黃雨軒，林宇嵐,2，張林平*，吳 斐，楊 瀅，譚明曦

(1. 江西農(nóng)業(yè)大學(xué) 鄱陽(yáng)湖流域森林生態(tài)系統(tǒng)保護(hù)與修復(fù)國(guó)家林業(yè)和草原局重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，江西 南昌 330045；2. 湄洲灣職業(yè)技術(shù)學(xué)院，福建 莆田 351119)

油茶（Camellia oleiferaAbel.）隸屬山茶科（Theaceae）山茶屬（Camellia），為常綠小喬木或灌木，是我國(guó)特有的木本油料樹(shù)種，與油橄欖（Olea europaeaL.）、油棕（Elaeis guineensisJacq.）和椰子（Cocos nuciferaL.）并稱世界四大木本油料植物[1]。油茶果極具經(jīng)濟(jì)價(jià)值，茶油富含不飽和脂肪酸，是優(yōu)質(zhì)保健食用植物油[2]。近年來(lái)，我國(guó)植物油自給率逐年下降，對(duì)油料和植物油的進(jìn)口均居世界前列[3]。為緩解我國(guó)油料供需矛盾，國(guó)務(wù)院批準(zhǔn)實(shí)施《全國(guó)油茶產(chǎn)業(yè)發(fā)展規(guī)劃》（2009—2020），2020年我國(guó)油茶種植面積超過(guò)462萬(wàn)hm2[4]。新形勢(shì)下，油茶產(chǎn)業(yè)發(fā)展前景良好，種植面積逐漸增大。

磷（P）是植物細(xì)胞內(nèi)的重要組成部分，如磷酸、磷脂和蛋白質(zhì)等，約占植物干質(zhì)量的0.05%～0.5%，是植物生長(zhǎng)過(guò)程中需要的大量營(yíng)養(yǎng)元素之一。它不僅參與植物多種生理過(guò)程如光合作用、酶活性調(diào)節(jié)等，還是調(diào)節(jié)能量代謝、信號(hào)傳導(dǎo)過(guò)程中關(guān)鍵因子[5-6]。植物缺磷會(huì)影響細(xì)胞分裂，從而導(dǎo)致植株出現(xiàn)矮化、葉片枯黃、枝干細(xì)弱等癥狀[7]。油茶林的栽培對(duì)土壤肥力要求很高、需肥量大，而紅壤中可利用磷的含量不能滿足油茶林生長(zhǎng)發(fā)育的需要，磷是限制紅壤區(qū)油茶生長(zhǎng)發(fā)育的主要營(yíng)養(yǎng)元素之一[8]。近年來(lái)，油茶集約化經(jīng)營(yíng)過(guò)程中常配施大量的磷肥，然而施入的磷肥極易被土壤中的金屬離子固定，導(dǎo)致植物所吸收的磷素僅占施磷量的25%左右[9]。而過(guò)量的磷流失到土壤中會(huì)造成土壤退化、板結(jié)和水體富營(yíng)養(yǎng)化等環(huán)境問(wèn)題，從而降低油茶林的生產(chǎn)力[10]。因此，如何提高油茶林地磷素有效性，降低磷肥使用和減輕磷肥對(duì)土壤環(huán)境的壓力已成為經(jīng)濟(jì)作物的熱點(diǎn)研究之一。

