彭思佳，虞任瑩，童秀子，李雪瑞，李 宏，于麗娟, ，羅海波,

（1.南京師范大學(xué)食品與制藥工程學(xué)院，江蘇南京 210023；2.云南省農(nóng)業(yè)科學(xué)院農(nóng)產(chǎn)品加工研究所，云南昆明 650221）

水蜜桃（Prunus persica）屬于典型的呼吸越變型果實(shí)，采收期正值7～9 月份高溫多雨季節(jié)，使得采后表現(xiàn)出旺盛的呼吸作用和快速軟化等特點(diǎn)，加之軟化后更易受自身攜帶及貯運(yùn)過程中病原菌的影響而腐爛變質(zhì)，因此極難貯藏，常溫下僅3～5 d 即喪失商品價值和食用價值[1-2]。

目前，國內(nèi)外已有采用冷藏、熱水處理、氣調(diào)、1-甲基環(huán)丙烯（1-MCP）、鈣處理、涂膜和輻照等技術(shù)對水蜜桃進(jìn)行貯藏保鮮的報道，并取得了一定的效果[3-5]。在這些保鮮技術(shù)中，自發(fā)氣調(diào)包裝具有操作簡便、成本低、安全性高且適用范圍廣等優(yōu)點(diǎn)，已成為果蔬中短期貯藏和銷售過程中最具發(fā)展?jié)摿Φ谋ｕr技術(shù)之一[6]。然而，傳統(tǒng)自發(fā)氣調(diào)包裝大多采用透氣透水性能較差的聚乙烯（PE）、聚氯乙烯（PVC）或聚偏二氯乙烯（PVDC）保鮮膜等進(jìn)行包裝，極易導(dǎo)致包裝內(nèi)形成不良的氣體環(huán)境和水蒸氣凝結(jié)，常引起果蔬生理性品質(zhì)劣變，甚至加速厭氧微生物生長而腐爛。

微孔膜包裝作為一種新興的低成本環(huán)保型自發(fā)氣調(diào)保鮮技術(shù)，可通過微孔改善傳統(tǒng)包裝膜的滲透性，有效地調(diào)節(jié)包裝內(nèi)O2和CO2的體積比及相對濕度，避免傳統(tǒng)自發(fā)氣調(diào)包裝易發(fā)生低氧呼吸及高CO2損害等缺陷，從而達(dá)到動態(tài)自發(fā)氣調(diào)的保鮮效果[7]。目前，已有研究人員采用微孔膜包裝對獼猴桃[8-9]、甜櫻桃和草莓[10]的保鮮效果進(jìn)行了探索，發(fā)現(xiàn)微孔膜包裝顯著抑制了果實(shí)生理生化代謝，維持果實(shí)較好的品質(zhì)，延長了保鮮期。激光打孔具有準(zhǔn)確、清潔和無污染等優(yōu)點(diǎn)，且處理后材料的整體性能受影響較小，一定數(shù)量的微米級小圓孔，可根據(jù)不同果蔬的呼吸速率調(diào)整包裝膜的透氣率，比普通微孔膜具有更好的選擇性透氣、透水性能[7]。然而，微孔膜包裝受果蔬種類、膜厚度、孔徑、單位面積孔數(shù)量等因素的影響較大，針對不同果蔬的微孔膜包裝參數(shù)還需進(jìn)一步研究。

采后1-MCP 處理可通過與乙烯受體特異性結(jié)合而阻斷乙烯的催熟作用，目前已廣泛應(yīng)用于果蔬的貯藏保鮮。1-MCP 處理對香蕉、蘋果、桃、獼猴桃、李、梨、甜柿、番石榴、番茄、青椒和油菜等均具有不同程度的保鮮效果[11]。然而，1-MCP 單獨(dú)處理對微生物生長影響不大，且果蔬貯藏過程中會有新的乙烯受體合成，因而其保鮮效果仍然有限，需要與其他技術(shù)聯(lián)用以提高協(xié)同增效作用[12]。近年來研究發(fā)現(xiàn)，1-MCP 處理結(jié)合微孔膜包裝具有協(xié)同效應(yīng)，可發(fā)揮更好的保鮮效果[7]。俞靜芬等[9]采用1-MCP 結(jié)合微孔保鮮膜對“紅陽”獼猴桃進(jìn)行處理，能在一定程度上延緩獼猴桃的衰老，降低呼吸高峰值，延長獼猴桃果實(shí)的貨架期。蔡佳昂等[13]研究表明，1-MCP 與微孔氣調(diào)包裝復(fù)合技術(shù)能夠減緩苕尖的腐爛黃化，維持較好的營養(yǎng)品質(zhì)，使其貯藏期延長至18 d。

