王 濤，馬躍軍，胥福勛，沙如拉，阿拉木斯，高玉林，蘇日娜，劉 斌*

(1.內(nèi)蒙古自治區(qū)農(nóng)牧業(yè)科學(xué)院，呼和浩特 010031；2.巴彥淖爾市農(nóng)牧業(yè)科學(xué)研究所，內(nèi)蒙古 巴彥淖爾 015000；3. 烏拉特中旗畜牧業(yè)服務(wù)中心，內(nèi)蒙古 巴彥淖爾 015300；4.鄂托克旗農(nóng)牧技術(shù)推廣中心，內(nèi)蒙古 鄂爾多斯 016100)

內(nèi)蒙古絨山羊主要包括二狼山型白絨山羊、阿爾巴斯型白絨山羊和阿拉善型白絨山羊。 絨山羊繁殖性能主要受遺傳、營(yíng)養(yǎng)、環(huán)境的影響，內(nèi)蒙古地區(qū)絨山羊繁殖性能差異較大，部分高繁絨山羊繁殖率可達(dá)160%以上，而在阿拉善、巴彥淖爾市等荒漠草原牧區(qū)僅為90%左右。近年來(lái)，隨著人們對(duì)羊絨和肉產(chǎn)品的需求不斷提高，如何提高絨山羊繁殖率已成為必然趨勢(shì)。 中草藥因其純天然、毒性小、副作用小等特點(diǎn)在生產(chǎn)中廣泛應(yīng)用，合理配伍的中草藥可有效提高動(dòng)物的繁殖性能和抗應(yīng)激能力[1]，提高絨山羊產(chǎn)區(qū)的養(yǎng)殖效益，增加農(nóng)牧民的收入。 國(guó)內(nèi)大量研究表明，中草藥飼料添加劑對(duì)非繁殖季節(jié)動(dòng)物具有促發(fā)情作用[2，3]，可有效調(diào)節(jié)動(dòng)物機(jī)體免疫性能、抗氧化及生產(chǎn)性能[4，5]。 PMSG 是一種經(jīng)濟(jì)實(shí)用且高效的外源生殖激素，在生產(chǎn)中應(yīng)用廣泛，合適的注射劑量和使用時(shí)間可顯著提高動(dòng)物的繁殖性能[6]。 本研究采用中草藥添加劑和孕馬血清促性腺激素(PMSG)對(duì)內(nèi)蒙古絨山羊進(jìn)行了催情處理，通過(guò)測(cè)定并分析血清生化指標(biāo)和產(chǎn)羔性能，探究?jī)煞N不同處理方式對(duì)內(nèi)蒙古絨山羊血清生化指標(biāo)和產(chǎn)羔性能的影響，以期為提高絨山羊的繁殖性能提供參考依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料

試驗(yàn)動(dòng)物選擇體重和年齡相近的內(nèi)蒙古二郎山型絨山羊成年經(jīng)產(chǎn)母羊264 只，分為中草藥試驗(yàn)Ⅰ組108 只、PMSG 試驗(yàn)Ⅱ組96 只和對(duì)照組60 只，試驗(yàn)羊采用放牧加補(bǔ)飼飼養(yǎng)方式，放牧草場(chǎng)屬于半荒漠化草場(chǎng)，放牧結(jié)束后自由飲水并補(bǔ)飼玉米200 g/只。 試驗(yàn)Ⅰ組于試驗(yàn)開(kāi)始前7 d 開(kāi)始飼喂中草藥，每次50 g/只，每2 d 飼喂1 次，共3 次，停止飼喂中草藥后觀察母羊發(fā)情情況并放入優(yōu)質(zhì)種公羊進(jìn)行本交；試驗(yàn)Ⅱ組于試驗(yàn)開(kāi)始前12 d 放置孕酮陰道海綿栓， 試驗(yàn)開(kāi)始第一天早飼前撤栓的同時(shí)肌肉注射PMSG 200 IU/只，次日觀察母羊發(fā)情情況并放入優(yōu)質(zhì)種公羊進(jìn)行本交；對(duì)照組采用常規(guī)飼喂方式飼喂，觀察母羊發(fā)情情況并放入優(yōu)質(zhì)種公羊進(jìn)行本交。 在試驗(yàn)開(kāi)始第二天早飼前各組選取5 只頸靜脈采血5 mL，靜置20 min 后置于離心機(jī)中以3500 r/min 離心10 min，吸出上層血清置于1.5 mL 離心管中，放置于-20 ℃冰箱中保存待測(cè)。 試驗(yàn)地點(diǎn)位于內(nèi)蒙古自治區(qū)烏拉特中旗。