叢枝菌根（arbuscular mycorrhiza，AM）真菌，隸屬球囊菌門（Glomeromycota），能與大約80%的陸生植物根系形成共生關(guān)系[11]。AM真菌從植物獲取碳源，同時(shí)向植物轉(zhuǎn)運(yùn)多種營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，具有促進(jìn)植物生長(zhǎng)、改善植物營(yíng)養(yǎng)狀況、提高植物抵抗生物和非生物逆境的功能[11-12]。大量研究表明叢枝菌根真菌在植物利用磷中起著重要作用，一方面，叢枝菌根真菌侵染植株后，其根尖表皮變厚，細(xì)胞層數(shù)增多，根冠比增加，根系長(zhǎng)度變長(zhǎng)，根系與土壤接觸面積增大，覆蓋范圍可超過(guò)根系的700倍，進(jìn)一步提高宿主植物對(duì)土壤磷的吸收作用[13-14]。另一方面，叢枝菌根真菌的根外菌絲能夠分泌一些物質(zhì)，包括磷酸酶、糖類和有機(jī)酸等，而這些酶可以促進(jìn)土壤中難溶性的磷進(jìn)行溶解，從而提高植物的磷吸收效率。與此同時(shí)，大量研究表明，在低磷條件下，植物對(duì)磷的吸收主要依靠菌絲來(lái)完成[15-16]。AM真菌可為植物提供高達(dá)100%的磷，金鑫等[17]研究表明根外菌絲對(duì)局部P養(yǎng)分獲取受環(huán)境調(diào)控，在環(huán)境磷養(yǎng)分較低而局部磷養(yǎng)分高于環(huán)境磷養(yǎng)分時(shí)，較多的菌絲會(huì)進(jìn)入局部區(qū)域獲取磷。通過(guò)單個(gè)真菌菌絲營(yíng)養(yǎng)吸收的數(shù)學(xué)模型發(fā)現(xiàn)菌絲吸收P的速率比根的吸收速率高出一個(gè)數(shù)量級(jí)[18]，也有研究表明接種AM真菌可能會(huì)完全抑制植物根對(duì)P的吸收[19]。目前研究推測(cè)AM真菌對(duì)根吸收的限制可能是兩者競(jìng)爭(zhēng)所致，如P轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白的減少[16]，在高磷條件下，AM真菌生物量顯著降低[20]，研究表明隨著P含量的增加，未接種的豆科植物地上部磷含量增量要遠(yuǎn)高于未接種處理，而地下部無(wú)顯著差異，即在高磷條件下AM真菌可能會(huì)限制P向地上部的傳遞[21]。本課題組前期研究表明：油茶是菌根植物，施有機(jī)磷可以改變菌根化油茶根系的形態(tài)結(jié)構(gòu)，AM真菌通過(guò)提高油茶對(duì)礦質(zhì)元素的吸收來(lái)增強(qiáng)葉片的光合作用，改善根系的形態(tài)結(jié)構(gòu)，進(jìn)而促進(jìn)油茶生長(zhǎng)和生物量的增加[22]。然而AM真菌對(duì)植物無(wú)機(jī)磷的吸收和培養(yǎng)土壤磷組分轉(zhuǎn)化的影響還未見(jiàn)報(bào)道。因此，本研究以油茶1年生實(shí)生苗為試驗(yàn)材料，采用盆栽試驗(yàn)探究不同無(wú)機(jī)磷（KH2PO4）水平下，接種幼套近明球囊酶（Claroideogolmus etuicatum）對(duì)油茶無(wú)機(jī)磷形態(tài)、植株磷濃度和磷轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白基因的影響，為油茶集約化經(jīng)營(yíng)中通過(guò)菌根生物技術(shù)途徑提升土壤磷素利用效率提供科學(xué)依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 供試植物

選用油茶贛無(wú)2高產(chǎn)品種的1年生實(shí)生苗為供試植物材料，由江西省林業(yè)科學(xué)院提供。

1.2 供試菌種

供試幼套近明球囊霉（Claroideogolmus etuicatum）菌劑購(gòu)自長(zhǎng)江大學(xué)根系生物學(xué)研究所，并通過(guò)純沙（滅菌）栽培玉米和三葉草（Trifolium pretense）擴(kuò)繁菌劑，菌劑包括菌絲、孢子（密度為34個(gè)·g-1）、宿主根及基質(zhì)。

1.3 供試土壤

試驗(yàn)土壤采自江西農(nóng)業(yè)大學(xué)紅壤土，土壤基本理化特征為：pH 5.8，有機(jī)質(zhì)41.25 g·kg-1，有效磷2.5 mg·kg-1，銨態(tài)氮14.24 mg·kg-1，硝態(tài)氮2.26 mg·kg-1，過(guò)2 mm篩，經(jīng)過(guò)高溫滅菌（121 ℃，2 h）處理，以消除土著微生物的干擾。同時(shí)取過(guò)2 mm篩的河沙，用自來(lái)水沖洗干凈，晾干后干熱滅菌（180 ℃，4 h）,供試基質(zhì)為滅菌土和滅菌沙（V∶V=1∶1）混合。

1.4 試驗(yàn)設(shè)計(jì)

采用雙因素完全隨機(jī)區(qū)組試驗(yàn)設(shè)計(jì)：（1）2個(gè)AM真菌(C. etuicatum)處理，即接種(+AM)和不接種(-AM)；（2）4個(gè)無(wú)機(jī)磷處理水平，即0、10、50、100 KH2PO4mg·kg-1。有8個(gè) 處理，每處理10盆，重復(fù)3次，每處理累計(jì)30盆，共240盆。

