緩沖液
- TAE緩沖液應用于對流免疫電泳的實驗效果分析
術的采用，使在緩沖液體系中帶電的抗原抗體呈定向運動，加快了兩者的結合，并且限制了抗原抗體在介質中向四周擴散的傾向，提高了反應時間，顯著增加了實驗靈敏度[1]，常用于抗原或抗體的定性分析、效價測定及純度鑒定[2]。對流免疫電泳實驗在臨床檢驗和醫(yī)學院校的臨床免疫學檢驗教學中有很重要意義。對流免疫電泳的原理是在pH值為8.6的瓊脂凝膠中，大部分蛋白質抗原等電點低，帶較強負電荷，且分子量小，電泳力大于電滲力，在電場中向正極移動；而抗體絕大多數(shù)為IgG，因其等電點偏
科技風 2023年3期2023-02-18
- 具有區(qū)分力的葉酸片體外溶出度測定方法研究
4.5醋酸鹽緩沖液、pH 5.0醋酸鹽緩沖液、pH 6.8磷酸鹽緩沖液）中的溶出度，并使用相似因子（f2）法進行溶出曲線的相似性評價，以期為葉酸片仿制藥質量一致性評價和處方開發(fā)提供參考。1 儀器與試藥1.1 儀器860DL自動溶出儀（美國Logan公司）；S40型pH酸度計[梅特勒-托利多儀器（上海）有限公司]；Agilent 8454紫外可見分光光度計（美國安捷倫公司）；MS204TS/02電子天平[梅特勒-托利多儀器（上海）有限公司]；金怡SHA-2
食品與藥品 2022年4期2022-08-08
- 不同預處理對酒精浸制標本DNA提取效果比較
EDTA 鹽水緩沖液（STE）、磷酸緩沖鹽溶液（PBS）和無菌水，0.9%NaCl 溶液、STE 鹽水緩沖液、PBS 磷酸緩沖鹽溶液對干制昆蟲標本的基因組DNA 的得率均有一定程度的提高，無菌水處理則會降低DNA的得率［1，4，12］。HUANG等［2］通過對瓢蟲干制標本預處理的研究發(fā)現(xiàn)0.9%NaCl溶液和STE 緩沖液的預處理效果優(yōu)于PBS 緩沖液。對于昆蟲酒精浸制標本而言，目前尚不清楚這4 種預處理方式是否具有同樣的提升效果。朽木甲亞科Allecul
延安大學學報（自然科學版） 2022年2期2022-07-04
- 醋酸纖維薄膜電泳緩沖系統(tǒng)置換及緩沖條件優(yōu)化
比妥-巴比妥鈉緩沖液，同時優(yōu)化其實驗條件，達到和巴比妥-巴比妥鈉緩沖系統(tǒng)一樣的實驗效果。1 材料與方法1.1 試驗材料此次試驗選取的初生牛血清。1.2 儀器和器材電泳儀（北京市六一儀器廠DYY-10C）；電泳槽（北京六一儀器廠DYC38B）；pH計（梅特勒-托利多儀器有限公司FE28）；醋酸纖維薄膜（路橋四甲生化塑料廠2cm×8cm）。1.3 試驗設計緩沖系統(tǒng)優(yōu)化：選用以下5種常見緩沖系統(tǒng)，離子強度、pH值與巴比妥緩沖系統(tǒng)相同（0.09mol/L，pH8.
科技視界 2022年10期2022-05-20
- 血清蛋白醋酸纖維膜電泳緩沖液的篩選
泳常用的巴比妥緩沖液試劑不易購得，其他替代緩沖液分離血清蛋白效果又說法不一，因此，篩選適合該電泳的緩沖液對保障實驗質量有重要意義。基于實驗原理及電泳緩沖液的特點，選取幾種常用緩沖液進行篩選試驗，為教學和科研提供依據(jù)。1 材料和方法1.1 材料(1)成年家兔：由河北北方學院實驗動物科提供。(2)電泳支持物：醋酸纖維膜，2.0 cm×8.0 cm，購自北京六一生物技術有限公司。(3)主要試劑：Tris堿，鹽酸，磷酸，乙二胺四乙酸二鈉(Na2EDTA)，硼酸，四
河北北方學院學報（自然科學版） 2022年11期2022-02-03
- SEMA3A、SEMA3B蛋白免疫組化染色中抗原修復方法的優(yōu)化
復方法，枸櫞酸緩沖液和EDTA緩沖液是最兩種常使用的修復液。免疫組化染色顯示SEMA3A和SEMA3B表達主要定位于細胞質。為了更好的展示細胞質抗原免疫組化染色效果，本實驗選擇了不同的熱修復方法和修復液，對上述細胞質蛋白進行免疫組化檢測，尋找最佳的修復方法，以提高細胞質抗原染色的準確性和可靠性。1 材料與方法1.1 材料與試劑收集2015～2020年石河子大學醫(yī)學院第一附屬醫(yī)院手術切除的口腔鱗狀細胞癌癌旁正常組織標本40例，所有病例病理診斷明確。Olymp
臨床與實驗病理學雜志 2021年10期2021-12-13
- pH（酸度）計的選擇、使用及保養(yǎng)
計測量配置好的緩沖液液溫，調(diào)節(jié)儀器顯示的溫度，使其與被測緩沖液的液溫一致。（4）將電極用蒸餾水洗凈并用濾紙擦干，用吸管吸取配制好的緩沖液（6.86pH）對電極進行潤洗，取少量配制好的緩沖液（6.86pH）倒入燒杯中，放入電極，輕輕搖晃至電極表面無氣泡，讀數(shù)穩(wěn)定后，調(diào)整儀器定位，使儀器示值與配制的緩沖液標稱值一致。（5）取出電極后用蒸餾水清洗并用濾紙擦干，用吸管吸取配制好的緩沖液4.00pH（或9.18pH）對電極進行潤洗，取少量配制好的緩沖液（4.00pH
商品與質量 2021年31期2021-08-20
- 水浴法測定飼用植酸酶耐熱性方法的研究
