左 華，周 冬，陳曉軍

上海市寶山區(qū)仁和醫(yī)院甲乳外科，上海 200431

甲狀腺癌是一種常見(jiàn)的內(nèi)分泌系統(tǒng)惡性腫瘤，流行病學(xué)調(diào)查顯示，甲狀腺癌占全身惡性腫瘤的1%～5%，其發(fā)病率每年約遞增4%[1]?；颊咭耘跃佣?，不同病理分型中以分化型甲狀腺癌的預(yù)后最好，其5年生存率高達(dá)97%，早期確診并規(guī)范化治療分化型甲狀腺癌成為改善預(yù)后的關(guān)鍵[2]。近年來(lái)甲狀腺超聲、CT和細(xì)針穿刺等手段在甲狀腺癌的評(píng)估和初步篩選方面得到廣泛的運(yùn)用，但其對(duì)于甲狀腺結(jié)節(jié)的良惡性判斷還是有一定的假陽(yáng)性率和假陰性率，同時(shí)，CT的輻射性和穿刺的創(chuàng)傷性降低了部分患者的依從性。隨著分子生物學(xué)研究的深入，血清學(xué)指標(biāo)在惡性腫瘤的診斷、監(jiān)測(cè)和預(yù)后評(píng)估中越來(lái)越受到重視[3]。嗜酸性粒細(xì)胞趨化因子(CCL11)是重要的趨化因子，在結(jié)腸癌、胃癌和肺癌等惡性腫瘤中呈高表達(dá)，而在甲狀腺癌中是否呈異常表達(dá)尚不清楚[4]；谷胱甘肽過(guò)氧化物酶3(GPX3)為活性氧的清除劑，對(duì)細(xì)胞自由基損傷具有保護(hù)作用，在乳腺癌和胃癌的發(fā)生發(fā)展過(guò)程中具有作用[5-6]；半乳糖凝集素-1(Gal-1)是一種低聚糖結(jié)構(gòu)，對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)、分化、黏附和凋亡具有重要作用，在胃癌和甲狀腺癌中呈高表達(dá)，對(duì)甲狀腺癌的診斷有一定的臨床價(jià)值[7]。本研究通過(guò)檢測(cè)分化型甲狀腺癌患者血清CCL11、GPX3和Gal-1水平，觀察其在診斷分化型甲狀腺癌中的臨床價(jià)值。

1 資料與方法

1.1一般資料 選擇2019年1月至2020年12月在本院經(jīng)手術(shù)病理確診為分化型甲狀腺癌的患者97例為分化型甲狀腺癌組，組織類型：乳頭狀癌66例，濾泡狀癌31例；分化程度：高分化31例，中分化43例和低分化23例；淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移：有52例，無(wú)45例；臨床分期：Ⅰ～Ⅱ期65例，Ⅲ～Ⅳ期32例。納入標(biāo)準(zhǔn)：均符合分化型甲狀腺癌的診斷標(biāo)準(zhǔn)[8]；均經(jīng)病理學(xué)確診。排除標(biāo)準(zhǔn)：具有局部和全身性感染；合并橋本甲狀腺炎、甲狀腺?gòu)浡圆∽兒图谞钕俟δ芸哼M(jìn)等疾病；其他惡性腫瘤；肝、腎、肺等重要臟器功能不全；精神性疾病和智力下降者；妊娠期或哺乳期女性；合并血液系統(tǒng)和免疫系統(tǒng)疾病。選擇同期在本院就診的良性甲狀腺疾病者65例為甲狀腺良性疾病組，病理類型：結(jié)節(jié)性甲狀腺腫5例，濾泡狀腺瘤58例，甲狀腺乳頭狀囊性腺瘤1例和甲狀腺囊腫1例。選擇本院同期體檢健康者45例為健康對(duì)照組。3組年齡、性別和體質(zhì)量指數(shù)(BMI)等基線資料比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，具有可比性，見(jiàn)表1。本研究經(jīng)醫(yī)院倫理委員會(huì)審核通過(guò)，所有受試者均簽署知情同意書。