將滅菌供試基質(zhì)裝入花盆（上口直徑17 cm、下底直徑12 cm、高15 cm）中，每盆裝2 kg基質(zhì)，并加入70 g菌劑，對(duì)照中加入等量滅活菌劑（121 ℃，滅菌2 h）。每盆種植1棵油茶苗，確保根系與菌劑接觸。試驗(yàn)于2019年5月開(kāi)始，將盆栽放在江西農(nóng)業(yè)大學(xué)基地大棚內(nèi)管理，溫度25～28 ℃，相對(duì)濕度70%～75%。磷處理前，澆灌無(wú)磷的 Hoagland營(yíng)養(yǎng)液，即（236 Ca(NO3)2·4H2O、 246.5 MgSO4·7H2O、 2.86 H3BO3、1.81 MnCl2·4H2O、0.22 ZnSO4·7H2O、0.08 CuSO4·5H2O、0.02 H2MnO4·H2O、7.354 C10H12O8N2NaFe、74.5 KCl） g·L-1，1個(gè)月澆灌1次，每次每盆250 mL營(yíng)養(yǎng)液。3個(gè)月后，開(kāi)始施磷處理，每隔一天分別澆灌200 mL濃度為0、10、50、100 KH2PO4mg·kg-1溶液，持續(xù)處理30 d，再培養(yǎng)2個(gè)月后收獲。

1.5 植株磷含量、土壤磷含量的測(cè)定

測(cè)定油茶植株地上部和地下部全磷含量，以及土壤全磷、有效磷、有機(jī)磷含量。具體測(cè)定方法參照《土壤農(nóng)業(yè)化學(xué)分析方法》[23]。

1.6 土壤無(wú)機(jī)磷分級(jí)的測(cè)定

測(cè)定土壤中無(wú)機(jī)磷含量，土壤無(wú)機(jī)磷分級(jí)的具體測(cè)定方法參照雷宏軍等[24]。

1.7 磷轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白的實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測(cè)

油茶根、葉總RNA的提取方法參照天根生物工程（TIANGEN）公司RNA prep Pure多糖多酚植物總RNA提取試劑盒（DP441）所提供的方法，所得RNA溶液放置-80 ℃?zhèn)溆茫镄蛄袇⒖贾芸∏俚萚25]。

1.8 數(shù)據(jù)分析

使用Microsoft Excel 2016對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行整理，在IBM SPSS statistics 20.0中采用雙因素方差分析（Two-way ANOVA）檢測(cè)接種AM真菌處理、施無(wú)機(jī)磷處理及其交互作用對(duì)所有測(cè)定指標(biāo)的影響。采用單因素方差分析（One-way ANOVA）中的Duncan’s檢驗(yàn)檢測(cè)不同處理間的差異（P<0.05）。通過(guò)皮爾森相關(guān)系數(shù)（Pearson correlation coefficient）分析油茶苗磷濃度與土壤不同磷形態(tài)含量的相關(guān)性。使用origin2019繪制柱狀圖。

2 結(jié)果

2.1 接種AM真菌及施磷對(duì)油茶苗磷含量的影響

雙因素方差分析表明（表1），接種AM真菌、施無(wú)機(jī)磷及其兩者交互作用對(duì)油茶地上部磷濃度含量和根系磷含量影響均為極顯著（P<0.01）。

表1 接種AM真菌、施磷處理及兩者交互作用對(duì)油茶苗磷含量、培養(yǎng)土壤磷組分含量的影響Table 1 Effects of AM fungi inoculation, phosphorus application and their interaction on the phosphorus concentration of Camellia oleifera and soil phosphorus concentration

圖1可知，無(wú)論是否接種，油茶地上部磷含量隨著KH2PO4濃度的增加均呈遞增趨勢(shì)。在不施磷（0 mg·kg-1）、低 磷（10 mg·kg-1）、中 磷（50 mg·kg-1）和高磷（100 mg·kg-1）條件下，菌根化油茶苗地上部磷含量均顯著高于未菌根化的磷含量，分別提高了5.64%、8.14%、14.28%、5.79%。無(wú)論是否接種AM真菌，隨著KH2PO4濃度的增加，油茶根系磷含量均呈逐步上升的趨勢(shì)。在4個(gè)不同KH2PO4濃度下，接種AM真菌均顯著提高油茶根系的磷含量，分別提高了12.85%、20.01%、19.63%、18.09%。

