孫 曉，寧洪鑫，侯文彬，阿迪力·艾斯托拉，劉昌孝, 4*，何 新*

陰道用中藥原位凝膠的研究進展

孫 曉1，寧洪鑫2，侯文彬2，阿迪力·艾斯托拉3，劉昌孝1, 4*，何 新1*

1. 廣東藥科大學，廣東 廣州 510006 2. 北京協(xié)和醫(yī)學院&中國醫(yī)學科學院放射醫(yī)學研究所，天津市放射醫(yī)學與分子核醫(yī)學重點實驗室，天津 300192 3. 和田地區(qū)藥物研究所，新疆 和田 848000 4. 天津藥物研究院，天津 300301

原位凝膠是一類以溶液狀態(tài)給藥后，能在用藥部位立即發(fā)生相轉(zhuǎn)變，由液態(tài)轉(zhuǎn)化形成非化學交聯(lián)半固體凝膠的制劑。其具有溶液和凝膠的雙重優(yōu)勢，已成為藥劑學研究的熱點。傳統(tǒng)的陰道給藥劑型存在滯留時間短、生物利用度低等問題，近年來已有較多研究將新型原位凝膠應(yīng)用于陰道給藥，通過延長陰道內(nèi)滯留時間來提高藥物的生物利用度。中藥原位凝膠有利于其藥效的提升，通過參閱近年來國內(nèi)外相關(guān)文獻，從陰道用中藥原位凝膠劑的特點、分類、制備和評價方法等方面進行綜述，以期為陰道用中藥原位凝膠劑的進一步研究與應(yīng)用提供依據(jù)。

陰道給藥；原位凝膠；中藥制劑；制備工藝；生物利用度

陰道給藥是陰道炎癥、宮頸糜爛以及宮頸炎等常見婦科疾病的傳統(tǒng)治療方式，中醫(yī)藥外治法歷史悠久，用于治療婦科疾病的中藥劑型包括片劑、栓劑、乳膏劑以及凝膠劑等[1-2]。

原位凝膠（gel）又稱即型凝膠，是近年來在傳統(tǒng)凝膠劑基質(zhì)的基礎(chǔ)上研發(fā)出來的一種區(qū)別于傳統(tǒng)親水凝膠的新型凝膠給藥系統(tǒng)，系指一類對環(huán)境因素敏感、以溶液狀態(tài)給藥后，能在用藥部位立即發(fā)生相轉(zhuǎn)變，由液態(tài)轉(zhuǎn)換成非化學交聯(lián)的半固體凝膠的制劑[3]。與中藥聯(lián)用形成原位凝膠給藥系統(tǒng)，可以克服傳統(tǒng)中藥劑型所存在的弊端，已成為近年來中藥制劑領(lǐng)域研究的熱點。

本文查閱了近年來國內(nèi)外相關(guān)文獻，從陰道用中藥原位凝膠的特點、類型、制備、評價方法等方面進行了總結(jié)，以期為陰道用中藥原位凝膠劑的進一步研究與應(yīng)用提供依據(jù)。

1 陰道用中藥原位凝膠劑的特點

女性的陰道是女性內(nèi)生殖器的一部分，位于骨盆下部的正中間位置，為長約9 cm的纖維肌性管狀器官，具有巨大的黏膜表面積、豐富的血流量以及對藥物的通透性良好的特點，是藥物傳遞的有效途徑[4-5]。從前陰給藥多用于治療婦科疾病，包括陰中填塞和洗浴2種方法。如《金匱要略》中將礬石丸和蛇床子散做成栓劑納入前陰，分別治療濕熱帶下證及寒濕帶下證；用狼牙湯方劑煎湯熏洗外陰，治療濕熱郁積所致的外陰糜爛生瘡。還有研究表明，通過陰道途徑給藥可產(chǎn)生全身療效，如激素替代治療、子宮內(nèi)膜異位癥等，也有將肽類或疫苗進行陰道給藥的研究。

陰道途徑給藥具有延長釋放系統(tǒng)的滯留時間、避免肝臟首過代謝、對有些藥物滲透性較高、藥物不會被代謝而失活等優(yōu)點[6]，因此該種給藥方式正逐漸被研究者關(guān)注。原位凝膠以溶液狀態(tài)給藥，在用藥部位可立即發(fā)生相轉(zhuǎn)變，由液體變?yōu)榘牍腆w制劑，具有凝膠制劑高度親水性的三維網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)以及良好的組織相容性，同時獨特的溶液-凝膠轉(zhuǎn)變性質(zhì)使其兼具制備簡單、使用方便，與用藥部位尤其是黏膜組織親和力強、滯留時間長、釋藥緩慢持久等優(yōu)點。陰道用原位凝膠劑結(jié)合了液體與半固體陰道用制劑的優(yōu)點，同時彌補了二者易在治療時間段脫落等缺點[7]，從而備受青睞，與中藥聯(lián)用形成原位凝膠給藥系統(tǒng)，可以克服傳統(tǒng)中藥劑型所存在的弊端。并且原位凝膠可以作為緩釋載體與脂質(zhì)體、微囊、包合物等新劑型結(jié)合增加藥物穩(wěn)定性，達到緩控釋的獨特優(yōu)勢，工藝簡單易行，適合于工業(yè)大生產(chǎn)。

2 原位凝膠劑的分類

原位凝膠制劑制備工藝簡單，選擇合適的溶劑將輔料與藥物溶解在一起即可。研究表明，影響原位凝膠成型的因素主要有基質(zhì)濃度、離子強度以及凝膠體系的pH值等，根據(jù)其膠凝機制的不同，可將原位凝膠分為溫度敏感型、離子敏感型[8]、pH敏感型以及復合敏感型4種類型。

