張樹棟，吳斌，于海珍，王琳，吳兆偉，張喆，胡琴

(北京市藥品檢驗(yàn)研究院國家藥品監(jiān)督管理局仿制藥研究與評(píng)價(jià)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，中藥成分分析與生物評(píng)價(jià)北京重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，北京 102206)

卡馬西平(carbamazepine)是目前用于治療癲癇、三叉神經(jīng)痛等神經(jīng)系統(tǒng)疾病的一線藥物[1-2]。由于卡馬西平治療窗口窄(4～10 mg·L-1)，口服吸收不規(guī)則，在臨床使用時(shí)較易發(fā)生不良反應(yīng)，因此其體內(nèi)吸收情況需要特別關(guān)注[3]。卡馬西平(商品名：得理多)說明書記載卡馬西平在人體內(nèi)吸收完全，但普通片劑在服用單劑量后，約12 h內(nèi)達(dá)平均血漿峰值濃度。研究證實(shí)，影響口服速釋固體制劑產(chǎn)品的藥物吸收有3個(gè)主要因素，分別是溶出度、溶解度和腸道滲透性[4-5]。溶解度是影響藥物溶出的主要因素，Drugbank數(shù)據(jù)庫[6]測(cè)定卡馬西平在水中溶解度較低，僅為152 μg·mL-1，因此，對(duì)卡馬西平原料藥在不同溶出介質(zhì)中溶解情況開展研究，可以為藥物的體外溶出行為評(píng)價(jià)提供基礎(chǔ)。KOVACEVIC等[7]將卡馬西平作為高滲透性藥物研究，Drugbank數(shù)據(jù)庫也根據(jù)人體小腸吸收情況和Caco-2細(xì)胞的滲透性預(yù)測(cè)其為高滲透性[6]。根據(jù)BCS 理論，吸收程度與藥物的滲透性呈正相關(guān)，因此，筆者率先采用人工仿生膜技術(shù)(parallel artificial membrane permeability assay，PAMPA)對(duì)卡馬西平原料藥在不同介質(zhì)中的滲透速率進(jìn)行研究[8-9]，并同標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)美托洛爾比較分析其有效滲透性，為其體內(nèi)外相關(guān)性研究提供參考。

根據(jù)國家藥品監(jiān)督管理局公布的《仿制藥參比制劑目錄》，北京諾華有限公司生產(chǎn)的原研制劑為卡馬西平參比制劑，而國內(nèi)仿制藥有110家生產(chǎn)企業(yè)，共133個(gè)批準(zhǔn)文號(hào)。經(jīng)調(diào)研，國內(nèi)主要有7家原料藥生產(chǎn)企業(yè)，制備工藝也有一定的差異，因此對(duì)這些仿制藥企業(yè)所使用的原料藥進(jìn)行調(diào)研分析，并同原研制劑所使用的原料藥進(jìn)行比較分析，有利于開展仿制藥一致性評(píng)價(jià)。固有溶出速率是影響藥物溶出的主要因素，快速地評(píng)估工藝參數(shù)對(duì)藥物溶出的影響，能夠反映出藥物的粒徑和晶型的變化[10]。本研究對(duì)不同來源卡馬西平原料藥的固有溶出速率進(jìn)行比較，探究影響體外溶出的關(guān)鍵因素，為今后仿制藥一致性評(píng)價(jià)工作和體內(nèi)外相關(guān)性研究提供數(shù)據(jù)基礎(chǔ)。

卡馬西平是一種典型的多晶型藥物，其常見的晶型有Ⅰ型、Ⅱ型、Ⅲ型、Ⅳ型，文獻(xiàn)報(bào)道[11-14]不同的晶型對(duì)卡馬西平的穩(wěn)定性及溶出速率均有較大影響，其中卡馬西平在潮濕的環(huán)境下容易發(fā)生晶型的轉(zhuǎn)變，形成二水合物，從而降低藥物的體外溶出速率和體內(nèi)吸收[15-16]。目前，卡馬西平制劑的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中未對(duì)卡馬西平二水合物加以檢測(cè)以及限度要求，因此，本研究制備了卡馬西平二水合物，并在不同溶出介質(zhì)中同卡馬西平原料藥固有溶出速率進(jìn)行比較，更好地了解藥物特性，對(duì)開展藥物的穩(wěn)定性研究及體外溶出行為評(píng)價(jià)具有指導(dǎo)意義。