.2 試驗試劑緩沖液Ⅰ為0.25 mol/L 乙酸-乙酸鈉緩沖液，pH值5.5。緩沖液Ⅱ為0.25 mol/L乙酸-乙酸鈉緩沖液，含有0.5 g/L 牛血清白蛋白、0.5 g/L 曲拉通X-100，pH 值5.5。耐熱稀釋緩沖液用于耐熱試驗中植酸酶的浸提和稀釋，酶溶解在該緩沖體系中進行耐熱性處理。1.3 儀器設備BSA224S-CW 分析天平（德國賽多利斯）、DK-98-Ⅱ-雙列四孔恒溫水浴鍋（天津泰斯特儀器有限公司）、V-1800可見分光光度計（上海美譜
現(xiàn)代畜牧獸醫(yī) 2021年3期2021-04-03
- 熱處理輔助水酶法提取芝麻油的工藝
例浸泡于檸檬酸緩沖液中，然后進行熱處理[14]。水酶法步驟：酶解所用的酶制劑為水解蛋白酶Alcalase 2.4 L，加酶量為2%（粉碎后芝麻粉質量的2%），酶解過程用2 mol/L的NaOH調(diào)pH，酶解條件為：pH 9.0、溫度55 ℃、酶解時間3 h。離心轉速和時間為10 000 r/min、10 min，溫度為4 ℃。離心后分為4層（游離油1、乳狀液、水解液和殘渣），取出乳狀液再次進行冷凍，二次離心，得游離油2，最后將2次所得油脂稱量計數(shù)[8]。芝麻
食品工業(yè) 2021年3期2021-04-01
- 利用N糖苷酶F對單克隆抗體N糖酶解條件的優(yōu)化
e F)及變性緩沖液(5×)均購自New England BioLabs公司；無水乙醇、甲酸銨、乙酸、二甲基亞砜(DMSO)、2-氨基苯甲酰胺(2-AB)、氰基硼氫化鈉、β-巰基乙醇等均購自Sigma公司；甲酸和乙腈購自Fisher公司；PBS Buffer(1×)購自上海生工；10 kD超濾離心管購自Merck公司；100 mmol·L-1Tris-HCl(含1% SDS，pH 9.0)溶液和非涂層-熔融石英毛細管購自Beckman公司；純化柱(Glyc
生物技術進展 2021年2期2021-03-30
- 新型醋酸纖維素薄膜電泳緩沖液的研究
泳實驗最常用的緩沖液是巴比妥緩沖液，巴比妥緩沖液緩沖能力強、穩(wěn)定性好，以該緩沖液為電泳介質的樣品分離效果好，但該緩沖液中用到的巴比妥和巴比妥鈉作為麻醉鎮(zhèn)靜藥物，安全性存在隱患，在試劑采購方面也存在限制，因此研究適用于醋酸纖維素薄膜電泳的新型緩沖液具有重要的意義。本研究以人血清為樣品進行醋酸纖維素電泳來檢驗不同電泳緩沖液的效果。1.材料與方法1.1 實驗材料醋酸纖維薄膜（2cm×8cm）；人血清；巴比妥緩沖液（pH8.6，離子強度0.06）[1]：巴比妥1.
中國科技縱橫 2021年24期2021-03-02
- 重組抗人表皮生長因子受體2單克隆抗體酸性異構體去除工藝的優(yōu)化
過調(diào)整不同層析緩沖液組分的比例，實現(xiàn)pH梯度洗脫，從而分離出抗體電荷異構體。同樣，F(xiàn)ARMAN等［11］通過調(diào)節(jié)緩沖液組分的比例實現(xiàn)了分離電荷異構體的目的。但這種方法涉及的緩沖液種類較多，工藝過程較復雜，pH控制不穩(wěn)定，很難應用在生產(chǎn)放大。深圳萬樂藥業(yè)有限公司（簡稱萬樂藥業(yè)）生產(chǎn)的由中國倉鼠卵巢細胞（CHO）發(fā)酵的抗人表皮生長因子受體2（human epidermal growth factor receptor 2，HER2）單克隆抗體類似藥，經(jīng)親和層析
中國生物制品學雜志 2021年2期2021-02-25
- 淺談提升動物實驗室血凝與血凝抑制檢測準確率的方法
的操作2.1 緩沖液的操作2.1.1 緩沖液的種類。在展開血凝試驗與血凝抑制試驗時，兩者使用的緩沖液存在明顯差異，常見的緩沖液包括兩種，第一種生理鹽水；第二種磷酸鹽緩沖液。在常規(guī)的禽流感抗體檢測檢驗中，會選用濃度85%的生理鹽水作為緩沖液，因為當生理鹽水的濃度超過85%后，容易導致紅細胞出現(xiàn)非特異性凝集，但是生理鹽水并不能持續(xù)具備反應系統(tǒng)pH值的能力。而磷酸鹽緩沖液具備此能力。利用磷酸鹽緩沖液展開禽流感抗體檢測，獲取的抗體效價與利用生理鹽水相較，體現(xiàn)出明顯
新農(nóng)民 2020年11期2020-12-15
- 《承德醫(yī)學院學報》可以直接使用的英文縮略詞
鹽）DMEM（緩沖液培養(yǎng)基）OCT（包埋劑）DMSO（二甲基亞砜）PB（磷酸緩沖液）DNase（脫氧核糖核酸酶）PBS（磷酸鹽緩沖液）ECL（增強型化學發(fā)光法）PBST（磷酸鹽吐溫緩沖液）EDTA（乙二胺四乙酸）PVDF（聚偏二氟乙烯）ELISA（酶聯(lián)免疫吸附測定）RT-PCR（反轉錄-聚合酶鏈式反應）FITC（異硫氰酸熒光素）SDS-PAGE（SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳）GAPDH（3-磷酸甘油醛脫氫酶）qPCR（實時定量PCR）GFAP（膠質纖維酸性蛋
承德醫(yī)學院學報 2020年4期2020-12-14
- 響應面優(yōu)化可溶態(tài)和膜結合態(tài)馬鈴薯多酚氧化酶提取工藝
