張文穎　閔浩　吳勝兵　張新華　夏庭君　閔水發(fā)

摘要：為了探索生物藥劑對(duì)美國(guó)白蛾的防效，本試驗(yàn)選用HycuNPV與BT復(fù)配，在湖北大悟縣開(kāi)展美國(guó)白蛾幼蟲(chóng)噴霧防治試驗(yàn)，結(jié)果表明：用單一HycuNPV防治第一代美國(guó)白蛾幼蟲(chóng)施藥7、10、13 d后校正死亡率分別為26.71%、67.96%、99.88%。用單一HycuNPV防治第三代美國(guó)白蛾幼蟲(chóng)施藥7、10、13、15 d后校正死亡率分別為17.30%、40.67%、80.33%、91.67%。HycuNPV與BT復(fù)配防治美國(guó)白蛾第一代幼蟲(chóng)施藥7、10、13 d后校正死亡率分別為66%、95.44%、99.88%。HycuNPV與BT復(fù)配防治美國(guó)白蛾第三代幼蟲(chóng)施藥7、10、13、15 d后校正死亡率為43.33%、76.67%、91.33%、96%。均說(shuō)明HycuNPV與BT復(fù)配致死速度快，明顯快于單一HycuNPV。防治第一代與第三代美國(guó)白蛾幼蟲(chóng)試驗(yàn)結(jié)果一致，但防治第一代效果更好。HycuNPV與BT復(fù)配，增效作用明顯，還可顯著降低防治成本。

關(guān)鍵詞：美國(guó)白蛾核型多角體病毒;蘇云金桿菌;復(fù)配;美國(guó)白蛾;林間藥效

中圖分類號(hào)：S435文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A文章編號(hào)：1004-3020（2022）03-0017-05

Analysis of Forest Efficacy of Re-Compounded with HycuNPV and Bacillus thuringiensis?on Control of Hyphantria cunea

Zhang Wenying Min Hao Wu Shengbing Zhang Xinhua Xia Tingjun Min Shuifa

（1. Hubei Ecological Engineering CollegeWuhan430200;

2. Wuhan Chutian Luyi Ecological Technology Co.， Ltd.Wuhan430223;

3. Forest Pest Control Station of Dawu County Forestry BreauXiaogan432800）

Abstract：In order to explore the effectiveness of biological agents on Hyphantria cunea， HycuNPV and BT were used in Dawu County of Hubei Province. The results showed that the adjusted mortality rate was 26.71% after 7 days， 67.96% after 10 days and 99.88% after 13 days.The adjusted mortality rate of controlling third-generation H.cunea?larvae administration with a single HycuNPV was 17.30% after 7 days ，40.67% after 10 days， 80.33% after 13 days， and 91.67% after 15 days.Combination of HycuNPV with BT had an adjusted mortality of controlling first-generation was 66% after 7 days，95.44% after 10 days， and 99.88% after 13 days.Combination of HycuNPV with BT had an adjusted mortality of controlling third-generation 43.33% after 7 days，76.67% after 10 days， 91.33% after 13 days， and 96% after 15 days.All indicate that the combination of HycuNPV and BT is faster and significantly faster than a single HycuNPV.The results of the first generation and the third generation of H.cunea?larvae were consistent， but the first generation was better.The combination of HycuNPV and BT has obvious synergistic effect and can also significantly reduce the prevention and control cost.

Key words：HycuNPV;Bacillus thuringiensis?;Re-compounded;Hyphantria cunea;forest efficacy

美國(guó)白蛾Hyphantria cunea是最嚴(yán)重的外來(lái)入侵有害生物之一，具有食性復(fù)雜、寄主廣泛、危害嚴(yán)重、繁殖力強(qiáng)、傳播途徑廣等特點(diǎn)，危害的農(nóng)林作物品種達(dá)300多種，對(duì)園林樹(shù)木、經(jīng)濟(jì)林、行道樹(shù)、農(nóng)田防護(hù)林、農(nóng)村居民房前屋后零星樹(shù)木等造成嚴(yán)重的危害。湖北省內(nèi)于2016年在孝感市大悟縣、安陸市等地首次發(fā)現(xiàn)美國(guó)白蛾，對(duì)湖北省農(nóng)林業(yè)生產(chǎn)和生態(tài)安全構(gòu)成嚴(yán)重威脅[1]。