本研究以霞輝8 號水蜜桃為試驗(yàn)材料，在前期充分考慮水蜜桃呼吸強(qiáng)度及膜透水透氣性能的基礎(chǔ)上制作激光微孔膜保鮮袋，研究1-MCP 處理結(jié)合激光微孔膜包裝對水蜜桃果實(shí)品質(zhì)及生理生化的影響，探討其協(xié)同保鮮效果，為1-MCP 結(jié)合激光微孔膜包裝的實(shí)際應(yīng)用提供理論參考。

1 材料與方法

1.1 材料與儀器

霞輝8 號水蜜桃 于2021 年7 月下旬（26～34 ℃）采自江蘇省常州市溧陽市北山桃園，挑選果型大小、色澤、成熟度基本一致，無病蟲害、無機(jī)械傷的桃果實(shí)，置5 ℃下預(yù)冷24 h；激光微孔保鮮膜 由北京丹普客包裝技術(shù)有限公司提供，聚烯烴+30%馬鈴薯淀粉材質(zhì)，孔徑30 μm，厚度10 μm，孔數(shù)量為80000/m2，水蒸氣透過率1 L/m2d，CO2透過率8 L/m2d，O2透過率1.6 L/m2d；1-MCP 咸陽西秦生物科技有限公司；其他常用化學(xué)試劑均為國產(chǎn)分析純。

SYS-GH 30A 呼吸測定儀 遼寧賽亞斯科技有限公司；CR-10Plus 色差計 Konica Minolta 公司；GY-1 果實(shí)硬度計 牡丹江市機(jī)械研究所；AWAJ 阿貝折光儀 上海葉拓儀器儀表有限公司；ZHTE-48 多樣品組織研磨儀 南京卓恒科學(xué)儀器有限公司；Pico-21 高速冷凍離心機(jī) Thermo Fisher 公司；UV-1100 紫外可見分光光度計 上海美譜達(dá)儀器有限公司。

1.2 實(shí)驗(yàn)方法

1.2.1 樣品處理 將挑選好的桃果實(shí)隨機(jī)分為三組，每組105 個。第一組置聚苯乙烯密封箱中用2 μL/L 1-MCP 在5 ℃下熏蒸24 h，熏蒸結(jié)束后將桃放入塑料筐，每筐35 個果實(shí)，用激光微孔膜包裝（1-MCP+LMF）。第二組在同樣條件下不經(jīng)熏蒸處理僅用激光微孔膜（LMF）包裝。第三組在同樣條件下不經(jīng)熏蒸處理且采用紙箱包裝作為對照（Control）。將上述樣品置5 ℃貯藏，每7 d 取15 個桃果實(shí)進(jìn)行相關(guān)指標(biāo)測定。

1.2.2 失重率和硬度的測定 失重率采用稱重法，各組每7 d 取3 個桃果實(shí)進(jìn)行稱重，計算公式如下：

1.2.3 可溶性固形物和抗壞血酸含量的測定 可溶性固形物含量用折光儀測定，結(jié)果以百分比（%）表示?？箟难岷繙y定采用2,6-二氯靛酚法[14]。將桃樣品與2%草酸充分研磨勻漿后離心（10000×g，10 min）。吸取2.0 mL 上清液于50 mL 的錐形瓶中，加1%草酸溶液18.0 mL 振蕩混勻，用標(biāo)準(zhǔn)抗壞血酸標(biāo)定過的2,6-二氯酚靛酚溶液滴定至粉紅色，并以在30 s 內(nèi)不褪色為滴定終點(diǎn)，記錄2,6-二氯酚靛酚溶液的用量，結(jié)果表示為mg/kg FW。

