張園園，周高新**，李 悅，丁 建，王 勇，韓寶康，張 晶，夏曾潤，杜小平，楊水云

（1．安康市農(nóng)業(yè)科學(xué)研究院，陜西 安康 725021；2．陜西省長青林業(yè)局，陜西 漢中 723000；3．中國富硒產(chǎn)業(yè)研究院，陜西 安康 725021；4．西安交通大學(xué)，陜西 西安 710000）

香菇（Lentinus edodes），又名香菌、花菇、香蕈，隸屬擔(dān)子菌門（Basidiomycota） 傘菌綱（Agaricomycetes）傘菌目（Agaricales）口蘑科（Tricholaceae）香菇屬（Lentinus）[1]。香菇是我國栽培歷史最長、栽培規(guī)模最大的食用菌之一，不僅含有豐富的蛋白質(zhì)、多糖、氨基酸、礦物質(zhì)元素、維生素等營養(yǎng)成分，而且具有健脾胃、促消化、降低膽固醇、提高免疫力等功效[2-5]。

硒是人體必需的微量元素之一，享有“心臟守護神”“天然解毒劑”“生命的火種”“抗癌之王”等稱號[6-7]。我國是世界主要的硒資源國之一，硒的工業(yè)儲量居世界第4位。但我國2/3的地區(qū)仍為缺硒區(qū)和低硒區(qū)，所以我國仍是一個缺硒大國[8]。

香菇在人們的膳食結(jié)構(gòu)中占重要地位，可將無機硒轉(zhuǎn)化為人體所需的有機硒，從而促進人體吸收利用[9]。因此，利用生物轉(zhuǎn)化法生產(chǎn)富硒香菇成為國內(nèi)外研究的熱點[10]。通過對12個香菇菌株進行硒耐受性研究，探索了亞硒酸鈉對香菇生長發(fā)育的影響，以期篩選出適合陜南地區(qū)氣候特點及市場需求的香菇優(yōu)良菌株，為富硒香菇的生產(chǎn)及產(chǎn)品開發(fā)奠定了基礎(chǔ)。

1 材料與方法

1.1 材料

1．1．1 供試菌株

供試菌株編號及來源見表1。

表1 菌株及來源Tab．1 Strains and sources

1．1．2 培養(yǎng)基

基礎(chǔ)培養(yǎng)基：馬鈴薯 200．0 g、葡萄糖 10．0 g、蔗糖 10．0 g、蛋白胨 2．0 g、磷酸二氫鉀 1．0 g、硫酸鎂 0．5 g、瓊脂 12 g，水 1 000 mL。

栽培培養(yǎng)基：木屑80%、麩皮18%、石灰1%、石膏1%。

1.2 試驗方法

1．2．1 香菇菌株的硒耐受性研究

采用平板劃線培養(yǎng)法，分別向基礎(chǔ)培養(yǎng)基中添加一定濃度的亞硒酸鈉，使培養(yǎng)基中亞硒酸鈉的質(zhì)量濃度分別為 0 （CK）、50 mg·L-1、100 mg·L-1、150 mg·L-1、200 mg·L-1、250 mg·L-1、300 mg·L-1、350 mg·L-1、400 mg·L-1、450 mg·L-1、500 mg·L-1。采用直徑90 mm的培養(yǎng)皿，每皿培養(yǎng)基用量20 mL。無菌條件下在每個平板中央定量接種直徑為5 mm的各供試菌株的菌餅1塊，每個濃度重復(fù)3次。設(shè)定培養(yǎng)溫度為（23±1）℃，黑暗培養(yǎng)12 d，每隔2天記錄一次菌落直徑，觀察菌落形態(tài)，并對菌絲長勢進行評分。

1．2．2 亞硒酸鈉對香菇子實體生長發(fā)育的影響

因陜南大部分區(qū)域以生產(chǎn)春栽香菇為主，因此以1．2．1篩選的春栽香菇菌株為研究菌株。采用熟料栽培法，分別向栽培培養(yǎng)基中添加含量為0（CK）、50 mg·kg-1、 100 mg·kg-1、150 mg·kg-1、 200 mg·kg-1、250 mg·kg-1、300 mg·kg-1的亞硒酸鈉，研究不同濃度亞硒酸鈉對香菇產(chǎn)量及硒含量的影響。采用規(guī)格為17 cm×58 cm×0．006 cm的聚乙烯折角塑料袋裝料，每袋裝料量折合干料1．2 kg。料袋高壓滅菌（121℃，2．5 h），待料溫冷卻后接栽培種。

