王立明

（黑龍江職業(yè)學院，黑龍江哈爾濱 150080）

有益微生物制劑在消化道繁殖和代謝過程中可產生揮發(fā)性脂肪酸、消化酶和多種B族維生素，具有激發(fā)小腸段上皮細胞對葡萄糖的轉運和吸收等功能[1-2]，對動物機體有益，有望成為抗生素的有效替代品。有研究表明，日糧中適當添加有益微生物制劑可改善機體免疫功能，調節(jié)腸道功能平衡[3-5]。目前，針對有益微生物制劑開展的相關研究多集中于制劑的作用機制，主要探究畜禽在食用芽孢桿菌微生物制劑飼料后腸道微生物菌群和免疫功能會受到的影響；但在有益微生物制劑對飼料養(yǎng)分消化利用方面的研究較少[6-8]。本研究選擇黃羽肉雞作為試驗動物，在黃羽肉雞日糧添加芽孢桿菌微生物制劑，研究芽孢桿菌對黃羽肉雞生長性能、養(yǎng)分（蛋白質及氨基酸）利用率以及盲腸菌群數量的影響，以期為相關應用提供參考。

1 材料與方法

1.1 試驗材料

試驗采用芽孢桿菌微生物制劑由枯草芽孢桿菌、地衣芽孢桿菌混合制成，孢子含量為2×1010CFU/g，由武漢雄峰科技有限公司提供。

黃羽肉雞來自某基地。采用全封閉雞舍，試驗開始前已做好消毒工作。

1.2 試驗設計

試驗選取240羽7日齡體重接近、健康狀況良好的快長型黃羽肉雞，隨機分為2組，每組6個重復，每個重復20只。試驗期49 d，分為2個階段。7～28日齡為第一階段，29～56日齡為第二階段。對照組肉雞飼喂基礎日糧；試驗組在基礎日糧中加入250 g/t芽孢桿菌微生物制劑。

1.3 試驗日糧

試驗基礎日糧主要原料選用玉米、豆粕、次粉和油糠等食材，原料的配比參考美國NRC肉雞飼養(yǎng)標準（1994）肉雞營養(yǎng)需要以及及飼養(yǎng)標準（NY/T 33—2004）?；A日糧組成及營養(yǎng)水平見表1。

表1 基礎日糧組成及營養(yǎng)水平Tab.1 Basic diet composition and nutritional level

1.4 測定指標及方法

1.4.1 生長性能

試驗開始和結束，試驗雞空腹稱重。試驗期間觀測記錄各重復耗料量以及試驗雞生長狀況，計算平均日增重、平均日采食量以及料重比。

1.4.2 營養(yǎng)物質表觀消化率

試驗結束前7 d，每個重復選擇1只中等體重雞，置入代謝籠開展行氮代謝試驗。預試期3 d，正式試驗期7 d。代謝試驗期收集試雞的排泄物，糞便烘干制成風干樣品。

參照《飼料分析與飼料質量檢測技術》，測定日糧和排泄物中常規(guī)養(yǎng)分；采用waters pico-TagAA分析儀，測定排泄物和試驗日糧氨基酸的表觀消化率。

營養(yǎng)物質表觀消化率=(養(yǎng)分攝入量-養(yǎng)分排泄量)/養(yǎng)

1.4.3 盲腸菌群數量

取0.5 g勻質的盲腸內容物，加入到4.5 mL無菌生理鹽水，振蕩混勻，取0.5 mL；依次稀釋至10～6倍。選擇3個合適的稀釋度，由高稀釋度開始，吸取菌液加入各培養(yǎng)基平皿內，每個平皿3個稀釋度，每個稀釋度做3個重復，37℃培養(yǎng)24～48 h，采用平板計數法進行計數，并計算每克內容物所含菌數。培養(yǎng)基為各細菌的選擇性培養(yǎng)基，乳酸桿菌采用燭缸法進行厭氧培養(yǎng)，其余均采用需氧培養(yǎng)。

1.5 數據統(tǒng)計與分析

試驗數據采用SPSS 13.0統(tǒng)計軟件序進行數據分析，Duncan's進行多重比較和相關回歸分析。結果以“平均值±標準差”表示，P＜0.05表示差異顯著。

2 結果與分析

2.1 芽孢桿菌微生物制劑對黃羽肉雞生長性能的影響（見表2）

由表2可知，與對照組相比，試驗組肉雞的末重、平均日增重和平均日采食量均顯著升高（P＜0.05）。試驗組肉雞的料重比略低于對照組，但差異不顯著（P＞0.05）。

表2 芽孢桿菌微生物制劑對黃羽肉雞生長性能的影響Tab.2 Effect of Bacillus microbial preparation on production performance of yellow feather broilers

