趙恭文 唐劍峰* 狄春香 李昌鵬 宿景池 楊志航

（1 山東中農聯(lián)合生物科技股份有限公司，山東濟南 250100；2 山東省農村經濟管理服務總站，山東濟南 250000）

根結線蟲（spp.）是危害溫室蔬菜的重要病原物，可侵染茄果類、瓜類、十字花科類等大多數(shù)蔬菜作物，每年因根結線蟲造成的損失高達70 億美元（Yue et al.，2020；Wang et al.，2021），隨著我國保護地蔬菜種植面積和種植年限不斷增加，根結線蟲發(fā)生的頻率和危害程度逐年升高，一般可造成減產20%～30%，發(fā)生嚴重時甚至可造成減產90%以上，嚴重危害蔬菜生產（翟明娟 等，2017；岳向國 等，2018；王洪山 等，2019；張潔 等，2019）。根結線蟲的防治包括農業(yè)防治、生物防治和化學防治等措施（趙磊 等，2011；張潔 等，2019；孫海 等，2020），其中化學防治長期以來一直是蔬菜作物根結線蟲防治中最高效、最主要的措施（Giannakou et al.，2010；崔鑫 等，2017）。噻唑膦作為防治根結線蟲的主要化學藥劑，近年來被廣泛應用于溫室根結線蟲的防治，然而長期過量且單一使用，已使根結線蟲對噻唑膦產生低水平抗性（吳青松，2016）。科學合理使用噻唑膦防治根結線蟲，延長持效期、減少用藥量及次數(shù)是延緩其抗藥性發(fā)展的有效途徑。

微囊化技術一般指利用物理、化學以及物理化學或生物學的方法將化學物質或生物材料包覆在囊壁材料中，使其緩慢釋放甚至控制釋放（李北興 等，2014）。30%噻唑膦微囊懸浮劑是近幾年開發(fā)的新型緩釋制劑，該產品將噻唑膦微囊化后能夠增強其穩(wěn)定性，延長持效期，從而減少噻唑膦的使用量及使用頻次（李北興 等，2014；唐劍峰 等，2019）。本試驗測定了噻唑膦原藥對山東省內幾個蔬菜種植區(qū)根結線蟲的室內毒力，比較了30%噻唑膦微囊懸浮劑和5%噻唑膦微乳劑對根結線蟲的防治效果，以期為噻唑膦科學合理使用提供依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗材料

根結線蟲采集自山東省濟南市濟陽區(qū)、山東省泰安市岱岳區(qū)等地的黃瓜和番茄大棚，經鑒定為南方根結線蟲（）。

1.2 試驗藥劑

93.3%噻唑膦原油，由山東中農聯(lián)合生物科技股份有限公司提供。

30%噻唑膦微囊懸浮劑，市售，山東省聯(lián)合農藥工業(yè)有限公司生產。

5%噻唑膦微乳劑，市售，河北三農農用化工有限公司生產。

1.3 試驗方法

1.3.1 南方根結線蟲二齡幼蟲（J）的獲取 將被根結線蟲侵染的新鮮植物根洗凈，剪成1 cm 長小段，放入組織搗碎機中加3 倍量的水搗碎30 s，轉入200 目（孔徑75 μm）和500 目（孔徑26 μm）組合標準篩，用自來水沖洗篩中植物組織，收集500 目標準篩內的線蟲卵，用0.5%的NaClO 溶液表面消毒3 min，無菌水沖洗5 次后放入自制貝曼漏斗中，于25 ℃培養(yǎng)箱中黑暗培養(yǎng)，間隔24 h 收集1 次，制成200 條·mL左右的線蟲懸浮液備用（岳向國 等，2018，2019）。

1.3.2 室內生物測定 試驗于2018—2020 年間，在山東中農聯(lián)合生物科技股份有限公司研發(fā)中心生測研究室進行，采用浸蟲法測定室內活性。將93.3%噻唑膦原油用丙酮溶液溶解并配制成母液，用0.1%吐溫80 水溶液將母液稀釋為100、50、20、10、2 mg·L等5 個濃度梯度的藥液。取0.5 mL 藥液和0.5 mL 線蟲懸浮液加入到24 孔板中混勻。每處理設3 次重復，設含有等劑量丙酮溶劑的0.1%吐溫80 水溶液為空白對照。放于（25 ± 1）℃培養(yǎng)箱中，黑暗處理48 h 后鏡檢各處理線蟲死亡情況，計算各處理J的校正死亡率，利用DPS 數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)求出毒力回歸方程及LC值。

死亡率=死亡線蟲數(shù)/處理線蟲數(shù) × 100%

校正死亡率=（處理死亡率 -對照死亡率）/（100 -對照死亡率）× 100%

1.3.3 田間藥效試驗 試驗于2018—2020 年間，在山東省濟南市濟陽區(qū)董家莊村（2018 年）、山東省濟南市濟陽區(qū)安家莊村（2019 年）、山東省泰安市岱岳區(qū)西良甫村（2020 年）、山東省泰安市岱岳區(qū)朱家莊村（2020 年）等地的黃瓜和番茄大棚內進行。試驗共設3 個處理：30%噻唑膦微囊懸浮劑（制劑用量7.5 kg·hm，單株灌根施藥）、5%噻唑膦微乳劑（制劑用量45 kg·hm，單株灌根施藥）和清水對照。每個處理設4 次重復，采用隨機區(qū)組排列，小區(qū)面積15～45 m。

