葉園珍 麥嘉卉 胡湛棋 陳 黎 廖建湘 段 婧

1 方法

1.3 資料截取 從病歷系統(tǒng)中截取患兒的臨床表型，常規(guī)實驗室檢查結(jié)果；血液串聯(lián)質(zhì)譜和尿液氣相色譜質(zhì)譜檢測，視聽覺誘發(fā)電位，影像學(xué)檢查報告(腦電圖和頭顱MR)，神經(jīng)心理評估結(jié)果，治療和隨訪情況。

1.4 隨訪 患兒出院后常規(guī)行門診隨訪，未至門診隨訪者行電話隨訪。本文隨訪截止日期為2021年12月。

1.5 遺傳學(xué)檢測方法 在取得患兒父母的知情同意后，采集患兒及其父母的外周靜脈血，送安吉康爾醫(yī)學(xué)檢驗實驗室進行核心家系的全外顯子檢測或全基因組檢測。

全基因組檢測方法：采用全血DNA提取試劑盒提取基因組DNA，超聲隨機打斷為200～300 bp的DNA片段，純化后構(gòu)建全基因組測序文庫，在Illumina高通量測序平臺進行全基因組測序，平均覆蓋深度為30×。得出數(shù)據(jù)后進行基因序列的生物信息學(xué)分析，突變命名參考人類參考基因組GRCh37。

全外顯子檢測方法：提取基因組DNA，采用全外顯子高通量測序技術(shù)通過靶向探針捕獲和高通量二代測序?qū)θ祟惤?萬個基因的外顯子及其上下游約20 bp的區(qū)域進行測序。獲得原始測序序列(fastq文件)后，首先使用BWA將reads比對到人參考基因組(GRCH37/hg19)上，并使用SAMtools進行reads信息統(tǒng)計及排序。使用Picard對比對結(jié)果進行去重處理。再使用GATK標(biāo)準(zhǔn)變異檢測流程檢測變異，突變命名參考人類參考基因組GRCh37。

2 結(jié)果

2.2 體格檢查及輔助檢查 表1顯示，11例頭圍及體重均在正常范圍，未見特殊面容，例3發(fā)色黃，例7和11各有牛奶咖啡斑1塊。血液串聯(lián)質(zhì)譜和尿液氣相色譜質(zhì)譜檢測、視聽覺誘發(fā)電位均未見異常。8例腦電圖見間期放電，放電部位不定，分布于額區(qū)、枕區(qū)、顳區(qū)；3例腦電圖背景正?；蚪缦?。11例均行頭顱MR，例9胼胝體、雙側(cè)側(cè)腦室前腳旁及扣帶回見白質(zhì)異常信號，余10例未見異常。

9例行神經(jīng)心理評估，7例<6歲者行2016版兒童神經(jīng)心理行為檢查量表(簡稱兒心量表)[9]評估，平均DQ值為90.6±7.0；其中平均語言值76.3±10.6，警示行為均為0。例5在9歲時行韋氏智力測試，提示智力發(fā)育落后，語言相當(dāng)于同年齡同性別的P1水平。例7行韋氏學(xué)齡前兒童智力測驗量表測試，提示語言63分。例4、6和10生長發(fā)育同正常同齡兒，未見落后表現(xiàn)。

2.3 遺傳學(xué)分析 圖1基因檢測顯示，11例均提示16p11.2微缺失，缺失范圍524～908 kb，8例為新發(fā)突變，例11和9分別遺傳自無癥狀的父親和母親，例8來源不明。

表1 11例16p11.2微缺失綜合征患兒的臨床特征

3 討論

本文例5在9歲6月時出現(xiàn)PKD，亦考慮與缺失染色體含有PRRT2基因相關(guān)，結(jié)合病史，確診為16p11.2微缺失綜合征及PKD，加用奧卡西平治療，療效佳。目前僅有9例報道16p11.2微缺失綜合征表現(xiàn)為PKD[4]，發(fā)生率較PRRT2基因變異率低，可能與16p11.2微缺失綜合征外顯率有關(guān)。本文病例提示16p11.2微缺失綜合征為引起PKD的遺傳學(xué)病因之一，需引起重視。同時，本文其他病例需警惕后期有PKD可能，應(yīng)注意隨訪。

16p11.2 微缺失綜合征是ASD最常見的已知遺傳病因之一(0.5%)[22]。ASD患者的遺傳篩查中發(fā)現(xiàn)16p11.2缺失或重復(fù)，提示其為ASD較強的遺傳危險因素[2]。多項研究顯示，16.1%～25.6%的16p11.2缺失攜帶者有ASD特征或被確診為ASD[2]。此外，在16p11.2微缺失綜合征患者中，伴有發(fā)育遲緩(包括運動及語言)占50%～57%[19, 23]。本文11例患兒中9例行神經(jīng)心理評估，發(fā)現(xiàn)8例患兒語言發(fā)育遲緩。例5出現(xiàn)智力發(fā)育障礙，9歲時韋氏智力量表檢測總分50，符合16p11.2微缺失綜合征表現(xiàn)。例6和例10未行神經(jīng)心理評估檢查，生長發(fā)育同正常同齡兒。11例均經(jīng)評估后未發(fā)現(xiàn)ASD傾向。