1.2.4 呼吸強(qiáng)度的測定 呼吸強(qiáng)度用呼吸測定儀測定，結(jié)果表示為mg CO2/kg·h。

1.2.5 過氧化氫含量的測定 過氧化氫（H2O2）含量參照Gouda 等[15]的方法并進(jìn)行了較小程度的修改。將硫酸鈦（5%）和200 μL 的濃氨水溶液加入到1 mL 的提取物中，并在3000×g 下離心10 min。沉淀物用丙酮反復(fù)洗滌并離心。將殘余物溶于5 mL濃硫酸（2 mol/L）中，在415 nm 處測量吸光度。結(jié)果以μmol/kg FW 表示。計算公式如下：

1.2.6 超氧化物歧化酶、過氧化氫酶和抗壞血酸氧化酶活力的測定 超氧化物歧化酶（superoxide dismutase，SOD）活性采用氮藍(lán)四唑（NBT）光還原法測定[14]。稱取2.0 g 樣品與6 mL 4 ℃下預(yù)冷的pH7.8、50 mmol/L 磷酸緩沖溶液（含1 mmol/L DTT、1%PVP）研磨勻漿后離心（10000×g，30 min，4 ℃）。反應(yīng)管中分別依次加入0.2 mL 上清、pH7.8，50 mmol/L的磷酸緩沖溶液4.2 mL、13 mmol/L Met 0.4 mL，0.1 mmol/L EDTA 0.4 mL，0.075 mmol/L NBT 0.4 mL 和0.002 mmol/L 核黃素溶液0.4 mL，不加酶液的反應(yīng)管作為最大光還原管，不光照為對照管。將各反應(yīng)管放入光照培養(yǎng)箱中，4000 lx 光強(qiáng)度下反應(yīng)30 min，光照結(jié)束后立即避光測定A560值，以抑制NBT 光還原50%為一個酶活單位（U），結(jié)果表示為U/g FW。

過氧化氫酶（catalase，CAT）的活性參照曹建康等[14]的方法進(jìn)行測定，并稍作調(diào)整。反應(yīng)在pH7.8的磷酸鹽緩沖液、0.2%的H2O2和1 mL 的粗提液中進(jìn)行，每隔30 s 記錄吸光值A(chǔ)240的變化，連續(xù)記錄3～5 min。以每分鐘A240變化0.001 為一個酶活單位（U），結(jié)果表示為U/g FW。

抗壞血酸氧化酶（ascorbate peroxidase，APX）活性的測定參照曹建康等[14]的方法進(jìn)行，并稍作修改。將2 g 樣品與5 mL 含有0.1 mmol/L EDTA、1 mmol/L抗壞血酸和1%（w/v）聚乙烯吡咯烷酮的磷酸鈉緩沖液（pH7.8）混勻離心（10000×g，20 min，4 ℃）。離心后，將1 mL 粗提物與磷酸二氫鉀緩沖液（pH7.0）2.5 mL、0.1 mmol/L EDTA 0.1 mL、5 mmol/L 抗壞血酸溶液0.1 mL 和1.5 mmol/L H2O22.0 mL 混合。每15 s 記錄A290的值，連續(xù)記錄1～2 min。以每分鐘A290變化0.01 為一個酶活單位（U），結(jié)果表示為U/g FW。

1.2.7 原果膠和可溶性果膠含量的測定 原果膠和可溶性果膠含量均采用咔唑比色法[14]，并稍作修改。通過乙醇沸水浴去除樣品中的糖分和其他物質(zhì)，離心后取沉淀。隨后將30 mL 去離子水加入沉淀物中，于50 °C 下振搖35 min，溶解果膠后，通過離心得到上清液，用于可溶性果膠的測量；提取原果膠時，將沉淀中加入25 mL 0.5 mol/L 硫酸溶液，沸水浴1.5 h，用于原果膠的測量。將1 mL 原果膠或可溶性果膠提取物與6 mL 濃硫酸的反應(yīng)混合物在沸水浴中加熱30 min，冷卻后加入0.2 mL 1.5 g/L 咔唑-乙醇，在黑暗中培養(yǎng)30 min 后，測定A530值。

