wú)瘤生存和總生存期的比較月)

3 討論

CD47屬于免疫球蛋白超家族成員，是一種分子量為50 kD的跨膜蛋白，又稱(chēng)整合素相關(guān)蛋白，目前發(fā)現(xiàn)有兩個(gè)配體：凝血酶敏感蛋白-1(TSP-1)，為一種分泌糖蛋白，在細(xì)胞增殖、生長(zhǎng)和分化以及血管發(fā)育和生長(zhǎng)中發(fā)揮重要作用[2]；信號(hào)調(diào)節(jié)蛋白α(SIRPα)，與免疫信號(hào)傳導(dǎo)相關(guān)，與CD47結(jié)合抑制巨噬細(xì)胞對(duì)腫瘤細(xì)胞的吞噬，產(chǎn)生免疫逃逸[3]。CD47蛋白通過(guò)以上兩種途徑促進(jìn)了腫瘤細(xì)胞的增殖與生長(zhǎng)，并且逃避了自身免疫系統(tǒng)對(duì)腫瘤細(xì)胞的攻擊，其表達(dá)與多種惡性腫瘤的不良預(yù)后相關(guān)[4]。目前，CD47與腫瘤相關(guān)巨噬細(xì)胞的研究較多，人體存在著兩個(gè)不同的免疫系統(tǒng)，以T細(xì)胞為代表的獲得性免疫系統(tǒng)；另一個(gè)是以巨噬細(xì)胞為代表的先天性免疫系統(tǒng)，起著吞噬細(xì)胞、呈遞抗原、免疫應(yīng)答以及維持細(xì)胞穩(wěn)定的作用。因此，認(rèn)為巨噬細(xì)胞具清除腫瘤細(xì)胞及其它對(duì)身體有害細(xì)胞的作用。然而在有些惡性腫瘤中吞噬細(xì)胞似乎沒(méi)有起到相關(guān)作用，研究顯示是因?yàn)镃D47蛋白的高表達(dá)與吞噬細(xì)胞上的受體SIRPα結(jié)合，抑制了吞噬細(xì)胞的吞噬功能。本研究結(jié)果顯示，與陰性表達(dá)者相比，CD47陽(yáng)性表達(dá)者的組織學(xué)分級(jí)更差，臨床分期、腋窩淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移率更高，無(wú)瘤生存及總生存時(shí)間更短；CD47的表達(dá)與ER、HER-2及Ki-67的表達(dá)不一致，與PR的表達(dá)一致。

綜上所述，CD47的陽(yáng)性表達(dá)提示腫瘤預(yù)后不良且易復(fù)發(fā)，理論上可用CD47單克隆抗體與腫瘤細(xì)胞CD47結(jié)合，阻斷腫瘤細(xì)胞的免疫逃逸，促進(jìn)吞噬細(xì)胞吞噬并清除腫瘤細(xì)胞，達(dá)到以CD47為腫瘤免疫治療靶點(diǎn)的作用[5]。目前，也有針對(duì)CD47單克隆抗體的臨床試驗(yàn)[6]。因此，CD47能否作為腫瘤免疫治療的一個(gè)理想靶點(diǎn)，值得研究與關(guān)注。