李艷, 范耀華, 戴桂萍, 朱玉璋

嘉興市第二醫(yī)院腫瘤內(nèi)科(浙江嘉興 314000)

肺癌是臨床中常見(jiàn)呼吸系統(tǒng)惡性腫瘤，其發(fā)病率及病死率均極高，在其眾多病理類型中，非小細(xì)胞肺癌(non-small cell lung cancer, NSCLC)占到所有肺癌的80%～85%[1]。大部分NSCLC被確診時(shí)，已經(jīng)是中晚期，臨床對(duì)于其主要治療方法為化療。機(jī)體腫瘤的發(fā)生發(fā)展過(guò)程中，免疫功能是其重要影響因素之一[2]，當(dāng)免疫功能出現(xiàn)紊亂或是免疫監(jiān)測(cè)功能降低時(shí)，機(jī)體腫瘤的發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)將會(huì)大大增加，而機(jī)體免疫功能的直接體現(xiàn)為外周血T淋巴細(xì)胞及NK細(xì)胞的數(shù)量[3]。不同淋巴細(xì)胞亞群間的平衡是維持正常免疫功能的重要一環(huán)[4]。癌胚抗原(carcinoembryonic antigen，CEA)以及鱗狀上皮細(xì)胞癌抗原(squamous cell carcinoma antigen，SCC)常用于肺癌治療療效的評(píng)估和預(yù)后的判斷[5]。本研究旨在探討中晚期NSCLC患者化療前后淋巴細(xì)胞絕對(duì)計(jì)數(shù)的差異，并進(jìn)一步分析外周血淋巴細(xì)胞絕對(duì)計(jì)數(shù)的變化及與CEA、SCC的相關(guān)性,為臨床診治提供參考。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選擇嘉興市第二醫(yī)院2017年1月至2020年3月收治的行化療的中晚期NSCLC患者82例作為病例組，其中男55例，女27例，年齡40～77歲，平均(52.34±9.88) 歲。病理類型：鱗癌35例，腺癌47例。所有患者依據(jù)隨機(jī)數(shù)字表法分為吉西他濱組(n=41)和培美曲塞組(n=41)。同時(shí)選擇同期進(jìn)行健康體檢的60例正常人作為對(duì)照組。3組研究對(duì)象一般基線資料比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，具有可比性，見(jiàn)表1。納入標(biāo)準(zhǔn)：(1)年齡18～80歲；(2)體力狀況ECOG評(píng)分≤2分；(3)病理診斷均為NSCLC；(4)入院前無(wú)手術(shù)、放療、化療、免疫治療史；(5)均能夠耐受化療；(6)至少存在1個(gè)可測(cè)量評(píng)估的肺內(nèi)病灶，評(píng)估標(biāo)準(zhǔn)為recist1.1標(biāo)準(zhǔn)[6]。排除標(biāo)準(zhǔn)：(1)妊娠期或哺乳期；(2)合并3級(jí)高血壓；(3)嚴(yán)重肺內(nèi)感染或者全身感染；(4)合并嚴(yán)重肝腎、血液疾病或精神障礙者；(5)合并自身免疫性疾病或使用免疫調(diào)節(jié)藥物治療者。本研究患者知情同意，并經(jīng)我院倫理委員會(huì)審核通過(guò)(倫理審批號(hào)：202104035041)。

表1 病例組與對(duì)照組一般情況比較 例

1.2 方法 吉西他濱組采用注射用鹽酸吉西他濱(遠(yuǎn)大醫(yī)藥黃石飛云制藥有限公司，國(guó)藥準(zhǔn)字 H20133194，0.2 g)聯(lián)合順鉑注射液(江蘇豪森藥業(yè)股份有限公司，國(guó)藥準(zhǔn)字H20040812，2 mL∶10 mg)治療，治療方法如下：第1天和第8天靜脈滴注吉西他濱，用量為1.25 g/m2；第1～3天靜脈滴注順鉑，用量為25 mg/m2，每3 周為1 個(gè)周期；培美曲塞組采用培美曲塞(齊魯制藥有限公司，國(guó)藥準(zhǔn)字H20060672，0.2 g)聯(lián)合順鉑治療，治療方法如下：化療第1天靜脈滴注培美曲塞，用量為0.5 g/m2；化療第1～3 天靜脈滴注順鉑，25 mg/m2，每3 周為1 個(gè)周期。

