廖文靖，袁 河，趙志友

（1.湖南省檳榔加工與食用安全工程技術(shù)研究中心，湖南湘潭 411100；2.湖南賓之郎食品科技有限公司檢測(cè)中心，湖南湘潭 411100）

0 引言

檳榔屬于棕櫚科檳榔屬[1]，作為一種藥用植物，其主要生長(zhǎng)在南亞和東南亞地區(qū)，我國(guó)的臺(tái)灣和海南是主要的檳榔種植地區(qū)[2]。檳榔除了作為藥用，也能作為一種日常的食品，嚼食檳榔與古老的東方文化有著密切的聯(lián)系[3]。

檳榔中含有多酚、生物堿和多糖等多種生物活性成分[4]。檳榔多酚作為檳榔中的重要生物活性成分之一，其組成有多種，其中黃酮類(lèi)物質(zhì)為其主要成分[5]。有研究表明，檳榔多酚具有抗氧化、抗疲勞、抗菌抑菌、緩解炎癥及鎮(zhèn)痛等藥理作用[6]。目前，國(guó)內(nèi)外對(duì)于檳榔多酚的研究取得了一定的進(jìn)展，主要從檳榔多酚的化學(xué)組成與含量、提取與分離純化、藥理活性等方面對(duì)國(guó)內(nèi)外檳榔多酚的研究進(jìn)行總結(jié)，同時(shí)對(duì)檳榔多酚后續(xù)的研究與利用進(jìn)行展望。

1 檳榔多酚的化學(xué)組成與含量

1.1 檳榔多酚的化學(xué)組成

檳榔中的酚類(lèi)成分較多，包括兒茶素、花青素和簡(jiǎn)單酚酸等[7]。有研究表明，兒茶素類(lèi)組分在檳榔多酚中的含量最高，Sari L M等人[8]將檳榔用96%的乙醇提取后，采用高效液相色譜法對(duì)檳榔提取物中的酚類(lèi)化合物組分含量進(jìn)行分析，結(jié)果表明兒茶素和槲皮素是主要的酚類(lèi)化合物。同樣，有研究發(fā)現(xiàn)檳榔仁中兒茶素的含量最高，其次是單寧酸、表沒(méi)食子兒茶素和沒(méi)食子酸[9]。另外，唐敏敏等人[10]以75%的乙醇對(duì)海南檳榔仁中的成分進(jìn)行提取，分析得到乙酸乙酯萃取部位中多酚含量較高，并鑒定了76種類(lèi)黃酮化合物，其中兒茶素的含量也是最高的。基于檳榔多酚的分離鑒定方法，Yuan M等人[11]分離鑒定了檳榔中2種新的黃酮類(lèi)化合物，分別是Calquiquelignan M(1)和Calquiquelignan N(2)，以及9種已知的化合物。此外，檳榔多酚的組成會(huì)隨著檳榔成熟度的改變而發(fā)生變化。王明月等人[12]采用HPLC法對(duì)檳榔幼果和檳榔成熟果中的9種多酚類(lèi)物質(zhì)進(jìn)行分析，結(jié)果表明檳榔幼果中的多酚種類(lèi)與數(shù)量比檳榔成熟果中的低，但是成熟果果皮中的多酚種類(lèi)及數(shù)量較果仁低。

1.2 檳榔多酚的含量

檳榔多酚的含量與檳榔的產(chǎn)地、品種及部位密切相關(guān)，另外使用不同的溶劑提取的檳榔多酚含量也存在差異。張春江等人[13]分別測(cè)定了不同產(chǎn)地、不同品種及不同部位的檳榔總酚含量，可知不同產(chǎn)地、不同品種及不同部位檳榔中的總酚含量存在較大的差異。檳榔仁中的總酚含量要明顯高于檳榔果皮，經(jīng)加工后的檳榔咀嚼品中的總酚含量降低。

檳榔中總酚含量的比較見(jiàn)表1。

表1 檳榔中總酚含量的比較

同樣，Zhang WM等人[14]分析了檳榔不同部位的總酚與類(lèi)黃酮含量，結(jié)果表明檳榔仁中的總酚與類(lèi)黃酮含量要顯著高于檳榔殼與檳榔花。

檳榔不同部位中的總酚和類(lèi)黃酮含量見(jiàn)表2。

表2 檳榔不同部位中的總酚和類(lèi)黃酮含量

不同溶劑提取得到的總酚含量也存在著差異，韓林[15]分別以乙酸乙酯、70%的乙醇和水作為溶劑提取檳榔仁中的總酚，不同溶劑提取得到的總酚含量各不相同，70%的乙醇提取得到的總酚含量最高，其次為水提取得到的總酚，含量最低的是乙酸乙酯提取的總酚。