1.2 試驗(yàn)藥品

中草藥添加劑配方按照下述質(zhì)量份進(jìn)行配伍：淫羊藿30～50 份、熟地10～30 份、山芋20～30 份、山藥15～25 份、茯苓15～25 份、澤瀉15～25 份、鎖陽(yáng)15～25 份、知母15～25 份、何首烏15～25 份、益母草15～25份、菟絲子20～30 份，將組分量中草藥用粉碎機(jī)進(jìn)行粉碎、過(guò)40 目篩并攪拌均勻即可。

PMSG(1000 IU/支)，上海市計(jì)劃生育科學(xué)研究所生產(chǎn)；PRID(1000 IU/只)：孕酮陰道海綿栓，美國(guó)。

1.3 測(cè)定指標(biāo)

1.3.1 產(chǎn)羔性能

1.3.2 血清生化指標(biāo)

血清總蛋白(TP)、血清白蛋白(ALB)、血清葡萄糖(GLU)、尿素氮(BUN)、免疫球蛋白(IgA、IgG、IgM)、總膽紅素(TBIL)、直接膽紅素(DBIL)、間接膽紅素(IBIL)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽過(guò)氧化物酶(GSH-Px)和丙二醛(MDA)；所有血清樣本均送至北京華英生物技術(shù)研究所測(cè)定。

1.3.3 生殖激素指標(biāo)

促卵泡素(FSH)、促黃體素(LH)、雌二醇(E2)、孕酮(P4)和睪酮(T)，所有血清樣本均送至北京華英生物技術(shù)研究所測(cè)定。

1.3.4 統(tǒng)計(jì)方法

試驗(yàn)數(shù)據(jù)采用SSPS19.0 統(tǒng)計(jì)軟件ANOVA 程序進(jìn)行單因素方差分析，采用Duncan 法進(jìn)行組間的多重比較，結(jié)果用平均值±標(biāo)準(zhǔn)差表示。

2 結(jié)果與分析

2.1 不同處理方式對(duì)繁殖季節(jié)內(nèi)蒙古絨山羊產(chǎn)羔性能的影響

如表1 所示，試驗(yàn)Ⅰ組和試驗(yàn)Ⅱ組發(fā)情率和產(chǎn)羔率均顯著高于對(duì)照組(P＜0.01)，試驗(yàn)Ⅱ組雙羔率極顯著高于試驗(yàn)Ⅰ組和對(duì)照組(P＜0.01)，試驗(yàn)Ⅰ組和對(duì)照組之間無(wú)顯著差異(P>0.05)。

表1 不同處理方式對(duì)繁殖季節(jié)內(nèi)蒙古絨山羊產(chǎn)羔性能的影響

2.2 不同處理方式對(duì)繁殖季節(jié)內(nèi)蒙古絨山羊血清生化指標(biāo)的影響

如表2 所示，試驗(yàn)Ⅱ組IgA 和IgG 顯著高于對(duì)照組(P＜0.05)，其他指標(biāo)三組之間均無(wú)顯著差異(P>0.05)。

表2 不同處理方式對(duì)繁殖季節(jié)內(nèi)蒙古絨山羊血清生化指標(biāo)的影響

2.3 不同處理方式對(duì)內(nèi)蒙古絨山羊血清抗氧化性能的影響

如表3 所示，試驗(yàn)Ⅱ組GSH-PX 顯著高于試驗(yàn)Ⅰ組和對(duì)照組(P＜0.05)，試驗(yàn)Ⅰ組和對(duì)照組之間無(wú)顯著差異(P>0.05)。