分別于化療前2 d及化療2周期后20 d抽取病例組外周靜脈血，采用流式細(xì)胞技術(shù)檢測(cè) CD3+(%)、CD4+(%)、CD8+(%)、NK(%)、CD4+/CD8+細(xì)胞比值。應(yīng)用Sysmex XE-5000血細(xì)胞分析儀檢測(cè)外周血中的淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)。 CD3+(%)、CD4+(%)、CD8+(%)、NK(%)百分比乘以淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)即為CD3+、CD4+、CD8+、NK淋巴細(xì)胞的絕對(duì)值。對(duì)照組也采用相同方法完成上述檢測(cè)。采用用電化學(xué)方法檢測(cè)病例組化療前2 d及化療2周期后20 d的CEA、SCC的水平。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS 20.0統(tǒng)計(jì)軟件，其中計(jì)數(shù)資料采用率(%)表示，采用2檢驗(yàn)。計(jì)量資料以表示，采用t檢驗(yàn)。血漿CEA、SCC和淋巴細(xì)胞亞群水平變化趨勢(shì)的相關(guān)性采用Pearson相關(guān)分析。以P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 病例組和對(duì)照組各淋巴細(xì)胞亞群絕對(duì)計(jì)數(shù)比較 病例組化療前和化療后的CD3+、CD4+淋巴細(xì)胞絕對(duì)計(jì)數(shù)及CD4+/CD8+均明顯低于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。CD8+淋巴細(xì)胞絕對(duì)計(jì)數(shù)及NK細(xì)胞絕對(duì)計(jì)數(shù)略高于對(duì)照組，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。病例組化療后的CD3+、CD4+淋巴細(xì)胞的絕對(duì)計(jì)數(shù)及CD4+/CD8+較化療前有顯著升高(P<0.05)。CD8+淋巴細(xì)胞絕對(duì)計(jì)數(shù)和NK細(xì)胞絕對(duì)計(jì)數(shù)差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，見(jiàn)表2。

表2 病例組與對(duì)照組外周血各淋巴細(xì)胞絕對(duì)計(jì)數(shù)比較

2.2 不同化療方案間的淋巴細(xì)胞亞群絕對(duì)計(jì)數(shù)的比較 培美曲塞組的CD3+、CD4+、CD8+、NK淋巴細(xì)胞的絕對(duì)計(jì)數(shù)及CD4+/CD8+與吉西他濱組比較，差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，見(jiàn)表3。

表3 培美曲塞組與吉西他濱組外周血各淋巴細(xì)胞絕對(duì)值比較

2.3 病例組各淋巴細(xì)胞絕對(duì)計(jì)數(shù)與CEA、SCC的相關(guān)性 CD3+、CD4+淋巴細(xì)胞絕對(duì)計(jì)數(shù)及CD4+/CD8+與CEA、SCC呈負(fù)相關(guān)性(P<0.05)，CD8+、NK淋巴細(xì)胞絕對(duì)計(jì)數(shù)與CEA、SCC無(wú)顯著相關(guān)性(P>0.05)，見(jiàn)表4。

表4 病例組各淋巴細(xì)胞絕對(duì)計(jì)數(shù)與CEA、SCC的相關(guān)性分析

3 討論

已有諸多研究報(bào)道顯示[7-8]，機(jī)體腫瘤的發(fā)生發(fā)展與免疫情況之間存在密切的相關(guān)性。細(xì)胞免疫是人體免疫功能的主要構(gòu)成部分，其同機(jī)體內(nèi)的NK細(xì)胞和B細(xì)胞參與的體液免疫共同組成了機(jī)體的免疫功能主體。在細(xì)胞免疫當(dāng)中，T淋巴細(xì)胞是其中重要的細(xì)胞類型之一，不僅參與細(xì)胞免疫過(guò)程，還會(huì)對(duì)免疫應(yīng)答起到一定的調(diào)節(jié)作用[9]。在T淋巴細(xì)胞中，根據(jù)其是否表達(dá)CD4及CD8分為兩個(gè)細(xì)胞亞群。兩個(gè)細(xì)胞亞群中，CD4+T淋巴細(xì)胞的主要功能在于協(xié)助細(xì)胞和體液免疫，同時(shí)能夠分泌諸多輔助因子參與到抗腫瘤的過(guò)程當(dāng)中。CD8+T淋巴細(xì)胞的主要功能在于其為細(xì)胞毒效應(yīng)細(xì)胞，能夠?qū)δ承┘?xì)胞和異物進(jìn)行特異性的殺傷[10]。兩種T淋巴細(xì)胞亞群的比值在正常情況下保持一個(gè)動(dòng)態(tài)平衡的狀態(tài)，共同維持機(jī)體免疫功能的正常和穩(wěn)定。NK細(xì)胞是機(jī)體內(nèi)一種特殊的免疫細(xì)胞，能夠?qū)τ谑芨腥镜募?xì)胞或是腫瘤細(xì)胞進(jìn)行直接性的殺傷，故而NK細(xì)胞數(shù)目的變化將會(huì)直接影響到機(jī)體對(duì)于腫瘤細(xì)胞的清除和殺傷功能，當(dāng)NK細(xì)胞數(shù)目和活性降低時(shí)，機(jī)體抗腫瘤能力將會(huì)大大降低[11-12]。