結(jié)果以生成半乳糖醛酸的質(zhì)量分?jǐn)?shù)（%）表示。計算公式如下：

1.2.8 多聚半乳糖醛酸酶和β-葡萄糖苷酶活力的測定 多聚半乳糖醛酸酶（polygalacturonase，PG）和β-葡萄糖苷酶活力均參照曹健康等[14]的方法進(jìn)行。將樣品與乙醇混合離心，沉淀中加入5 mL 預(yù)冷的乙酸鈉緩沖液，置4 ℃下孵育20 min，離心后取上清液。PG 的反應(yīng)混合物包含1.0 mL 醋酸鈉緩沖液（pH5.5），0.5 mL 聚半乳糖醛酸溶液和1.0 mL 上清液；β-葡萄糖苷酶的反應(yīng)混合物含有1.5 mL 的水楊酸溶液和1.0 mL 的上清液。在37 ℃的恒溫水浴中保持1 h后，測定A560值。根據(jù)葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)曲線計算出酶促反應(yīng)生成的葡萄糖的量，酶活性以每小時每克桃組織樣品（鮮重）在37 ℃催化底物形成葡萄糖的質(zhì)量表示，即mg/kg·h。

1.3 數(shù)據(jù)處理

每組實(shí)驗(yàn)均重復(fù)3 次，結(jié)果表示為平均值±標(biāo)準(zhǔn)差。采用SPSS 19.0 軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，采用單因素方差分析進(jìn)行顯著性差異分析，P＜0.05 為差異顯著。采用Excel 2016 軟件作圖。

2 結(jié)果與分析

2.1 1-MCP 處理結(jié)合激光微孔膜包裝對采后水蜜桃品質(zhì)的影響

2.1.1 1-MCP 處理結(jié)合激光微孔膜包裝對采后水蜜桃失重率的影響 失重率是判斷果實(shí)新鮮度和商品價值的重要指標(biāo)之一。如圖1 所示，隨著貯藏時間的延長，對照組失重率快速上升，這可能是受蒸騰作用的影響，果實(shí)含水量減少所致。LMF 處理組和1-MCP+LMF 處理組失重率在整個貯藏期間均顯著（P＜0.05）低于對照組，兩處理組之間無顯著（P＞0.05）差異，這可能與激光微孔膜包裝能有效抑制桃果實(shí)蒸騰失水有關(guān)，但1-MCP 對失重率的影響較小。

圖1 1-MCP 結(jié)合激光微孔膜包裝處理對水蜜桃失重率的影響Fig.1 Effect of 1-MCP treatment combined with laser microporous film packaging on weight loss of honey peach

2.1.2 1-MCP 處理結(jié)合激光微孔膜包裝對采后水蜜桃硬度的影響 硬度是評價桃果實(shí)品質(zhì)的另一重要指標(biāo)。在貯藏過程中，水蜜桃硬度呈下降趨勢（圖2），采后7 d 內(nèi)桃果實(shí)的硬度變化較小，貯藏7～14 d 內(nèi)果實(shí)硬度呈迅速下降趨勢；貯藏14 d 時，對照組、LMF 處理組及1-MCP+LMF 處理組硬度分別下降了47.35%、28.46%和20.71%，其中下降幅度較小的是1-MCP+LMF 處理組；貯藏35 d 時，1-MCP+LMF 處理組硬度為4.98 kg/cm2，顯著（P＜0.05）高于對照組的2.85 kg/cm2。在本試驗(yàn)中，果實(shí)硬度下降速度依次為對照組＞LMF 處理組＞1-MCP+LMF 處理組，結(jié)果說明1-MCP 處理結(jié)合激光微孔膜包裝能較好保持桃果實(shí)的硬度。

圖2 1-MCP 結(jié)合激光微孔膜包裝處理對水蜜桃硬度的影響Fig.2 Effect of 1-MCP treatment combined with laser microporous film packaging on hardness of honey peach

2.1.3 1-MCP 處理結(jié)合激光微孔膜包裝對水蜜桃可溶性固形物和抗壞血酸含量的影響 可溶性固形物是影響果實(shí)風(fēng)味和營養(yǎng)的主要成分。如圖3A 所示，貯藏前期，對照組桃果實(shí)可溶性固形物呈現(xiàn)下降趨勢，貯藏7 d 后可溶性固形物含量持續(xù)上升；而另兩個處理組可溶性固形物含量則在貯藏第7 d 達(dá)到最大值，隨后呈現(xiàn)先降后升趨勢。貯藏35 d 時，對照組、LMF 處理組及1-MCP+LMF 處理組可溶性固形物含量分別上升了26.84%、10.00%和5.79%，這可能是由于隨著貯藏時間的延長，果實(shí)變軟，糖分積累所致。貯藏28～35 d，1-MCP+LMF 處理組可溶性固形物均顯著（P＜0.05）低于對照組和LMF 處理組，該結(jié)果表明1-MCP 處理結(jié)合激光微孔膜包裝能較好維持桃果實(shí)可溶性固形物含量。

