李解軍 宋繼軍 陳春光

我國(guó)目前結(jié)核病疫情仍較為嚴(yán)重，全國(guó)約450萬(wàn)人存在有活動(dòng)性肺結(jié)核［1］。隨著經(jīng)濟(jì)發(fā)展、人們生活方式的改變，人類免疫缺陷病毒（Human im?munodeficiency virus，HIV）感染發(fā)生率不斷增加，結(jié)核菌合并HIV 雙重感染的發(fā)病率亦呈上升趨勢(shì)，對(duì)人類健康造成嚴(yán)重威脅［2］。但目前有關(guān)結(jié)核病合并HIV 的發(fā)病機(jī)制尚未十分明確，一般認(rèn)為結(jié)核病患者感染HIV 后，機(jī)體CD4+T 數(shù)量減少，細(xì)胞免疫功能受損。亦有報(bào)道認(rèn)為CD8+T 細(xì)胞抗病毒活性喪失或誘發(fā)機(jī)體自發(fā)性免疫系統(tǒng)疾病，進(jìn)而使各種機(jī)會(huì)性感染風(fēng)險(xiǎn)增高［3］。臨床中常通過(guò)檢測(cè)T 淋巴細(xì)胞亞群來(lái)反映機(jī)體免疫功能情況，故對(duì)T 淋巴細(xì)胞亞群的檢測(cè)有助于觀察結(jié)核病合并HIV 患者免疫狀況［4］。本研究就CD4+、CD8+、CD4+/CD8+檢測(cè)在結(jié)核病合并HIV 患者中的診斷價(jià)值及與HIV 病毒載量的相關(guān)性進(jìn)行分析，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取鄭州市第六人民醫(yī)院2017年12月至2020年12月收治的559 例結(jié)核病患者的臨床資料。納入標(biāo)準(zhǔn)：①均符合結(jié)核病相關(guān)診斷標(biāo)準(zhǔn)［5］；②年齡18～70 歲；③首次發(fā)病，且具有完整的臨床資料；④依從性良好，配合完成研究者。排除標(biāo)準(zhǔn)：①合并其他臟器病變或其他系統(tǒng)嚴(yán)重疾?。虎谛?、肝、腎等臟器功能嚴(yán)重不全；③孕婦、精神病等特殊人群。166 例患者中，合并HIV 者48 例（合并組），未合并HIV 者511 例（未合并組）。合并組男32 例，女16 例，平均年齡（40.87±11.25）歲。未合并組男341 例，女170例，平均年齡（41.63±12.14）歲。兩組資料比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。本研究經(jīng)過(guò)院醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)通過(guò)，受試者已簽署知情同意書(shū)。

1.2 方法

清晨抽取兩組患者2 mL 空腹外周靜脈血，加入抗凝管中，24 h 內(nèi)進(jìn)行染色處理，在另一抗凝管中加入20 μL T 淋巴細(xì)胞亞群試劑與50 μL 抗凝全血，充分混勻，暗置15 min，加入10 倍稀釋FACS 溶血素450 μL，溫室暗處?kù)o置反應(yīng)15 min。1 h 內(nèi)采用美國(guó)BD 公司生產(chǎn)的流式細(xì)胞儀進(jìn)行檢測(cè)T 細(xì)胞淋巴亞群CD4+、CD8+、并計(jì)算CD4+/CD8+比值，試劑為原裝配套試劑，詳細(xì)操作嚴(yán)格按照說(shuō)明書(shū)執(zhí)行。

1.3 病毒載量檢測(cè)及分組

采用全自動(dòng)病毒載量?jī)x檢測(cè)血漿中病毒載量，并對(duì)合并組進(jìn)行分組：Ⅰ組<103copies/mL；Ⅱ組40-103copies/mL；Ⅲ組>103copies/mL［6］。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用SPSS 22.0 統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，計(jì)量資料以（±s）表示，組間比較行t檢驗(yàn)，多組間比較行F檢驗(yàn)；各參數(shù)間相關(guān)性分析采用Pearson 法；采用ROC 曲線分析CD4+、CD8+、CD4+/CD8+對(duì)結(jié)核病合并HIV 的診斷價(jià)值；以P<0.05為差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組CD4+、CD8+、CD4+/CD8+水平比較

