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蘆根化學成分及其抗氧化和α-葡萄糖苷酶抑制活性

2022-07-22 08:44高祉婧蘇艷芳
中成藥 2022年3期
關(guān)鍵詞:蘆根石油醚糖苷酶

秦 濤,高祉婧,蘇艷芳,張 杰

(天津大學藥物科學與技術(shù)學院,天津 300072)

蘆根為禾本科植物蘆葦屬蘆葦PhragmitescommunisTrin.的干燥根莖,是《中國藥典》收載的品種,為常用的藥食同源中藥,性寒味甘,具有清熱生津、除煩、止嘔、利尿之功效[1]。臨床主要用于治療發(fā)熱、支氣管炎、尿路感染、止嘔等,現(xiàn)代藥理學研究表明,蘆根具有抗氧化、降血糖、抗腫瘤、保肝等作用[2]。蘆根是中醫(yī)推薦用于治療新冠肺炎的疏風解毒膠囊的八味組成藥材之一[3]。迄今國內(nèi)外關(guān)于蘆根的文獻集中于其多糖,次生代謝產(chǎn)物的研究鮮有報道,為了進一步闡明蘆根的藥用物質(zhì)基礎(chǔ),對蘆根醇提物的石油醚、乙酸乙酯和正丁醇萃取部分的化學成分進行分析,共分離得到25個化合物,其中化合物2~11、13~17、20和23~25均為首次從該屬和該植物中分離得到,化合物1~4和7具有較強的抗氧化活性,化合物2~4、11和15具有α-葡萄糖苷酶抑制活性。

1 材料

Bruker Avance Ⅲ-400 MHz、600 MHz型核磁共振譜儀(德國Bruker公司);Agilent TOF LC/MS質(zhì)譜儀(美國Agilent公司);Autopol Ⅱ旋光儀(美國魯?shù)婪蚬?;GF254薄層色譜硅膠、柱色譜硅膠(青島海洋化工廠);聚酰胺(浙江臺州路橋四甲生化塑料廠);Sephadex LH-20(美國Amersham Pharmacia公司);ODS 柱色譜硅膠(日本Fuji Silysia公司);D101大孔吸附樹脂(天津市海光化工有限公司);ZORBAX SB-C18制備柱、ZORBAX SB-C18分析柱(美國安捷倫公司);Thermo Scientific Multiskan GO 酶標儀(中生華美科技有限公司)。色譜甲醇(天津市康科德科技有限公司);其他試劑均為分析純。

藥材蘆根2018年4月采集于河北省保定市白洋淀,由天津中醫(yī)藥大學李天祥教授鑒定為禾本科蘆葦屬蘆葦PhragmitescommunisTrin.的干燥根莖,標本保存在天津大學藥物科學與技術(shù)學院天然藥物化學實驗室。

2 提取與分離

干燥的蘆根27.1 kg,用95%乙醇冷浸2周,依次用95%乙醇、60%乙醇回流提取2次(每次2 h),得到浸膏4.1 kg,加適量蒸餾水混懸,然后依次用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇進行萃取,得石油醚萃取部分(84.0 g)、乙酸乙酯萃取部分(188.0 g)、正丁醇萃取部分(571.0 g)。

取石油醚萃取物(78.0 g),采用硅膠柱分離,石油醚-乙酸乙酯(100∶0~70∶30)梯度洗脫,得到6個部分(Fr.A1~Fr.A6)。將Fr.A2采用硅膠柱分離,以石油醚-丙酮(99∶1)作為洗脫劑,得到13個流分(Fr.a1~Fr.a13)。Fr.a7經(jīng)過硅膠柱分離,以石油醚-乙酸乙酯(98∶2)作為洗脫劑,共得120個流分(Fr.b1~Fr.b120)。經(jīng)過硅膠薄層色譜法檢識將Fr.b113~Fr.b119與Fr.a8合并,然后通過硅膠柱分離,以石油醚-二氯甲烷(60∶40)作為洗脫劑,再經(jīng)石油醚純化后,得到化合物22(7.0 mg)。