不同溶劑檳榔提取物中的得率和總酚含量見(jiàn)表3。

表3 不同溶劑檳榔提取物中的得率和總酚含量

2 檳榔多酚的提取與分離純化

2.1 檳榔多酚的提取

植物多酚是一類(lèi)具有苯環(huán)并結(jié)合羥基的酚類(lèi)化合物，作為植物體內(nèi)的重要活性成分，通常與其他物質(zhì)（蛋白質(zhì)、糖類(lèi)、生物堿）以混合形式存在，檳榔多酚也是如此。檳榔多酚的提取方法有多種，使用較多的主要為有機(jī)溶劑萃取法和超聲波輔助提取法。提取的檳榔多酚含量因產(chǎn)地、品種、部位及提取溶劑的不同而存在明顯差異，提取后的檳榔多酚，以福林酚法和酒石酸法來(lái)測(cè)定其含量[16-17]。邢建華等人[16]基于福林酚法對(duì)檳榔提取物中的總酚含量測(cè)定條件進(jìn)行了優(yōu)化，測(cè)定條件為福林酚試液5 mL，7.5%碳酸鈉4 mL，反應(yīng)時(shí)間60 min，于波長(zhǎng)765 nm處測(cè)定吸光度。而宋晶燕[18]則是采用酒石酸亞鐵法測(cè)定檳榔提取物中的總酚含量，這2種方法在測(cè)定檳榔中總酚含量均有應(yīng)用，但福林酚法應(yīng)用更多。

2.1.1 有機(jī)溶劑萃取法

有機(jī)溶劑萃取法是提取植物中多酚最常見(jiàn)的一種方法，由于多酚含有羥基，依據(jù)相似相溶的原理，其與水和有機(jī)溶劑互溶。因此，檳榔多酚的提取通常是以水、甲醇或乙醇等作為提取溶劑，目前研究中更多的是以水和有機(jī)溶劑混合提取。該方法的優(yōu)點(diǎn)是提取工藝簡(jiǎn)單、不需要太高成本，缺點(diǎn)是提取耗費(fèi)的時(shí)間較長(zhǎng)。

檳榔多酚的提取效果受到提取時(shí)間、溫度、溶劑種類(lèi)和料液比等因素的影響[19]。

綜合各方面因素如提取效果、難易程度及成本等，對(duì)于用有機(jī)溶劑萃取法提取檳榔多酚的適合工藝有干燥的中藥飲片檳榔粉末以1∶30的料液比加入到80%的乙醇溶液中，溫度65℃，時(shí)間120 min，檳榔多酚提取率33.25%[18]；烘干的檳榔仁粉末以1∶38的料液比加入到50%的丙酮溶液中，浸提溫度為68℃，浸提的時(shí)間為48 min，其多酚提取得率可達(dá)到40.43%[20]。

2.1.2 超聲波輔助提取法

超聲波輔助提取法是利用超聲波的空化作用促進(jìn)細(xì)胞的破裂，從而有利于目標(biāo)成分的溶出，該方法通常與其他提取方式聯(lián)合使用。超聲波輔助提取法相較于有機(jī)溶劑萃取法，具有省時(shí)、效率高等特點(diǎn)，并且能夠減少溫度過(guò)高對(duì)于酚類(lèi)物質(zhì)的破壞，適合中草藥及多酚、多糖等提取，缺點(diǎn)是提取過(guò)程中產(chǎn)生較大噪音。

宋菲等人[21]利用超聲波輔助提取法提取檳榔殼和檳榔仁中的多酚，提取工藝為干燥的檳榔仁和檳榔殼粉末按料液比1∶10投入到75%的乙醇溶液中，超聲波頻率為40 kHz，溫度為60℃，時(shí)間30 min，提取4次，檳榔仁和檳榔殼的多酚提取率分別為49.06%和16.74%。陳健等人[22]基于有機(jī)溶劑萃取與超聲波協(xié)同輔助的檳榔原花青素提取方法，利用響應(yīng)面分析法進(jìn)行優(yōu)化，確定了最佳工藝條件為檳榔干粉末以1∶40的料液比投入到81%的丙酮水溶液中，超聲功率600 W，超聲時(shí)間16 min，原花青素提取率約3.41%。同樣，在檳榔花多酚的提取中，薛莉君等人[23]也采用了超聲萃取的方法對(duì)檳榔雄花蕾中的多酚進(jìn)行提取。

2.2 檳榔多酚的分離純化

檳榔多酚經(jīng)提取后，得到的粗提物中還含有其他雜質(zhì)，如多糖和檳榔堿等。因此，為了更好地發(fā)揮其功效，需要將提取后的多酚進(jìn)一步分離純化。