注： + AM：接種AM真菌；-AM：不接種AM真菌。數(shù)值為均值±標(biāo)準(zhǔn)差（n=3），不同小寫字母表示相同接種處理間差異顯著（P＜0.05）；星號(hào)表示相同磷水平處理間差異顯著（P＜0.05）。下同。Note： + A: AMF inoculation; -A: non-inoculation. Values are presented as means ± SD (n=3)，different letters indicate significant differences between the same inoculation treatments (P＜0.05),asterisks indicate significant differences between treatments with the same phosphorus level (P＜0.05). The same as below.

2.2 接種AM真菌及施磷對(duì)土壤磷含量的影響

雙因素方差分析表明（表1），接種AM真菌處理、施無(wú)機(jī)磷處理及其兩者交互作用對(duì)土壤全磷含量、有效磷含量及有機(jī)磷含量的影響均極顯著（P<0.01）。

表2可知，無(wú)論是否接種，隨著KH2PO4濃度的增加，土壤全磷含量、有效磷含量和有機(jī)磷含量均呈逐步上升趨勢(shì)。不施磷條件下，接種AM真菌顯著降低油茶土壤全磷含量和有機(jī)磷含量，分別降低了3.32%、11.40%。在低磷（10 mg·kg-1）條件下，接種AM真菌顯著增加了土壤全磷含量（6.17%）和有機(jī)磷含量（10.44%），而降低了有效磷含量（2.20%）。在中磷（50 mg·kg-1）條件下，接種AM真菌顯著降低了油茶土壤全磷含量（9.43%）和有效磷含量（2.58%），而增加了有機(jī)磷含量（0.49%）。在高磷（100 mg·kg-1）條件下，接種AM真菌均顯著降低了土壤全磷含量（9.09%）、有效磷含量（6.63%）和有機(jī)磷含量（4.44%）。

表2 接種AM真菌及施磷對(duì)土壤磷組分含量的影響Table 2 Effect of inoculation of AM fungi and application of soil phosphorus concentration of Camellia oleifera seedlings

2.3 接種AM真菌及施磷對(duì)土壤無(wú)機(jī)磷形態(tài)的影響

雙因素方差分析表明（表1），接種AM真菌處理對(duì)土壤Al-P含量、Fe-P含量、Ca-P含量和O-P含量的影響均極為顯著（P<0.01）。施磷對(duì)土壤Al-P含量、Fe-P含量、Ca-P含量和O-P含量的影響均極顯著（P<0.01）。接種AM真菌處理和施磷處理兩者交互作用對(duì)土壤中Al-P、Fe-P和O-P 3種磷形態(tài)含量的影響均極為顯著（P<0.01），而對(duì)土壤中Ca-P含量的影響不顯著（P>0.05）。

表3可知，未接種條件下，Al-P、Fe-P、Ca-P、O-P 4種磷形態(tài)含量均顯著高于接種處理，由低到高順序?yàn)镺-P

表3 接種AM真菌及施磷對(duì)不同形態(tài)磷含量的影響Table 3 Effect of inoculation of AM fungi and application on different forms of grown soil phosphorus content of Camellia oleifera seedlings

無(wú)論是否接種AM真菌，隨著KH2PO4濃度的增加土壤Al-P、Fe-P和Ca-P含量均呈遞增趨勢(shì)，而土壤O-P含量隨著KH2PO4濃度的增加均呈先下降后上升的趨勢(shì)。不施磷條件下，接種AM真菌降低土壤Al-P含量（10.85%）、Fe-P含量（2.25%）、Ca-P含量（15.92%）和O-P含量（12.82%）。施磷量為10 mg·kg-1時(shí)，接種AM真菌與未接種處理間對(duì)土壤Al-P含量差異不顯著，顯著降低了土壤Fe-P含量（6.27%）、Ca-P含量（11.67%）和O-P含量（25.48%）。施磷量為50 mg·kg-1時(shí)，接種AM真菌顯著降低了土壤Al-P含量（4.90%）和土壤Fe-P含量（19.40%），對(duì)Ca-P含量和O-P含量差異不顯著。施磷量為100 mg·kg-1時(shí)，接種AM真菌與未接種AM真菌處理間土壤Al-P含量差異不顯著，顯著降低了Fe-P含量、 Ca-P含量和O-P含量，分別為7.48%、9.13%和17.30%。

