喻璽　李素媛　應(yīng)月　余佳　劉恒　趙吉媛

摘 要：采用高效液相色譜（HPLC）法對(duì)宜昌市茶葉主產(chǎn)區(qū)102批次茶葉樣品中6種水溶性維生素進(jìn)行監(jiān)測(cè)分析，外標(biāo)法定量。結(jié)果表明：五峰、興山、夷陵區(qū)、宜都和秭歸茶葉產(chǎn)區(qū)均測(cè)出6種維生素，其中秭歸產(chǎn)區(qū)中維生素C平均含量最高，遠(yuǎn)安產(chǎn)區(qū)中維生素B1平均含量最高，點(diǎn)軍產(chǎn)區(qū)中煙酸平均含量最高，宜都產(chǎn)區(qū)中維生素B6平均含量最高，長(zhǎng)陽產(chǎn)區(qū)中葉酸平均含量最高，五峰產(chǎn)區(qū)中維生素B2平均含量最高。各茶葉產(chǎn)區(qū)維生素含量存在顯著差異，可能與茶葉的加工工藝、貯存條件、茶樹的生長(zhǎng)環(huán)境等因素有關(guān)。

關(guān)鍵詞：茶葉;維生素;高效液相色譜

中圖分類號(hào) S571.1;Q946.889 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼 A 文章編號(hào) 1007-7731（2022）07-0047-03

宜昌產(chǎn)茶文化歷史悠久，是湖北省名優(yōu)綠茶和宜紅茶的主要產(chǎn)區(qū)[1]。茶葉是常見的日常飲品之一，含有豐富的蛋白質(zhì)、氨基酸、生物堿、茶多酚、有機(jī)酸、糖類、芳香物質(zhì)、水溶性礦物質(zhì)和水溶性維生素等[2]。水溶性維生素主要包含維生素C和B族維生素，人體對(duì)維生素類需求量很小，但無法在體內(nèi)自主合成，必須通過日常飲食攝取才能滿足機(jī)體正常的代謝需求[3]。茶葉由于產(chǎn)地、品種以及制作工藝等的不同，維生素含量也呈現(xiàn)出差異。水溶性維生素常用的測(cè)定方法[4]有：微生物法[5]、紫外分光光度法[6]、熒光法[7]、毛細(xì)管電泳法[8]以及高效液相色譜法[9-11]等。微生物法檢測(cè)周期長(zhǎng)，重現(xiàn)性不好，檢測(cè)過程繁瑣。紫外分光光度法受其他物質(zhì)干擾大，很難找到一種顯色劑同時(shí)測(cè)定多種維生素。熒光法靈敏度高，但線性范圍窄，不適合測(cè)定含量較高的維生素。高效液相色譜法前處理過程簡(jiǎn)單、分析速度快、分離效能高、重復(fù)性好，且能同時(shí)分離和測(cè)定多種維生素[2]。為此，本研究建立了高效液相色譜同時(shí)測(cè)定6種水溶性維生素的方法，并在此條件下對(duì)宜昌市主要茶葉生產(chǎn)基地及合作社茶葉中的水溶性維生素含量進(jìn)行了測(cè)定，以評(píng)價(jià)茶葉品質(zhì)，填補(bǔ)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)的檢測(cè)方法空白，為建立宜昌茶葉產(chǎn)地的溯源方法提供科學(xué)依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 茶葉 選取2020年上半年生產(chǎn)的茶葉，對(duì)宜昌市主要茶葉生產(chǎn)基地及合作社共取樣102個(gè)，其中夷陵區(qū)14個(gè)、五峰縣20個(gè)，宜都市10個(gè)、點(diǎn)軍區(qū)7個(gè)、長(zhǎng)陽縣18個(gè)、興山縣8個(gè)、秭歸縣17個(gè)、遠(yuǎn)安縣8個(gè)。

1.2 儀器與試劑 Waters e2695高效液相色譜儀：沃特世科技（上海）有限公司，配2998檢測(cè)器;6種維生素標(biāo)準(zhǔn)品：Stanford Analytical Chemicals Inc;電子天平：梅特勒-托利多儀器（上海）有限公司;甲醇為色譜純;其余試劑均為分析純。

1.3 維生素標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液的配制 用電子天平準(zhǔn)確稱取煙酸、維生素B1、維生素B2、維生素B6、葉酸、維生素C標(biāo)準(zhǔn)品各0.1000g，用0.01mol/L鹽酸定容至100mL，配制成混合標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液。使用前，根據(jù)需要用0.01mol/L鹽酸稀釋成指定濃度的標(biāo)準(zhǔn)工作液。

1.4 樣品處理 取適量茶葉置于50℃左右烘箱烘干，用粉碎機(jī)粉碎，用電子天平準(zhǔn)確稱取茶粉末1.0000g，用0.01mol/L鹽酸浸泡定容至10mL，渦旋混勻后超聲90min，取上清液過濾待測(cè)。

1.5 色譜條件 色譜柱：XDB-C18柱（250mm×4.6mm，5μm）;采用梯度洗脫：流動(dòng)相A為0.05mol/L磷酸二氫鉀溶液（pH=6.1），B為甲醇，從進(jìn)樣時(shí)90%的A經(jīng)10min線性變化為50%，再經(jīng)1min線性變化為90%直至進(jìn)樣結(jié)束;流速1.0mL/min;柱溫：25℃;檢測(cè)波長(zhǎng)：266nm。

2 結(jié)果與分析

2.1 維生素工作液色譜圖 將維生素混合標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液稀釋成所需工作溶液，按上述色譜條件將各濃度進(jìn)樣10μL，水溶性維生素混合標(biāo)準(zhǔn)溶液的出峰順序依次為維生素C、維生素B1、煙酸、維生素B6、葉酸、維生素B2，且在15min內(nèi)6種水溶性維生素完全分離，所得色譜圖如圖1所示。