2.2.1 大孔樹(shù)脂吸附法

大孔樹(shù)脂是一類(lèi)高分子聚合物，與有機(jī)溶劑、酸和堿不相溶，具有穩(wěn)定性高、吸附容量大、吸附速度快等特點(diǎn)，還具有使用周期長(zhǎng)的優(yōu)點(diǎn)，在天然產(chǎn)物的分離和純化中廣泛使用[24]。宋菲等人[21]用S-8型大孔樹(shù)脂對(duì)檳榔殼和檳榔仁多酚粗提物進(jìn)行分離純化，檳榔仁和檳榔殼的多酚純度分別提高了1.81倍，9.08倍。吳秋生等人[25]研究表明適合分離純化檳榔花多酚的樹(shù)脂為AB-8型大孔樹(shù)脂，分離純化后的檳榔花多酚純度大約是純化前的12倍。

2.2.2 硅膠柱層析法

硅膠柱層析法是利用不同物質(zhì)在硅膠上的吸附力有差異而使物質(zhì)分離的一種方法，該方法具有操作簡(jiǎn)單和經(jīng)濟(jì)實(shí)惠等特點(diǎn)[26]。韓林[15]利用硅膠柱層析法將經(jīng)有機(jī)溶劑提取后的檳榔仁粗提物進(jìn)行分離純化，使用甲醇-氯仿溶液進(jìn)行洗脫，最終得到了5個(gè)組分，其中表兒茶素是純度較高的一種化合物。張興等人[27]用工業(yè)乙醇浸提檳榔鮮果，之后依次用3種不同的有機(jī)溶劑進(jìn)行萃取，再將濃縮后得到的浸膏通過(guò)硅膠柱層析后進(jìn)行梯度洗脫，最終得到9個(gè)酚類(lèi)成分。

3 檳榔多酚的藥理活性

檳榔多酚是檳榔中的重要生理活性成分，研究表明，檳榔多酚具有多種生物活性，如抗氧化、抗菌、抗衰老、抗疲勞和抗過(guò)敏等，近年來(lái)還有研究發(fā)現(xiàn)檳榔多酚具有調(diào)節(jié)腸道菌群等健康功效。

3.1 抗氧化

檳榔所具有的抗氧化作用與其具有的多酚含量密切相關(guān)，且多酚的含量越高，抗氧化作用也逐漸增強(qiáng)[28]。多酚通過(guò)滅活脂質(zhì)自由基或防止氫過(guò)氧化物分解成自由基來(lái)發(fā)揮抗氧化活性[29]。研究表明，在檳榔的不同部位抗氧化活性不同，檳榔仁中的多酚含量要高于檳榔殼和檳榔花，由檳榔仁提取的多酚其抗氧化活性也要強(qiáng)于檳榔殼和檳榔花，因此檳榔仁提取多酚具有高的抗氧化能力可以歸結(jié)為其較高的多酚含量[30]。另外，在具體的抗氧化成分研究中，Sari L M等人[8]通過(guò)高效液相色譜法（HPLC）分離純化檳榔的乙醇提取物，研究表明檳榔的抗氧化活性可能與兒茶素和槲皮素有關(guān)。Huang P L等人[5]研究認(rèn)為，檳榔中的原花青素也具有抗氧化的能力，并且其抗氧化能力與聚合度密切相關(guān)。除此之外，在動(dòng)物試驗(yàn)的研究中發(fā)現(xiàn)，檳榔多酚還能通過(guò)增強(qiáng)抗氧化能力保護(hù)急性高原缺氧大鼠的重要器官[31]。同樣，檳榔多酚對(duì)于高原低氧所引起的高原肺水腫也具有預(yù)防保護(hù)作用[32]。

3.2 抗菌

檳榔多酚有抑制細(xì)菌生長(zhǎng)的作用。在體內(nèi)試驗(yàn)中，Li S等人[33]研究發(fā)現(xiàn)，以50 mg/kg/d的檳榔甲醇提取物干預(yù)7 d后，與對(duì)照組相比，接種金黃色葡萄球菌小鼠的存活率要顯著提高（存活率70%vs.10%）。同樣，在體外試驗(yàn)中，張興等人[27]研究表明，檳榔多酚能夠抑制金黃色葡萄球菌的活性。結(jié)果進(jìn)一步說(shuō)明檳榔多酚具有抗細(xì)菌活性。

Jam N等人[34]使用瓊脂圓盤(pán)擴(kuò)散技術(shù)測(cè)定了檳榔果提取物（分別以甲醇、乙醇和水作為提取溶劑）的抗菌活性，結(jié)果表明檳榔甲醇提取物對(duì)大腸桿菌具有較強(qiáng)的抗菌活性，最低抑制濃度（MIC）為1.56 mg/mL。另外，檳榔多酚還能抑制結(jié)核分枝桿菌的活性[35]。