2.4 油茶苗磷含量與土壤不同磷形態(tài)含量之間的相關(guān)分析

相關(guān)性分析表明（表4），土壤有效磷、有機(jī)磷和Al-P含量均與油茶根系磷濃度呈顯著正相關(guān)關(guān)系；土壤全磷、有效磷、有機(jī)磷、Al-P、Fe-P、Ca-P和O-P含量均與油茶地上磷含量呈正相關(guān)關(guān)系。土壤有效磷、有機(jī)磷、Al-P、Fe-P、Ca-P和O-P含量與土壤全P含量呈顯著正相關(guān)關(guān)系；土壤有機(jī)磷、Al-P、Fe-P、Ca-P和O-P含量與土壤有效磷含量呈正相關(guān)關(guān)系；土壤Al-P、Fe-P、Ca-P和O-P含量與土壤有機(jī)磷含量呈正相關(guān)關(guān)系。

表4 油茶植株磷含量與土壤不同形態(tài)磷含量之間的相關(guān)性Table 4 Correlation between the phosphorus content in Camellia oleifera seedlings and the phosphorus content of different forms in soil

2.5 接種AM真菌及施磷對(duì)油茶苗磷轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白基因表達(dá)的影響

雙因素方差分析表明（表1）接種AM真菌對(duì)油茶葉片和根系的Pht1;1基因表達(dá)影響均極顯著（P<0.01）。施無(wú)機(jī)磷對(duì)油茶葉片Pht1;1基因表達(dá)的影響顯著（P<0.05），對(duì)油茶根系Pht1;1基因表達(dá)的影響極顯著（P<0.01）。接種處理和施磷處理兩者交互作用對(duì)油茶葉片的Pht1;1基因表達(dá)的影響極顯著（P<0.01），而對(duì)根系的Pht1;1基因表達(dá)的影響不顯著（P＞0.05）。

圖2所示，接種AM真菌條件下，油茶葉片Pht1;1基因表達(dá)量隨著供磷水平的增加呈先降后升的趨勢(shì)；而不接種AM真菌條件下，油茶葉片Pht1;1基因表達(dá)量隨著供磷水平的增加呈逐步上升的趨勢(shì)。在不施磷和低磷（10 mg·kg-1）條件下，接種AM真菌均顯著提高油茶葉片Pht1;1基因的相對(duì)表達(dá)量，分別提高了37.14%、39.58%。在中磷（50 mg·kg-1）和高磷（100 mg·kg-1）條件下，接種AM真菌與未接種AM真菌油茶葉片Pht1;1基因的相對(duì)表達(dá)量之間差異不顯著。

圖2 接種AM真菌及施磷下油茶葉片Pht1;1相對(duì)表達(dá)量Fig. 2 Relative expression level of Pht1;1 in Camellia oleifera seedling leaves inoculated with AM fungi and phosphorus

圖3所示，接種AM真菌下油茶根系Pht1;1基因表達(dá)量隨著KH2PO4濃度的增加呈先上升后下降的趨勢(shì)；而不接種AM真菌下油茶葉片Pht1;1基因表達(dá)量隨著KH2PO4濃度的增加呈逐步上升的趨勢(shì)。不施磷條件下，接種AM真菌油茶根系Pht1;1基因表達(dá)量顯著低于未接種，降低了78.74%。低磷條件下，接種AM真菌顯著增加油茶根系Pht1;1基因表達(dá)量，增加了3.73%。中磷條件下，接種AM真菌顯著降低了油茶根系Pht1;1基因表達(dá)量（47.59%）。高磷條件下，接種AM真菌顯著降低油茶根系Pht1;1基因表達(dá)量（51.38%）。

圖3 接種AM真菌及施磷下油茶根系Pht1;1相對(duì)表達(dá)量Fig. 3 Relative expression of Pht1;1 in the roots of Camellia oleifera seedling inoculated with AM fungi and phosphorus