2.2 線性回歸方程 對(duì)維生素標(biāo)準(zhǔn)工作液系列濃度分離檢測(cè)，分別得到以峰面積[Y ]對(duì)各維生素的濃度X的線性回歸分析，建立回歸方程、相關(guān)系數(shù)及線性范圍等數(shù)據(jù)見表1，結(jié)果顯示線性關(guān)系良好。

2.3 不同產(chǎn)地茶葉中水溶性維生素含量 在優(yōu)化后的色譜條件下，對(duì)不同產(chǎn)區(qū)的102個(gè)茶葉樣品中6種水溶性維生素的含量進(jìn)行分析測(cè)定，得到各產(chǎn)地代表色譜圖（圖2），各產(chǎn)地茶葉中6種維生素含量平均含量結(jié)果見表2。由圖2及表2可知，五峰、興山、夷陵區(qū)、宜都和秭歸茶葉產(chǎn)區(qū)均測(cè)出6種維生素，其中秭歸產(chǎn)區(qū)中維生素C平均含量最高，遠(yuǎn)安產(chǎn)區(qū)中維生素B1平均含量最高，點(diǎn)軍產(chǎn)區(qū)中煙酸平均含量最高，宜都產(chǎn)區(qū)中維生素B6平均含量最高，長(zhǎng)陽產(chǎn)區(qū)中葉酸平均含量最高，五峰產(chǎn)區(qū)中維生素B2平均含量最高。各茶葉產(chǎn)區(qū)維生素含量存在顯著差異可能與茶葉的加工工藝、貯存條件、茶樹的生長(zhǎng)環(huán)境等因素有關(guān)。

3 結(jié)論與討論

根據(jù)地理環(huán)境和氣候的不同，中國(guó)的茶葉產(chǎn)區(qū)主要分為江北、江南、西南和華南四大茶區(qū)，宜昌屬于江南茶區(qū)，是適合茶樹生長(zhǎng)的區(qū)域之一[12]，故而宜昌茶葉整體質(zhì)量上乘，水溶性維生素含量豐富。其中，五峰采花鄉(xiāng)山勢(shì)巍峨，山巒起伏，河流交錯(cuò)，地形東低西高，茶樹多生長(zhǎng)在海拔400～1200m的林間山地，晝夜溫差大，屬于典型的高山云霧氣候。夷陵區(qū)的鄧村也屬典型的高山云霧氣候，雨量充沛，晝夜溫差大[13-15]。五峰和鄧村產(chǎn)出的名茶全國(guó)聞名，與適宜的生長(zhǎng)環(huán)境密不可分。茶葉中的水溶性維生素種類豐富，是不可多得的保健飲品。本研究結(jié)果表明：五峰、興山、夷陵區(qū)、宜都和秭歸茶葉產(chǎn)區(qū)均測(cè)出6種維生素，其中秭歸產(chǎn)區(qū)中維生素C平均含量最高，遠(yuǎn)安產(chǎn)區(qū)中維生素B1平均含量最高，點(diǎn)軍產(chǎn)區(qū)中煙酸平均含量最高，宜都產(chǎn)區(qū)中維生素B6平均含量最高，長(zhǎng)陽產(chǎn)區(qū)中葉酸平均含量最高，五峰產(chǎn)區(qū)中維生素B2平均含量最高。各茶葉產(chǎn)區(qū)維生素含量存在顯著差異可能與茶葉的加工工藝、貯存條件、茶樹的生長(zhǎng)環(huán)境等因素有關(guān)。本研究結(jié)果為不同產(chǎn)地茶類之間的水溶性維生素含量存在顯著差異提供了佐證，為茶葉加工品質(zhì)控制及研究維生素在茶葉加工過程中的變化提供了依據(jù)。但本研究中所選用的樣品均為各茶區(qū)當(dāng)年生產(chǎn)的綠茶成品，后續(xù)應(yīng)開展各茶葉產(chǎn)區(qū)新鮮茶葉與成品茶葉、不同品種茶葉中水溶性維生素含量的分析研究，為宜昌區(qū)域茶葉發(fā)展提供更好的技術(shù)支持。

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（責(zé)編：徐世紅）

Monitoring and Analyzing of Water-soluble Vitamins in Tea from Different Producing Areas in Yichang

YU Xi? ?LI Suyuan? ?YING Yue? ?YU Jia?; ?LIU Heng? ?ZHAO Jiyuan

（Three Gorges Public Inspection and Testing Center， Three Gorges Vocational And Technical College， Yichang 443000， China）

Abstract： In this study， high performance liquid chromatography （HPLC） was used to monitor and analyze six water-soluble vitamins in one hundred and two batches of tea samples from main tea producing areas in Yichang. Results show that the Wufeng， Xingshan， Yilingqu， Yidu and Zigui contain 6 kinds of vitamin . Zigui tea production areas were measured， including the highest average vitamin C， average Yuanan vitamin B1 in producing the highest levels， point the average content of nicotinic acid in producing the highest， Yidu reach vitamin B6 in producing the highest levels on average， the highest average vitamin folic acid content in Changyang area. The average content of vitamin B2 was the highest in Wufeng producing areas. The significant difference of vitamin content in different tea producing areas may be related to tea processing technology， storage conditions， tea growing environment and other factors.

Key words： Tea; Vitamin; High performance liquid chromatography

作者簡(jiǎn)介：喻璽（1986—），女，湖北宜昌人，工程師，從事食品檢測(cè)工作。? 收稿日期：2021-12-19