表1 各組基線資料比較[n(%)或

1.2方法

1.2.1血清標(biāo)本留取及檢測(cè) 入院后抽取所有受試者肘靜脈血約5 mL，在室溫下靜置約20 min，然后以3 000 r/min離心10 min，離心半徑為15 cm，去上清液約3 mL，放置于-80 ℃的冰箱中待測(cè)。使用酶聯(lián)免疫檢測(cè)儀(型號(hào)DG5033A，南京華東電子集團(tuán)醫(yī)療裝備有限責(zé)任公司)按照酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)測(cè)定血清CCL11、GPX3和Gal-1水平，所有試劑盒采用R&D公司產(chǎn)品，嚴(yán)格按照試劑盒說(shuō)明書操作。

1.2.2觀察指標(biāo) 各組血清CCL11、GPX3和Gal-1水平比較；分化型甲狀腺癌組手術(shù)前后血清CCL11、GPX3和Gal-1水平比較；血清CCL11、GPX3和Gal-1水平與分化型甲狀腺癌臨床病理資料的關(guān)系，診斷甲狀腺癌的效能及各指標(biāo)的相關(guān)性分析。

2 結(jié) 果

2.1各組血清CCL11、GPX3和Gal-1水平比較 分化型甲狀腺癌組血清CCL11和Gal-1水平高于甲狀腺良性疾病組和健康對(duì)照組(P<0.05)，甲狀腺良性疾病組CCL11和Gal-1水平高于健康對(duì)照組(P<0.05)； 而分化型甲狀腺癌組血清GPX3水平低于甲狀腺良性疾病組和健康對(duì)照組(P<0.05)，甲狀腺良性疾病組GPX3水平低于健康對(duì)照組(P<0.05)。見(jiàn)表2。

表2 各組血清CCL11、GPX3和Gal-1水平比較

2.2分化型甲狀腺癌組手術(shù)前后血清CCL11、GPX3和Gal-1水平比較 分化型甲狀腺癌組手術(shù)后血清CCL11和Gal-1水平較手術(shù)前降低，而血清GPX3水平較手術(shù)前升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見(jiàn)表3。

表3 分化型甲狀腺癌組手術(shù)前后血清CCL11、GPX3和Gal-1水平比較

2.3分化型甲狀腺癌組血清CCL11、GPX3和Gal-1水平與臨床病理資料的關(guān)系 分化型甲狀腺癌組患者血清CCL11、GPX3和Gal-1水平與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移情況、浸潤(rùn)深度和TNM分期有關(guān)(P<0.05)，而與性別、年齡、腫瘤最大直徑、組織學(xué)類型和分化程度無(wú)關(guān)(P>0.05)。見(jiàn)表4。

表4 分化型甲狀腺癌組血清CCL11、GPX3和Gal-1水平與臨床病理資料的關(guān)系

2.4血清CCL11、GPX3和Gal-1對(duì)分化型甲狀腺癌的診斷效能 血清CCL11、GPX3和Gal-1對(duì)分化型甲狀腺癌均具有較高的診斷效能，3項(xiàng)指標(biāo)聯(lián)合檢測(cè)的靈敏度為91.8%，特異度為92.3%，曲線下面積(AUC)為0.962，高于CCL11(Z=4.770，P<0.05)、GPX3(Z=4.585，P<0.05)和Gal-1(Z=4.137，P<0.05)單獨(dú)檢測(cè)，而CCL11、GPX3和Gal-1之間比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。見(jiàn)表5、圖1。

表5 血清CCL11、GPX3和Gal-1對(duì)分化型甲狀腺癌的診斷效能

圖1 血清CCL11、GPX3和Gal-1診斷分化型甲狀腺癌的ROC曲線

2.5分化型甲狀腺癌患者血清CCL11、GPX3和Gal-1水平的相關(guān)性分析 分化型甲狀腺癌患者血清CCL11(r=-0.625，P<0.05)和Gal-1(r=-0.716，P<0.05)水平與GPX3水平呈負(fù)相關(guān)，而血清CCL11水平與Gal-1水平呈正相關(guān)(r=0.647，P<0.05)。