受陰道生理條件上的限制，未在相關(guān)文獻中檢索到陰道用離子敏感型原位凝膠，主要的離子敏感型原位凝膠高分子材料包括乙酰結(jié)冷膠（deacetylated gellan gum）和海藻酸鹽（alginate）[9]，多應(yīng)用于眼部[10]及鼻腔[11-12]。因此，目前中藥陰道用原位凝膠種類有溫度敏感型、pH敏感型以及復合敏感型3大類。近年來應(yīng)用于陰道給藥的各種中藥原位凝膠見表1。

2.1 溫度敏感型原位凝膠

溫度敏感型原位凝膠（thermosensitivegel）是一類對溫度變化敏感的高分子聚合物凝膠，其特點是具有臨界相轉(zhuǎn)變溫度（lower critical solution temperature，LCST），能夠隨環(huán)境溫度的改變而發(fā)生相變，這種凝膠在室溫下（20～25 ℃）呈液態(tài)，當接觸體液時（35～37 ℃）立即發(fā)生相轉(zhuǎn)變[31]形成黏性半固體膠膜黏附在生物膜上，延長藥物在體內(nèi)的滯留時間，從而提高藥物的生物利用度，提高藥效。一般認為溫敏型原位凝膠的膠凝機制（圖1）是由于溫度的改變，導致高分子聚合物的氫鍵作用隨之改變，從而使其自身的物理狀態(tài)發(fā)生改變。由于溫度改變相對容易控制，且這種凝膠體內(nèi)外均適用，因此是目前研究最為廣泛和相對成熟的一類環(huán)境敏感型原位凝膠[32]。

在現(xiàn)有的溫敏型原位凝膠研究中，凝膠基質(zhì)主要包括泊羅沙姆（Poloxamer）、甲基纖維素[33]和殼聚糖（chitosan，CS）[34]。其中非離子表面活性劑泊羅沙姆由于其良好的溫敏性質(zhì)及安全性且易獲得，在溫敏型原位凝膠領(lǐng)域應(yīng)用最為廣泛和深入[35-36]。泊羅沙姆是由聚氧乙烯（polyethylene oxide，PEO）與聚氧丙烯（polypropylene oxide，PPO）組成的嵌段共聚物（PEO-PPO-PEO），其中泊洛沙姆407（Poloxamer 407，P407）、泊洛沙姆188（Poloxamer 188，P188）是使用較為廣泛的凝膠基質(zhì)。

多位學者以P407和P188為基質(zhì)，根據(jù)不同的藥物特點及用藥需求，以膠凝溫度、膠凝時間、膠凝穩(wěn)定性、流變特性等為考察指標制備出多個中藥溫敏型原位凝膠，包括參黃溫敏原位凝膠、婦黃寧溫敏原位凝膠、姜黃素溫敏原位凝膠，苦茶婦科原位凝膠等。其中，P407和P188用量比例優(yōu)選在2.5∶1～10∶1[13-16]。

表1 陰道用中藥原位凝膠

Table 1 In situ gel of traditional Chinese medicine for vagina

凝膠名稱凝膠類型凝膠基質(zhì)文獻 參黃陰道用溫敏原位凝膠溫度敏感型原位凝膠泊洛沙姆13 婦黃寧溫敏凝膠溫度敏感型原位凝膠泊洛沙姆14 姜黃素溫度敏感型原位凝膠溫度敏感型原位凝膠泊洛沙姆15 苦茶婦科原位凝膠溫度敏感型原位凝膠泊洛沙姆16 苦豆子總堿溫敏凝膠溫度敏感型原位凝膠泊洛沙姆17 易黃湯陰道用溫敏原位凝膠溫度敏感型原位凝膠泊洛沙姆18 婦科用載醋酸棉酚即型凝膠溫度敏感型原位凝膠氨基化泊洛沙姆19 茶樹精油復方溫敏型凝膠劑溫度敏感型原位凝膠泊洛沙姆20 鹽酸小檗堿pH敏感陰道用原位凝膠pH敏感型原位凝膠卡波姆21 姜黃素微乳溫敏原位凝膠劑微乳復合溫度敏感型原位凝膠泊洛沙姆22 蛇床子素微囊-溫敏凝膠微囊復合溫度敏感型型原位凝膠泊洛沙姆23 斑蝥素羥丙基-β-環(huán)糊精原位凝膠劑環(huán)糊精包合物復合溫度敏感型原位凝膠泊洛沙姆24 荊芥油-苦參素陰道用脂質(zhì)體溫敏凝膠脂質(zhì)體復合溫度敏感型原位凝膠泊洛沙姆、羥丙甲基纖維素25 蛇床子素羥丙基-β-環(huán)糊精原位凝膠環(huán)糊精包合物復合溫度敏感型原位凝膠殼聚糖26 蛇床子微囊溫敏凝膠微囊復合溫度敏感型原位凝膠泊洛沙姆27 鴉膽子油微囊-原位凝膠微囊復合溫度敏感型原位凝膠泊洛沙姆28 姜黃素固體分散體原位溫敏凝膠固體分散體復合溫度敏感型原位凝膠泊洛沙姆29 龍血竭羥丙基-β-環(huán)糊精包合物溫敏凝膠環(huán)糊精包合物復合溫度敏感型原位凝膠泊洛沙姆30