美國(guó)白蛾核型多角體病毒HycuNPV侵入蟲(chóng)體后在害蟲(chóng)細(xì)胞核內(nèi)發(fā)育增殖，產(chǎn)生病毒多角體，使害蟲(chóng)致死。蘇云金桿菌Bacillus thruingiensis（簡(jiǎn)稱 BT）是一種芽孢桿菌，主要活性成分是殺蟲(chóng)晶體蛋白，又稱δ-內(nèi)毒素，引起敗血癥。近年來(lái)，我國(guó)在美國(guó)白蛾生物防治中大力推廣應(yīng)用核型多角體病毒和蘇云金桿菌，均取得了一定的成效。但兩種生物制劑又有各自的缺陷：BT相對(duì)于病毒，具有殺蟲(chóng)譜寬，殺蟲(chóng)速度快，但易產(chǎn)生抗性;核型多角體病毒殺蟲(chóng)專一，效果好，但殺蟲(chóng)速度慢[2]。已有研究證明，病毒與BT混用具有增效作用[3]。病毒與BT復(fù)配防治美國(guó)白蛾的研究在湖北省還是空白，開(kāi)展HycuNPV與BT復(fù)配防治美國(guó)白蛾的試驗(yàn)，可為湖北省大面積實(shí)施美國(guó)白蛾生物防治提供技術(shù)支撐。

1試驗(yàn)材料與方法

1.1試驗(yàn)地概況

試驗(yàn)地設(shè)在孝感市大悟縣高店鄉(xiāng)忠河村徐家塝，試驗(yàn)地周圍水源充足，樹(shù)木長(zhǎng)勢(shì)旺盛。試驗(yàn)前調(diào)查被美國(guó)白蛾危害的楓楊Pterocarya stenoptera、桑樹(shù)Morus alba、山櫻花Prunus serrulata、三球懸鈴木Platanus orientalis等闊葉樹(shù)，有蟲(chóng)株率5%～10%，蟲(chóng)口密度5 00～1 500頭·株，以2～3齡幼蟲(chóng)為主，屬于輕中度危害。選擇楓楊林作為試驗(yàn)樣樹(shù)，樹(shù)齡3～4 a，樹(shù)高3～5 m，郁閉度0.6～0.7。

1.2材料

供試藥劑為美國(guó)白蛾核型多角體病毒（HycuNPV）（原液2.5×10 OBs·mL），由中國(guó)林業(yè)科學(xué)研究院森林生態(tài)環(huán)境與保護(hù)研究所提供;蘇云金桿菌（BT 16 000 IU·mg），由湖北康欣生物科技有限公司生產(chǎn)。施藥器械為手持式小型噴霧器。

1.3試驗(yàn)方法

1.3.1單一HycuNPV林間藥效試驗(yàn)

林間藥效試驗(yàn)分別于2021年6月2～16日美國(guó)白蛾第一代幼蟲(chóng)危害期、9月2～16日美國(guó)白蛾第三代幼蟲(chóng)危害期進(jìn)行。選取每2～3枝楓楊50 cm延長(zhǎng)枝作為1個(gè)樣本，每個(gè)樣本接入2～3齡幼蟲(chóng)100頭。選用單一HycuNPV（含量2.5×10 OBs·mL）兌水稀釋100倍，試驗(yàn)濃度為2.5×10 OBs·mL（該濃度由研制單位篩選確定），采取小型噴霧器噴霧，至葉面浸濕為止，重復(fù)3次，并以清水噴霧作為對(duì)照。在施藥前對(duì)樣本進(jìn)行編號(hào)，記錄施藥前活蟲(chóng)數(shù)，施藥后，將樣本用尼龍網(wǎng)罩住。施藥后5、7、10、13、15 d觀察記錄美國(guó)白蛾死亡數(shù)、活蟲(chóng)數(shù)。將結(jié)果進(jìn)行方差分析和新復(fù)極差法多重比較，確定最佳藥效。

1.3.2HycuNPV與BT復(fù)配防治試驗(yàn)