1 儀器與試藥

1.1儀器 電子天平XA205(METTLER TOLEDO公司，感量：0.01 mg)；藥物溶解性測(cè)試儀 μDiss(PION公司)；藥物滲透性測(cè)試儀 μFLUX(PION公司)；固有溶出速率壓片測(cè)試裝置(PION公司)；激光衍射粒度分布儀Mastersizer 2000(Malvern公司)；Ultima Ⅳ型粉末X射線衍射儀(XPRD)(Rigaku公司)；JSM-7500F掃描電鏡(SEM)(JEOL公司)；pH計(jì)METTLER TOLEDO(Seven Compact公司)；純水儀Milli-Q(MERCK MILLIPORE公司)。

1.2藥品與試劑 卡馬西平對(duì)照品(中國食品藥品檢定研究院，批號(hào)：100142-201706，含量：100.0%)；原研企業(yè)所使用的卡馬西平原料藥(北京諾華有限公司提供，批號(hào)：C5028，含量：100.0%)，仿制企業(yè)A所使用的卡馬西平原料藥(批號(hào)：Y03419013-CN0181202)，仿制企業(yè)B所使用的卡馬西平原料藥(批號(hào)：190518061)，仿制企業(yè)C所使用的卡馬西平原料藥(批號(hào)：YL1909003)均來源于2020年國家藥品抽驗(yàn)計(jì)劃；卡馬西平二水合物(實(shí)驗(yàn)室自制)；酒石酸美托洛爾對(duì)照品(中國食品藥品檢定研究院，批號(hào)：100084-201403，含量：99.9%)。

藥物溶出模擬液固體粉末SIF-Original(美國Pion公司，F(xiàn)FF-0619-B)；胃腸道模擬脂質(zhì)體(GIT，美國Pion公司，批號(hào)：520731)；ASB緩沖液(acceptor sink conditioned buffer，美國Pion公司，批號(hào)：520729，pH值7.4)；甲醇為色譜純；磷酸二氫鉀、氫氧化鈉、無水乙酸鈉、冰醋酸、氯化鈉、鹽酸、二水合磷酸二氫鈉、十二烷基硫酸鈉等均為分析純；水為超純水。本研究所用pH值1.2鹽酸溶液、pH值4.0醋酸鹽緩沖液和pH值6.8磷酸鹽緩沖液均參照《普通口服固體制劑溶出曲線測(cè)定與比較指導(dǎo)原則》中的附錄配制[17]；pH值5.0和pH值6.5磷酸鹽緩沖液均按《中華人民共和國藥典》2020版四部緩沖液配制。

2 方法

2.1卡馬西平在不同溶出介質(zhì)中溶解度測(cè)定 μDiss藥物溶解性測(cè)試儀，在溶出杯中分別加入16 mL實(shí)驗(yàn)介質(zhì)pH 1.2鹽酸溶液、pH 4.0醋酸鹽緩沖液、pH 6.8磷酸鹽緩沖液(下文簡稱“pH 1.2，4.0，6.8”)、水、模擬飽腹介質(zhì)(下文簡稱“FeSSIF”，分別取氯化鈉11.87 g、氫氧化鈉4.04 g、冰醋酸8.65 g，加水溶解，加入SIF-Original 11.2 g，稀釋至1 L，pH 5.0)和1%十二烷基硫酸鈉溶液(sodium dodecyl sulfate，SDS)，加入過量的原研制劑所使用的卡馬西平原料藥，溫度為37 ℃，攪拌速度為200 r·min-1，將光纖探頭置于液面下方，在紫外光波長340～345 nm下測(cè)定藥物濃度。