抗壞血酸是反映果實(shí)營養(yǎng)成分的重要指標(biāo)之一，在提高果實(shí)的抗氧化和抗衰老方面也起著重要作用。由圖3B 可知，隨著貯藏時間的延長，桃果實(shí)抗壞血酸含量呈下降趨勢，且在貯藏過程中，1-MCP+LMF 處理組的抗壞血酸含量始終高于其他處理。貯藏35 d 時，對照組、LMF 處理組及1-MCP+LMF 處理組抗壞血酸含量分別下降了93.75%、83.75%和78.75%，LMF 和1-MCP+LMF 處理均延緩了抗壞血酸含量的下降，其中1-MCP+LMF 處理效果更好。

圖3 1-MCP 結(jié)合激光微孔膜包裝處理對水蜜桃可溶性固形物和抗壞血酸含量的影響Fig.3 Effect of 1-MCP treatment combined with laser microporous film packaging on soluble solids and ascorbic acid content of honey peach

2.2 1-MCP 處理結(jié)合激光微孔膜包裝對水蜜桃呼吸強(qiáng)度的影響

桃屬于呼吸躍變型果實(shí)，由圖4 可知，在貯藏過程中，桃果實(shí)呼吸強(qiáng)度整體呈上升趨勢，采后14 d 內(nèi)桃果實(shí)的呼吸強(qiáng)度變化較小，貯藏14～21 d 內(nèi)呼吸強(qiáng)度呈迅速上升趨勢；貯藏21 d 時出現(xiàn)第一個呼吸高峰，對照組、LMF 處理組及1-MCP+LMF 處理組的呼吸強(qiáng)度分別為80.21、72.35 和64.47 mg CO2/kg·h，并在貯藏35 d 時出現(xiàn)第二個呼吸高峰；貯藏35 d 時，1-MCP+LMF 處理組呼吸速率為60.00 mg CO2/kg·h，顯著（P＜0.05）低于LMF 處理組及對照組。貯藏后期，LMF 處理組和1-MCP+LMF 處理組呼吸強(qiáng)度均低于同時間的對照組果實(shí)，表明激光微孔膜可有效抑制水蜜桃的呼吸強(qiáng)度，且與1-MCP 結(jié)合處理有協(xié)同作用。

圖4 1-MCP 結(jié)合激光微孔膜包裝處理對水蜜桃呼吸強(qiáng)度的影響Fig.4 Effect of 1-MCP treatment combined with laser microporous film packaging on respiration intensity of honey peach

2.3 1-MCP 處理結(jié)合激光微孔膜包裝對水蜜桃活性氧及相關(guān)酶的影響

2.3.1 1-MCP 處理結(jié)合激光微孔膜包裝對水蜜桃H2O2含量的影響 如圖5 顯示，隨著貯藏時間的延長，桃果實(shí)的H2O2含量整體呈緩慢上升趨勢。貯藏前期，各處理組H2O2含量在貯藏前期上升后下降，LMF 和1-MCP+LMF 處理組在7 d 形成峰值，而對照組在貯藏14 d 時形成峰值；貯藏后期，1-MCP+LMF 處理組H2O2含量始終低于LMF 處理組和對照組；貯藏35 d 時，對照組H2O2含量上升了1.12 倍，顯著（P＜0.05）高于LMF 和1-MCP+LMF 處理組。這說明激光微孔膜處理可以有效抑制桃果實(shí)H2O2的產(chǎn)生，但與1-MCP 復(fù)合處理協(xié)同效應(yīng)較小。

圖5 1-MCP 結(jié)合激光微孔膜包裝處理對水蜜桃H2O2含量的影響Fig.5 Effect of 1-MCP treatment combined with laser microporous film packaging on H2O2 content of honey peach