將BT （16 000 IU·mg）2.5 g 加入到HycuNPV原液（ 2.5×10 OBs·mL）10 mL中，再稀釋800倍，則噴灑時(shí)復(fù)配藥劑濃度HycuNPV 3.125×10? OBs·mL與BT 5×10 IU·mg，按照單一HycuNPV藥效試驗(yàn)相同的方法，接入2～3齡美國(guó)白蛾幼蟲(chóng)100頭，施藥后5、7、10、13、15 d觀察記錄美國(guó)白蛾死亡數(shù)、活蟲(chóng)數(shù)，分析防治效果，判斷BT對(duì)HycuNPV的增效作用。

蟲(chóng)口減退率（%）=處理前活蟲(chóng)數(shù)-處理后活蟲(chóng)數(shù)/處理前活蟲(chóng)數(shù)×100%;

校正死亡率（%）=處理蟲(chóng)口減退率-對(duì)照蟲(chóng)口減退率/1-對(duì)照蟲(chóng)口減退率×100%。

2結(jié)果與分析

2.1單一HycuNPV林間藥效分析

采用單一HycuNPV防治第一代美國(guó)白蛾幼蟲(chóng)施藥后7、10、13 d校正死亡率分別為28.71%、67.96%、99.88%，可見(jiàn)施藥10 d后幼蟲(chóng)死亡率達(dá)到65%以上，13 d后幼蟲(chóng)死亡率逐漸達(dá)到高峰期（表1），這與張文穎等試驗(yàn)結(jié)果一致[5]。用單一HycuNPV防治第三代美國(guó)白蛾幼蟲(chóng)施藥后7、10、13、15 d校正死亡率分別為17.3%、40.67%、80.33%、91.67%，可見(jiàn)施藥15 d后幼蟲(chóng)校正死亡率達(dá)高峰期（表2），但防治效果與第一代相比，施藥后7、10、13、15 d校正死亡率均較低。

2.2HycuNPV與BT復(fù)配林間藥效分析

從表1可知，HycuNPV與BT復(fù)配防治第一代美國(guó)白蛾幼蟲(chóng)施藥后7、10、13 d校正死亡率分別為66%、95.44%、99.88%。說(shuō)明HycuNPV與BT復(fù)配后致死速度加快，經(jīng)對(duì)復(fù)配的防效進(jìn)行方差分析（表3）后再進(jìn)行新復(fù)極差分析得出各處理間的防效差異性結(jié)果，除施藥后15 d，其他處理復(fù)配后致死速度在同一調(diào)查時(shí)間明顯快于單一的HycuNPV（表4）。

從表4可知，處理4即AB、處理5即AB、處理9即AB、處理10即AB之間差異不顯著，且都屬于藥效最好的區(qū)間。從經(jīng)濟(jì)角度分析，成本越低越好，HycuNPV與BT復(fù)配的成本遠(yuǎn)低于單一HycuNPV，從見(jiàn)效時(shí)間角度分析，死亡時(shí)間越短越好，因此，處理9即AB的組合為最佳選擇，即HycuNPV與BT復(fù)配防治美國(guó)白蛾第一代幼蟲(chóng)施藥后13 d，其平均校正死亡率為99.88%。

從表2可知，HycuNPV與BT復(fù)配防治第三代美國(guó)白蛾幼蟲(chóng)施藥后7、10、13、15 d校正死亡率分別為43.33%、76.67%、91.33%、96.00%。仍說(shuō)明HycuNPV與BT復(fù)配致死速度快，經(jīng)對(duì)復(fù)配的防效進(jìn)行方差分析（表5）后再進(jìn)行新復(fù)極差分析得出各處理間的防效差異性結(jié)果，除施藥后5 d和15 d，其他處理復(fù)配后致死速度在同一調(diào)查時(shí)間明顯快于單一的HycuNPV（表6）。但防治效果不如第一代。

從表6可知，處理5、處理9、處理10之間差異不顯著，且都屬于防效最好的區(qū)間，單一HycuNPV施藥后15 d校正死亡率為91.67%。從經(jīng)濟(jì)角度分析，成本越低越好，HycuNPV與BT復(fù)配的成本遠(yuǎn)低于單一HycuNPV，從見(jiàn)效時(shí)間角度分析，死亡時(shí)間越短越好，因此，處理9即AB的組合為最佳選擇，即HycuNPV與BT復(fù)配防治美國(guó)白蛾第三代幼蟲(chóng)施藥后13 d，其平均校正死亡率為91.33%。