34.12倍。緩沖液浸提法是一種液-固萃取方法,因此緩沖液對提取效果影響很大[11]。常用的緩沖溶液以磷酸鹽為基底,采用聚乙烯吡咯烷酮(PVP)結合吐溫-80(Tween-80)、聚乙二醇辛基苯基醚(TritonX-100)、抗壞血酸(VC)中的一種或幾種配制而成[12-13]。由于mPPO和sPPO性質的差異,提取方法會直接影響到提取效果,且將馬鈴薯sPPO和mPPO區(qū)分提取的研究報道極少。因此,本實驗通過緩沖溶液浸提法對sPPO進行提取,通過超聲波輔助
食品工業(yè)科技 2020年24期2020-12-09
- 提取緩沖液對桑葉中生理生化指標測定的影響＊
度、時間及提取緩沖液等多方面因素的影響，其中，提取緩沖液的選擇是一項保證酶活力得到準確檢測的重要影響因素，在很大程度上影響酶液的提取效果，而磷酸鹽緩沖液、生理鹽水等提取緩沖液是實驗研究中常采用的提取緩沖液種類[4，5]。本研究就文獻研究中常用的磷酸鹽緩沖液、生理鹽水等提取緩沖液是否會對桑葉中可溶性蛋白含量、MDA含量及SOD、CAT、POD的活力測定存在影響進行了對比分析，為更準確地實施桑葉生理生化指標測定工作提供數(shù)據(jù)方面的支持。1 材料與方法1.1 材料
蠶桑通報 2020年1期2020-07-10
- 外周血細胞FISH快速檢測反應體系的分析
備 (1)雜交緩沖液配制：緩沖液F(20%甲酰胺，10%硫酸葡聚糖，0.9%NaCl)；緩沖液G(20%丙三醇，10%硫酸葡聚糖，0.9%NaCl)；50%甲酰胺緩沖液(50%甲酰胺，10%硫酸葡聚糖，0.1%SDS，2×SSC)；碳酸乙烯酯緩沖液(20%硫酸葡聚糖，15%碳酸乙烯酯，600 mmol/L NaCl，10 mmol/L檸檬酸，pH 6.2)。(2)雜交探針配制：將紅色探針、綠色探針、Cot-1 DNA和雜交緩沖液按1 ∶1 ∶1 ∶7的比例
臨床與實驗病理學雜志 2020年5期2020-06-29
- 轉氨基作用與氨基酸紙層析實驗的改進*
題：可否用其他緩沖液代替磷酸緩沖液？轉氨基時間能否縮短？當小白鼠數(shù)量不夠時，肝勻漿可否稀釋使用？未用完的肝勻漿保存一段時間是否還有活性？添加輔酶-磷酸吡哆醛(pyridoxal phosphate，PP)能否加快轉氨基反應？通過回答這些問題，我們改進了轉氨基作用與氨基酸紙層析的方式方法，極大提高了實驗效率，現(xiàn)與同行分享。1 材料與方法1.1 試劑磷酸二氫鈉、磷酸二氫鉀為天津市科密歐化學試劑有限公司產(chǎn)品，磷酸氫二鈉為天津市致遠化學試劑有限公司產(chǎn)品，Tris購
湖北科技學院學報(醫(yī)學版) 2020年2期2020-05-21
- 一種胰蛋白酶親和材料的制備及應用
ris-HCl緩沖液（20 mmol/L，pH 7.3）將菌體洗滌三次，用相同Tris-HCl緩沖液將菌體重懸，在冰浴條件下超聲破碎，直至菌體懸浮液由黏稠變?yōu)橥噶?。將破碎的菌液?0℃加熱30 min，然后以12 000 r/min離心10 min，取上清，即得BTI粗蛋白。重組蛋白BTI帶有6×His標簽，采用親和層析法純化，在蛋白純化系統(tǒng)（美國BIO-RAD）上進行，檢測280 nm處吸光度，流速控制為1 mL/min。用緩沖液（20 mmol/L T
食品工業(yè) 2020年4期2020-05-06
- 微柱離心-HPLC法測定半乳糖化去甲斑蝥素脂質體的包封率*
pH 7.0)緩沖液溶脹24 h后，取5 mL注射器去掉內(nèi)芯，底部墊入合適圓形濾紙墊片，將溶脹充分的SephadexG-50緩慢填入其中，排除氣泡，以PBS緩沖溶液平衡1個柱體積，1000 r/min離心1 min，重復平衡、離心三次，得到高度約2 cm的凝膠微柱[9～11]。2.3.2 離心力對空白脂質體過柱率的影響吸取0.2mL blank-Gal-Lips，緩慢加到凝膠微柱上，靜置吸附5 min后，加入0.5 mL PBS緩沖液，以不同的離心力(60
廣州化工 2020年5期2020-03-31
- 優(yōu)化三個因素改善血漿蛋白醋酸纖維薄膜電泳效果*
比妥-巴比妥鈉緩沖液電泳[1]。這些點樣材料和緩沖液有不少弊端：首先，血漿在蓋玻片和X光膠片上難以分布均勻，以致無法形成整齊的點樣線，造成電泳條帶數(shù)量少、條帶不清晰、條帶畸形；其次，巴比妥鈉有毒[2]，價格昂貴，不易采購；此外，巴比妥緩沖液電泳分離的條帶間距小，很難得到6條帶，不便于后續(xù)各類蛋白的定量。為此，本研究擬比較點樣材料、磷酸緩沖液緩濃度及點樣量對電泳效果的影響，確定最佳點樣材料、最適緩沖液濃度和最適點樣量，從而建立理想的電泳體系，為后續(xù)的條帶定量
湖北科技學院學報(醫(yī)學版) 2020年1期2020-01-08
- 注射用重組人鈣調(diào)蛋白磷酸酶B亞基成品鑒別試驗方法的建立
、溶液配制TG緩沖液：稱取三羥甲基氨基甲烷15.12g，甘氨酸72g，加水溶解并稀釋至500ml，4℃保存。EBM緩沖液：量取TG緩沖液20ml，加甲醇40ml，再加水稀釋至200ml，4℃保存TTBS緩沖液：稱取三羥甲基氨基甲烷6.05g，氯化鈉4.5g，量取聚山梨酯80 0.55ml，加適量水溶解，用鹽酸調(diào)pH值至7.5，加水稀釋至500ml，4℃保存。封閉液：含10%牛白蛋白的TTBS緩沖液。供試品溶液：取供試品1瓶加入滅菌注射用水適量復溶并轉移至1
昆明醫(yī)科大學報 2019年2期2019-09-10