表3 不同處理方式對(duì)內(nèi)蒙古絨山羊血清抗氧化性能的影響

2.4 不同處理方式對(duì)繁殖季節(jié)內(nèi)蒙古絨山羊血清生殖激素的影響

如表4 所示，試驗(yàn)Ⅰ組和試驗(yàn)Ⅱ組雌二醇E2 顯著高于對(duì)照組(P＜0.05)，試驗(yàn)Ⅱ組促卵泡素FSH 和促黃體素LH 顯著高于試驗(yàn)Ⅰ組和對(duì)照組(P＜0.05)。

表4 不同處理方式對(duì)繁殖季節(jié)內(nèi)蒙古絨山羊血清生殖激素的影響

3 討論

3.1 不同處理方式對(duì)繁殖季節(jié)內(nèi)蒙古絨山羊繁殖性能的影響

在中草藥研究應(yīng)用的歷史長(zhǎng)河中，人們發(fā)現(xiàn)一部分中草藥對(duì)動(dòng)物的發(fā)情、產(chǎn)仔以及成年羊的生長(zhǎng)具有積極作用，國(guó)內(nèi)很多研究也表明，中草藥添加劑可有效誘導(dǎo)動(dòng)物的發(fā)情，對(duì)動(dòng)物的繁殖性能具有積極作用[7]。 使用外源激素是誘導(dǎo)非繁殖季節(jié)母畜發(fā)情的技術(shù)手段之一，對(duì)于提高牛、羊等季節(jié)性發(fā)情動(dòng)物的繁殖性能具有很高的應(yīng)用價(jià)值。 國(guó)內(nèi)外相關(guān)研究表明，使用海綿栓+PMSG 處理秋季空懷多浪母羊的發(fā)情率為80.4%，產(chǎn)羔率為94.4%[8]，李成(2015)等在利用CIDR+PMSG 對(duì)甘肅高山細(xì)毛羊進(jìn)行同期發(fā)情的試驗(yàn)表明，在放栓后一定時(shí)間注射一定劑量的PMSG 可使其繁殖率達(dá)到最高[9]。本研究中試驗(yàn)Ⅰ組(中草藥)和試驗(yàn)Ⅱ組(PMSG)發(fā)情率和產(chǎn)羔率均極顯著高于對(duì)照組(P＜0.01)，試驗(yàn)Ⅱ組(PMSG)雙羔率極顯著高于試驗(yàn)Ⅰ組(中草藥)和對(duì)照組(P＜0.01)，表明使用中草藥添加劑和PMSG 均可極顯著提高繁殖季節(jié)內(nèi)蒙古絨山羊的產(chǎn)羔率，但使用PMSG 能極顯著提高其雙羔率。

3.2 不同處理方式對(duì)內(nèi)蒙古絨山羊血清生化指標(biāo)的影響

血清總蛋白(TP)由白蛋白(ALB)和球蛋白(GLB)組成，動(dòng)物機(jī)體對(duì)蛋白質(zhì)的消化和利用程度通?？审w現(xiàn)在血清總蛋白含量的變化，當(dāng)機(jī)體蛋白質(zhì)代謝旺盛時(shí)，血清TP 隨之升高，另外，血清TP 具有維持血管滲透壓、酸堿平衡、運(yùn)輸代謝物等多種功能，與機(jī)體免疫功能密切相關(guān)，因此也能反映機(jī)體的抗病能力[10]。 國(guó)內(nèi)相關(guān)研究表明，中草藥的飼喂量與機(jī)體蛋白質(zhì)的代謝有直接的關(guān)聯(lián)，隨著飼喂水平的提高，血清TP 和ALB 也會(huì)隨之增加[11]，同時(shí)，孫明海等對(duì)仔豬的試驗(yàn)表明，中草藥飼料添加劑可顯著提高哺乳仔豬TP 和ALB 的含量，增強(qiáng)抗病力、體內(nèi)蛋白質(zhì)的沉淀和利用率，并促進(jìn)其成長(zhǎng)[12]。 本研究中試驗(yàn)Ⅰ組(中草藥)和試驗(yàn)Ⅱ組(PMSG)血清TP 和ALB 較對(duì)照組有升高的趨勢(shì)，表明中草藥添加劑和PMSG 對(duì)內(nèi)蒙古絨山羊機(jī)體蛋白質(zhì)的代謝具有積極作用。