T-溫度 LCST-臨界相轉(zhuǎn)變溫度

2.2 pH敏感型原位凝膠

pH敏感型原位凝膠是一類對pH變化敏感的高分子聚合物凝膠，此類聚合物分子骨架中均含有大量的可解離基團，其膠凝行為[37]認為是電荷間的排斥作用導致分子鏈伸展與相互纏結(jié)的結(jié)果（圖2）。人的體液具有一定的緩沖容量，能夠通過改變高分子周圍溶液環(huán)境pH值而誘發(fā)膠凝。

pH敏感型原位凝膠常用的基質(zhì)是卡波姆（carbopol，CP），又名聚羧乙烯，是一種水溶性的凝膠基質(zhì)，根據(jù)其聚合度的不同，CP可以分為多種規(guī)格，其中以CP934、CP940、CP941等最為常用。CP分子中含有大量的羧基，在較低pH值時，羧基基本不解離，分子中同種電荷排斥作用很小，因此黏度較小，隨著pH值的增大，羧基解離比例增大，分子間的斥力增加，導致溶解度減小，黏度增大[38]。

正常人陰道pH范圍在3.5～4.8[39]，理想的pH 敏感型陰道用凝膠在非生理條件下（pH 3，25 ℃）應(yīng)具有黏度小、可以自由流動、滿足陰道可注入性等優(yōu)點，而在模擬生理條件下（pH 4，37 ℃）可以發(fā)生相轉(zhuǎn)變成半固體凝膠制劑。研究者以此為評價指標，經(jīng)過優(yōu)化確定0.5% CP980加上0.3%聚乙烯醇203（polyvinyl alcohol 203，PVA203）為最佳處方，制備了鹽酸小檗堿pH敏感陰道用原位凝膠，測得該制劑在非生理條件時黏度小于1100 mPa·s，在模擬生理條件pH 4.0時，黏度大于2500 mPa·s，符合陰道用凝膠劑的標準。

圖2 pH敏感型原位凝膠膠凝機圖

2.3 復合型原位凝膠

2種及以上的制劑結(jié)合起來制備的原位凝膠稱為復合型原位凝膠，主要有新型的微粒給藥系統(tǒng)，如微乳、微囊、包合物、脂質(zhì)體[40]等，具有改善藥物溶解性、提高藥物穩(wěn)定性、減少刺激性、緩控釋作用等優(yōu)點[41]。

2.3.1 微乳-溫敏凝膠 微乳是由油相、水相、乳化劑及助乳化劑在適當比例下自發(fā)形成的一種熱力學穩(wěn)定的油水混合系統(tǒng)，其作為藥物載體主要具有以下優(yōu)點：高穩(wěn)定性，易于制備和保存；藥物分散性好，利于吸收，可提高藥物生物利用度；可延長水溶性藥物的釋放時間。姜黃素具有多種藥理活性，但是其難溶于水，口服吸收差，生物利用度非常低，且體內(nèi)易被代謝，李曉云等[22]利用微乳增加姜黃素在水中的溶解度，又在姜黃素微乳的基礎(chǔ)上加入溫敏凝膠基質(zhì)制成了溫度敏感型原位凝膠，即在室溫為液體，在機體皮膚或黏膜上由于體溫作用形成凝膠劑，不僅提高了姜黃素的溶解度，也延長了藥物的作用時間，進而促進了藥物的體內(nèi)吸收。

2.3.2 微囊-溫敏凝膠 藥物制成微囊（或微球），可以實現(xiàn)以下作用：掩蓋藥物的不良氣味；提高藥物的穩(wěn)定性；降低藥物對消化道的刺激；液體藥物固體化，方便其使用；避免復方制劑中藥物的配伍變化；制成緩控釋制劑和靶向制劑；包裹活細胞或生物活性物質(zhì)。王銳等[23]先將水溶性差的蛇床子素制成微囊，再使用冷制法制備溫敏凝膠，以膠凝溫度為指標，對P407、P188以及丙二醇的濃度進行單因素考察，采用正交試驗優(yōu)化蛇床子素微囊-溫敏凝膠的制備工藝，得到蛇床子素微囊-溫敏凝膠的最佳制備工藝參數(shù)為P407-P188-丙二醇的比例18∶1∶15，測得其膠凝溫度為36 ℃，通過體外釋放度考察發(fā)現(xiàn)蛇床子素微囊-溫敏凝膠釋放符合Higuchi方程，藥物的釋放行為是半透膜擴散，呈現(xiàn)良好的緩釋作用。微囊與原位凝膠的結(jié)合提高了藥物的順應(yīng)性，更好地發(fā)揮了原位凝膠的緩釋作用。

2.3.3 包合物-溫敏凝膠 羥丙基-β-環(huán)糊精可顯著增加藥物的溶解性能，特別是難溶性藥物。陳斌[24]將環(huán)糊精包合物與溫敏性原位凝膠2種制劑結(jié)合到一起，制備的斑蝥素羥丙基-β-環(huán)糊精包合物溫敏原位凝膠，成功地解決了斑蝥素水溶性差、口服生物利用度低等問題。關(guān)秀峰等[26]采用飽和水溶液法選用羥丙基-β-環(huán)糊精對藥物進行包合，選擇可與環(huán)糊精接枝的殼聚糖制備溫敏凝膠，并對蛇床子藥材、蛇床子凝膠以及蛇床子包合物溫敏凝膠的體外釋放進行對比，結(jié)果證明，包合物溫敏凝膠具有良好的緩釋作用。

2.3.4 脂質(zhì)體-溫敏凝膠 脂質(zhì)體系指將藥物包封于類脂質(zhì)雙分子層內(nèi)而形成的微型泡囊體，具有靶向、減毒、緩釋、高穩(wěn)定性等特點，張朵朵等[25]采用復乳法制備苦參素脂質(zhì)體，以泊洛沙姆P407和P188為凝膠基質(zhì)，以凝膠的膠凝溫度為考察指標對處方進行優(yōu)化；采用冷溶法制備荊芥油-苦參素陰道用脂質(zhì)體溫敏凝膠，得到脂質(zhì)體-溫敏凝膠基質(zhì)最佳處方為18% P407、5% P188和0.2%羥丙基甲基纖維素（hydroxypropyl methyl cellulose，HPMC）。