合并組CD4+、CD4+/CD8+水平明顯低于未合并組，CD8+水平顯著高于未合并組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。見(jiàn)表1。

表1 兩組CD4+、CD8+、CD4+/CD8+水平比較（±s）Table 1 Comparison of CD4+，CD8+，CD4+/CD8+levels between the two groups（±s）

表1 兩組CD4+、CD8+、CD4+/CD8+水平比較（±s）Table 1 Comparison of CD4+，CD8+，CD4+/CD8+levels between the two groups（±s）

組別合并組未合并組t 值P 值n 48 511 CD4+（%）22.54±5.62 31.84±8.24 7.651<0.001 CD8+（%）62.67±6.76 41.36±5.62 24.657<0.001 CD4+/CD8+（%）0.34±0.03 1.56±0.13 64.807<0.001

2.2 不同HIV 病毒載量患者CD4+、CD8+、CD4+/CD8+水平比較

CD4+、CD4+/CD8+水平：Ⅰ組>Ⅱ組>Ⅲ組；CD8+：Ⅰ組<Ⅱ組<Ⅲ組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。見(jiàn)表2。

表2 不同HIV 病毒載量患者CD4+、CD8+、CD4+/CD8+水平比較（±s）Table 2 Comparison of CD4+，CD8+，CD4+/CD8+levels inpatients with different HIV viral loads（±s）

表2 不同HIV 病毒載量患者CD4+、CD8+、CD4+/CD8+水平比較（±s）Table 2 Comparison of CD4+，CD8+，CD4+/CD8+levels inpatients with different HIV viral loads（±s）

注：a與Ⅰ組比較，b與Ⅱ組比較，P<0.05。

CD4+/CD8+（%）0.58±0.16 0.25±0.05a 0.14±0.03ab 82.050<0.001組別Ⅰ組Ⅱ組Ⅲ組F 值P 值n 19 13 16 CD4+（%）30.64±6.57 24.63±4.26a 11.22±1.62ab 72.970<0.001 CD8+（%）53.64±6.24 64.24±7.72a 72.11±8.96ab 25.820<0.001

2.3 CD4+、CD8+、CD4+/CD8+與HIV 病毒載量相關(guān)性分析

CD4+、CD4+/CD8+與HIV 病毒載量呈顯著負(fù)相關(guān)（r=-0.542、-0.634，P=0.021、0.012），CD8+與HIV 病毒載量呈正相關(guān)關(guān)系（r=0.521，P=0.029）。

2.4 CD4+、CD8+、CD4+/CD8+對(duì)結(jié)核病合并HIV 的診斷價(jià)值

ROC 曲線結(jié)果顯示，CD4+、CD8+、CD4+/CD8+聯(lián)合檢測(cè)診斷結(jié)核病合并HIV 的下曲線面積（AUC）為0.815，明顯高于單獨(dú)診斷（P<0.05）。見(jiàn)表3及圖1。

表3 CD4+、CD8+、CD4+/CD8+對(duì)結(jié)核病合并HIV 的診斷價(jià)值Table 3 The diagnostic value of CD4+，CD8+，CD4+/CD8+on tuberculosis with HIV

圖1 CD4+、CD8+、CD4+/CD8+單項(xiàng)及聯(lián)合診斷ROC 曲線圖Figure 1 The ROC curve of CD4+，CD8+，CD4+/CD8+single and combined diagnosis

3 討論

結(jié)核病是艾滋病常見(jiàn)的細(xì)菌性機(jī)會(huì)性感染，該類患者體內(nèi)的單核細(xì)胞對(duì)HIV 有更強(qiáng)的親和力，可增加其易感性，結(jié)核分枝桿菌還可促進(jìn)HIV 的轉(zhuǎn)錄復(fù)制，加速HIV 在淋巴細(xì)胞之間的傳播［7］。近年來(lái)隨著人們生活方式改變、社會(huì)經(jīng)濟(jì)不斷發(fā)展，結(jié)核病并HIV 的發(fā)病率呈逐漸上升趨勢(shì)，對(duì)患者身體健康、生活質(zhì)量造成嚴(yán)重影響［8?9］。如何評(píng)估該類患者病情嚴(yán)重程度及疾病進(jìn)展情況，進(jìn)行有效治療，減少死亡率是目前臨床研究重點(diǎn)之一。