取乙酸乙酯萃取物(173.0 g),采用硅膠柱分離,以石油醚-乙酸乙酯-甲醇(100∶0∶0~0∶70∶30)梯度洗脫,得到8個部分(Fr.B1~Fr.B8)。Fr.B3經(jīng)過硅膠柱分離,以二氯甲烷-乙酸乙酯(100∶0~90∶10)梯度洗脫,得到5個流分(Fr.c1~Fr.c5)。Fr.c1經(jīng)甲醇重結(jié)晶后,得化合物20(3.0 mg)。Fr.c2通過硅膠柱分離,以石油醚-乙酸乙酯(86∶14)作為洗脫劑,再經(jīng)制備HPLC甲醇-水(30∶70)純化,得化合物21(5.0 mg)。Fr.c3經(jīng)二氯甲烷重結(jié)晶后,得化合物18(180.0 mg)。Fr.c4經(jīng)多次Sephadex LH-20柱(甲醇)分離,得化合物11(3.8 mg)、19(4.5 mg)。Fr.c5經(jīng)二氯甲烷重結(jié)晶后,得到化合物12(17.9 mg)。Fr.B4經(jīng)甲醇重結(jié)晶后,得化合物23(70.0 mg)。Fr.B5經(jīng)丙酮純化后,得化合物15(27.5 mg)。Fr.B6經(jīng)硅膠柱分離,以二氯甲烷-甲醇(90∶10)作為洗脫劑,得到4個流分(Fr.d1~d4)。Fr.d1經(jīng)過制備HPLC甲醇-水(12∶88)純化,得化合物16(1.5 mg)、17(2.8 mg)。Fr.d2經(jīng)多次Sephadex LH-20柱(甲醇)分離,得化合物9(2.3 mg)。Fr.d4經(jīng)多次Sephadex LH-20柱(甲醇)分離,得化合物8(50.0 mg)。Fr.B7通過硅膠柱分離,以二氯甲烷-甲醇(90∶10)作為洗脫劑,再經(jīng)過多次Sephadex LH-20柱(甲醇)分離,得化合物10(5.0 mg)。

將正丁醇部分分散于水中,過D101大孔吸附樹脂柱,依次用水、30%乙醇、95%乙醇進行洗脫,收集各洗脫部分,減壓回收,得到水洗脫部分(353.0 g)、30%乙醇洗脫部分(RPB30,54.0 g)、95%乙醇洗脫部分(RPB95,65.0 g)。

