董云寶

山東省沂水縣動物疫病預(yù)防控制中心，山東臨沂 276400

0 引言

牛結(jié)節(jié)性皮膚病（LSD）又稱牛結(jié)節(jié)疹、牛結(jié)節(jié)性皮炎或牛疙瘩皮膚病，是由山羊痘病毒屬的牛結(jié)節(jié)性皮膚病病毒（LSDV）引起的，以皮膚痘瘡樣結(jié)節(jié)或潰瘍，奶牛產(chǎn)奶量下降，肉牛皮張質(zhì)量下降等為主要臨床特征的牛病毒性傳染病。該病于1929年最早發(fā)現(xiàn)于贊比亞，15 年后傳入博茨瓦納、南非；20世紀(jì)70年蔓延至蘇丹、尼日利亞、毛里塔尼亞、馬里、津巴布韋、索馬里和喀麥隆等國家；2008年以后，陸續(xù)在毛里求斯、土耳其、伊拉克、約旦、黎巴嫩出現(xiàn)病例報道；阿塞拜疆、伊朗于2014年首次發(fā)現(xiàn)LSD；哈薩克斯坦、俄羅斯、塞爾維亞、納米比亞、阿爾巴尼亞、沙特阿拉伯、黑山共和國等于2016年發(fā)生該病。2019年8月12日，我國首次在新疆維吾爾自治區(qū)伊犁州發(fā)生牛結(jié)節(jié)性皮膚病[1]，至今，該病已成為威脅我國養(yǎng)牛業(yè)的一大疫病并有蔓延的趨勢。

1 病原

1.1 病原特征

LSDV是DNA病毒，屬于痘病毒科、脊椎動物痘病毒亞科、山羊痘病毒屬，呈磚塊狀或橢圓形，大小為260～320 nm，基因組大小約為151 kbp，為較小的痘病毒。通過對該病毒的DNA分析表明，LSDV與羊痘病毒毒株之間的同源性高達(dá)80.0%，與綿羊痘病毒、山羊痘病毒的基因組核苷酸同源性高達(dá)97.0%。

1.2 病原抵抗力

LSDV對外界環(huán)境抵抗力較強(qiáng)，在pH值6.6～8.6之間可長期存活，在室溫甘油鹽水或細(xì)胞培養(yǎng)液中可存活4～6 個月，在干燥痂皮中可存活1 個月以上，-80 ℃下保存病變皮膚結(jié)節(jié)或組織培養(yǎng)液中的病毒可存活10 年。LSDV于55 ℃下2 h或65 ℃下30 min可滅活，20.0%乙醚、氯仿、1.0%福爾馬林也可將其滅活；對次氯酸鈉（2.0%～3.0%）、苯酚（2.0%，15 min）、碘化合物（1∶33稀釋度）和季銨鹽類化合物（0.5%）等敏感[2]。LSDV粒子對紫外線敏感，日光照射很快即可使其失去活性，但在黑暗條件下可保持活力長達(dá)幾個月。

2 流行病學(xué)

2.1 易感動物

牛是主要的易感動物，不分品種（黃牛、水牛、奶牛、瘤牛）、年齡和性別，以奶牛的易感性最高，雜交牛品種的發(fā)病率和死亡率高。綿羊、山羊等也可感染。本病不是人獸共患病，人無易感性。

2.2 傳染源

LSD病牛是主要傳染源?；寂＝Y(jié)節(jié)潰爛分泌物、脫落的痂皮中含有大量LSDV。此外病牛的血液、肌肉、奶、唾液、眼鼻腔分泌物和精液中也含有LSDV，病愈牛3 周內(nèi)體內(nèi)還含有病毒并具有傳染性。