接種后置于23℃～25℃培養(yǎng)室避光培養(yǎng)，空氣相對濕度60%～65%，每天通風(fēng)換氣，保證培養(yǎng)室內(nèi)空氣新鮮。培養(yǎng)期間進行3次刺孔，待菌絲滿袋后繼續(xù)培養(yǎng)30 d，使菌絲達到生理成熟，移入出菇棚，采用大棚層架式進行出菇。出菇溫度25℃～28℃，空氣相對濕度85%～90%。菇蓋邊緣內(nèi)卷，孢子未彈射時采收。每潮菇采收后，需進行料面清理、菌棒注水（第一潮菇采收后除外）、間歇養(yǎng)菌、低溫催蕾、出菇管理等工作[11]，共出4潮菇。采收后，統(tǒng)計產(chǎn)量，分別檢測不同潮次子實體、菇柄、菇蓋的硒含量。硒含量的檢測參照參考文獻[12]。

1.3 數(shù)據(jù)統(tǒng)計與分析

用DPS（Version 7．05） 數(shù)據(jù)統(tǒng)計分析軟件對數(shù)據(jù)進行統(tǒng)計分析。

2 結(jié)果與分析

2.1 亞硒酸鈉對12個香菇菌株菌絲長勢影響

不同質(zhì)量濃度的亞硒酸鈉對不同香菇菌株菌絲長勢的影響結(jié)果見表2。

表2 亞硒酸鈉對不同香菇菌株菌絲長勢的影響Tab.2 Effect of disodium selenite on the mycelia growth of different Lentinus edodes strains

由表2可知，不同濃度亞硒酸鈉對不同香菇菌株菌絲長勢影響較大。隨著亞硒酸鈉濃度的增加，香菇菌絲長勢均呈逐漸減弱的趨勢，但減弱的程度存在很大差異。春栽香菇品種中，菌絲總體長勢為：安香1號＞渭香1號＞9608＞908＞秦南1號；夏栽香菇品種中，菌絲總體長勢為：武香＞慶科212＞L808；秋栽品種中，菌絲總體長勢為：945＞秦香＞868＞109。

2.2 亞硒酸鈉對12個香菇菌株菌落形態(tài)影響

不同質(zhì)量濃度的亞硒酸鈉對不同香菇菌株菌落形態(tài)影響見表3和圖1。

表3 亞硒酸鈉對不同香菇菌株菌落形態(tài)的影響Tab.3 Effect of disodium selenite on the colonial morphology of different Lentinus edodes strains

圖1 12個香菇菌株菌落形態(tài)Fig.1 Colony morphology of twelve strains of Lentinus edodes

由表3可知，亞硒酸鈉對不同香菇菌株菌落形態(tài)影響較大，其中有無同心圓、菌落邊緣是否整齊之間存在顯著的差異。春栽香菇品種中，隨著亞硒酸鈉濃度的增大，安香1號、渭香1號、908均無同心圓，但當亞硒酸鈉質(zhì)量濃度高于250 mg·L-1時，5個不同菌株菌落均呈現(xiàn)不同程度的鋸齒狀。夏栽香菇品種中，隨著亞硒酸鈉濃度的增大，武香菌落邊緣整齊，且無同心圓，表明該菌株硒耐受性強；當亞硒酸鈉濃度高于250 mg·L-1時，慶科212和908菌落邊緣不同程度地出現(xiàn)鋸齒狀和同心圓。秋栽香菇品種中，當亞硒酸鈉濃度高于250 mg·L-1時，4個香菇菌株菌落邊緣均不同程度的出現(xiàn)鋸齒狀或有同心圓。綜上所述，低濃度的亞硒酸鈉對香菇菌絲生長影響較小，邊緣整齊無同心圓，表明菌落生長正常；高濃度的亞硒酸鈉對香菇菌株間影響較大，菌落邊緣呈鋸齒形且有同心圓，表明菌絲生長受到了嚴重抑制。因此，在實際生產(chǎn)中，建議亞硒酸鈉的添加量不超過250 mg·L-1。

2.3 亞硒酸鈉對12個香菇菌株菌絲生長速率影響

不同質(zhì)量濃度的亞硒酸鈉對不同香菇菌株絲生長速率的影響見表4。

表4 亞硒酸鈉對不同香菇菌株菌絲生長速率的影響Tab．4 Effect of disodium selenite on the growth rate of different Lentinus edodes strains

由表4可知，隨著亞硒酸鈉濃度的增加，12個香菇菌株菌絲生長速率基本均呈逐漸下降的趨勢，但不同菌株間菌絲生長速率差異較大。

春栽香菇品種中，當亞硒酸鈉質(zhì)量濃度為0時，菌絲生長速率由快到慢為：安香1號＞秦南1號＞渭香1號＞9608＞908；當亞硒酸鈉質(zhì)量濃度為50 mg·L-1時，菌絲生長速率由快到慢為：安香1號＞渭香1號＞908＞秦南1號＞9608；當亞硒酸鈉質(zhì)量濃度為100 mg·L-1時，菌絲生長速率由快到慢為：908＞安香1號＞渭香1號＞9608＞秦南1號；當亞硒酸鈉質(zhì)量濃度為300 mg·L-1時，菌絲生長速率由快到慢為：908＞渭香1號＞9608＞安香1號＞秦南1號；當亞硒酸鈉質(zhì)量濃度為500 mg·L-1時，菌絲生長速率由快到慢為：安香1號＞渭香1號＞908＞9608＞秦南1號。