2.3.2 1-MCP 處理結(jié)合激光微孔膜包裝對水蜜桃SOD、CAT 和APX 活力的影響 SOD、CAT 和APX是具有清除活性氧作用的酶類。如圖6A 所示，貯藏期間，SOD 酶活整體呈上升趨勢，除了貯藏第14 d，1-MCP+LMF 處理的桃果實(shí)SOD 活性均顯著（P＜0.05）高于對照組和LMF 處理組；貯藏第35 d 時，1-MCP+LMF 處理組SOD 活性上升了18.75%，顯著（P＜0.05）高于對照組。如圖6B 所示，對照組樣品在第7 d 和第28 d 時CAT 酶活達(dá)到高峰，1-MCP+LMF和LMF 處理加速了第二個酶活高峰的出現(xiàn)；貯藏第35 d 時，LMF 和1-MCP+LMF 處理組CAT 活性分別上升了32.79%和84.65%，顯著（P＜0.05）高于對照組。如圖6C 所示，貯藏過程中，APX 酶活整體呈下降趨勢；貯藏7 d 內(nèi)，各組APX 酶活呈迅速下降趨勢，14～21 d 內(nèi)桃果實(shí)的APX 酶活變化較小；貯藏期間，1-MCP+LMF 處理組酶活顯著（P＜0.05）高于LMF 處理組和對照組，保持了較高的抗氧化酶活性，減緩了APX 酶活的下降速度。上述結(jié)果表明，1-MCP 處理結(jié)合激光微孔膜包裝可有效保持較高的SOD、CAT 和APX 活性，提高桃果實(shí)的抗氧化能力，降低活性氧對細(xì)胞的損害。

圖6 1-MCP 結(jié)合激光微孔膜包裝處理對水蜜桃SOD、CAT 和APX 活力的影響Fig.6 Effect of 1-MCP treatment combined with laser microporous film packaging on SOD, CAT and APX activity of honey peach

2.4 1-MCP 處理結(jié)合激光微孔膜包裝對水蜜桃果膠成分及其相關(guān)酶的影響

2.4.1 1-MCP 處理結(jié)合激光微孔膜包裝對水蜜桃原果膠和可溶性果膠含量的影響 果膠參與細(xì)胞壁分子間的相互作用，存在于細(xì)胞的胞間層，在果實(shí)后熟軟化過程中，原果膠會被水解成可溶性果膠，導(dǎo)致果實(shí)變軟。如圖7A 所示，隨貯藏時間的延長，原果膠含量整體呈下降趨勢；貯藏7～14 d 時，對照組原果膠含量迅速下降，從1.52%下降到1.18%，而1-MCP+LMF 和LMF 處理組則整體呈緩慢下降趨勢；貯藏35 d 時，對照組、LMF 處理組及1-MCP+LMF 處理組原果膠含量分別下降34.32%、21.91%和17.24%，且1-MCP+LMF 處理組的原果膠含量在整個貯藏期間均顯著（P＜0.05）高于LMF 處理組及對照組。

圖7 1-MCP 結(jié)合激光微孔膜包裝處理對水蜜桃原果膠和可溶性果膠含量的影響Fig.7 Effect of 1-MCP treatment combined with laser microporous film packaging on protopectin and soluble pectin content of honey peach

如圖7B 所示，桃果實(shí)可溶性果膠含量在貯藏期間總體呈上升趨勢，1-MCP+LMF 處理組果實(shí)內(nèi)可溶性果膠含量在貯藏期間以較低速度緩慢上升，且均低于LMF 處理組和對照組；貯藏過程中，對照組可溶性果膠含量最高，除了貯藏第21 d 外，1-MCP+LMF和LMF 處理組均無顯著（P＞0.05）差異。上述結(jié)果表明，激光微孔膜包裝對水蜜桃原果膠分解為可溶性果膠起到了一定的抑制作用，結(jié)合1-MCP 處理可有效抑制原果膠含量的減少，但對于抑制可溶性果膠含量上升效果不明顯。