近年來(lái)，我國(guó)肺癌的發(fā)病率逐年上升，具有較高的病死率，已有研究表明，機(jī)體的免疫功能狀態(tài)是影響肺癌發(fā)展、預(yù)后的重要因素。本研究表明，NSCLC患者中的CD3+、CD4+淋巴細(xì)胞的絕對(duì)計(jì)數(shù)及CD4+/CD8+均低于健康對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，CD8+淋巴細(xì)胞絕對(duì)計(jì)數(shù)和NK細(xì)胞絕對(duì)計(jì)數(shù)無(wú)明顯差異。化療后，NSCLC患者的CD3+、CD4+淋巴細(xì)胞的絕對(duì)計(jì)數(shù)及CD4+/CD8+均較化療前明顯升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。而CD8+、NK淋巴細(xì)胞絕對(duì)值的差異無(wú)統(tǒng)計(jì)意義，這說(shuō)明化療可改善NSCLC患者的免疫狀態(tài)，改善患者的免疫功能。對(duì)培美曲塞組和吉西他濱組化療后數(shù)據(jù)進(jìn)行比較，兩組淋巴細(xì)胞的絕對(duì)計(jì)數(shù)無(wú)明顯差異，表明培美曲塞和吉西他濱治療中晚期NSCLC，均可調(diào)節(jié)免疫應(yīng)答，對(duì)免疫功能的影響相當(dāng)。吉西他濱的作用在于其能夠抑制細(xì)胞分裂的過(guò)程，進(jìn)而起到抗腫瘤的作用，當(dāng)與鉑類藥物聯(lián)合使用時(shí)可以直接作用于腫瘤細(xì)胞的DNA合成期，起到抑制作用，但吉西他濱存在一定的骨髓抑制作用，會(huì)對(duì)預(yù)后造成一定的影響，在實(shí)際工作中應(yīng)時(shí)刻監(jiān)測(cè)[13]。培美曲塞的作用在于其能夠抑制機(jī)體內(nèi)二氫葉酸還原酶以及胸苷酸合成酶等的活性，進(jìn)而降低機(jī)體內(nèi)嘌呤和嘧啶的合成總量，最終起到抑制腫瘤細(xì)胞遺傳物質(zhì)合成的作用。鉑類化療藥物可以抑制腫瘤細(xì)胞DNA的復(fù)制，并且可以對(duì)腫瘤細(xì)胞細(xì)胞膜結(jié)構(gòu)進(jìn)行破壞，有效抑制腫瘤細(xì)胞的生長(zhǎng)和增殖。上述藥物在作用腫瘤細(xì)胞發(fā)揮抑制作用的同時(shí)，還會(huì)對(duì)機(jī)體免疫系統(tǒng)產(chǎn)生一定的刺激作用，使得免疫系統(tǒng)功能增強(qiáng)，但具體作用機(jī)制仍需進(jìn)一步研究[14-15]。

血清CEA是一種存在于正常胚胎組織和異常腫瘤組織中的癌胚抗原，它的增高與NSCLC患者腫瘤發(fā)生、病情發(fā)展和預(yù)后評(píng)估都有著密切的關(guān)系[16]。已有多項(xiàng)研究表明CEA能夠用于化療療效的評(píng)估，治療后血清CEA水平對(duì)NSCLC患者的預(yù)后評(píng)估有著重要的價(jià)值[17]。SCC為一種相對(duì)分子質(zhì)量比較大的糖蛋白，參與癌細(xì)胞的轉(zhuǎn)移、侵襲和浸潤(rùn)，當(dāng)患者的組織開(kāi)始惡性病變時(shí)，該水平會(huì)顯著上升。SCC在肺癌患者的診斷和臨床治療的觀察中的價(jià)值得到臨床的公認(rèn)[18]。本研究發(fā)現(xiàn)CD3+、CD4+淋巴細(xì)胞絕對(duì)計(jì)數(shù)及CD4+/CD8+與CEA、SCC呈現(xiàn)出負(fù)相關(guān)性，說(shuō)明淋巴細(xì)胞亞群作為觀察腫瘤患者的近期化療療效的一項(xiàng)指標(biāo)具有一定的臨床價(jià)值。

綜上所述，本研究提示，NSCLC患者存在著免疫功能抑制，化療可改善患者的免疫功能，有利于預(yù)后，培美曲塞和吉西他濱治療NSCLC患者均可調(diào)節(jié)免疫應(yīng)答。聯(lián)合監(jiān)測(cè)CEA、SCC及免疫細(xì)胞的變化，對(duì)評(píng)估化療的近期療效提供了一定的參考意義。本次研究仍存在一定局限性，首先本次研究?jī)H為單中心、小樣本量研究，導(dǎo)致結(jié)果存在一定偏倚，其次本次研究未能夠?qū)α馨图?xì)胞計(jì)數(shù)與患者遠(yuǎn)期生存率進(jìn)行相關(guān)性研究，下一步仍需大樣本量、多中心、長(zhǎng)時(shí)間的臨床研究。

利益相關(guān)聲明：所有作者均聲明不存在任何利益沖突。

作者貢獻(xiàn)說(shuō)明：李艷：試驗(yàn)設(shè)計(jì)、研究實(shí)施、論文撰寫(xiě)；戴桂萍、朱玉璋：資料收集；范耀華：論文修訂和審校。