取RPB30進行硅膠柱分離,以二氯甲烷-甲醇(9∶1~6∶4)梯度洗脫,得到3個部分(Fr.C1~Fr.C3)。Fr.C1(7.8 g)進行硅膠柱分離,以乙酸乙酯-甲醇(95∶5)作為洗脫劑,得到46個流分(Fr.e1~Fr.e46),合并Fr.e20~Fr.e30(4.0 g)進行ODS反相柱色譜分離(甲醇-水10∶90~0∶100),得到13個流分(Fr.f1~Fr.f13),F(xiàn)r.f13(220.0 mg)經(jīng)制備HPLC甲醇-水(30∶70)純化,得化合物1(35.0 mg)、2(30.0 mg)。Fr.C2(6.5 g)進行Sephadex LH-20柱(甲醇)分離,得到9個流分(Fr.g1~Fr.g9),將Fr.g1~Fr.g3、Fr.e31~Fr.e46與Fr.f3~Fr.f8進行合并(3.3 g),進行ODS反相柱甲醇-水(10∶90~0∶100)分離,得到27個流分(Fr.h1~Fr.h27),F(xiàn)r.h26(30.0 mg)經(jīng)制備HPLC甲醇-水(22∶78)純化,得化合物3(7.0 mg)、4(3.5 mg)。Fr.h11(20.0 mg)經(jīng)制備HPLC甲醇-水(22∶78)純化,得化合物5(7.0 mg)、6(2.7 mg)。將Fr.g7~Fr.g9進行合并(890.0 mg),進行聚酰胺柱分離,以二氯甲烷-甲醇(93∶7)作為洗脫劑,得到55個流分Fr.i1~Fr.i55,合并Fr.i18~Fr.i24(240.0 mg),進行Sephadex LH-20柱(甲醇)分離,得到12個流分(Fr.j1~Fr.j12),合并Fr.j9~Fr.j12(30.0 mg),經(jīng)甲醇重結(jié)晶得化合物13(10.0 mg)。將Fr.i35~Fr.i55進行合并(100.0 mg),進行Sephadex LH-20柱(甲醇)分離,得到8個流分(Fr.k1~Fr.k8),合并Fr.k4~Fr.k8(20.0 mg),經(jīng)甲醇重結(jié)晶,然后進行制備HPLC甲醇-水(41∶59)純化,得化合物14(3.0 mg)。將Fr.g4~Fr.g6進行合并(1.2 g),進行硅膠柱分離,以二氯甲烷-甲醇(86∶14)作為洗脫劑,得34個流分(Fr.l1~Fr.l34),將Fr.l16~Fr.l19進行合樣(300.0 mg),進行硅膠柱分離,以乙酸乙酯-甲醇(90∶10)作為洗脫劑,得到20個流分(Fr.m1~Fr.m20),合并Fr.m7~Fr.m8,得化合物24(105.0 mg)。Fr.C3(2.0 g)進行硅膠柱分離,以乙酸乙酯-甲醇(99∶1)作為洗脫劑,得到63個流分 (Fr.n1~Fr.n63),合并Fr.n56~Fr.n63(130.0 mg),經(jīng)制備HPLC甲醇-水(40∶60)純化,得化合物7(17.0 mg)。合并Fr.n26~Fr.n54(1.0 g),經(jīng)丙酮重結(jié)晶,得化合物25(200.0 mg)。

3 結(jié)構(gòu)鑒定

化合物3:白色粉末,紫外吸收254 nm有吸收,365 nm沒有吸收,提示可能是木脂素苷類化合物,ESI-MSm/z:581.2[M-H]-。1H-NMR (600 MHz,CD3OD)δ:6.57 (1H,s,H-6),6.38 (2H,s,H-2′,6′),4.30 (1H,d,J=6.0 Hz,H-7′),4.24 (1H,d,J=7.9 Hz,H-1″),3.94 (1H,dd,J=10.0,5.8 Hz,H-9b),3.86 (1H,dd,J=11.9,1.8 Hz,H-6″b),3.85 (3H,s,5-OCH3),3.74 (6H,s,3′,5′-OCH3),3.65 (1H,dd,J=11.9,5.4 Hz,H-6″a),3.52~3.58 (3H,m,H-9a,H-9′),3.32 (3H,s,3-OCH3),3.24~3.36 (3H,m,H-3″,4″,5″),3.17 (1H,dd,J=8.4,7.5 Hz,H-2″),2.78 (1H,dd,J=15.3,4.4 Hz,H-7b),2.57 (1H,dd,J=15.1,11.6 Hz,H-7a),1.88 (1H,m,H-8′),1.84 (1H,m,H-8);13C-NMR (150 MHz,CD3OD)δ:149.0 (C-3′,5′),148.6 (C-5),147.7 (C-3),140.1 (C-4′),139.6 (C-4),134.6 (C-1′),130.1 (C-1),126.5 (C-2),107.7 (C-6),107.0 (C-2′,6′),104.6 (C-1″),78.1 (C-3″),78.0 (C-5″),75.2 (C-2″),74.9 (C-9),71.7 (C-4″),63.3 (C-9′),62.8 (C-6″),60.0 (3-OCH3),56.8 (3′,5′-OCH3),56.6 (5-OCH3),50.1 (C-8′),42.7 (C-7′),38.2 (C-8),34.0 (C-7)。以上數(shù)據(jù)與文獻[5]報道基本一致,故鑒定為(-)-南燭木樹脂酚9-O-β-D-葡萄吡喃糖苷。