CD4+細(xì)胞是T 淋巴細(xì)胞亞群之一，同時(shí)也是HIV 感染人體的主要靶細(xì)胞，可通過(guò)直接或分泌腫瘤壞死因子、干擾素等細(xì)胞因子抑制病毒復(fù)制［10］。當(dāng)機(jī)體發(fā)生免疫病理改變時(shí)，CD4+細(xì)胞數(shù)量會(huì)明顯減少、細(xì)胞功能受損。機(jī)體異常免疫改變還表現(xiàn)在CD8+細(xì)胞表達(dá)增高［11］。CD8+細(xì)胞具有很好的監(jiān)控和殺傷功能。Nasi 等［12］發(fā)現(xiàn)，在HIV 感染早期，患者CD8+表達(dá)常高于正常人，且免疫功能亦會(huì)出現(xiàn)異常。CD4+/ CD8+比值則是重要的免疫狀態(tài)檢測(cè)指標(biāo)，在正常人群中CD4+/ CD8+比值為0.7～2.8，當(dāng)<0.20 時(shí)，HIV 感染者機(jī)會(huì)性感染率會(huì)明顯增高［13］。本研究中，與未合并組相比，合并組患者CD4+、CD4+/CD8+水平更低，CD8+水平更高。說(shuō)明結(jié)核病患者感染HIV 后，免疫系統(tǒng)會(huì)受到損害。

HIV 病毒載量是病毒的負(fù)荷，即機(jī)體內(nèi)復(fù)制的病毒數(shù)量［14］。國(guó)內(nèi)外大量研究指出，隨著疾病的不斷進(jìn)展，患者血漿病毒載量水平會(huì)不斷增高，推測(cè)其原因可能是由于HIV 病毒進(jìn)入機(jī)體后侵犯T淋巴細(xì)胞，復(fù)制裝配越來(lái)越多的病毒進(jìn)一步侵犯更多的T 淋巴細(xì)胞，進(jìn)而產(chǎn)生級(jí)聯(lián)放大效應(yīng)［15］。本研究發(fā)現(xiàn)，隨HIV 病毒載量不斷增高，CD4+、CD4+/CD8+水平呈逐漸下降趨勢(shì)，CD8+水平呈增高趨勢(shì)。相關(guān)性分析發(fā)現(xiàn)，上述T 淋巴細(xì)胞亞群與HIV 病毒載量具有一定相關(guān)性。說(shuō)明T 淋巴細(xì)胞免疫激活狀況可一定程度上反映血漿病毒載量的變化情況。推測(cè)其原因可能是由于病毒復(fù)制水平的升高與細(xì)胞激活是一個(gè)相互促進(jìn)的關(guān)系，當(dāng)病毒復(fù)制速率加快，產(chǎn)生的病毒抗原亦會(huì)增多，可為T淋巴細(xì)胞激活提供更多的刺激信號(hào)；而T 淋巴細(xì)胞異常激活可為病毒復(fù)制提供更多的宿主細(xì)胞，進(jìn)而加快病毒復(fù)制［16］。本研究ROC 曲線分析結(jié)果顯示，CD4+、CD8+、CD4+/CD8+均可有效診斷結(jié)核病合并HIV，且聯(lián)合檢測(cè)診斷效能更佳，說(shuō)明三者聯(lián)合檢測(cè)可作為診斷結(jié)核病合并HIV 的重要依據(jù)。

綜上所述，CD4+、CD8+、CD4+/CD8+在結(jié)核病合并HIV 呈異常表達(dá)，且與HIV 病毒載量具有一定相關(guān)性，通過(guò)檢測(cè)患者CD4+、CD8+、CD4+/CD8+水平有利于結(jié)核病合并HIV 感染早期診斷。