2.3 傳播方式

本病通過蚊、蠅、蠓、虻等吸血節(jié)肢動物叮咬傳播，非洲蜱蟲也可充當(dāng)媒介傳播本病，還可通過奶牛間相互舔舐，通過飼料、飲水等直接接觸傳染。此外，LSDV可通過母牛子宮感染胎兒，也可通過吮乳將LSDV傳播給牛犢。污染的精液也可傳播，所以在該病流行的地區(qū)和發(fā)病季節(jié)，無論人工授精還是自然交配，都可能傳播LSD，所以應(yīng)注意配種衛(wèi)生和引種風(fēng)險[3]。

2.4 流行季節(jié)

發(fā)病具有明顯的季節(jié)性，多發(fā)生于夏季至晚秋昆蟲較多的6—9月，雨后更甚。

3 臨床癥狀與病理變化

3.1 一般性臨床癥狀

LSD的潛伏期，自然感染為2～4 周，實(shí)驗(yàn)室感染為4～12 天，平均為7 天左右。發(fā)病牛最初表現(xiàn)體溫升高到40 ℃以上，稽留熱，持續(xù)7 天左右，精神沉郁，食欲減退。泌乳牛產(chǎn)奶量顯著下降，肩前、腹股溝外、股前、后肢和耳下淋巴結(jié)等處的淺表淋巴結(jié)腫大[4]。病愈的公牛可從精液中長期排毒，導(dǎo)致不育；孕牛可能會流產(chǎn)，后備母牛持續(xù)數(shù)月不發(fā)情，或引起不孕不育。

3.2 特征性臨床癥狀

病牛在頸部、頭部、胸部、背部、乳房、會陰等部位的皮膚上出現(xiàn)幾個或數(shù)個疙瘩（結(jié)節(jié)），高出皮膚表面，觸診堅實(shí)并有痛感；逐漸遍及四肢及全身，有的只有局部出現(xiàn)疙瘩，有的遍及全身。疙瘩大多顯圓形，直徑2～3 cm，有的稍大，與周圍皮膚界限明顯。流口水，有鼻炎癥狀，眼睛和鼻腔流出大量黏液性分泌物，進(jìn)而引起角膜炎，角膜渾濁甚至失明。隨著病情發(fā)展，皮膚疙瘩可能遍布全身，并且在口角、鼻孔以及眼結(jié)膜、口腔黏膜等可視黏膜甚至喉、氣管、食道等部位也出現(xiàn)結(jié)節(jié)，嚴(yán)重影響病牛的飲食和呼吸，致其逐漸消瘦；有些大結(jié)節(jié)或多量的結(jié)節(jié)，易引起病牛的四肢、胸腹、陰戶等部位皮下水腫，尤其是四肢皮下水腫[5]，出現(xiàn)運(yùn)動障礙，不愿走動。

3.3 病理變化

皮下水腫和結(jié)節(jié)脫落，引起皮膚壞死、潰瘍和脫落，繼發(fā)細(xì)菌感染和化膿。不同部位的結(jié)節(jié)和壞死可導(dǎo)致不同病理變化，如氣管、肺的病變可能導(dǎo)致肺炎癥狀，氣管內(nèi)充滿黏液，氣管黏膜充血，局部氣管塌陷，有窒息的危險；乳房部位的結(jié)節(jié)、結(jié)痂和壞死，可能會導(dǎo)致乳腺炎，嚴(yán)重影響奶牛正常泌乳。

4 診斷方法

4.1 實(shí)驗(yàn)室診斷

病毒分離與鑒定、電鏡觀察、實(shí)時熒光聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（實(shí)時熒光PCR）與聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（普通PCR方法）、血清中和試驗(yàn)等方法，對LSD進(jìn)行臨床病例確診。

4.2 試劑盒診斷

實(shí)驗(yàn)室診斷方法雖然準(zhǔn)確，但耗時長、靈敏度低、特異性差，早期病例很難做出快速準(zhǔn)確地診斷。使用牛結(jié)節(jié)性皮膚病病毒染料法熒光定量PCR試劑盒，可快速、準(zhǔn)確地檢測LSDV，可作為診斷LSD的首選方法[6]。目前，在國家口岸檢疫中已開始使用。