3 討 論

分化型甲狀腺癌由于早期缺乏典型的臨床癥狀，術(shù)前與甲狀腺良性結(jié)節(jié)難以鑒別?，F(xiàn)有的B超、CT和組織學(xué)活檢單獨(dú)使用均不能達(dá)到滿意的鑒別良惡性的效果，存在一定的假陰性或假陽(yáng)性率。影像學(xué)檢查對(duì)于檢出甲狀腺結(jié)節(jié)的靈敏度較高，但對(duì)于結(jié)節(jié)良惡性鑒別的特異度較低。甲狀腺結(jié)節(jié)細(xì)針穿刺作為細(xì)胞學(xué)檢查手段雖被廣泛使用，但也存在一定的假陽(yáng)性和假陰性率，同時(shí)為有創(chuàng)操作，導(dǎo)致部分患者的依從性較差。隨著分子生物學(xué)的發(fā)展，血清學(xué)指標(biāo)往往較癥狀提前3～6個(gè)月出現(xiàn)異常，因此血清學(xué)指標(biāo)的檢測(cè)已經(jīng)成為腫瘤早期診斷的重要方法。

CCL11是趨化因子的1種，其表達(dá)具有器官的差異性，位于人類染色體17q11，是趨化因子超家族成員的重要組成部分，在腫瘤組織和腫瘤患者的體液中均有異常表達(dá)，往往被用于腫瘤的診斷、監(jiān)測(cè)和預(yù)后判斷[9]。在1項(xiàng)對(duì)前列腺癌的研究中發(fā)現(xiàn)，前列腺癌組織中的CCL11水平明顯高于癌旁組織和良性前列腺組織，體外實(shí)驗(yàn)證實(shí)CCL11能夠通過(guò)使前列腺癌細(xì)胞的上皮細(xì)胞間質(zhì)化，從而促進(jìn)前列腺癌細(xì)胞的侵襲和轉(zhuǎn)移能力[10]。在一項(xiàng)對(duì)胃癌的研究中顯示，胃癌患者血清CCL11水平明顯高于健康對(duì)照者，并發(fā)現(xiàn)血清CCL11水平與高TNM分期有關(guān)[11]。本研究結(jié)果顯示，分化型甲狀腺癌組血清CCL11水平也明顯高于甲狀腺良性疾病組和健康對(duì)照組，并且發(fā)現(xiàn)手術(shù)后血清CCL11水平較術(shù)前出現(xiàn)明顯降低，說(shuō)明CCL11參與分化型甲狀腺癌的發(fā)生發(fā)展過(guò)程，其血清水平升高與分化型甲狀腺癌具有明顯的關(guān)系。本研究還顯示血清CCL11水平與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移情況、浸潤(rùn)深度和TNM分期有關(guān)，而與性別、年齡、腫瘤最大直徑、組織學(xué)類型和分化程度無(wú)關(guān)，說(shuō)明血清CCL11是甲狀腺癌預(yù)后評(píng)估的重要指標(biāo)，與文獻(xiàn)[12]所報(bào)道的結(jié)腸癌患者血清CCL11基因表達(dá)水平升高與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移和高TNM分期有關(guān)一致。本研究還發(fā)現(xiàn)當(dāng)血清CCL11水平取截?cái)嘀禐?2.84 pg/mL時(shí)，其診斷分化型甲狀腺癌的靈敏度為63.9%，特異度為92.3%，AUC為0.835，說(shuō)明CCL11對(duì)分化型甲狀腺癌具有較高的診斷效能。