化合物4:白色粉末,紫外吸收254 nm有吸收,365 nm沒有吸收,提示可能是木脂素苷類化合物,ESI-MSm/z:581.2[M-H]-。1H-NMR (600 MHz,CD3OD)δ:6.57 (1H,s,H-6),6.42 (2H,s,H-2′,6′),4.60 (1H,d,J=4.6 Hz,H-7′),4.31 (1H,d,J=7.8 Hz,H-1″),3.85 (3H,s,5-OCH3),3.81~3.89 (2H,m,H-6″b,H-9′b),3.74 (6H,s,3′,5′-OCH3),3.65 (1H,dd,J=12.0,5.7 Hz,H-6″a),3.60 (1H,dd,J=11.5,5.1 Hz,H-9b),3.52 (1H,dd,J=11.5,5.9 Hz,H-9a),3.48 (1H,dd,J=10.0,5.8 Hz,H-9′a),3.22 (3H,s,3-OCH3),3.21~3.39 (4H,m,H-2″,3″,4″,5″),2.96 (1H,dd,J=16.9,5.5 Hz,H-7b),2.71 (1H,dd,J=16.9,11.5 Hz,H-7a),2.13 (1H,m,H-8′),2.00 (1H,m,H-8);13C-NMR (150 MHz,CD3OD)δ:149.1 (C-5),148.5 (C-3′,5′),146.6 (C-3),138.6 (C-4),135.1 (C-4′),134.9 (C-1′),128.1 (C-1),127.2 (C-2),109.5 (C-2′,6′),107.6 (C-6),104.7 (C-1″),78.3 (C-3″),78.1 (C-5″),75.5 (C-2″),72.0 (C-4″),71.5 (C-9′),65.2 (C-9),63.3 (C-6″),60.0 (3-OCH3),57.0 (3′,5′-OCH3),56.5 (5-OCH3),42.1 (C-8′),41.9 (C-7′),35.3 (C-8),34.0 (C-7)。以上數(shù)據(jù)與文獻[6]報道基本一致,故鑒定為(-)-7′-表-南燭木樹脂酚9′-O-β-D-葡萄吡喃糖苷。

化合物8:淺黃色固體,ESI-MSm/z:417.1[M-H]-。1H-NMR (600 MHz,DMSO-d6)δ:8.20 (1H,d,J=8.9 Hz,H-6′),7.88 (1H,d,J=15.3 Hz,H-β),7.87 (2H,d,J=8.8 Hz,H-2,6),7.77 (1H,d,J=15.3 Hz,H-α),7.09 (2H,d,J=8.8 Hz,H-3,5),6.41 (1H,dd,J=8.9,2.3 Hz,H-5′),6.28 (1H,d,J=2.3 Hz,H-3′),5.37 (1H,d,J=4.9 Hz,2″-OH),5.28 (1H,d,J=7.3 Hz,H-1″),5.14 (1H,d,J=4.6 Hz,3″-OH),5.07 (1H,d,J=5.3 Hz,4″-OH),4.61 (1H,t,J=5.8 Hz,6″-OH),3.70 (1H,m,H-6″b),3.46 (1H,m,H-6″a),3.40 (1H,m,H-5″),3.28 (1H,m,H-3″),3.26 (1H,m,H-2″),3.17 (1H,m,H-4″);13C-NMR (150 MHz,DMSO-d6)δ:191.4 (C=O),166.1 (C-4′),165.8 (C-2′),159.4 (C-4),143.5 (C-β),133.0 (C-6′),130.7 (C-2,6),128.3 (C-1),119.1 (C-α),116.5 (C-3,5),113.0 (C-1′),108.2 (C-5′),103.0 (C-3′),99.9 (C-1″),77.1 (C-3″),76.6 (C-5″),73.2 (C-2″),69.7 (C-4″),60.7 (C-6″)。以上數(shù)據(jù)與文獻[9]報道基本一致,故鑒定為異甘草苷。