2.4.2 1-MCP 處理結(jié)合激光微孔膜包裝對水蜜桃PG 和β-葡萄糖苷酶活力的影響 PG 作為主要的細(xì)胞壁降解酶之一，可水解聚半乳糖醛酸中的α-1,4 半乳糖苷鍵，降解細(xì)胞壁的結(jié)構(gòu)骨架，導(dǎo)致果實(shí)軟化。如圖8A 所示，桃果實(shí)貯藏期間PG 活性總體呈上升趨勢。貯藏14 d 內(nèi)，三組果實(shí)PG 活性緩慢上升；貯藏14～21 d，對照組PG 活性快速上升，而1-MCP+LMF 和LMF 處理組PG 活性21 d 后才開始快速上升；貯藏28～35 d，各組PG 活性變化較小；貯藏第35 d時各組PG 活性均達(dá)到峰值，對照組、LMF 處理組及1-MCP+LMF 處理組PG 活性分別上升了4.49、2.29 和2.22 倍。

圖8 1-MCP 結(jié)合激光微孔膜包裝處理對水蜜桃PG 和β-葡萄糖苷酶活力的影響Fig.8 Effect of 1-MCP treatment combined with laser microporous film packaging on the PG and β-glucosidase activity of honey peach

β-葡萄糖苷酶主要降解果膠多聚醛酸側(cè)鏈的半乳糖殘基，破壞細(xì)胞壁結(jié)構(gòu)。如圖8B 所示，貯藏期間，桃果實(shí)β-葡萄糖苷酶活性總體呈上升趨勢；對照組始終保持較快的酶活上升速度，而1-MCP+LMF和LMF 處理組β-葡萄糖苷酶活性在貯藏7～14 d 時才開始快速上升；貯藏28 d 時，各組酶活達(dá)到峰值，對照組、LMF 處理組及1-MCP+LMF 處理組PG 活性分別上升了1.54、0.74 和0.71 倍。貯藏期間，1-MCP+LMF 和LMF 處理組桃果實(shí)β-葡萄糖苷酶活性均顯著（P＜0.05）低于對照組，但在貯藏后期，LMF處理和1-MCP+LMF 處理組之間無顯著（P＞0.05）差異，與PG 活性結(jié)果一致。

3 討論

采收后的果蔬仍會進(jìn)行旺盛的生理代謝，導(dǎo)致其營養(yǎng)成分損失，品質(zhì)下降。在生理成熟階段收獲如桃子等呼吸躍變型水果，會導(dǎo)致呼吸速率明顯增加，從而刺激某些代謝變化[16]。因此，延長水果保質(zhì)期的有效方法是將呼吸速率保持在最低水平，1-MCP 是乙烯的競爭性抑制劑，能與乙烯受體不可逆結(jié)合，抑制桃果實(shí)的呼吸速率。此外，環(huán)境中的氣體組分對水蜜桃保鮮具有重要的影響，采用普通塑料薄膜包裝容易造成包裝內(nèi)氧氣濃度降低，引起果蔬的無氧呼吸，加速果實(shí)腐敗變質(zhì)[17]。適宜的采后處理措施可延緩果實(shí)生理代謝進(jìn)程，減少水分損失，維持果實(shí)相對穩(wěn)定的營養(yǎng)成分，其中微孔膜包裝可有效地調(diào)節(jié)貯藏環(huán)境中的O2/CO2比。Cliff 等[18]研究發(fā)現(xiàn)，采用微孔膜包裝的鮮切蘋果，在貯藏結(jié)束時具有更好的硬度和感官品質(zhì)。馬佳佳等[19]研究發(fā)現(xiàn)微孔膜氣調(diào)保鮮可以降低環(huán)境中的O2/CO2比，延緩枇杷果實(shí)理化品質(zhì)的下降。本研究中，激光微孔膜包裝處理和1-MCP結(jié)合激光微孔膜包裝處理有效地抑制了“霞輝8 號”水蜜桃冷藏期間的呼吸強(qiáng)度，維持了可溶性固形物及抗壞血酸的含量，抑制了失重率的上升，其中復(fù)合處理效果更好，表明1-MCP 結(jié)合激光微孔膜包裝對維持水蜜桃品質(zhì)具有良好的協(xié)同效果。