- 十二烷基硫酸鈉毛細管電泳法分析非還原單克隆抗體藥物純度的前處理條件優(yōu)化
)溶液作為樣品緩沖液對免疫球蛋白G(IgG)進行還原和非還原處理以及與SDS的絡合[6]。而對于非還原單抗純度分析,使用現(xiàn)有的樣品緩沖液(pH 9.0)時,單抗樣品在處理過程中可能會發(fā)生抗體鏈間二硫鍵斷裂而產(chǎn)生非預期的降解片段,如輕鏈(light chain, LC)、重鏈(heavy chain, HC)、重輕鏈(heavy chain-light chain, HL)、重重鏈(heavy chain-heavy chain, HH)、重重輕鏈(heav
色譜 2019年6期2019-05-30
- 緩沖液種類對土壤酸性磷酸酶活性的影響
在一定pH值的緩沖液和溫度等環(huán)境條件下進行培養(yǎng)，最終通過測定酶促反應后生成物的量來計算酶的活性[2]。酶促反應是在一定環(huán)境條件下進行的。其中pH值與酶結構的穩(wěn)定性以及酶對底物的親和力密切相關[3]，對土壤酶活性的測定結果有顯著影響[4]。由于pH值對酶活性的顯著作用，為減少培養(yǎng)過程中因pH值浮動而造成的影響，通常采用一定的緩沖液來實現(xiàn)較穩(wěn)定的培養(yǎng)環(huán)境，而不同緩沖液影響下酶活性高低也有所不同。不適宜的pH值可能給酶促反應生成物的測定造成困難[5]。由于pH值
中國土壤與肥料 2018年5期2018-11-05
- 乳鼠及成年大鼠腦皮質膜蛋白差異的分析
不易溶解于水性緩沖液系統(tǒng)中。因此，膜蛋白的制備和獲得是研究膜蛋白組學的關鍵技術難點，所提取蛋白純度的高低會直接影響最終的實驗結果。制備膜蛋白樣品時，傳統(tǒng)的方法是使用去污劑，根據(jù)其明顯的疏水性特點，常選用離子型SDS和非離子型Triton-X等。SDS會使多數(shù)蛋白完全變性[2]，限制了很多下游分析。非離子型去污劑較為溫和，但是對于膜蛋白，特別是具有多個跨膜區(qū)膜蛋白的抽提效果往往很差。本研究中選用的Novagen ProteoExtract 跨膜蛋白抽提試劑盒
中國藥理學通報 2018年8期2018-07-27
- 基于響應面優(yōu)化的褶牡蠣中金屬硫蛋白提取工藝研究
加熱除雜蛋白、緩沖液勻漿離心法、凝膠過濾、離子交換及多種層析結合法等，然而其分離純化方法仍有待進一步提高，仍存在如雜蛋白干擾嚴重、MT提取率不高等問題[8,9]。本研究以褶牡蠣中金屬硫蛋白（MT）為對象，通過 Cd2+誘導褶牡蠣體內(nèi)產(chǎn)生MT，優(yōu)化牡蠣體內(nèi)MT提取條件，以期獲得MT制備的最佳工藝，為天然高效的海洋源MT產(chǎn)品開發(fā)與應用提供一定的參考。1 材料與方法1.1 材料與試劑褶牡蠣（Crassostrea plicatul）購自浙江省舟山市東河水產(chǎn)批發(fā)市
現(xiàn)代食品科技 2018年2期2018-03-13
- 高危介質雙密封機泵的應用及其常見沖洗方案的使用注意事項
N 52方案為緩沖液罐內(nèi)常壓，一旦一級密封發(fā)生泄漏，高危介質將由緩沖液導管進入緩沖液儲液罐，之后觸發(fā)緩沖液高液位報警，之后由上方泄放線進入泄放系統(tǒng)，安全排放。此方案適合液態(tài)烴，輕質油等不易凝結的介質。圖1 52方案Fig.1 PLAN 52圖2 53A方案Fig.2 PLAN 53A53A方案為儲罐內(nèi)存壓，壓力由現(xiàn)場氮氣線提供，一般緩沖液罐內(nèi)壓力高于密封腔介質壓力0.14～0.41 MPa，一旦一級密封發(fā)生泄漏，儲液罐介質將進入密封腔，避免高危介質外泄。此
當代化工 2017年11期2017-12-07
- 提取緩沖液pH值對植物組織中SOD、POD和CAT酶活性的影響
3319）提取緩沖液pH值對植物組織中SOD、POD和CAT酶活性的影響龔屾，石英，韓毅強，高亞梅，鄭殿峰，杜吉到（黑龍江八一農(nóng)墾大學農(nóng)學院，大慶 163319）植物組織中SOD、POD和CAT活性測定對于研究植物抗逆性極其重要。為了簡化實驗，利用比色法研究了四種作物在正常水分條件下和干旱脅迫下，不同pH值提取緩沖液對SOD、POD和CAT酶活性的影響。結果表明，SOD不適合在低pH值（6.0）提取緩沖液下提取，POD不適合在pH 7.0的提取緩沖液下提取
黑龍江八一農(nóng)墾大學學報 2017年2期2017-04-25
- “植物細胞骨架的顯示和觀察”的簡化方法
mol/L磷酸緩沖液(pH 6.8)、M-緩沖液、1% Triton X-100液、3%戊二醛、0.2%考馬斯亮藍R250染料、1/15 mol/L磷酸鹽緩沖液(pH 6.8)，實驗材料可以選洋蔥鱗葉。3.3 具體步驟 ①取洋蔥鱗莖內(nèi)表皮，用剪刀剪成約1 cm2大小，置于裝有pH 6.8磷酸緩沖液的50 mL燒杯中，使其下沉；②用吸管吸去磷酸緩沖液，用1% Triton X-100液，處理20～30 min；用吸管吸去Triton X-100液，再加入M-
生物學教學 2017年10期2017-02-18