動(dòng)物免疫球蛋白主要存在于動(dòng)物血清中，其含量的高低為評(píng)估其免疫狀況的重要指標(biāo)之一。 相關(guān)研究表明，IgG 是哺乳動(dòng)物血清中含量最高的免疫球蛋白，機(jī)體體內(nèi)IgG 的含量與機(jī)體免疫能力的強(qiáng)弱成正比關(guān)系，IgG 能夠與抗原結(jié)合，有效發(fā)揮吞噬細(xì)胞和病毒的作用。IgA 是一種蛋白質(zhì)，這種蛋白質(zhì)能夠?qū)C(jī)體消化道、呼吸道等局部粘膜起到作用，并保護(hù)機(jī)體的腸道免受傷害，IgM 是機(jī)體應(yīng)對(duì)抗原物質(zhì)最早出現(xiàn)的免疫球蛋白，能與機(jī)體結(jié)合清除病原體，在抗感染中起著至關(guān)重要的作用[13]。 玄家潔(2018)的研究指出，在育成羊的飼料中添加不同劑量的復(fù)方中草藥飼料添加劑均可提高其血液中免疫球蛋白IgA、IgG 的含量，且隨著添加量的增加，免疫球蛋白的含量也隨之增加[14]。 本研究中試驗(yàn)Ⅱ組(PMSG)IgA 和IgG 顯著高于對(duì)照組(P＜0.05)，試驗(yàn)Ⅰ組(中草藥)較對(duì)照組也具有升高的趨勢(shì)，表明PMSG 可有效增強(qiáng)內(nèi)蒙古絨山羊機(jī)體的免疫性能， 中草藥添加劑對(duì)絨山羊機(jī)體的免疫性能有一定影響但統(tǒng)計(jì)學(xué)差異不顯著(P>0.05)，但具有積極作用，分析認(rèn)為可能與中草藥添加劑的飼喂量有關(guān)。

3.3 不同處理對(duì)內(nèi)蒙古絨山羊血清抗氧化性能的影響

抗氧化酶可反映機(jī)體抗氧化功能， 生產(chǎn)中主要以SOD、GSH-Px 等抗氧化酶類含量和活力及氧化代謝產(chǎn)物MDA 水平作為評(píng)價(jià)機(jī)體組織器官機(jī)能的重要指標(biāo)。正常情況下，機(jī)體氧自由基的產(chǎn)生與清除保持平衡，但在衰老、疾病或特殊生理情況下，機(jī)體抗氧化酶的活性顯著降低，這些氧自由基大量積累，對(duì)機(jī)體造成極大破壞作用[15]。 MDA 作為評(píng)價(jià)機(jī)體抗氧化性能的一種重要物質(zhì)，間接的反映了機(jī)體受自由基損害的嚴(yán)重程度，辣根過(guò)氧化物酶(HRP)具有消除機(jī)體過(guò)氧化物的作用，通過(guò)催化過(guò)氧化物反應(yīng)和還原反應(yīng)對(duì)機(jī)體起到一定的保護(hù)作用。 國(guó)內(nèi)外相關(guān)研究表明，較高水平的GSH-Px 和SOD 和較低水平的MDA 可體現(xiàn)動(dòng)物機(jī)體具有較高的抗氧化性能。 本研究中試驗(yàn)Ⅱ組(PMSG)GSH-Px 含量顯著高于試驗(yàn)Ⅰ組(中草藥)和對(duì)照組(P＜0.05)，MDA 和SOD 三組之間無(wú)顯著差異，但試驗(yàn)Ⅰ組和試驗(yàn)Ⅱ組的SOD 含量較高于對(duì)照組，試驗(yàn)Ⅰ組(中草藥)的MDA 含量最低，表明中草藥添加劑和PMSG 對(duì)內(nèi)蒙古絨山羊機(jī)體的抗氧化性能具有積極作用。