采后果蔬體內(nèi)清除ROS 能力下降，ROS 產(chǎn)生與清除失去平衡，導(dǎo)致果蔬體內(nèi)積累過多的ROS，加速果實(shí)采后品質(zhì)劣變。植物在長期的進(jìn)化過程中，形成了一套完善的酶促反應(yīng)系統(tǒng)來清除一定閾值內(nèi)的ROS，其中SOD、CAT 和APX 是活性氧酶促清除系統(tǒng)的重要成員，提高SOD、CAT 和APX 活性有利于維持細(xì)胞內(nèi)ROS 產(chǎn)生與清除的動態(tài)平衡，減少細(xì)胞膜損傷[20]。蔡佳昂等[13]研究表明，1-MCP 與微孔氣調(diào)包裝復(fù)合處理可抑制紅苕尖CAT、SOD 活性的下降，有效延長紅苕尖保鮮期。吉寧等[8]研究發(fā)現(xiàn)，微孔膜耦合不同濃度的1-MCP 處理能保持“貴長”獼猴桃果實(shí)較高的SOD、POD、CAT 酶活性，有效減少膜脂過氧化物的產(chǎn)生，延緩果實(shí)后熟衰老。本實(shí)驗(yàn)中，1-MCP 結(jié)合激光微孔膜包裝維持了桃果實(shí)冷藏期間較高的ROS 清除相關(guān)酶（SOD、CAT 和APX）活性，降低了H2O2的產(chǎn)生，表明1-MCP 結(jié)合激光微孔膜包裝對維持桃果實(shí)冷藏期間ROS 代謝平衡有較好的效果，這可能與激光微孔膜的選擇性透氣透水性有關(guān)。

活性氧和細(xì)胞壁物質(zhì)代謝是引起果實(shí)軟化的重要因素[21]，果實(shí)軟化會影響水蜜桃采后貯藏性能和貨架壽命，加速果實(shí)腐爛變質(zhì)。已有研究表明，細(xì)胞壁物質(zhì)降解與果實(shí)軟化密切相關(guān)，原果膠是保持細(xì)胞壁結(jié)構(gòu)完整的果膠成分，貯藏期間逐漸降解為可溶性果膠[22]。PG 和β-葡萄糖苷酶是導(dǎo)致纖維素和果膠分解的關(guān)鍵酶，細(xì)胞壁降解酶協(xié)同作用導(dǎo)致細(xì)胞壁組分不穩(wěn)定，果實(shí)軟化腐爛[23-24]。殷健東[25]研究表明1 μL/L 1-MCP 處理可顯著抑制“雨花露”水蜜桃冷藏期間PG、β-葡萄糖苷酶和Cx 等酶活力，維持細(xì)胞壁結(jié)構(gòu)的穩(wěn)定性，從而延緩果實(shí)軟化。肖煙云[26]研究發(fā)現(xiàn)1.2 μL/L 1-MCP 處理可降低桃果實(shí)PG、Cx和β-半乳糖苷酶等細(xì)胞壁降解酶活力，延緩共價結(jié)合果膠、離子結(jié)合果膠、纖維素和半纖維素等細(xì)胞壁構(gòu)成成分含量的下降及水溶性果膠含量的增加，從而保持桃果實(shí)較高的硬度，延緩后熟軟化。本實(shí)驗(yàn)中，激光微孔膜包裝結(jié)合1-MCP 處理可有效降低PG 和β-葡萄糖苷酶活性，從而緩解原果膠的水解，保持細(xì)胞壁結(jié)構(gòu)完整，從而維持了較高的果實(shí)硬度，延緩了果實(shí)軟化，但與1-MCP 的協(xié)同作用在貯藏后期較小。

4 結(jié)論

激光微孔膜包裝可顯著降低果實(shí)失重率，延緩可溶性固形物、抗壞血酸等營養(yǎng)成分的變化，維持果實(shí)硬度，抑制水蜜桃冷藏期間呼吸代謝，維持SOD、CAT 和APX 等活性氧代謝相關(guān)酶較高的活力，和較低的細(xì)胞壁分解酶活力，進(jìn)而延緩了原果膠含量的下降和可溶性果膠含量的上升，最終延緩生理生化代謝進(jìn)程，保持水蜜桃果實(shí)較好的感官品質(zhì)。1-MCP 處理結(jié)合激光微孔膜包裝具有協(xié)同效果，水蜜桃果實(shí)貨架壽命在5 ℃條件下可達(dá)到28 d。該研究結(jié)果為1-MCP 處理結(jié)合激光微孔膜包裝技術(shù)的產(chǎn)業(yè)化應(yīng)用提供了理論依據(jù)。