作物定植后緩苗15 d 施藥，每小區(qū)按試驗劑量稱取制劑，按照400 mL·株藥液量進行單株灌根施藥。其他正常管理。

于施藥后30、60、90 d 在每小區(qū)隨機挖取20株，調查各處理根結線蟲發(fā)病率、發(fā)病級數(shù)，計算病情指數(shù)和防治效果。公式如下：

發(fā)病率=（發(fā)病株數(shù)/調查總株數(shù)）× 100%

病情指數(shù)=〔∑（病級 × 該病級株數(shù)）/（最高病級 ×調查總株數(shù)）〕 × 100

防效=〔（對照組病情指數(shù) -處理組病情指數(shù)）/對照組病情指數(shù)〕× 100%

病情分級依據(jù)GB/T19780.38—2000《農藥田間藥效試驗準則（一）殺線蟲劑防治根部線蟲病》進行。0 級：根系無蟲癭；1 級：根系有少量小蟲癭；3 級：2/3 根系布滿小蟲癭；5 級：根系布滿小蟲癭并有次生蟲癭；7 級：根系形成須根團。

2 結果與分析

2.1 噻唑膦對不同地區(qū)根結線蟲J2 活性的影響

室內浸蟲法試驗對各地區(qū)根結線蟲的室內毒力結果見表1。噻唑膦處理各試驗地采集的根結線蟲J48 h 后，LC值在4.18～5.86 mg·L，均表現(xiàn)出良好的活性。

表1 噻唑膦對不同地區(qū)根結線蟲J2 活性的影響

2.2 30%噻唑膦微囊懸浮劑對根結線蟲的防治效果

30%噻唑膦微囊懸浮劑防治根結線蟲的田間藥效試驗結果見圖1。施藥后30 d，30%噻唑膦微囊懸浮劑與5%噻唑膦微乳劑防效都在80%以上，兩者間差異不顯著。施藥后60 d，30%噻唑膦微囊懸浮劑防效最高達80.22%，最低為69.61%，5%噻唑膦微乳劑防效最高達71.84%，最低為60.04%，兩者間差異達到顯著或極顯著水平。施藥后90 d，30%噻唑膦微囊懸浮劑防效最高可達72.12%，5%噻唑膦微乳劑最高防效僅為61.90%，30%微囊懸浮劑的防效均極顯著優(yōu)于5%噻唑膦微乳劑。

圖1 30%噻唑膦微囊懸浮劑對根結線蟲的田間防效

3 結論與討論

應用化學農藥仍是根結線蟲防治的主要措施。噻唑膦作為防治根結線蟲的主流藥劑，雖然已經推廣了多年，但仍被廣泛應用。

賢振華等（2014）測定噻唑膦對南方根結線蟲的LC（24 h）值為13.93 mg·L；漆永紅等（2011）的試驗結果則表明10%噻唑膦顆粒劑處理南方根結線蟲24 h 后，其LC值為5.91 mg·L。本試驗室內毒力試驗結果表明，噻唑膦處理南方根結線蟲48 h 后，對濟南、泰安地區(qū)2 種作物上采集的根結線蟲的LC值為4.18～5.86 mg·L，與前人測定結果差異不大，藥劑對南方根結線蟲依然表現(xiàn)出良好的活性。

微囊懸浮劑是通過一定方法將農藥包裹于特定囊壁之內，以達到緩慢釋放、避免敏感有效成分的光解、提升穩(wěn)定性、提高持效期、減少使用量的一種劑型，同時藥劑微囊化可明顯減少噻唑膦等有機膦農藥刺激性氣味，減輕農藥對農作物的藥害（李北興 等，2014）。噻唑膦屬于易降解的農藥（馬濤等，2017），魏蕓霞等（2018）通過GC-FPD 測定藥后30 d 噻唑膦在土壤中消解率達89.62%，田間施用時保證噻唑膦在土壤中的穩(wěn)定性可以在很大程度上延長噻唑膦對線蟲的作用時間。本試驗田間試驗結果表明，30%噻唑膦微囊懸浮劑在施藥初期（藥后30 d）與5%噻唑膦微乳劑對根結線蟲的防效差異不顯著，但隨著時間延長（藥后60 d 和90 d），二者防效差異達顯著或極顯著水平。說明隨著時間延長，5%噻唑膦微乳劑迅速降解，防效明顯下降，而30%噻唑膦微囊懸浮劑在緩釋性、持效性方面的優(yōu)勢明顯，從而能夠減少施藥次數(shù)，減少農藥用量，保障農產品安全。