- 利用果膠降解菌塔賓曲霉GYC 501改善梗絲品質及其發(fā)酵條件的優(yōu)化
并從發(fā)酵時間、緩沖液濃度、緩沖液pH值、發(fā)酵溫度、酶的使用量入手，先進行單因素優(yōu)化實驗再進行正交實驗,以優(yōu)化發(fā)酵條件。結果顯示：使用塔賓曲霉(Aspergillustubingensis) GYC 501在煙草梗絲培養(yǎng)基中發(fā)酵48 h后所得到的發(fā)酵液對煙草梗絲進行發(fā)酵處理，得到最優(yōu)發(fā)酵條件：酶使用量為1536 U，發(fā)酵時間為12 h，溫度為42 ℃，緩沖液pH為4.8，緩沖液濃度為0.3 mol/L，梗絲含水量為50%。在此最優(yōu)發(fā)酵條件下,梗絲果膠降解率最
江西農(nóng)業(yè)學報 2017年2期2017-02-17
- 制取小麥旗葉粗酶液的最佳緩沖體系研究
鈉-磷酸二氫鈉緩沖液為提取緩沖液時，PAL和LOX活力最高。當此緩沖液濃度為0.15 mol/L時，POD活力最高；當此緩沖液濃度為0.10 mol/L時，淀粉酶和LOX活力最高；當此緩沖液濃度為0.05 mol/L時，PAL活力最高。 [結論]制取粗酶液的最佳緩沖體系是pH 7.0、0.10 mol/L的磷酸氫二鈉-磷酸二氫鈉緩沖液。小麥；旗葉；粗酶液；緩沖體系小麥籽粒產(chǎn)量主要依賴于小麥開花后光合物質的積累[1-2]，而旗葉是小麥生育后期重要的光合器官，
安徽農(nóng)業(yè)科學 2016年35期2017-01-07
- 提取液及固-液分離方法對固態(tài)非淀粉多糖酶類活性的影響
、乙酸-乙酸鈉緩沖液(0.1 mol/L，pH 5.50)、磷酸鹽緩沖液(0.05 mol/L，pH 6.00)和0.9%NaCl溶液；溶液提取后的固-液分離方法分別為不分離、3 000 r/min離心3 min和中速濾紙過濾。每個處理5個重復，每個重復設2個平行，測定各個處理下酶的活性，并考察提取液的類型對酶制劑產(chǎn)品(α-半乳糖苷酶除外)溶解離心后溶液中溶質及蛋白質含量的影響。結果表明，磷酸鹽緩沖液溶解木聚糖酶后活性最高(P0.05)，且均顯著地高于去離
動物營養(yǎng)學報 2016年10期2016-11-15
- 《中國藥典》2010年版二部注射用頭孢哌酮鈉舒巴坦鈉含量測定方法探討
的 研究磷酸鹽緩沖液的用量對舒巴坦對照品色譜峰的影響。方法以半峰寬、拖尾因子、理論板數(shù)及質量/面積等參數(shù)為指標，研究不同用量的磷酸鹽緩沖液對舒巴坦對照品色譜峰的影響程度，從而確定合適的磷酸鹽緩沖液用量。結果隨著磷酸鹽緩沖液用量的增加，各指標均有不同程度的下降。結論磷酸鹽緩沖液的用量必須控制在合適的范圍內(nèi)。舒巴坦；高效液相色譜法；色譜峰評價注射用頭孢哌酮鈉舒巴坦鈉收載于《中國藥典》2010年版，為頭孢哌酮鈉及舒巴坦鈉不同配比的復方制劑，實驗證實，2種成分配伍
西北藥學雜志 2016年5期2016-09-22
- 紡織品水萃取液pH值測定的不確定度評定
總量貢獻最大，緩沖液配制產(chǎn)生的不確定度貢獻較小，pH計產(chǎn)生的不確定度以及樣品稱量產(chǎn)生的不確定度貢獻最小。關鍵詞：紡織品；水萃取液；pH值；不確定度；緩沖液 文獻標識碼：A中圖分類號：TS17 文章編號：1009-2374（2016）24-0070-03 DOI：10.13535/j.cnki.11-4406/n.2016.24.0356 結語由圖2可以看出，在合成不確定度的來源中，重復性測量產(chǎn)生的不確定度以及萃取用水體積產(chǎn)生的不確定度對不確定度總量貢獻最大
中國高新技術企業(yè) 2016年24期2016-05-30
- 香菇菌絲體中SOD的提取工藝研究
加入3mL磷酸緩沖液，置于液氮中研磨，4℃、10 000r/min離心15min，上清液即為粗酶液。1.3.3SOD的純化[7]向粗酶液中加入0.25倍體積的氯仿-乙醇(3∶5)溶液，充分混勻后4℃、15 000r/min離心20min，去除雜蛋白沉淀；繼續(xù)向上清液中加入0.6倍體積冷丙酮，充分混勻后4℃、15 000r/min離心20min，得到SOD沉淀；用提取緩沖液溶解，55℃熱處理15min后離心，棄沉淀得到SOD純化酶液，測定SOD活性及蛋白質含
特產(chǎn)研究 2016年1期2016-03-26
- 磷酸鹽緩沖液活化蝦殼材料脫除鎘的初步研究
049）磷酸鹽緩沖液活化蝦殼材料脫除鎘的初步研究李濛曉妍1，2，萬 鵬1，蔡冰娜1，陳得科1，2，朱曉連1，2，孫恢禮1，陳 華1，潘劍宇1（1.中國科學院熱帶海洋生物資源與生態(tài)重點實驗室/中國科學院南海海洋研究所/廣東省海洋藥物重點實驗室，廣東 廣州 510301；2.中國科學院大學，北京 100049）蝦殼黏附蛋白中的酸性氨基酸殘基含量相對較高，有利于蝦殼通過陽離子交換方式脫除水溶液中的重金屬。脫無機鹽蝦殼經(jīng)磷酸鹽緩沖液浸泡活化可以得到一種能夠脫除水溶
廣東農(nóng)業(yè)科學 2016年12期2016-02-08
- 比較不同抗原修復液對免疫組化結果的影響