3.4 不同處理方式對(duì)繁殖季節(jié)內(nèi)蒙古絨山羊血清生殖激素的影響

FSH 和LH 可促進(jìn)卵泡成熟和排卵，刺激卵泡內(nèi)膜細(xì)胞產(chǎn)生雌激素等其他性激素[16]。在動(dòng)物發(fā)情周期中LH 分泌有明顯的規(guī)律性，呈脈沖式分泌，卵泡期基本保持穩(wěn)定，通常在發(fā)情期出現(xiàn)最高峰，F(xiàn)SH 在發(fā)情期也出現(xiàn)一個(gè)高峰，但沒(méi)有LH 明顯[17]。 E2 可刺激卵泡發(fā)育、誘導(dǎo)發(fā)情行為，與催乳素協(xié)同作用，促進(jìn)乳腺導(dǎo)管系統(tǒng)發(fā)育。研究表明，母羊在發(fā)情時(shí)E2 可達(dá)高峰，之后會(huì)迅速降低[18]。歐陽(yáng)富龍(2017)等的研究表明，復(fù)方中草藥對(duì)奶牛血清中E2、FSH、LH 含量具有一定的調(diào)控作用，能緩解由E2 劇烈變化引起的生理應(yīng)激[19]。S.Ocak(2013)等使用FSH+600 IU PMSG 處理綿羊，子宮內(nèi)腹腔鏡輔助人工授精后，能獲得(7.8±1.2)個(gè)可移植胚胎，其認(rèn)為單次注射FSH 較好于傳統(tǒng)遞減法注射FSH 的效果[20]。 K.C.Lehloenya(2013)使用FSH+350 IU PMSG 肌肉注射波爾山羊，48 h 后撤除孕酮陰道海綿栓，單次注射FSH 可獲得(9.56±1.90)個(gè)胚胎，而多次注射FSH 只獲得(0.22±0.2)個(gè)胚胎，表明單次注射FSH 對(duì)波爾山羊的超數(shù)排卵效果更好[21]。

本研究中試驗(yàn)Ⅰ組(中草藥)和試驗(yàn)Ⅱ組(PMSG)E2 顯著高于對(duì)照組(P＜0.05)，試驗(yàn)Ⅱ組(PMSG)FSH 和LH 顯著高于試驗(yàn)Ⅰ組(中草藥)和對(duì)照組(P＜0.05)，表明中草藥添加劑和PMSG 可顯著提高內(nèi)蒙古絨山羊血液E2 的水平，使用PMSG 可顯著提高內(nèi)蒙古絨山羊血液FSH 和LH 的水平，綜上，中草藥添加劑和PMSG 均可有效提高內(nèi)蒙古絨山羊血清相關(guān)生殖激素的水平， 從而促進(jìn)其發(fā)情， 且使用PMSG 效果更佳。

4 結(jié)論

中草藥添加劑和PMSG 處理可顯著提高繁殖季節(jié)內(nèi)蒙古絨山羊的發(fā)情率和產(chǎn)羔率(P＜0.01)，且使用PMSG 可顯著提高其雙羔率(P＜0.01)；使用兩種不同方式均能有效改善其機(jī)體的抗氧化性能，增強(qiáng)機(jī)體免疫能力；中草藥添加劑和PMSG 處理均能提高繁殖季節(jié)內(nèi)蒙古絨山羊血清相關(guān)生殖激素的水平，且使用PMSG 效果更佳。