夏栽香菇品種中，當亞硒酸鈉質(zhì)量濃度為0時，菌絲生長速率由快到慢為：L808＞慶科212＞武香；當亞硒酸鈉質(zhì)量濃度為50 mg·L-1時，菌絲生長速率由快到慢為：慶科212＞武香＞L808；當亞硒酸鈉濃度為100 mg·L-1時，菌絲生長速率由快到慢為：慶科212＞武香＞L808；當亞硒酸鈉濃度為300 mg·L-1時，菌絲生長速率由快到慢為：武香＞慶科212＞L808；當亞硒酸鈉濃度為500 mg·L-1時，菌絲生長速率由快到慢為：武香＞慶科212＞L808。

秋栽香菇品種中，當亞硒酸鈉質(zhì)量濃度為0時，菌絲生長速率由快到慢為：868＞109＞秦香＞945；當亞硒酸鈉質(zhì)量濃度為50 mg·L-1時，菌絲生長速率由快到慢為：868＞109＞945＞秦香；當亞硒酸鈉質(zhì)量濃度為100 mg·L-1時，菌絲生長速率由快到慢為：868＞109＞秦香＞945；當亞硒酸鈉質(zhì)量濃度為300 mg·L-1時，菌絲生長速率由快到慢為：868＞109＞945＞秦香；當亞硒酸鈉質(zhì)量濃度為500 mg·L-1時，菌絲生長速率由快到慢為：945＞秦香＞868＞109。

在實際生產(chǎn)中，可根據(jù)不同季節(jié)選擇不同的香菇菌株進行富硒香菇栽培，建議春栽品種首選安香1號，其次為908和渭香1號；夏栽品種首選武香，其次為慶科212；秋栽品種首選868，其次為109和945。綜合菌絲長勢及菌絲生長速率2個指標，建議實際生產(chǎn)中亞硒酸鈉添加量不超過300 mg·L-1。

2.4 亞硒酸鈉對安香1號產(chǎn)量及硒含量的影響

不同質(zhì)量濃度亞硒酸鈉對安香1號產(chǎn)量及硒含量的影響見表5。

表5 不同質(zhì)量濃度亞硒酸鈉對安香1號生長發(fā)育的影響Tab．5 Effects of different mass concentrations of on the growth and development of Anxiang 1 fruit body

由表5可知，不同質(zhì)量濃度亞硒酸鈉對安香1號生長影響較大。隨著亞硒酸鈉濃度的增大，安香1號滿袋時間延長、菌絲生長速率降低、袋均產(chǎn)量降低、污染率增加，表明亞硒酸鈉對安香1號的生長有一定的抑制作用，但子實體硒含量呈上升趨勢。當亞硒酸鈉濃度為300 mg·L-1時，子實體硒含量最高，為216．347 mg·kg-1。在實際生產(chǎn)中，可根據(jù)要求，添加適宜的亞硒酸鈉進行富硒香菇的生產(chǎn)。

3 結(jié)論

不同質(zhì)量濃度的亞硒酸鈉對不同香菇菌株菌絲長勢、菌落形態(tài)影響較大。低質(zhì)量濃度的亞硒酸鈉對香菇菌絲生長影響不大，高質(zhì)量濃度的亞硒酸鈉可抑制菌絲生長發(fā)育。因此，適宜質(zhì)量濃度的亞硒酸鈉是影響香菇菌絲生長發(fā)育的關(guān)鍵因素，這與張正偉[13]研究結(jié)論一致。綜合菌絲長勢、菌落形態(tài)、菌絲生長速率3個指標，在進行富硒香菇生產(chǎn)中，建議春栽香菇品種首選安香1號，其次為908；夏栽香菇品種首選武香，其次為慶科212；秋栽香菇品種首選868，其次為109。

在試驗范圍內(nèi)，不同質(zhì)量濃度的亞硒酸鈉對安香1號生長影響較大。隨著亞硒酸鈉濃度的增大，安香1號子實體硒含量呈上升趨勢，這與張正偉[13]研究結(jié)論一致。當亞硒酸鈉質(zhì)量濃度為300 mg·kg-1時，子實體硒含量最高，為216．347 mg·kg-1。在實際生產(chǎn)中，可根據(jù)要求，添加適宜的亞硒酸鈉進行富硒香菇的生產(chǎn)。根據(jù)《食品安全國家標準食品營養(yǎng)強化劑富硒食用菌粉》（GB1903．22-2016）[13]，可將富硒香菇作為一種食品營養(yǎng)強化劑進行開發(fā)利用。