程中選擇不同的緩沖液，可能對免疫組化結果產(chǎn)生不同的影響。在本文中，我們選擇高壓熱修復方式，研究兩種不同抗原修復液，即檸檬酸緩沖液及Tris－EDTA（TE）緩沖液，對免疫組化結果的影響。1 材料和方法1.1 組織福爾馬林固定石蠟包埋的肺癌組織切片及結腸癌組織切片均來自吉林大學中日聯(lián)誼醫(yī)院，切片厚度為3μm，每個蠟塊連續(xù)切取多張并貼附在商用硅包被的載玻片（世通公司）上，切片吸附后在65℃烤箱中烘烤2h以增強吸附力。1.2 試劑MUC1抗體分別購自BD公司（5
中國實驗診斷學 2015年8期2015-09-26
- 重癥監(jiān)護室患者連續(xù)性腎臟替代治療中應用不同緩沖液的利與弊
治療中應用不同緩沖液的利與弊楊 滿 綜述 袁偉杰 審校重癥監(jiān)護室(ICU)患者通常需行連續(xù)性腎臟替代治療(CRRT)。CRRT過程中，不同類型的緩沖液可能對水電解質酸堿平衡及臨床預后產(chǎn)生不同的影響。本文擬對乳酸鹽、碳酸氫鹽及枸櫞酸緩沖液的利弊，在不同危重情形下如何選擇這些緩沖液做一綜述。連續(xù)性腎臟替代治療 重癥監(jiān)護室 緩沖液重癥監(jiān)護室(ICU)的患者一旦出現(xiàn)急性腎損傷(AKI)或多器官功能障礙綜合征(MODS)，通常需接受連續(xù)性腎臟替代治療(CRRT)，以
腎臟病與透析腎移植雜志 2015年5期2015-04-03
- 毛細管電泳法測定L-谷氨酰胺呱侖酸鈉顆粒中2種主成分的含量Δ
μm）；運行緩沖液：40 mmol/L硼砂緩沖液（pH＝9.22）；樣品緩沖液：4 mmol/L硼酸緩沖液（pH＝6.97）；溫度：20 ℃；進樣方式：壓力進樣；進樣壓力：0.5 psi；進樣時間：5 s；分離電壓：15 kV；檢測波長：220 nm。試驗前石英毛細管柱分別用0.1 mol/L氫氧化鈉沖洗20 min，超純水沖洗5 min，運行緩沖液沖洗5 min，以保證毛細管柱充分清洗并平衡。每次進樣前依次用0.1 mol/L氫氧化鈉、超純水、運行緩沖
中國藥房 2015年15期2015-03-10
- 水稻細胞核DNA含量和倍性的流式細胞術測定
成功報道的分離緩沖液為參考，制備了水稻的細胞核懸液，通過比較以篩選出適用于水稻不同組織細胞核流式細胞術分析的最佳緩沖液，改善水稻細胞核分離效果，為快速、準確鑒定出水稻不同組織細胞核DNA含量和倍性提供實驗依據(jù).1 材料與方法1.1 材料和儀器流式細胞儀(FACSCalibur, 美國Backman公司).以水稻(Oryzasativa. L)品種中花11為研究對象，取在MS培養(yǎng)基中正常生長2周的幼苗葉、根尖以及大田中授粉15 d后的種子為實驗材料.細胞核分
中南民族大學學報（自然科學版） 2014年1期2014-08-06
- 柿葉總黃酮緩釋微丸累積釋藥率的測定
丁對照品磷酸鹽緩沖液的制備：精密稱取蘆丁對照品23.4 mg置于100 mL的容量瓶中，用適量的磷酸鹽緩沖液(pH=6.8)溶解后定容至刻度，搖勻，既得.(a)人工胃液將上述溶液分別在400～600 nm波長范圍內(nèi)掃描，結果表明，蘆丁對照品在人工胃液和磷酸鹽緩沖液中的最大吸收波長均在510 nm，因此選定510 nm為測定波長,如圖1所示.(b)磷酸鹽緩沖液(pH=6.8)圖1 蘆丁對照品的紫外-可見掃描圖2.2 標準曲線的繪制(1)人工胃液下標準曲線的繪
陜西科技大學學報 2014年2期2014-06-27
- 鷹嘴豆鐵蛋白提取工藝優(yōu)化研究
增加種子勻漿后緩沖液清洗3 次(20、20、10 mL)步驟。分別考慮緩沖液種類(KH2PO4-NaOH 緩沖液、Tris-HCl 緩沖液)、pH 值(7.0、7.5、8.0、8.5、9.0)、料液比(1∶1、1∶2、1∶3、1∶4)、鹽析鹽種類(50 mmol/L 的MgCl2、飽和度為15%～20%的(NH4)2SO4、鹽析濃度(10、20、30、40、50、60、70、80 mmol/L)對鷹嘴豆鐵蛋白提取工藝的影響［6-9］。采用1.2.2、1.2
天然產(chǎn)物研究與開發(fā) 2014年2期2014-01-09
- 毛細管電泳法測定頭孢羥氨芐膠囊中頭孢羥氨芐的含量
7 cm；運行緩沖液：50mmol/L 磷酸鹽緩沖液（pH值5.0）；工作電壓：25 kV；電壓進樣：10 kV×5 s；柱溫25℃；檢測波長230 nm；毛細管在每次運行前用0.1 mol/L 氫氧化鈉溶液、超純水各沖洗5 min，運行緩沖液沖洗10 min，在2次運行之間用緩沖液沖洗3 min。3 結果3.1 頭孢羥氨芐對照品及內(nèi)標（A）和樣品中頭孢羥氨芐及內(nèi)標（B）的CE 圖,見圖1。圖1 對照品（A）和樣品（B）的CE 圖3.2 線性試驗精密量取適
中外醫(yī)療 2013年13期2013-12-09
- 新型手性HPCE整體柱拆分氧氟沙星
s-H3PO4緩沖液按實驗需要配置成不同濃度和pH.所有溶液均經(jīng)0.22 μm的微孔濾膜過濾.1.3 HPCE整體柱分析前處理HPCE手性整體柱在每次運行之前用Tris-H3PO4緩沖液沖洗1 h，采用注射器壓力進樣20 s，分離電壓為25 kV，檢測波長為254 nm，溫度20℃.2 結果與討論2.1 緩沖液pH值對分離的影響在β-CD-M1衍生物HPCE整體柱上，檢測波長254 nm，工作電壓25 kV，10－8g/L氧氟沙星進樣20 s，20℃的電泳