2.2卡馬西平在不同溶出介質(zhì)中滲透性測(cè)定

2.2.1滲透速率測(cè)定 本研究中采用PAMPA測(cè)定方法，使用μFLUX藥物滲透性測(cè)定系統(tǒng)，通過將原位光纖檢測(cè)和人工仿生膜(PAMPA)相結(jié)合，來實(shí)現(xiàn)藥物透膜吸收的實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)，測(cè)定藥物在被動(dòng)轉(zhuǎn)運(yùn)中的有效滲透性。從藥物滲透性測(cè)試儀分為供體室和受體室，中間由人造膜隔開。在口服藥物遞送的情況下，供體室代表胃腸道，受體室代表血液，中間的膜代表胃腸道細(xì)胞膜。首先在人造膜表面精密加入胃腸道模擬脂質(zhì)體(GIT lipid)20 μL，然后在供體室中加入實(shí)驗(yàn)介質(zhì)(pH 1.2鹽酸溶液16 mL、pH 4.0醋酸鹽緩沖液、pH 6.8磷酸鹽緩沖液、水和FeSSIF)，在受體室中加入ASB緩沖液16 mL。稱取過量的原研制劑所使用的卡馬西平原料藥置供體室中，并保證卡馬西平在受體室的ASB緩沖液中滿足漏槽條件。兩室溫度為37 ℃，攪拌速度為200 r·min-1，將兩側(cè)光纖探頭分別置于液面下方，在波長330～340 nm下測(cè)定藥物濃度，按公式計(jì)算藥物的人工膜滲透速率。

2.2.2有效滲透性測(cè)定 本研究分別選擇pH 6.5和pH 5.0的磷酸鹽緩沖液作為實(shí)驗(yàn)介質(zhì)，進(jìn)一步評(píng)價(jià)卡馬西平原料藥的有效滲透性。同“2.2.1”法操作，在供體室中加入實(shí)驗(yàn)介質(zhì)(pH 5.0磷酸鹽緩沖液和pH 6.5磷酸鹽緩沖液)16 mL，在受體室中加入ASB緩沖液16 mL。量取甲醇溶解的供體藥物儲(chǔ)備液置供體室中，在320～330 nm波長下測(cè)定并計(jì)算藥物濃度，按公式計(jì)算藥物的人工膜滲透性。

2.3不同來源卡馬西平原料藥的固有溶出速率比較分析

2.3.1固有溶出速率測(cè)定 為了進(jìn)一步研究不同企業(yè)所使用的卡馬西平原料藥的固有溶出速率差異，分別選取原研制劑、仿制企業(yè)A、仿制企業(yè)B、仿制企業(yè)C所使用的原料藥，由于胃酸pH接近1.2，同時(shí)卡馬西平在pH 1.2介質(zhì)中固有溶出速率最高，因此測(cè)定不同企業(yè)卡馬西平原料藥在pH 1.2介質(zhì)條件下的固有溶出速率。本研究采用固有溶出速率壓片測(cè)試裝置，其利用具有已知表面積的壓制薄圓片，排除了表面積和表面電荷對(duì)溶出的影響，測(cè)定藥物的固有溶出速率。取原研制劑和仿制藥企業(yè)A、B、C所使用的原料藥各約10 mg至壓片模具中，0.689 5 Mpa壓力下加壓1 min后取出。采用 μDiss藥物溶解性測(cè)試儀，取載藥模具一起放入溶出杯中，緩慢加入pH 1.2鹽酸溶液10 mL，溫度為37 ℃，攪拌速度為100 r·min-1，將光纖探頭置于液面下方，在波長330～340 nm下測(cè)定并計(jì)算藥物濃度，根據(jù)公式計(jì)算藥物固有溶出速率。

2.3.2粒徑測(cè)定 為了分析不同來源原料藥固有溶出速率差異的原因，采用激光衍射粒度分布儀干法對(duì)不同企業(yè)卡馬西平原料藥進(jìn)行測(cè)定。

2.3.3XPRD和SEM測(cè)定 為了分析不同來源原料藥晶型和形態(tài)的差異，分別采用XPRD和SEM對(duì)不同企業(yè)卡馬西平原料藥進(jìn)行測(cè)定，測(cè)定條件為X射線管：Cu靶；X射線波長：1.540 51 ?；管壓：40 kV；管電流：40 mA；掃描角度：3°～50°；掃描速度：4°·min-1。SEM：10 μm，5 kV。