3 陰道用中藥原位凝膠的評價方法

目前尚未有成熟的陰道用原位凝膠劑的質(zhì)量評價體系，尤其是中藥陰道用原位凝膠。原位凝膠的質(zhì)量標準除了外觀、pH、物理及化學穩(wěn)定性，還包括膠凝溫度、藥物含量和體外釋放度等，本文將從體外和在體兩方面對陰道用原位凝膠的評價方法進行綜述。

3.1 陰道用中藥原位凝膠的體外質(zhì)量評價

3.1.1 膠凝溫度 膠凝溫度是溫敏型原位凝膠最重要的評價指標，常用的測定膠凝溫度的方法有目測法及流變學測定法[42]。

（1）目測法：一種為攪拌子法[43]，具體操作是在西林瓶中裝入待測溶液，插入溫度計，加入磁性攪拌子，在水浴中進行電磁攪拌，使水浴持續(xù)緩慢升溫，以磁力攪拌子完全停止轉(zhuǎn)動的溫度定義為膠凝溫度；另一種為試管倒置法，取適量原位凝膠于4 ℃的10 mL離心管中，將離心管置于恒溫水浴鍋中，調(diào)節(jié)水溫，使其由25 ℃緩慢升至37 ℃，每升高1 ℃觀察原位凝膠的流動性，直至原位凝膠完全不再流動，即為膠凝溫度。目測法簡單易操作，但是局限性和誤差性相對較大。

（2）流變學測定方法：利用旋轉(zhuǎn)流變儀對凝膠的流變特征進行研究，將樣品置于正弦變化的剪切應(yīng)力下研究黏彈性質(zhì)，計算彈性模量（′）和黏性模量（″），′越大，凝膠彈性越強，″越大，凝膠黏度越大。Rossi等[44]指出，當凝膠溫度升高時，′也隨之增大。膠凝溫度也可被定義為當′與″相等時的溫度點[45]，方法相對于攪拌子法等更加客觀、精確，可全面揭示溫敏凝膠的相轉(zhuǎn)變過程。王秀清等[18]采用流變學方法利用Physica MCR102流變儀，同軸圓筒測試系統(tǒng)（coaxial cylinder 27，CC27）測定經(jīng)陰道模擬液稀釋前后易黃湯陰道用溫敏凝膠的膠凝溫度，結(jié)果顯示，在模擬陰道液稀釋前膠凝溫度為24.5 ℃，而經(jīng)過模擬陰道液稀釋后膠凝溫度變?yōu)?7 ℃。

3.1.2 膠凝時間 膠凝時間是指凝膠溶液發(fā)生膠凝時所需的時間，原位凝膠成凝性決定給藥劑量的準確性，膠凝時間越短，藥物流失越慢，發(fā)生突釋反應(yīng)的可能性越小。測定膠凝時間的方法多樣，多數(shù)文獻中將原位凝膠溶液置于西林瓶或離心管中，采取傾斜法至溶液不隨容器移動時，記錄該過程的時間即為膠凝時間。徐偉娜等[46]研究溫敏型原位凝膠的膠凝時間，試管中放入5 mL凝膠，進行37 ℃恒溫水浴，觀察樣品狀態(tài)的變化，樣品達到膠凝溫度所需的時間約為90 s。說明給藥后，可以在較短時間發(fā)揮其溫敏特性轉(zhuǎn)變?yōu)榘牍腆w凝膠狀態(tài)，凝膠不易溢出體外。

3.1.3 穩(wěn)態(tài)黏度 黏度是溫敏型原位凝膠的流變學特征，是非常重要的評價指標之一。黏度的穩(wěn)定性影響藥效，多采用旋轉(zhuǎn)黏度計來測定原位凝膠的穩(wěn)態(tài)黏度。Zhang等[47]研究了溫度和剪切速率對原位凝膠黏度的影響，發(fā)現(xiàn)當環(huán)境溫度低于相變溫度（35 ℃）時，測得的黏度始終很小，并且不隨剪切速率的變化而變化，因此，體系具有牛頓流體的性質(zhì)。隨著溫度的升高，黏度增大。當溫度升高到相變溫度時，黏度急劇增加，隨著剪切速率的增加，黏度急劇下降，呈現(xiàn)出假塑性流體特有的剪切變稀現(xiàn)象。

3.1.4 生物黏附性 只有原位凝膠具有適當?shù)酿じ搅?，藥物才能在給藥部位滯留一定時間，從而達到預(yù)期的釋放效果，因此生物黏附力是評價原位凝膠質(zhì)量的重要指標。Ci等[19]使用近紅外熒光活體成像技術(shù)考察了包載DiR熒光探針的凝膠在小鼠體內(nèi)外的滯留時間，結(jié)果表明其制得的經(jīng)過氨基修飾后的凝膠有著良好的生物黏附性，可在陰道黏膜上滯留長達8 h。

3.1.5 藥物含量 藥物含量是凝膠質(zhì)量優(yōu)劣的關(guān)鍵。目前對于陰道用原位凝膠的藥物含量測定多釆用HPLC法[48]。黃德浩等[20]采用HPLC法測定了凝膠中苦參堿的含量，藥物含量穩(wěn)定性良好，表明制備方法可靠，能控制藥物含量，成功制備出苦茶陰道用溫敏原位凝膠。