4.3 鑒別診斷

重癥LSD病例具有明顯的特征性臨床癥狀，結(jié)合實(shí)驗(yàn)室診斷基本能夠確診。但輕度感染的病牛，其臨床癥狀與牛偽結(jié)核棒狀桿菌皮膚病、偽牛痘、牛皰疹性乳頭炎、牛嗜皮菌病、牛皮蠅等疾病臨床表現(xiàn)類似，要注意鑒別診斷[7]（表1）。

表1 LSD 的鑒別診斷

5 綜合防控措施

2020年7月3日，在農(nóng)業(yè)農(nóng)村部、海關(guān)總署聯(lián)合發(fā)布的第256號公告《中華人民共和國進(jìn)境動物檢疫疫病名錄》中，將LSD定為一類動物傳染病。2022年2月10日，農(nóng)業(yè)農(nóng)村部和海關(guān)總署發(fā)布公告稱，在風(fēng)險評估的基礎(chǔ)上，已將本病調(diào)整為二類動物傳染病。生產(chǎn)實(shí)踐中，要嚴(yán)格按照農(nóng)業(yè)農(nóng)村部在2019年8月19日印發(fā)的《農(nóng)業(yè)農(nóng)村部關(guān)于做好牛結(jié)節(jié)性皮膚病防控工作的緊急通知》、2020年7月10日印發(fā)的《牛結(jié)節(jié)性皮膚病防治技術(shù)規(guī)范》的要求，本著“早發(fā)現(xiàn)、早報告、早確診、早處置”的原則，切實(shí)做好LSD的防控工作，堅決制止疫情擴(kuò)散蔓延，保障牛群健康和牛產(chǎn)業(yè)可持續(xù)發(fā)展。

5.1 疫情排查

牛群中如果于發(fā)燒后48 h，在頭、頸、胸、背等部位皮膚上出現(xiàn)2～3 cm的多發(fā)性、硬而凸起、界限分明的疙瘩，尤其是伴有肩前淋巴結(jié)、股前淋巴結(jié)等淺表淋巴結(jié)腫大；奶牛產(chǎn)奶量明顯下降；精神沉郁，不愿活動；眼結(jié)膜炎，鼻流清涕，口腔黏膜發(fā)炎，出現(xiàn)水皰，破潰后糜爛、潰瘍，口角流涎等典型臨床癥狀時，要立即全面排查，隔離病牛并限制移動，組織有關(guān)專家及時進(jìn)行現(xiàn)場臨床診斷和流行病學(xué)調(diào)查以及樣品采集、送檢等，開展臨床鑒別診斷和實(shí)驗(yàn)室檢測。

5.2 疫情報告

疑似LSD病例所在地縣級以上動物疫病預(yù)防控制中心要及時采集可疑病牛的皮膚痂塊、抗凝血、唾液或鼻拭子等樣品，分別向省級動物疫病預(yù)防控制中心、中國動物衛(wèi)生與流行病學(xué)中心逐級上報、檢測并確診、備份。

5.3 疫情處置

一旦發(fā)現(xiàn)確診病例，堅決撲殺病牛及監(jiān)測陽性牛，并進(jìn)行無害化處理，嚴(yán)格隔離和監(jiān)視同群及附近健康牛，加強(qiáng)檢測，嚴(yán)格消毒，防止該病擴(kuò)散。地面、墻壁、車輛等運(yùn)輸工具，糞便等排泄物，飼草、墊料等污染物，都要進(jìn)行嚴(yán)格消毒；進(jìn)行有效的滅蚊蠅等吸血昆蟲及幼蟲、填埋蚊蠅滋生地等工作，防止外部病原傳入和內(nèi)部病原傳播。建立免疫帶，緊急免疫完成后1 個月內(nèi)，限制同群牛移動，禁止發(fā)生疫情縣活牛調(diào)出，同時不到發(fā)生疫情的地區(qū)購買、引進(jìn)牛只。加強(qiáng)流行病學(xué)調(diào)查，查明疫情來源和可能傳播去向，及時消除疫情隱患[8]。