3.3 抗衰老、抗疲勞

檳榔多酚具有的抗衰老活性主要體現(xiàn)在其具有抑制彈性蛋白酶的作用。Lee K K等人[36]研究發(fā)現(xiàn)，檳榔多酚可通過(guò)抑制彈性蛋白酶活性，從而保護(hù)結(jié)締組織蛋白，對(duì)皮膚組織的老化和炎癥有明顯的抑制作用。檳榔多酚還具有抗疲勞的作用。祁靜[37]研究了檳榔多酚的抗疲勞活性，以不同劑量的檳榔多酚灌胃小鼠，測(cè)定了小鼠血清中尿素氮和乳酸含量，并分析肝糖原與肌糖原含量，結(jié)果表明檳榔多酚能夠有效緩解小鼠因運(yùn)動(dòng)產(chǎn)生的疲勞。

3.4 抗過(guò)敏

檳榔多酚還具有抗過(guò)敏的作用，Wang C C等人[38]研究發(fā)現(xiàn)，以富含多酚的檳榔核提取物通過(guò)飲用水的方式干預(yù)小鼠可以減少卵清蛋白引起的過(guò)敏反應(yīng)（包括腹瀉和十二指腸肥大細(xì)胞的浸潤(rùn)和脫粒），且多酚干預(yù)后減少了十二指腸中白細(xì)胞介素4（IL-4）和血清卵清蛋白特異性IgE水平。

3.5 其他

檳榔多酚在降血脂和抗炎癥等方面也具有較好的功效。在降血脂方面，Park Y B等人[39]研究發(fā)現(xiàn)，以0.5%的檳榔提取物干預(yù)膽固醇飲食（1%）大鼠可顯著降低血漿膽固醇水平，同時(shí)顯著降低了小腸胰膽固醇酯酶的活性。同樣，Byun S J和Jeon S M等人[40-41]研究表明，檳榔多酚類(lèi)物質(zhì)也能明顯降低血脂水平以及甘油三酯（TG）的吸收。此外，在抗炎癥方面，檳榔多酚能夠抑制炎癥因子的分泌，具有抗炎活性，發(fā)揮抗炎活性的物質(zhì)可能主要為兒茶素和表兒茶素等[10]。

檳榔多酚在調(diào)節(jié)腸道菌群方面也有相關(guān)報(bào)道。國(guó)內(nèi)最新的一項(xiàng)研究表明，檳榔仁多酚還可通過(guò)調(diào)節(jié)腸道菌群和免疫系統(tǒng)改善雌激素缺乏大鼠的骨質(zhì)疏松癥[28]。另外，有研究報(bào)道了檳榔與其他物質(zhì)具有協(xié)同作用，Zhou MX等人[42]研究了茯磚茶添加不同含量的檳榔對(duì)高脂飲食小鼠腸道菌群的影響，結(jié)果表明茯磚茶添加檳榔能夠有效降低高脂飲食小鼠的體重及血脂水平，并能調(diào)節(jié)腸道菌群組成。

4 結(jié)語(yǔ)

檳榔作為我國(guó)的一種重要食品，其含有的多酚具有抗氧化、抗菌、抗衰老和抗過(guò)敏等藥理活性。雖然檳榔多酚的應(yīng)用前景廣闊，但是目前對(duì)于檳榔多酚的研究應(yīng)用還處在初級(jí)階段。一方面，檳榔多酚的化學(xué)成分仍不明確，尤其是不同產(chǎn)地及不同品種間酚類(lèi)物質(zhì)差異較大，因此有必要進(jìn)一步結(jié)合質(zhì)譜等技術(shù)對(duì)不同產(chǎn)地、不同品種間檳榔的多酚類(lèi)物質(zhì)做進(jìn)一步鑒定，為檳榔優(yōu)質(zhì)品種篩選作參考；另一方面，檳榔多酚類(lèi)物質(zhì)的藥理活性還有待進(jìn)一步挖掘，對(duì)于具體藥理活性的發(fā)揮起關(guān)鍵作用的組分研究較少。此外，檳榔多酚類(lèi)物質(zhì)的利用體系還不夠完善，目前很少有檳榔多酚相關(guān)的產(chǎn)品，對(duì)于檳榔多酚產(chǎn)品從理論到應(yīng)用方面有待進(jìn)一步加強(qiáng)。

綜合分析，目前對(duì)檳榔多酚的研究較少，并且對(duì)檳榔多酚相關(guān)產(chǎn)品的開(kāi)發(fā)力度不夠，所以在后續(xù)的研究中，一是要進(jìn)一步加強(qiáng)對(duì)檳榔多酚類(lèi)物質(zhì)的分離純化及鑒定，明確發(fā)揮健康功效的具體成分及作用機(jī)制；二是要加大開(kāi)展檳榔多酚相關(guān)產(chǎn)品的研究及利用，拓展檳榔多酚類(lèi)物質(zhì)的用途，完善檳榔多酚利用體系，從而提高檳榔的綜合利用程度。