中南民族大學學報（自然科學版） 2013年1期2013-11-26
- 鹽酸二甲雙胍腸溶片釋放度試驗研究
H4.5醋酸鹽緩沖液、pH6.8磷酸鹽緩沖液和水為釋放介質，轉速為每分鐘 100 轉，依法操作，經(jīng) 5，10，15，30，45，60 min，取溶液 5 ml(每次取樣后補加同溫度的溶出介質5 ml)，濾過，取續(xù)濾液，直接測定或適當稀釋，依照紫外分光光度法在233nm波長處測定吸光度，按C4H11N5·HCl的吸收系數(shù)(E1%1cm)為798計算每片的釋放量，以各時間點的6片平均累積溶出量(%)為縱坐標作溶出曲線。同法繪制自制制劑的溶出曲線，并進行比較。2
中國現(xiàn)代藥物應用 2013年6期2013-09-19
- 2種緩沖液對血清蛋白醋酸纖維膜電泳效果對比研究
7009）2種緩沖液對血清蛋白醋酸纖維膜電泳效果對比研究于婧文1，霍明章1，2，李艷花1，趙立峰1，劉 宏1，2*（1.山西大同大學醫(yī)學院，山西 大同 037009；2.山西大同大學呼吸病與職業(yè)病研究所，山西 大同 037009）目的在血清蛋白醋酸纖維膜電泳巴比妥緩沖液可以分離出5條區(qū)帶的實驗條件下，研究硼酸－硼酸鹽緩沖液是否能夠達到相同甚至更好的實驗效果，是否可替代巴比妥緩沖液。方法采用DYY－8C型電泳儀進行醋酸纖維膜電泳，選擇不同電壓和電泳時間，觀察
山西大同大學學報(自然科學版) 2013年5期2013-09-13
- 梅毒螺旋體重組抗原TpN47的純化工藝研究＊
高濃度變性劑的緩沖液中，再進行固定化金屬親和層析(IMAC)[2]分離純化該蛋白。蛋白質一般都是在相對溫和的天然條件下行使其功能，用于建立雙抗原夾心試劑的抗原蛋白必須首先能溶于適當?shù)?span id="syggg00" class="hl">緩沖液中。因此，變性條件下層析純化的蛋白質必然涉及到蛋白質的復性問題，以解決其溶解性。實際應用中，可以采用兩種方式進行復性，一種是在變性條件下洗脫結合蛋白，然后進行透析或稀釋復性，另一種是蛋白結合在柱上之后，用相對溫和的溶液環(huán)境頂替變性溶液環(huán)境，待蛋白復性后再進行洗脫操作[3-
中國藥業(yè) 2013年21期2013-04-17
- Direct linear discriminant analysis based on column pivoting QR decomposition and economic SVD
牛乳+50μL緩沖液+5μL金標BSA)中平衡120 s;然后，將光纖傳感器末端沒入待測奶液(200μL待測牛乳+50μL緩沖液+5μL金標氯霉素素單克隆抗體)中700 s。檢測牛乳中氯霉素殘留量。3 ExperimentsThe experiments are used to verify the efficiency of the proposed two algorithms and the performance of the DLDA/QR-ES
Journal of Southeast University(English Edition) 2013年4期2013-02-18
- 酶的pH影響實驗中緩沖液配制的改善與優(yōu)化組合
pH影響實驗中緩沖液配制的改善與優(yōu)化組合黃 敏 顏冰楠 桂新春（廣東省連州衛(wèi)生學校 廣東 連州 513400）通過探討不同pH緩沖液配制的準確性及其對酶活性實驗的影響；按照分析化學和生物化學實驗中經(jīng)典的緩沖液的配制方法進行配制，使用pH計進行測定，并利用配制的緩沖液立即按生物化學實踐指導方法進行酶活性的影響實驗；結果發(fā)現(xiàn)緩沖液的pH值隨環(huán)境和人為因素等改變其值有較大變化，做出來的實驗現(xiàn)象也會發(fā)生改變，實驗結果難以控制；提出了通過改善pH緩沖液的配制方法，使
職業(yè)教育研究 2012年8期2012-08-10
- 商品液體植酸酶檢驗中存在問題的研討
試劑和材料乙酸緩沖液（參照GB/T18634—2009中5.3配制，以下簡稱GB/T5.3）；蒸餾水為市售純凈水；其余試劑均遵照GB/T執(zhí)行。1.2 試驗方法試樣溶液制備：分別準確移取一定量的液體樣品于100 ml容量瓶中，分別加入GB/T5.3緩沖液、蒸餾水和純凈水，定容搖勻，分別用GB/T5.3緩沖液和水稀釋。以下操作按GB/T進行。2 結果與討論2.1 液體酶試樣溶液提取液的測定結果(見表1)表1結果說明，提取酶樣的溶液不同，其結果相差較大，只有按照
飼料工業(yè) 2012年2期2012-06-08
- 紅霉素顆粒和干混懸劑溶出度HPLC測定法的建立研究
測定法，用乙酸緩沖液900mL作為溶出介質，轉速是50r/min，操作45分鐘，取出溶液進行過濾，用續(xù)濾液作供試品；再取適量紅霉素對照品，必須精密測量，將溶出介質進行溶解并稀釋成0.08mg/mL溶液，將其作為對照溶液。按下述色譜條件，經(jīng)精密測量取20μL兩中溶液，并注入色譜儀，記錄下色譜圖，計算每袋溶出量。結果 取藥廠提供的顆粒和干混懸劑，按溶出液檢測方法測定。結果表明，溶出度限度為80%。結論 采用專一性很強的HPLC測定法可以檢測干混懸劑和紅霉素顆粒