2.2 芽孢桿菌微生物制劑對黃羽肉雞蛋白質和氨基酸表觀消化率的影響（見表3）

由表3可知，與對照組相比，試驗組肉雞對飼料中蛋白質、蘇氨酸、甘氨酸、胱氨酸、組氨酸、脯氨酸的表觀消化率均顯著升高（P＜0.05）。兩組肉雞天冬氨酸、谷氨酸、絲氨酸、丙氨酸、蛋氨酸、亮氨酸、異亮氨酸、苯丙氨酸表觀消化率差異不顯著（P＞0.05）。

表3 芽孢桿菌微生物制劑對黃羽肉雞蛋白質和氨基酸表觀消化率的影響Tab.3 Effect of Bacillus microbial preparation on protein and amino acid digestibility of yellow feather broilers 單位：%

2.3 芽孢桿菌微生物制劑對黃羽肉盲腸微生物菌群的影響（見表4）

由表4可知，與對照組相比，試驗組肉雞盲腸乳酸桿菌、雙歧桿菌數量均顯著升高（P＜0.05），大腸桿菌數量顯著降低（P＜0.05）。試驗組肉雞盲腸腸球菌數量雖略高于對照組，但差異不顯著（P＞0.05）。

表4 芽孢桿菌制劑對黃羽肉雞盲腸微生物菌群的影響Tab.4 Effect of Bacillus microbial preparation on intestinal microbiota of yellow feather broilers 單位：lgCFU/g

3 討論

在養(yǎng)殖行業(yè)，長期使用抗生素可造成的養(yǎng)殖動物自身免疫力降低及抗生素殘留等問題，尋找合適的抗生素替代品成為研究熱點。有研究表明，乳酸菌、芽孢桿菌等益生菌具有代替抗生素應用于畜禽飼料的潛力[9-10]。其中，芽孢桿菌因易于貯藏、運輸而逐漸作為抗生素替代品，并取得了較好的應用效果[11]。有研究發(fā)現，芽孢桿菌以芽孢形式被養(yǎng)殖動物攝入有助于促進養(yǎng)殖動物的生長[12-13]。因此，發(fā)展芽孢桿菌的基礎以及應用研究具有重要意義。

本研究中，試驗組在基礎日糧中添加芽孢桿菌微生物制劑，黃羽肉雞的日增重和飼料轉化效率得到提升，表明黃羽肉雞生長后期采用芽孢桿菌微生物制劑替代抗生素具有一定可行性。微生物制劑能夠刺激腸道局部免疫反應，促進機體對病原細胞的免疫攻擊和對病原菌的抵抗力，同時其代謝產物在消化道形成的酸性環(huán)境能夠抑制有害菌群生存[14]。上述作用均利于促進動物的生長。

本研究雖并未開展對肉雞的相關免疫指標變化情況的研究，但測定了肉雞后腸道的微生物菌群情況，得到的結果同樣可以證實上述觀點。在基礎日糧中添加芽孢桿菌微生物制劑，可對黃羽肉雞盲腸微生物情況產生有益的影響[15]。本研究中，試驗組使用芽孢桿菌微生物制劑，盲腸乳酸桿菌和雙歧桿菌的數量升高，大腸桿菌數量顯著降低，但對腸球菌的影響不大，與上述研究結果一致。

芽孢桿菌作用于盲腸可抑制有害菌生長，促進有益菌的增殖。有研究發(fā)現，采用添加枯草芽孢桿菌的日糧飼喂AA肉仔雞，結果顯示，l、3周齡肉仔雞糞便大腸桿菌數量顯著降低，3周齡仔雞腸道中乳酸桿菌的數量顯著增加，沙門氏菌的數量顯著降低，但并未對大腸桿菌數量產生顯著影響[16]，結論與本研究類似。但芽孢桿菌無法在消化道內定植，只有通過動物不斷采食添加芽孢桿菌的飼料才能夠發(fā)揮作用。

4 結論

有益微生物制劑對肉雞的生長以及對養(yǎng)分的吸收具有較好的應用效果。在基礎日糧中加入適量的芽孢桿菌微生物制劑，可有效改善肉雞的腸道微生物菌群情況，降低大腸桿菌數量，有助于肉雞更好地吸取飼料中的養(yǎng)分，促進其健康生長。