3.1.6 體外釋放 藥物的體外釋放是指藥物從原位凝膠中釋放到接收介質(zhì)的過程，藥物的釋放速度和進程會影響藥效。通常使用釋放度來評價原位凝膠的體外釋放。常用的評價釋放度的模型有2種，一種是有膜釋放模型[49-50]，以藥物的溶出和擴散為主，常用的方法主要有Franz擴散池法以及透析袋法；另一種是無膜釋放模型[51-53]，此種模型下藥物和載體基質(zhì)均進行溶出和釋放，基質(zhì)的種類、溶蝕速率等均對藥物的釋放有影響，其中，凝膠溶蝕是藥物釋放的主要影響因素。

通過對近年來陰道用中藥原位凝膠的體外釋放評價方法的總結(jié)（表2），發(fā)現(xiàn)在有膜釋放模型中，藥物的釋放機制多為半透膜擴散，且大多服從Higuchi方程，而無膜釋放模型中，藥物的釋放大多服從零級動力學。不論是用哪種模型進行外釋放的評價，陰道用中藥原位凝膠劑對藥物有緩控釋的效果，有助于藥物在人體內(nèi)的長期滯留及緩慢釋放。

表2 陰道用中藥原位凝膠體外釋放評價

Table 2 Evaluation of in situ gel of traditional Chinese medicine for vagina release in vitro

凝膠名稱體外溶出模型釋放條件釋放結(jié)果釋放機制動力學模型文獻 參黃陰道用溫敏原位凝膠無膜釋放模型條件：恒溫水浴振蕩器震蕩30 min；介質(zhì)：pH 4.2的模擬陰道液；介質(zhì)體積：5 mL；溫度：37 ℃藥物累積釋放量隨凝膠的累積溶蝕量增加而增加，在6 h時，藥物可完全釋放凝膠溶蝕零級動力學13 婦黃寧溫敏凝膠無膜釋放模型條件：恒溫水浴振蕩器震蕩（120 r·min?1）；介質(zhì)：pH 4.0的磷酸鹽- 磷酸緩沖液/生理鹽水；介質(zhì)體積：5 mL；溫度：37 ℃pH 4.0緩沖溶液為釋放介質(zhì)時凝膠溶蝕和黃藤素釋放更平穩(wěn)擴散、凝膠溶蝕Higuchi14 有膜釋放模型條件：溶出杯、轉(zhuǎn)速100 r·min?1；介質(zhì)：pH 4.0的模擬陰道液；介質(zhì)體積：5 mL；溫度：37 ℃12 h內(nèi)凝膠劑的累積釋放量為93.52% 苦豆子總堿溫敏凝膠有膜釋放模型條件：漿法、轉(zhuǎn)速100 r·min?1；介質(zhì)：pH 7.4的PBS緩沖液；介質(zhì)體積：400 mL；溫度：37 ℃2 h內(nèi)藥物累積釋放度為48.29%，24 h內(nèi)藥物累積釋放度為96.33% 17 易黃湯陰道用溫敏原位凝膠有膜釋放模型條件：恒溫水浴振蕩器震蕩（100 r·min?1）；介質(zhì)：pH 4.2模擬陰道液；介質(zhì)體積：20 mL；溫度：37 ℃藥物呈現(xiàn)先快速后趨于平穩(wěn)的釋放趨勢，6 h累積釋放74.30% Higuchi18 婦科用載醋酸棉酚即型凝膠無膜釋放模型條件：50 r·min?1恒速震蕩；介質(zhì)：pH 4.3模擬陰道液；介質(zhì)體積：5 mL；溫度：37 ℃藥物釋放率在5.5 h達到80%左右，凝膠對藥物具有良好的緩釋作用凝膠溶蝕零級動力學19 茶樹精油復方溫敏型凝膠劑無膜釋放模型條件：恒溫水浴振蕩器震蕩30 min；介質(zhì)：pH 4.2的模擬陰道液；介質(zhì)體積：5 mL；溫度：37 ℃藥物釋放率在5.5 h達到99.85%凝膠溶蝕零級動力學20 姜黃素微乳溫敏原位凝膠有膜釋放模型條件：恒溫水浴振蕩器震蕩（100 r·min?1）；介質(zhì)：30%的無水乙醇40 mL；介質(zhì)體積：40 mL；溫度：37 ℃24 h時凝膠制劑的累積釋放率為93.76%，具有明顯緩釋效果 22 蛇床子素微囊-溫敏凝膠有膜釋放模型 50 h內(nèi)藥物釋放率可達90%，具有良好的緩釋作用半透膜擴散Higuchi23 荊芥油-苦參素陰道用脂質(zhì)體溫敏凝膠有膜釋放模型介質(zhì)：pH 4.0的檸檬酸緩沖液/蒸餾水/生理鹽水；介質(zhì)體積：200 mL；溫度：37 ℃24 h內(nèi)累積釋放率為（58.89±0.34）%，48 h內(nèi)累積釋放率為（66.38±0.12）%，具有明顯的緩釋作用 25 蛇床子素羥丙基β-環(huán)糊精原位凝膠有膜釋放模型條件：溶出杯、轉(zhuǎn)速300 r·min?1；介質(zhì)：0.1 mol·L?1HCl溶液；介質(zhì)體積：250 mL；溫度：37 ℃6 h內(nèi)釋放可達到90%，凝膠對藥物有一定的緩釋作用凝膠溶蝕 26 蛇床子微囊溫敏凝膠有膜釋放模型條件：溶出杯、轉(zhuǎn)速300 r·min?1；介質(zhì)：0.1 mol·L?1HCl溶液；介質(zhì)體積：250 mL；溫度：37 ℃藥物釋放可長達48 h，凝膠對藥物有一定的緩釋作用半透膜擴散Higuchi27 鴉膽子油微囊-原位凝膠無膜釋放模型條件：恒溫水浴振蕩器震蕩30 min；介質(zhì)：經(jīng)超聲脫氣的蒸餾水；介質(zhì)體積：10 mL；溫度：37 ℃藥物持續(xù)釋放可達96 h Higuchi28