化合物11:黃色固體,ESI-MSm/z:337.1[M-H]-。1H-NMR (600 MHz,CD3OD)δ:7.98 (1H,d,J=15.6 Hz,H-β),7.94 (2H,d,J=8.8 Hz,H-2′,6′),7.56 (1H,d,J=15.6 Hz,H-α),7.50 (1H,s,H-6),6.89 (2H,d,J=8.8 Hz,H-3′,5′),6.47 (1H,s,H-3),6.26 (1H,dd,J=17.8,10.3 Hz,H-2″),5.00 (2H,m,H-3″),3.89 (3H,s,-OCH3),1.49 (6H,s,-CH3×2);13C-NMR (150 MHz,CD3OD)δ:191.9 (C=O),163.5 (C-4′),161.5 (C-4),160.6 (C-2),149.1 (C-2″),142.3 (C-β),132.1 (C-1′),131.6 (C-2′,6′),130.2 (C-6),128.5 (C-5),119.4 (C-α),116.4 (C-3′,5′),115.8 (C-1),110.7 (C-3″),100.9 (C-3),56.1 (OCH3),41.1 (C-1″),27.5 (C-4″,5″)。以上數(shù)據(jù)與文獻[12]報道基本一致,故鑒定為甘草查爾酮 A。

化合物12:淺黃色固體,在365 nm下呈暗紫色熒光,F(xiàn)eCl3乙醇顯藍色斑點,硫酸乙醇顯黃色斑點,根據(jù)以上結(jié)果初步判斷是黃酮類化合物,ESI-MSm/z:329.1[M-H]-。1H- NMR (600 MHz,DMSO-d6)δ:7.33 (2H,s,H-2′,6′),6.98 (1H,s,H-3),6.56 (1H,d,J=2.0 Hz,H-8),6.20 (1H,d,J=2.0 Hz,H-6),3.88 (6H,s,-OCH3×2)。以上數(shù)據(jù)與文獻[13]報道基本一致,故鑒定為小麥黃素。

化合物13:淺黃色粉末,ESI-MSm/z:637.2[M-H]-。1H-NMR (600 MHz,DMSO-d6)δ:12.50 (1H,s,12-OH),7.36 (2H,s,H-2′,6′),7.05 (1H,s,H-3),6.86 (1H,d,J=1.9 Hz,H-8),6.48 (1H,d,J=1.9 Hz,H-6),5.08 (1H,d,J=7.5 Hz,H-1″),4.54 (1H,brs,H-1?),3.89 (6H,s,3′,5′-OCH3),1.07 (3H,d,J=6.3 Hz,5?-CH3);13C-NMR (150 MHz,DMSO-d6)δ:182.3 (C-4),164.6 (C-2),163.2 (C-7),161.5 (C-9),157.2 (C-5),148.6 (C-3′,5′),140.8 (C-4′),120.4 (C-1′),105.7 (C-10),104.9 (C-2′,6′),104.1 (C-3),100.8 (C-1″),100.2 (C-1?),99.7 (C-6),95.6 (C-8),76.6 (C-3″),75.9 (C-5″),73.4 (C-4?),72.4 (C-2″),71.0 (C-2?),70.6 (C-3?),69.9 (C-4″),68.6 (C-5?),66.3 (C-6″),56.7 (3′,5′-OCH3),18.0 (C-6?)。以上數(shù)據(jù)與文獻[14]報道基本一致,故鑒定為苜蓿素-7-O-蕓香糖苷。