GPX3是一種細(xì)胞外糖基化酶，對(duì)細(xì)胞穩(wěn)態(tài)的維持具有重要作用，通過(guò)對(duì)強(qiáng)氧化物的降解，清除氧自由基，起到抗氧化的作用，從而避免DNA的損傷，保持基因的完整性[13]。當(dāng)機(jī)體GPX3水平降低時(shí)，清除氧自由基的能力下降，導(dǎo)致DNA損傷，從而參與腫瘤的形成過(guò)程，體外實(shí)驗(yàn)證實(shí)GPX3能夠明顯抑制腫瘤細(xì)胞的增殖、遷移和侵襲等生物學(xué)行為，從而抑制腫瘤的發(fā)展[14]。本研究顯示，分化型甲狀腺癌組血清GPX3水平明顯低于甲狀腺良性疾病組和健康對(duì)照組，分化型甲狀腺癌患者術(shù)后血清GPX3水平較術(shù)前出現(xiàn)明顯升高，說(shuō)明GPX3是甲狀腺癌的保護(hù)因子。本研究還顯示，血清GPX3水平與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移情況、浸潤(rùn)深度和TNM分期有關(guān)，而與性別、年齡、腫瘤最大直徑、組織學(xué)類型和分化程度無(wú)關(guān)，說(shuō)明血清GPX3水平與腫瘤的惡性程度具有密切聯(lián)系，提示血清GPX3可作為甲狀腺癌惡性程度的評(píng)價(jià)指標(biāo)，與文獻(xiàn)[15]所報(bào)道的血清GPX3水平與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移情況、腫瘤TNM分期具有相關(guān)性一致。本研究結(jié)果還顯示，當(dāng)血清GPX3水平取截?cái)嘀禐?3.57 μg/L時(shí)，其診斷分化型甲狀腺癌的靈敏度為95.9%，特異度為72.3%，AUC為0.806，診斷效能較高，與文獻(xiàn)[16]報(bào)道結(jié)果相符。

Gal-1是1種半乳糖結(jié)合家族蛋白，在細(xì)胞和組織中分布廣泛，對(duì)細(xì)胞增殖和惡性轉(zhuǎn)化具有明顯的調(diào)節(jié)作用，對(duì)腫瘤細(xì)胞轉(zhuǎn)移具有促進(jìn)作用[17]。Gal-1能夠與細(xì)胞外的糖類配體結(jié)合，促進(jìn)腫瘤細(xì)胞與細(xì)胞外基質(zhì)的黏附，對(duì)腫瘤細(xì)胞的遷移和侵襲具有促進(jìn)作用。同時(shí)Gal-1能夠誘導(dǎo)T淋巴細(xì)胞發(fā)生凋亡，導(dǎo)致腫瘤細(xì)胞發(fā)生免疫逃逸，促進(jìn)腫瘤的發(fā)生發(fā)展[18]。本研究結(jié)果顯示，分化型甲狀腺癌組血清Gal-1水平明顯高于甲狀腺良性疾病組和健康對(duì)照組，術(shù)后血清Gal-1水平較術(shù)前出現(xiàn)明顯降低，說(shuō)明Gal-1參與了分化型甲狀腺癌的發(fā)生發(fā)展，與既往文獻(xiàn)報(bào)道的血清Gal-1水平可以作為甲狀腺良惡性疾病鑒別的重要指標(biāo)的結(jié)果一致[19]。本研究結(jié)果顯示，血清Gal-1水平與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移情況、浸潤(rùn)深度和TNM分期有關(guān)，而與性別、年齡、腫瘤最大直徑、組織學(xué)類型和分化程度無(wú)關(guān)。本研究結(jié)果還顯示，當(dāng)血清Gal-1水平取截?cái)嘀禐?17.44 ng/mL時(shí)，其診斷分化型甲狀腺癌的靈敏度為63.9%，特異度為98.5%，AUC為0.853，顯示出對(duì)分化型甲狀腺癌具有較高的診斷效能，與文獻(xiàn)[20]報(bào)道一致。

本研究結(jié)果顯示，血清CCL11、GPX3和Gal-1聯(lián)合檢測(cè)對(duì)分化型甲狀腺癌具有更高的診斷效能，均高于各指標(biāo)單獨(dú)檢測(cè)，說(shuō)明3項(xiàng)指標(biāo)聯(lián)合檢測(cè)具有某種互補(bǔ)性，能夠增加對(duì)分化型甲狀腺癌的診斷效能。分化型甲狀腺癌患者血清CCL11和Gal-1水平與GPX3水平呈負(fù)相關(guān)，而血清CCL11水平與Gal-1水平呈正相關(guān)，進(jìn)一步說(shuō)明3項(xiàng)指標(biāo)之間具有一定的相關(guān)性，其具體內(nèi)在聯(lián)系機(jī)制尚不清楚。

綜上所述，血清CCL11、GPX3和Gal-1參與了分化型甲狀腺癌的發(fā)生發(fā)展過(guò)程，聯(lián)合影像學(xué)和細(xì)胞學(xué)檢查有助于提高對(duì)分化型甲狀腺癌的診斷效能。