中國醫(yī)藥指南 2012年16期2012-01-25
- 陰離子交換色譜法一步分離牛初乳中的SIGA
蛋白A?？疾炝?span id="syggg00" class="hl">緩沖液pH和離子強度對所獲免疫球蛋白A產(chǎn)品純度的影響，獲得從牛初乳中分離免疫球蛋白A的最優(yōu)條件為pH 7.0，離子強度為0.03mol/L的磷酸鹽緩沖液，最終可獲得純度為91.24%的免疫球蛋白A，回收率達到47%。因此，利用以強堿3#樹脂為基質的陰離子交換色譜分離牛初乳中的免疫球蛋白A具有很好的發(fā)展?jié)摿?。分泌型免疫球蛋白A（sIgA），牛初乳，陰離子交換色譜，分離1 材料與方法1.1 材料與儀器平衡緩沖液 離子強度為0.03mol/L，pH
食品工業(yè)科技 2011年2期2011-11-06
- 南五味子葉綠體DNA的提取
咯烷酮），提取緩沖液A（50mmol/L Tris-HClpH=3.6，25mmol/L EDTA，1.25mol/L NaCl），提取緩沖液B（50mmol/LTris-HClpH=3.6，25mmol/L EDTA，1.25mol/LNaCl，10mmol/Lβ-巰基乙醇），提取緩沖液C（0.15mol/LNaCl，100mMEDTApH=8.0），提取緩沖液D（50mmol/LTris-HClpH=8.0，25mMEDTA），提取緩沖液E（0.35m
河南科技 2011年9期2011-10-26
- EDTA滴定法測定水中總硬度的幾點體會
入1～2 ml緩沖液，5滴鉻黑T指示劑，立即用Na2EDTA標準液滴定至溶液從紫紅色轉變成純藍色為止，同時做空白試驗，記下所消耗標準液的用量。563000遵義市疾病預防控制中心在滴定過程中，緩沖液具有關鍵作用。緩沖液的配制有兩步:①稱取16.9 g氯化銨，溶于143 ml氨水中(ρ=0.88 g/ L)，②稱取0.780 g硫酸鎂(MgSO4.7 h2O)及1.78 g乙二胺四乙酸二鈉(Na2EDTA.2 h2O)，溶于50 ml水中，加入2 ml氯化銨-
中國實用醫(yī)藥 2011年22期2011-10-26
- 一種快速提取質粒DNA鑒別重組克隆的方法
74)依據(jù)快檢緩沖液篩選重組子克隆的方法,結合堿裂解法提取質粒DNA的原理,經(jīng)過試驗摸索,應用了快檢緩沖液直接裂解菌液,電泳后篩選重組質粒的方法,避免了提取質粒鑒定等繁瑣步驟,其結果與菌液PCR、質粒酶切鑒定結果一致,可快速篩選出重組克隆.堿裂解法;快檢緩沖液;重組質粒常規(guī)方法篩選陽性克隆通常是一項繁瑣而耗時的工作.近年來,文獻[1,2]研究了菌落PCR篩選重組克隆子的方法,即挑取單菌落作為模板進行PCR擴增,此法簡便但費用較高;采用堿裂解菌液后直接進行瓊
中南民族大學學報（自然科學版） 2011年1期2011-10-16
- 酸洗脫血小板HLA－Ⅰ類抗原的研究*
、7)的檸檬酸緩沖液對血小板進行酸處理，觀察酸處理對血小板的活化、凋亡及聚集功能的影響。我們的研究發(fā)現(xiàn)檸檬酸緩沖液的pH值越低，血小板HLA－I類抗原的洗脫效率越高，但血小板的活化率和凋亡率也越高。利用pH=3的檸檬酸緩沖液0℃洗脫血小板可有效洗脫血小板表面HLA－Ⅰ類抗原，盡管血小板活化率和凋亡率顯著增加，但聚集功能未受顯著影響，因此可用于預防血小板輸注無效。材料和方法1 材料FACSCalibur流式細胞儀(BD);560CA血小板聚集儀(Chrono
中國病理生理雜志 2011年10期2011-08-02
- 學生實驗水硬度測定方法改進
測定水總硬度時緩沖液及鉻黑T指示劑的配制方法，可簡化學生實驗分析測定程序。水硬度；總硬度；測定程序總硬度是由水中鈣、鎂、鐵、錳、鋁等鹽類組成。此法測定的硬度是由鈣、鎂離子的總量，并折合成碳酸鈣計算。水中的鈣、鎂離子和鉻黑T指示劑能生成紫紅色絡合物，在pH=10的條件下，用乙二胺四乙酸二鈉滴定，上述絡合物中的鈣、鎂離子被析出，并與EDTA-2Na生成更加穩(wěn)定的無色絡合物，使鉻黑T游離，顯示其本來的藍色，溶液由紫紅色變?yōu)樗{色即為實驗成功。我們在測定水總硬度時，
衛(wèi)生職業(yè)教育 2010年15期2010-09-20
- 單鈉尿酸鹽晶體在不同pH值環(huán)境中的形態(tài)變化與意義*
7.2 PBS緩沖液，室溫1500 r/min離心5分鐘，棄上清雜質，粗純化處理。偏振光顯微鏡驗證沉淀物尿酸結晶存在，室溫存放。1.3.2試劑的配置用0.2 mol/L NaH2PO4和0.2 mol/L Na2HPO4溶液，滴定儀調(diào)整，配制pH值分別為5.5、5.7、6.1、6.5、7.2、7.6、8.0不同pH的7組PBS緩沖液，并用電子pH計標定緩沖液的pH值，室溫存放，備用。1.4晶體檢測1.4.1將粗純化的晶體200 μl加入pH值5.5的PBS
山東第一醫(yī)科大學(山東省醫(yī)學科學院)學報 2010年3期2010-01-25