3.2 陰道用中藥原位凝膠的在體評價

目前陰道用中藥原位凝膠劑在體的評價方法主要為在體局部的安全性評價以及在體藥效學和藥動學評價。

3.2.1 安全性評價 原位凝膠在體的安全性評價一般為對動物給藥部位黏膜的刺激性及毒性評價[54]。不同給藥部位的刺激性及毒性的評價方式不同，對于陰道用中藥原位凝膠的安全性評價，常用的動物主要有家兔和小鼠，觀察指標則是動物在給藥后的全身毒性反應(yīng)以及陰道及子宮等部位的局部病理性變化。在考察參黃陰道用溫敏型原位凝膠的陰道刺激性時，李燕等[13]以家兔為實驗動物，觀察其全身的變化，以其子宮、陰道、卵巢是否有充血性水腫等變化為指標，結(jié)果在家兔給藥期間及處死后均未觀察到異常情況。在醋酸棉酚原位凝膠的局部刺激性評價中，以小鼠為實驗動物，給藥后無明顯的局部毒性反應(yīng)，陰道刺激性實驗發(fā)現(xiàn)陰道細胞形態(tài)無異常，無明顯陰道刺激性。說明該凝膠是安全的，符合黏膜用藥制劑的規(guī)定[55]。

3.2.2 藥效學和藥動學評價 在體藥效學和藥動學評價通常是利用整體動物模型結(jié)合相應(yīng)檢測指標考察制劑的治療作用。通常以小鼠和大鼠為實驗動物。例如，以霉菌性陰道炎小鼠模型為實驗對象，收集陰道沖洗液觀察白色念珠菌和乳酸桿菌生長情況；采用蘇木-伊紅染色病理切片觀察陰道黏膜水腫及炎性增生情況；采用免疫組化法檢測炎癥因子的表達，全面評價姜黃素溫敏型原位凝膠對霉菌性陰道炎的治療作用[15]。羅靜[30]通過記錄陰道外觀、陰道病理形態(tài)學、子宮組織切片圖和子宮解剖圖的變化，綜合考察龍血竭羥丙基-β-環(huán)糊精包合物溫敏凝膠對宮頸柱狀上皮異位大鼠模型的影響，結(jié)果表明中劑量[0.2mL/(只?1·d?1)] 時治療效果最佳。

4 展望

中藥原位凝膠劑是目前發(fā)展很快的陰道給藥劑型，患者順應(yīng)性好，且易于涂布，無異物感，能緊密黏附在給藥部位，延長滯留時間，可以達到充分發(fā)揮藥效的目的。但是陰道用中藥原位凝膠在實際應(yīng)用方面仍存在一些問題，如原位凝膠劑的“突釋”[56]、高分子材料對皮膚的刺激性和安全性；以及目前多以中藥活性單體成分為研究對象，而中藥復方的研究較少；大部分研究僅對凝膠劑的處方及質(zhì)量控制進行研究，缺少相關(guān)的藥理、藥動力學及臨床應(yīng)用等研究；原位凝膠劑的制備方法及質(zhì)量控制缺乏嚴格、統(tǒng)一的標準；中藥原位凝膠劑目前研究較多的還是以泊洛沙姆為基質(zhì)的溫敏原位凝膠，不能滿足日益多樣化的臨床需求；中藥成分復雜，加入凝膠基質(zhì)后，兩者是否會發(fā)生相互作用而影響制劑質(zhì)量等問題，還需要廣大科研工作者進行更加深入的研究。

利益沖突 所有作者均聲明不存在利益沖突

[1] 陳雅慧, 張芳, 李盼盼, 等. 常用婦科中藥制劑臨床應(yīng)用進展 [J]. 中成藥, 2017, 39(9): 1904-1908.

[2] 何耀強, 巨亞莉. 婦科外用藥的劑型特點與合理應(yīng)用 [J]. 中國計劃生育學雜志, 2008, 16(12): 761-762.

[3] 楊博淵, 陳斌, 徐朋, 等. 原位凝膠技術(shù)的發(fā)展和相關(guān)產(chǎn)品研究進展 [J]. 中國新藥雜志, 2020, 29(17): 1964-1971.

[4] das Neves J, Bahia M F. Gels as vaginal drug delivery systems [J]., 2006, 318(1/2): 1-14.

[5] Acartürk F. Mucoadhesive vaginal drug delivery systems [J]., 2009, 3(3): 193-205.

[6] 張蜀艷. 婦科用凝膠劑的探討 [J]. 內(nèi)蒙古中醫(yī)藥, 2010, 29(11): 51.

[7] Hussain A, Ahsan F. The vagina as a route for systemic drug delivery [J]., 2005, 103(2): 301-313.

[8] 代龍. 離子敏感型即型凝膠的研究進展 [J]. 中國中藥雜志, 2009, 34(5): 515-518.

[9] Chenite A, Chaput C, Wang D,. Novel injectable neutral solutions of chitosan form biodegradable gels[J]., 2000, 21(21): 2155-2161.

[10] 王志鋼. 眼用凝膠劑研究進展 [J]. 中國執(zhí)業(yè)藥師, 2012, 9(10): 33-36.

[11] 張翼, 李鵬躍, 徐冰, 等. 原位凝膠的研究及應(yīng)用進展 [J]. 聊城大學學報: 自然科學版, 2020, 33(5): 88-96.

[12] 羅潔琦, 沙先誼, 方曉玲. 三七總皂苷離子敏感型鼻用原位凝膠的制備 [J]. 中草藥, 2011, 42(7): 1299-1304.