化合物14:淺黃色粉末,ESI-MSm/z:637.2[M-H]-。1H-NMR (600 MHz,DMSO-d6)δ:12.95 (1H,s,5-OH),7.34 (2H,s,H-2′,6′),7.01 (1H,s,H-3),6.87 (1H,brs,H-8),6.37 (1H,brs,H-6),5.20 (1H,d,J=7.5 Hz,H-1″),5.12 (1H,s,H-1?),3.89 (6H,s,3′,5′-OCH3),1.20 (3H,d,J=6.3 Hz,5?-CH3);13C-NMR (150 MHz,DMSO-d6)δ:182.3 (C-4),164.6 (C-2),163.2 (C-7),161.5 (C-9),157.2 (C-5),148.6 (C-3′,5′),140.5 (C-4′),120.5 (C-1′),105.7 (C-10),104.9 (C-2′,6′),104.1 (C-3),100.8 (C-1?),100.2 (C-1″),99.7 (C-6),95.6 (C-8),77.2 (C-5″),77.2 (C-2″),76.5 (C-3″),71.9 (C-4″),70.5 (C-4?),70.4 (C-3?),69.8 (C-2?),68.3 (C-5?),60.6 (C-6″),57.3 (3′,5′-OCH3),18.0 (C-6?)。以上數(shù)據(jù)與文獻[14]報道基本一致,故鑒定為苜蓿素-7-O-新橙皮糖苷。

化合物18:淺黃色結(jié)晶,ESI-MSm/z:163.0[M-H]-。1H-NMR (600 MHz,CD3OD)δ:7.60 (1H,d,J=15.9 Hz,H-7),7.44 (2H,d,J=8.6 Hz,H-2,6),6.81 (2H,d,J=8.6 Hz,H-3,5),6.28 (1H,d,J=15.9 Hz,H-8)。以上數(shù)據(jù)與文獻[19]報道基本一致,故鑒定為對羥基桂皮酸。

化合物19:白色結(jié)晶,ESI-MSm/z:193.1[M-H]-。1H-NMR (600 MHz,CD3OD)δ:7.60 (1H,d,J=15.9 Hz,H-7),7.18 (1H,d,J=1.9 Hz,H-2),7.06 (1H,dd,J=8.2,1.9 Hz,H-6),6.81 (1H,d,J=8.2 Hz,H-5),6.31 (1H,d,J=15.9 Hz,H-8),3.90 (3H,s,OCH3)。以上數(shù)據(jù)與文獻[19]報道基本一致,故鑒定為反式阿魏酸。

化合物20:淺粉色結(jié)晶,ESI-MSm/z:271.1[M-H]-。1H-NMR (600 MHz,CDCl3)δ:7.02 (2H,d,J=1.9 Hz,H-2,2′),7.00 (2H,dd,J=8.2,1.9 Hz,H-6,6′),6.90 (2H,d,J=8.2 Hz,H-5,5′),6.88 (2H,s,H-7,7′),5.62 (2H,s,OH),3.95 (6H,s,OCH3);13C-NMR (150 MHz,CDCl3)δ:146.9 (C-3,3′),145.5 (C-4,4′),130.5 (C-1,1′),126.7 (C-7,7′),120.3 (C-6,6′),114.7 (C-5,5′),108.3 (C-2,2′),56.1 (OCH3)。以上數(shù)據(jù)與文獻[20]報道基本一致,故鑒定為(E)-3,3′-二甲氧基-4,4′-二羥基二苯乙烯。

化合物21:淺黃色固體,ESI-MSm/z:181.1[M-H]-。1H-NMR (600 MHz,CDCl3)δ:9.82 (1H,s,CHO),7.16 (2H,s,Ar-H),6.03 (1H,s,OH),3.98 (6H,s,OCH3×2)。以上數(shù)據(jù)與文獻[21]報道基本一致,故鑒定為丁香醛。