5.4 加強(qiáng)監(jiān)管，嚴(yán)格檢疫

加強(qiáng)檢疫監(jiān)督管理，認(rèn)真查驗(yàn)牛結(jié)節(jié)性皮膚病臨床癥狀，凡是已表現(xiàn)出明顯臨床癥狀的牛，一律不準(zhǔn)發(fā)放檢疫合格證。

5.4.1 產(chǎn)地檢疫

產(chǎn)地檢疫發(fā)現(xiàn)疑似病例時，要根據(jù)實(shí)驗(yàn)室檢測結(jié)果和流行病學(xué)調(diào)查信息，及時上報并按要求處置。對已實(shí)行疫苗免疫的牛只，應(yīng)在檢疫合格證明中備注相關(guān)免疫信息。

5.4.2 屠宰檢疫

屠宰檢疫過程中，如發(fā)現(xiàn)有臨床癥狀的牛，應(yīng)立即停止屠宰，隔離病牛及同群牛，已經(jīng)屠宰的，產(chǎn)品要封存，清洗、消毒屠宰設(shè)備和工具，病牛和同群牛采樣送檢，檢出的陽性牛應(yīng)立即撲殺并進(jìn)行無害化處理，陰性牛繼續(xù)屠宰。

5.4.3 公路檢查

公路檢查中發(fā)現(xiàn)的已有明顯臨床癥狀的牛，應(yīng)就地隔離，按規(guī)定采樣、送檢，按檢驗(yàn)結(jié)果采取相應(yīng)處置措施。

5.4.4 邊境防控

錨地檢疫中發(fā)現(xiàn)的疑似病例，要根據(jù)《進(jìn)出境動物重大疫情應(yīng)急處置預(yù)案》要求，嚴(yán)格采樣、送檢，根據(jù)檢測結(jié)果，采取相應(yīng)處置措施。各邊境地區(qū)畜牧獸醫(yī)部門應(yīng)積極配合海關(guān)，加強(qiáng)引進(jìn)牛的隔離、消毒、檢測、巡查等工作，禁止從牛結(jié)節(jié)性皮膚病疫情流行的國家和地區(qū)直接或間接引進(jìn)牛只及相關(guān)產(chǎn)品，做好邊境地區(qū)防控。

5.5 加強(qiáng)飼養(yǎng)管理，提高牛只自身抗病能力

提高牛場生物安全防護(hù)意識，設(shè)法給牛創(chuàng)造一個相對舒適的生活環(huán)境。飼養(yǎng)、屠宰、隔離等場所要嚴(yán)格按照《動物防疫條件審查辦法》的規(guī)定，符合防疫條件要求，建立并認(rèn)真實(shí)施嚴(yán)格的衛(wèi)生消毒制度。同時，飼喂優(yōu)質(zhì)牧草和營養(yǎng)均衡飼料，添加適量多維素、黃芪多糖、益生菌等提高機(jī)體免疫力的物質(zhì)；積極推廣使用全混合（TMR）日糧。

5.6 免疫預(yù)防

通過疫苗接種進(jìn)行免疫預(yù)防，是本病當(dāng)前主要的防控措施，但必須進(jìn)行縣級畜牧獸醫(yī)主管部門報請、省級批準(zhǔn)并報農(nóng)業(yè)農(nóng)村部備案后方可進(jìn)行。我國目前并沒有針對該病的疫苗，因LSDV與羊痘病毒和山羊痘病毒同屬痘病毒，基因同源性高，具有高度交叉免疫原性，所以疫區(qū)和發(fā)現(xiàn)有發(fā)病牛的同群牛、周圍牛全部用山羊痘弱毒疫苗按照山羊的5 倍劑量皮內(nèi)注射。因皮內(nèi)注射容納疫苗量小，所以要多點(diǎn)（最少分5 點(diǎn)）皮內(nèi)注射。