[13] 李燕, 趙利剛, 王春艷, 等. 參黃陰道用溫敏原位凝膠的制備及質(zhì)量評價 [J]. 中國藥師, 2015, 18(4): 655-659.

[14] 孫媛, 劉波, 趙媛. 婦黃寧溫敏凝膠的制備及體外釋放研究 [J]. 時珍國醫(yī)國藥, 2016, 27(2): 363-366.

[15] 陳曉, 諶文元, 麻培培, 等. 姜黃素溫度敏感型原位凝膠治療霉菌性陰道炎的研究 [J]. 國際藥學研究雜志, 2017, 44(10): 947-952.

[16] 黃德浩, 王濤, 鄧紅, 等. 苦茶婦科凝膠的工藝研究及流變學參數(shù)考察 [J]. 中草藥, 2019, 50(1): 76-82.

[17] 魏玉輝, 張建萍, 段好剛, 等. 苦豆子總堿溫敏凝膠的制備及體外評價 [J]. 中成藥, 2015, 37(10): 2318-2320.

[18] 王秀清, 劉宇靈, 林龍飛, 等. 易黃湯陰道用溫敏原位凝膠及其普通凝膠的流變學和體外釋放研究 [J]. 中國中藥雜志, 2020, 45(3): 539-547.

[19] Ci L Q, Huang Z G, Liu Y,. Amino-functionalized poloxamer 407 with both mucoadhesive and thermosensitive properties: Preparation, characterization and application in a vaginal drug delivery system [J]., 2017, 7(5): 593-602.

[20] 黃德浩. 茶樹精油的質(zhì)量研究及其復方溫敏型凝膠劑的開發(fā) [D]. 廣州: 廣東藥科大學, 2019.

[21] 胡容峰. 婦科用pH敏感型陰道用原位凝膠的制備與應(yīng)用: 中國, CN201210122384.5 [P]. 2013-10-30.

[22] 李曉云, 竇金鳳, 王爽, 等. 姜黃素微乳溫敏原位凝膠劑的制備及其理化性質(zhì)研究 [J]. 藥物生物技術(shù), 2013, 20(3): 225-228.

[23] 王銳, 殷悅, 曲炳楠, 等. 蛇床子素微囊-溫敏凝膠的制備與質(zhì)量分析研究 [J]. 中國藥學雜志, 2017, 52(12): 1044-1048.

[24] 陳斌. 斑蝥素羥丙基β-環(huán)糊精原位凝膠劑的制備 [J]. 中華中醫(yī)藥學刊, 2010, 28(10): 2215-2217.

[25] 張朵朵, 吳艷麗, 危紅華, 等. 荊芥油-苦參素陰道用脂質(zhì)體溫敏凝膠的制備及其性質(zhì)考察 [J]. 中草藥, 2014, 45(7): 929-934.

[26] 關(guān)秀鋒, 王銳, 楊婧. 蛇床子環(huán)糊精包合物接枝溫敏凝膠的制備與體外釋放 [J]. 化學工程師, 2019, 33(12): 63-67.

[27] 姜霽洺. 蛇床子微囊溫敏凝膠的研究 [D]. 哈爾濱: 黑龍江中醫(yī)藥大學, 2014.

[28] 陳鋼, 張曉, 盧剛, 等. 鴉膽子油微囊-原位凝膠的制備及體外釋藥機制的研究 [J]. 中草藥, 2012, 43(7): 1306-1309.

[29] Zhang M M, Zhuang B, du G J,. Curcumin solid dispersion-loadedhydrogels for local treatment of injured vaginal bacterial infection and improvement of vaginal wound healing [J]., 2019, 71(7): 1044-1054.

[30] 羅靜. 龍血竭羥丙基-β-環(huán)糊精包合物溫敏凝膠的制備與評價 [D]. 昆明: 云南中醫(yī)藥大學, 2019.

[31] Huffman A S, Afrassiabi A, Dong L C. Thermally reversible hydrogels: II. Delivery and selective removal of substances from aqueous solutions [J]., 1986, 4(3): 213-222.

[32] 龐國勛. 中藥原位凝膠制劑工藝及藥理研究概況 [J]. 現(xiàn)代中西醫(yī)結(jié)合雜志, 2016, 25(11): 1247-1252.

[33] Karavasili C, Fatouros D G. Smart materials:gel-forming systems for nasal delivery [J]., 2016, 21(1): 157-166.

[34] Ur-Rehman T, Tavelin S, Gr?bner G. Chitosangelation for improved drug loading and retention in poloxamer 407 gels [J]., 2011, 409(1/2): 19-29.

[35] Jeong B, Kim S W, Bae Y H. Thermosensitive sol-gel reversible hydrogels [J]., 2002, 54(1): 37-51.

[36] Hatefi A, Amsden B. Biodegradable injectableforming drug delivery systems [J]., 2002, 80(1/2/3): 9-28.

[37] Agrawal M, Saraf S, Saraf S,. Stimuli-responsivegelling system for nose-to-brain drug delivery [J]., 2020, 327: 235-265.

[38] Agrawal A K, Das M, Jain S.gel systems as ‘smart’ carriers for sustained ocular drug delivery [J]., 2012, 9(4): 383-402.

[39] Chen J P, Zhou R, Li L,. Mechanical, rheological and release behaviors of a poloxamer 407/poloxamer 188/carbopol 940 thermosensitive composite hydrogel [J]., 2013, 18(10): 12415-12425.

[40] Ammar H O, Salama H A, Ghorab M,. Development of dorzolamide hydrochloridegel nanoemulsion for ocular delivery [J]., 2010, 36(11): 1330-1339.

[41] 仇海鎮(zhèn), 李娟. 原位凝膠的研究進展及其在藥劑學中的應(yīng)用 [J]. 醫(yī)學信息, 2010, 23(5): 1524-1526.