2.4卡馬西平及卡馬西平二水合物在不同溶出介質(zhì)中固有溶出速率研究 稱取原研制劑卡馬西平原料藥1 g，置20 mL水中攪拌24 h，濾過，即得卡馬西平二水合物。同“2.3.1”法操作，取原研制劑卡馬西平原料藥和自制卡馬西平二水合物壓片后，取載藥模具一起放入溶出杯中，緩慢加入10 mL實(shí)驗(yàn)介質(zhì)(pH 1.2鹽酸溶液、pH 4.0醋酸鹽緩沖液、pH 6.8磷酸鹽緩沖液和水)，測(cè)定固有溶出速率。

2.5統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 數(shù)據(jù)分析采用AuPROTM軟件(美國Pion Inc 公司)，二階導(dǎo)數(shù)法校正后進(jìn)行線性回歸。統(tǒng)計(jì)分析采用SPSS 13.0 版軟件的單因素方差分析，對(duì)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行顯著性檢驗(yàn)。

3 結(jié)果

3.1卡馬西平在不同溶出介質(zhì)中溶解度 卡馬西平原料藥在pH為1.2，4.0，6.8及水中的溶解度分別為258.98，232.98，217.47，209.53 μg·mL-1，其中在pH 1.2溶解度略偏高，可能受氫離子濃度影響，其他pH條件下差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，表明其溶解度為非pH依賴性；在FeSSIF介質(zhì)中溶解度有顯著提高(P<0.05)，為297.10 μg·mL-1，可能與介質(zhì)中含有少量膽酸鹽有關(guān)；在1%SDS中溶解度為2 879.95 μg·mL-1，提高約10倍，表明膽酸鹽、SDS等表面活性劑有助于提高卡馬西平的溶解度。如表1所示。

表1 卡馬西平原料藥溶解度結(jié)果 Tab.1 Solubility results of carbamazepine

3.2卡馬西平在不同溶出介質(zhì)中滲透性測(cè)定

3.2.1滲透速率比較 卡馬西平原料藥在pH 1.2，4.0，6.8，和水、FeSSIF介質(zhì)中的滲透速率分別為1.17，1.22，1.02，1.19和1.08 μg·min-1·(cm2)-1，其中在pH 6.8略偏低，其他pH條件下差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，表明溶出介質(zhì)的pH和膽酸鹽對(duì)滲透速率基本無影響。由于人工仿生膜對(duì)高濃度的SDS不耐受，也非體內(nèi)正常的生理環(huán)境，未開展相關(guān)研究。見表2。

表2 卡馬西平原料藥滲透速率結(jié)果 Tab.2 Permeability rate results of carbamazepine

3.2.2有效滲透性分析 隨著檢測(cè)時(shí)間的增加，藥物逐漸通過模擬的胃腸道細(xì)胞膜，由供體室轉(zhuǎn)移到受體室中，根據(jù)受體室中測(cè)得的藥物濃度，測(cè)定藥物的有效滲透性。在pH 6.5介質(zhì)中，卡馬西平的有效滲透性為9.54×10-5cm·s-1，高于美托洛爾在相同條件下測(cè)得的有效滲透性數(shù)值(9.30×10-5cm·s-1)，且3次測(cè)定結(jié)果的RSD值為1.19%，具有較好的重復(fù)性。在pH 5.0介質(zhì)中，卡馬西平的有效滲透性為8.34×10-5cm·s-1，也高于美托洛爾在相同條件下測(cè)得的有效滲透性數(shù)值(1.53×10-5cm·s-1)，且3次測(cè)定結(jié)果的RSD值為2.62%，也具有較好的重復(fù)性。研究通過PAMPA測(cè)定方法證實(shí)了卡馬西平為高滲透性藥物。見圖1、圖2。

圖1 卡馬西平原料藥在供體室(A)和受體室(B)中的濃度(pH 6.5)Fig.1 Concentration of carbamazepine in donor compartment(A) and receptor compartment(B)(pH 6.5)