3結(jié)論與討論

（1）病毒具有一定的自然傳染能力和持效作用，且具有高度的專一性，但殺蟲(chóng)速度慢[2]。本次林間藥效試驗(yàn)結(jié)果表明，HycuNPV與BT復(fù)配防治美國(guó)白蛾第一代幼蟲(chóng)施藥后7、10、13 d校正死亡率分別為66.00%、95.44%、99.88%。HycuNPV與BT復(fù)配防治美國(guó)白蛾第三代幼蟲(chóng)施藥后7、10、13、15 d校正死亡率分別為43.33%、76.67%、91.33%、96.00%。均說(shuō)明HycuNPV與BT復(fù)配致死速度快，明顯快于單一HycuNPV。防治第一代與第三代美國(guó)白蛾幼蟲(chóng)試驗(yàn)結(jié)果一致，但防治第一代效果更好。

（2）蘇云金桿菌能引起美國(guó)白蛾的敗血病，其癥狀是死亡幼蟲(chóng)身體癱軟，呈黑色。利用 BT防治美國(guó)白蛾，一般施藥后2～3 d 開(kāi)始死亡，5～6 d進(jìn)入死亡高峰。在美國(guó)白蛾2～4齡幼蟲(chóng)期，單獨(dú)采用蘇云金桿菌BT8 000 IU·mg-1懸浮劑稀釋2 000～3 000倍，5～7 d后防效較好，校正死亡率為83.13%～87.95%[4]。

（3）本次試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，第一代和第三代美國(guó)白蛾幼蟲(chóng)施藥后第7天死亡幼蟲(chóng)均表現(xiàn)為BT的感染病癥：體色發(fā)暗變黑，身體失水縮小。第13天幼蟲(chóng)死亡癥狀均為典型的病毒感染癥狀：幼蟲(chóng)身體腫脹，身體倒掛。說(shuō)明HycuNPV與BT復(fù)配，可增強(qiáng)彼此的毒力，克服病毒殺蟲(chóng)速度比較緩慢的缺陷。防治第一代與第三代美國(guó)白蛾幼蟲(chóng)試驗(yàn)結(jié)果一致，均說(shuō)明HycuNPV與BT復(fù)配致死速度快，明顯快于單一HycuNPV，但防治第一代藥效更好。

（4） HycuNPV和BT復(fù)配藥劑成本低。用HycuNPV（ 2.5×10 OBs·mL）與BT（16 000 IU·mg）復(fù)配， 即10 mL病毒液中加入2.5 g BT可防治林地666.7 m，每666.7 m林地需藥劑成本6.045元。而單一使用HycuNPV （2.5×10 OBs·mL）， 噴灑濃度為2.5×10 OBs·mL（與復(fù)配相比病毒濃度需要增加10倍），666.7 m林地需病毒100 mL， 每666.7 m需藥劑成本60元，幾乎是復(fù)配的10倍?？梢?jiàn)HycuNPV 和BT復(fù)配可顯著降低防治成本，林農(nóng)可以接受，易于推廣。

（5）包括HycuNPV在內(nèi)的生物防治技術(shù)對(duì)人畜無(wú)害，且很好地解決了化學(xué)防治帶來(lái)的抗藥性、環(huán)境污染等問(wèn)題，已成為有害生物防控的新型技術(shù)和趨勢(shì)，在實(shí)際應(yīng)用過(guò)程中，建議將BT和HycuNPV復(fù)配，充分發(fā)揮BT的速效性和HycuNPV的持效性，達(dá)到對(duì)害蟲(chóng)的高效、持久防治。

參考文獻(xiàn)

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[3]段彥麗，陶萬(wàn)強(qiáng)，曲良建，等.HcNPV和BT復(fù)配對(duì)美國(guó)白蛾的致病性[J].中國(guó)生物防治，2008，24（3）：223-238.

[4]閔水發(fā)，朱艾紅，曾文豪，等.2種蘇云金桿菌劑型防治美國(guó)白蛾效果分析[J].湖北林業(yè)科技，2019，48（6）：27-30.

[5]張文穎，閔水發(fā)，黃芳.美國(guó)白蛾核型多角體病毒防治美國(guó)白蛾林間藥效試驗(yàn)[J].湖北林業(yè)科技，2020，49（6）：23-25.

（責(zé)任編輯：唐嵐）