[42] 袁萍, 陳鷹, 劉麗娜. 辛苯聚醇陰道用溫敏凝膠的流變學特性及緩釋滯留性研究 [J]. 中國藥師, 2017, 20(6): 982-985.

[43] 田芳, 王玉柱, 楊凱, 等. 尼非韋羅陰道溫敏原位凝膠的流變學研究 [J]. 中國新藥雜志, 2013, 22(3): 345-350.

[44] Rossi S, Ferrari F, Bonferoni M C,. Comparison of poloxamer- and chitosan-based thermally sensitive gels for the treatment of vaginal mucositis [J]., 2014, 40(3): 352-360.

[45] Karavana S Y, Ren?be S, ?enyi?it Z A,. A newgel formulation of itraconazole for vaginal administration [J]., 2012, 3(4): 417-426.

[46] 徐偉娜, 楊清華, 王勤, 等. 溫敏型陰道酸緩沖原位凝膠的制備與質(zhì)量評價 [J]. 生物醫(yī)學工程研究, 2017, 36(2): 164-167.

[47] Zhang S J, Zhang Y T, Wang Z,. Temperature-sensitive gel-loaded composite nanomedicines for the treatment of cervical cancer by vaginal delivery [J]., 2020, 586: 119616.

[48] 歐陽伸雨. 復方陰道炎納米乳在位凝膠的制備及其藥效學研究 [D]. 楊凌: 西北農(nóng)林科技大學, 2018.

[49] Ren?ber S, Karavana S Y, ?enyi?it Z A,. Mucoadhesivegel formulation for vaginal delivery of clotrimazole: Formulation, preparation, and/evaluation [J]., 2017, 22(4): 551-561.

[50] 王銳, 邱金雙, 謝國梁, 等. 殼聚糖-海藻酸鈉緩釋微囊的制備與釋放性研究 [J]. 中醫(yī)藥導報, 2015, 21(8): 29-31.

[51] Patois E, Osorio-da Cruz S, Tille J C,. Novel thermosensitive chitosan hydrogels:evaluation [J]., 2009, 91(2): 324-330.

[52] 閆薈羽, 曲曉宇, 馬潔, 等. 吡嘧司特鉀眼用原位溫度敏感凝膠的制備及其體外釋放度的研究 [J]. 中國醫(yī)院藥學雜志, 2019, 39(22): 2304-2308.

[53] 肖金寶, 李洪斌, 劉福強, 等. 銀杏葉提取物溫度敏感型鼻用原位凝膠體外釋放研究 [J]. 中成藥, 2013, 35(1): 46-49.

[54] 徐玉紅, 王蔓琳, 李東, 等. 甲硝唑陰道用原位凝膠的急性毒性及陰道刺激性研究 [J]. 中國藥業(yè), 2009, 18(13): 6-7.

[55] 次麗倩. 婦科用載醋酸棉酚即型凝膠給藥系統(tǒng)研究 [D]. 上海: 上海理工大學, 2018.

[56] 敖惠, 柏佳倩, 張玉婷, 等. 原位凝膠在中藥靶向制劑中的研究進展 [J]. 中國藥師, 2017, 20(7): 1283-1286.

Research progress ongel of traditional Chinese medicine for vagina

SUN Xiao1, NING Hong-xin2, HOU Wen-bin2, ADIL Astulla3, LIU Chang-xiao1, 4, HE Xin1

1. Guangdong Pharmaceutical University,·Guangzhou 510006, China 2. Tianjin Key Laboratory of Radiation Medicine and Molecular Nuclear Medicine, Institute of Radiation Medicine, Chinese Academy of Medical Sciences & Peking Union Medical College, Tianjin 300192, China 3. Hetian Region Institute of Materia Medica, Hetian 848000, China 4. Tianjin Institute of Pharmaceutical Research, Tianjin 300301, China

gel is a kind of non-chemically crosslinked semi-solid gel which can be transformed from liquid to gel immediately after administration in solution. It has double advantages of solution and gel, and has become the focus of pharmaceutics research. Traditional vaginal dosage forms have some problems such as short retention time and low bioavailability. In recent years, an impressive number of newgel systems have been reported for vaginal drug delivery system to increase bioavailability with the extension of corneal residence time. Thegel of traditional Chinese medicine is beneficial to the improvement of its medication effect. In this paper, the characteristics, classification, preparation and evaluation methods ofgel of traditional Chinese medicine for vaginal use were reviewed, in order to provide the basis for the further research and application ofgel of traditional Chinese medicine for vagina.

vaginal administration;gel; traditional Chinese medicine preparations; preparation technology; bioavailability

R283

A

0253 - 2670(2022)11 - 3564 - 09

10.7501/j.issn.0253-2670.2022.11.035

2022-01-05

國家自然科學基金青年基金項目（82104012）；中國醫(yī)學科學院醫(yī)學與健康科技創(chuàng)新工程重大協(xié)同創(chuàng)新項目資助（2021-I2M-1-042）；和田地區(qū)技術(shù)研究與開發(fā)經(jīng)費項目（201910）；廣東省自然科學基金項目（2020A1515010156）

孫 曉（1996—），女，碩士研究生，研究方向為中藥物質(zhì)基礎(chǔ)研究。Tel: 15022160973 E-mail: 1132181450@qq.com

劉昌孝，博士生導師，中國工程院院士，主要從事藥理學與藥動學研究。E-mail: liuchangxiao@vip.163.com

何 新，教授，博士生導師，從事中藥藥動學與藥物代謝的研究。Tel: (020)39352880 E-mail: hexintn@gdpu.edu.cn

[責任編輯 潘明佳]