圖2 卡馬西平原料藥在供體室(A)和受體室(B)中的濃度(pH 5.0)Fig.2 Concentration of carbamazepine in donor compartment(A)and receptor compartment(B)(pH5.0)

3.3不同來源卡馬西平原料藥的固有溶出速率比較分析

3.3.1固有溶出速率比較 仿制企業(yè)A、仿制企業(yè)B和仿制企業(yè)C原料藥的固有溶出速率分別為38.48，38.71和39.34 μg·min-1·(cm2)-1，均顯著高于原研制劑原料藥33.88 μg·min-1·(cm2)-1(P<0.05)。見表3。

3.3.2粒徑分析 如圖3所示，原研制劑原料藥粒徑呈現(xiàn)均勻的正態(tài)分布，仿制企業(yè)A和C原料藥粒徑分布不均勻，不呈正態(tài)分布，有雙峰顯現(xiàn)，仿制企業(yè)B原料藥顆粒中粒徑整體偏小。仿制藥企業(yè)所用原料藥的粒徑大小不統(tǒng)一，同原研制劑存在一定差異。根據(jù)固有溶出速率和顆粒體積平均粒徑結(jié)果比較來看，顆粒粒徑越小、比表面積越大，固有溶出速率越高(表3)，表明固有溶出速率同原料藥體積平均粒徑有關(guān)，提示原料藥的粒徑可能會(huì)影響卡馬西平的體內(nèi)吸收。

圖3 不同企業(yè)卡馬西平原料藥粒徑分布Fig.3 Particle size distribution of carbamazepine from different companies

表3 不同企業(yè)所使用卡馬西平原料藥固有溶出速率結(jié)果(pH 1.2) Tab.3 Dissolution rate results of carbamazepine from different companies(pH 1.2)

3.3.3XPRD和SEM分析 通過XRPD測(cè)定4家企業(yè)所用的原料藥晶型一致，均為卡馬西平典型峰(圖4)，但SEM測(cè)定結(jié)果顯示的不同來源的原料藥顆粒表面均不相同(圖5)，推測(cè)這是由于原料藥重結(jié)晶工藝不同引起的。經(jīng)調(diào)研發(fā)現(xiàn)，原研制劑原料藥采用甲醇和水結(jié)晶制備原料藥顆粒，而仿制企業(yè)A、B、C原料藥均采用甲醇和乙醇結(jié)晶制備顆粒，可能是導(dǎo)致顆粒粒徑不一致的原因，其中仿制企業(yè)A和C的原料藥均為同一家原料藥生產(chǎn)企業(yè)產(chǎn)品，而兩者粒徑差異較大，調(diào)研證實(shí)仿制藥企業(yè)C在處方加工過程中，為了增加溶出效果，加快溶出速率，會(huì)將原料藥打碎過篩，因此導(dǎo)致粒徑較小。仿制企業(yè)B所用原料藥為另一家企業(yè)產(chǎn)品，其原料藥經(jīng)過微粉化過篩，導(dǎo)致顆粒整體偏小。

圖4 不同來源卡馬西平原料藥XRPD測(cè)定結(jié)果Fig.4 XRPD patterns of carbamazepine from different companies

圖5 不同來源卡馬西平原料藥SEM測(cè)定結(jié)果Fig.5 SEM photos of carbamazepine from different companies

3.4卡馬西平及卡馬西平二水合物在不同溶出介質(zhì)中固有溶出速率研究 如圖6所示，通過X射線衍射法確定卡馬西平二水合物晶型已經(jīng)完全轉(zhuǎn)變。不同pH值介質(zhì)條件下卡馬西平原料藥和自制二水合物固有溶出速率測(cè)定結(jié)果如表4所示，卡馬西平原料藥在pH值1.2，4.0，6.8和水中的固有溶出速率分別為33.88，31.07，24.99和27.55 mg·min-1·(cm2)-1，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，表明在偏酸性介質(zhì)條件固有溶出速率較高；而卡馬西平二水合物在相同的介質(zhì)中的固有溶出速率分別為23.19，24.58，22.22和23.37 mg·min-1·(cm2)-1(含量以卡馬西平計(jì))，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，表明固有溶出速率不受pH值的影響。研究中發(fā)現(xiàn)在同種pH值介質(zhì)條件下，卡馬西平固有溶出速率顯著高于卡馬西平二水合物的固有溶出速率(P<0.05)，結(jié)果表明卡馬西平在潮濕環(huán)境下易形成的卡馬西平二水合物，可能會(huì)對(duì)溶出有一定影響。