化合物24:白色粉末,ESI-MSm/z:179.1[M-H]-。1H-NMR (600 MHz,CD3OD)δ:4.09 (1H,m,H-3),4.09 (1H,m,H-4),4.06 (1H,m,H-5′),4.06 (1H,m,H-6′a),3.92 (1H,m,H-4′),3.87 (1H,m,H-5),3.87 (1H,m,H-6a),3.82 (1H,m,H-3′),3.74 (1H,m,H-1′a),3.74 (1H,m,H-6′b),3.70 (1H,m,H-6b),3.68 (1H,m,H-1a),3.67 (1H,m,H-1′b),3.65 (1H,m,H-1b);13C-NMR (150 MHz,CD3OD)δ:103.2 (C-2),99.2 (C-2′),83.3 (C-5),77.9 (C-4),77.6 (C-3),71.8 (C-4′),71.2 (C-5′),69.5 (C-3′),66.0 (C-1′),64.6 (C-6′),64.5 (C-6),64.2 (C-1)。以上數(shù)據(jù)與文獻[24]報道基本一致,故鑒定為果糖。

化合物25:白色粉末,ESI-MSm/z:235.1[M-H]-。1H-NMR (600 MHz,D2O)δ:4.02 (1H,brs,H-3′),3.95 (2H,s,H-4′,5′),3.87 (1H,d,J=12.6 Hz,H-6′b),3.82 (2H,d,J=1.7 Hz,H-1′a,1′b),3.75 (1H,dd,J=12.6,1.7 Hz,H-6′a),3.55 (2H,m,H-1),1.59 (2H,m,H-2),1.40 (2H,m,H-3),0.94 (3H,t,H-4);13C-NMR (150 MHz,D2O)δ:100.5 (C-2′),69.7 (C-4′),69.2 (C-5′),68.4 (C-3′),63.9 (C-6′),61.4 (C-1′),60.8 (C-1),34.4 (C-2),18.8 (C-3),13.2 (C-4)。以上數(shù)據(jù)與文獻[25]報道基本一致,故鑒定為正丁基-O-β-D-吡喃果糖苷。

4 抗氧化活性篩選

參考文獻[26],采用DPPH自由基清除試驗,對分離得到的化合物進行抗氧化活性測定并計算半數(shù)抑制濃度(IC50)值,以維生素C為陽性對照。10個化合物顯示出一定程度的抗氧化活性,見表1,化合物1~4、7表現(xiàn)出較強的抗氧化活性,其IC50值低于陽性對照維生素C。

5 α-葡萄糖苷酶抑制活性試驗篩選

參考文獻[27],采用PNPG法對分離得到的化合物進行α-葡萄糖苷酶抑制活性測定并計算IC50

表1 抗氧化活性試驗IC50值Tab.1 IC50 values in antioxidant activities tests

值,以阿卡波糖為陽性對照。5個化合物顯示出一定程度的α-葡萄糖苷酶抑制活性,見表2,化合物2~4和11表現(xiàn)出較強的α-葡萄糖苷酶抑制活性,其中化合物11的活性最強,其IC50值為180.42 μmol/L。

表2 α-葡萄糖苷酶抑制活性試驗IC50值Tab.2 IC50 values in α-glucosidase inhibitory activities

6 討論

本實驗從蘆根(干)分離鑒定了25個化合物,主要包括木脂素苷類、黃酮類及苯丙素類等成分,其中化合物2~11、13~17、20和23~25均為首次從該植物、該屬植物中分離得到。體外生物活性測試結(jié)果表明,木脂素苷類、黃酮類、苯丙素類成分具有不同程度的抗氧化活性和α-葡萄糖苷酶抑制活性,其中木脂素苷類成分的含量高,種類多,也表現(xiàn)出強的抗氧化活性和α-葡萄糖苷酶抑制活性。本研究為闡明蘆根抗氧化和降血糖作用的物質(zhì)基礎(chǔ),尋找具有抗氧化活性和降血糖活性的化學成分以及蘆根的進一步研究開發(fā)提供了科學依據(jù)。

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