表4 卡馬西平原料藥和二水合物固有溶出速率結(jié)果 Tab.4 Intrinsic dissolution rate results of carbamazepine and its dihydrate

圖6 卡馬西平二水合物XRPD圖譜Fig.6 XRPD pattern of carbamazepine dihydrate

4 討論

本研究中參照日本橙皮書[18]和《美國藥典》43版[19]，選擇pH值1.2，4.0，6.8，水和1%SDS作為實(shí)驗(yàn)介質(zhì)，同時(shí)增加餐后環(huán)境溶解度測(cè)試，選擇FeSSIF作為實(shí)驗(yàn)介質(zhì)測(cè)定溶解度。測(cè)得卡馬西平在水中溶解度為209.53 μg·mL-1明顯高于Drugbank和日本橙皮書中卡馬西平溶解度，可能同本研究測(cè)定溶解度所采用的原位光纖紫外監(jiān)測(cè)系統(tǒng)有關(guān)，其利用原位光纖在線檢測(cè)技術(shù)，能實(shí)時(shí)在線監(jiān)測(cè)待測(cè)化合物的溶解行為曲線，與傳統(tǒng)搖瓶法測(cè)定溶解度相比，可節(jié)約大量時(shí)間與成本，而且避免傳統(tǒng)搖瓶法由于操作繁瑣帶來溶解度損失的問題，能夠很好地反應(yīng)藥物的飽和溶解度。

藥物滲透性測(cè)定方法包括體內(nèi)藥動(dòng)學(xué)方法或體外滲透性方法，即人體試驗(yàn)、動(dòng)物體內(nèi)實(shí)驗(yàn)和體外實(shí)驗(yàn)[20]。盡管人體小腸灌流法是最直接的測(cè)量滲透性的方法，但由于人體試驗(yàn)操作復(fù)雜，成本高，因此到目前為止僅有LENNERNAS等[21]于2007年發(fā)表的29種藥物的人體小腸滲透性數(shù)據(jù)可作為準(zhǔn)確的判斷依據(jù)。相比體內(nèi)實(shí)驗(yàn)，研究者更傾向于選用體外細(xì)胞實(shí)驗(yàn)或人工膜滲透實(shí)驗(yàn)來建立滲透性評(píng)價(jià)模型，并選擇已知滲透性數(shù)據(jù)的美托洛爾作為參比藥物，驗(yàn)證所建立模型的適用性[22]。AVDEEF等[23]利用本試驗(yàn)采用的人工膜滲透實(shí)驗(yàn)測(cè)定裝置證實(shí)藥物滲透性結(jié)果與人體小腸灌流法測(cè)定的滲透性結(jié)果呈正相關(guān)，相關(guān)系數(shù)為0.83，說明人工膜滲透性測(cè)定法中使用的被動(dòng)轉(zhuǎn)運(yùn)模型可以很好地模擬人體小腸結(jié)構(gòu)，適合用于體外滲透性測(cè)定模型的建立。本研究參考溶出曲線研究，選擇pH值1.2，4.0，6.8不同pH值介質(zhì)和水測(cè)定原料藥滲透速率，并增加餐后環(huán)境滲透性測(cè)定，發(fā)現(xiàn)卡馬西平原料藥在以上介質(zhì)的滲透速率差異并不明顯，表明卡馬西平原料藥滲透速率比較穩(wěn)定，不受介質(zhì)pH值和膽酸鹽影響。研究進(jìn)一步證實(shí)了無論何種劑型，食物的攝取不影響卡馬西平的吸收速率和吸收程度。FDA 推薦了可以作為腸道原位灌流實(shí)驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)物的20種藥物，其中高滲透性的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)為美托洛爾和酮洛芬[19]，滲透性的高低可通過與同一方法測(cè)得的美托洛爾的數(shù)值進(jìn)行比較。有文獻(xiàn)[24]報(bào)道人體的空腹腸液pH為6.5，飽腹腸液pH為5.0[24]，為了使?jié)B透性的測(cè)定條件更接近人體胃腸道環(huán)境，選擇pH 6.5和pH 5.0作為實(shí)驗(yàn)介質(zhì)，并同參比藥物美托洛爾進(jìn)行比較。結(jié)果表明，卡馬西平原料藥在pH 6.5和5.0磷酸鹽緩沖液中可以通過被動(dòng)轉(zhuǎn)運(yùn)被吸收，均高于相同介質(zhì)的美托洛爾的滲透性數(shù)值，被動(dòng)轉(zhuǎn)運(yùn)的有效滲透性為高滲透性。臨床試驗(yàn)結(jié)果顯示該藥物口服后約12 h內(nèi)達(dá)平均血漿峰值濃度，表明其在體內(nèi)的溶解度低可能是影響體內(nèi)吸收緩慢的主要因素，但藥物-藥物、藥物-食物、藥物-疾病之間的相互作用，以及各種藥物代謝酶和生物膜上存在的攝取、外排轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白也會(huì)影響藥物的吸收過程。本研究中根據(jù)滲透性的測(cè)定結(jié)果，并結(jié)合溶解度測(cè)定結(jié)果，證實(shí)了卡馬西平為低溶解性高滲透性藥物，溶解度將是影響體內(nèi)吸收的主要因素。

仿制企業(yè)同原研制劑所使用的卡馬西平原料藥固有溶出速率存在顯著差異，經(jīng)過粒徑測(cè)定，我們發(fā)現(xiàn)顆粒粒徑越小、其比表面積越大，從而引起原料藥固有溶出速率升高。前期研究已經(jīng)證實(shí)卡馬西平為低溶解性高滲透性藥物，原料藥固有溶出速率不同會(huì)直接影響藥物的溶出速率，從而影響藥物體內(nèi)吸收速率。有研究[25]通過對(duì)國內(nèi)5個(gè)廠家生產(chǎn)的卡馬西平片體外溶出度進(jìn)行分析，發(fā)現(xiàn)仿制藥與參比制劑溶出曲線的相似性上均存在差異，在完成2020年卡馬西平片國家藥品抽驗(yàn)任務(wù)中也發(fā)現(xiàn)部分企業(yè)樣品存在此現(xiàn)象。本研究表明原料藥粒徑可能是影響卡馬西平片體外溶出存在差異的原因，需要進(jìn)一步研究確證?？R西平是一種變異性高、治療窗口的藥物，需控制體內(nèi)釋藥速率，而粒徑小、溶出快，可能導(dǎo)致體內(nèi)血藥濃度超過上限，引起療效差異和不良反應(yīng)，因此應(yīng)對(duì)原料藥的粒徑嚴(yán)格把關(guān)，建立統(tǒng)一標(biāo)準(zhǔn)，消除潛在的風(fēng)險(xiǎn)因素，提高仿制藥的質(zhì)量水準(zhǔn)。

卡馬西平不同晶型的溶出速率和體內(nèi)吸收也存在一定差異[16]。KAHELA等[15]發(fā)現(xiàn)卡馬西平無水物和二水合物形式體外溶出和體內(nèi)藥物代射均有較大差異。根據(jù)文獻(xiàn)[26]報(bào)道，筆者制備卡馬西平二水合物，結(jié)果顯示，二水合物對(duì)溶出速率有一定降低，但同相關(guān)文獻(xiàn)報(bào)道的影響較大卻有一定差距，提示卡馬西平形成二水合物可能對(duì)藥物溶出釋放有一定影響，但是可能不是主要影響因素，需要進(jìn)一步探究制劑中卡馬西平二水合物的影響。研究提示卡馬西平在潮濕的環(huán)境容易不穩(wěn)定，貯存時(shí)應(yīng)避免高濕，建議采用隔濕效果較好的包裝材料，同時(shí)也建議在藥品質(zhì)量評(píng)價(jià)中增加卡馬西平二水合物檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)。