3 討論

磷素極易被固定于土壤中而使其有效性降低，土壤磷脅迫極大程度地限制植物的生長(zhǎng)和產(chǎn)量[13,26]。本研究結(jié)果表明，低磷濃度下，接種AM真菌顯著提高了油茶地上部磷含量和根系磷含量，且施加無(wú)機(jī)磷和AM真菌存在顯著的交互作用。這可能是低磷環(huán)境下，油茶更依賴AM真菌吸收土壤中的養(yǎng)分和水分，同時(shí)根外菌絲分泌蘋果酸等有機(jī)酸，溶解土壤中難溶性磷化合物，提高土壤磷素的活性，從而改善油茶植株的磷含量[27]，與劉春艷[28]、孫艷梅[29]、李芳[30]等試驗(yàn)結(jié)果一致。

土壤中磷素的形態(tài)和含量是其有效性的關(guān)鍵因子[26]。根據(jù)雷宏軍等[24]提出的酸性土壤無(wú)機(jī)磷分級(jí)方法，可分成Al-P、Fe-P、Ca-P和O-P。其中Al-P、Fe-P、Ca-P是植物的第二有效磷源，而O-P是難以被植物吸收利用的潛在磷源[31]。鐘熊等[32]對(duì)菌絲室紅壤中添加不同形態(tài)磷處理，發(fā)現(xiàn)接種叢枝菌根真菌一定程度上增加了Ca2-P、Al-P、O-Al、和Ca10-P的含量。此外，張麗[33]、張宇亭[34]分別在紅壤和石灰性土壤研究發(fā)現(xiàn)，AM真菌主要活化土壤中潛在磷源（如Ca10-P、O-P），進(jìn)而提高土壤有效性。本試驗(yàn)結(jié)果表明，接種AM真菌顯著降低了土壤Al-P、Fe-P、Ca-P和OP的含量，這與張宇亭[34]等的結(jié)論一致。這可能是由于AM真菌與油茶建立共生關(guān)系后，AM真菌自身分泌有機(jī)酸等或促進(jìn)油茶根系分泌有機(jī)酸（如檸檬酸、葡萄酸等），促進(jìn)了土壤磷從植物難以利用的形態(tài)向可利用形態(tài)轉(zhuǎn)變[35]。因此接種C.etuicatum可有效的促進(jìn)油茶土壤磷形態(tài)的變化以及對(duì)礦質(zhì)養(yǎng)分的吸收，促進(jìn)土壤磷素向著有利于宿主植物吸收的方向轉(zhuǎn)化。

植物磷的吸收是跨表皮及皮層細(xì)胞質(zhì)膜的逆濃度的主動(dòng)運(yùn)輸過(guò)程，依賴于根系細(xì)胞膜上的高親和磷轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白家族。舒波[36]研究表明枳實(shí)生苗根系中的磷轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白基因表達(dá)受AM真菌侵染和土壤磷水平的調(diào)控，菌根侵染使PtaPT1和PtaPT2的相對(duì)表達(dá)量降低了20%～80%，而PtaPT3和PtaPT7的相對(duì)表達(dá)量降低了10%～30%，且低磷脅迫提高了出PtaPT6之外的其它Pht1基因家族成員的表達(dá)量；劉芳[37]在玉米全基因組水平上鑒定出13個(gè)Pht1磷轉(zhuǎn)運(yùn)基因，其中8個(gè)為新成員，且低磷脅迫下6個(gè)新成員基因受AM真菌誘導(dǎo)表達(dá)。此外，有研究表明AM真菌不僅可以通過(guò)誘導(dǎo)磷轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白基因的表達(dá)來(lái)提高宿主植物對(duì)磷素的吸收和利用，在低磷脅迫下也能夠改變植物根系基因型的表達(dá)[38]；周俊琴等[25]發(fā)現(xiàn)了油茶湘林4號(hào)（Camellia oleifera‘Xianglin 4’）在低磷條件下誘導(dǎo)Pht1;1的表達(dá)。本試驗(yàn)結(jié)果表明，未接種AM真菌油茶葉片Pht1;1基因表達(dá)量隨著KH2PO4濃度的升高而遞增，這可能是隨著施磷濃度的升高，轉(zhuǎn)運(yùn)至葉片中的磷量增加的結(jié)果；低磷條件下，接種C.etuicatum顯著增加了油茶葉片和根系中Pht1;1基因的表達(dá)；中磷、高磷條件下，接種C. etuicatum降低了油茶葉片和根系中Pht1;1基因的表達(dá)，表明AM真菌可通過(guò)調(diào)控油茶體內(nèi)PO43-的運(yùn)輸過(guò)程，從而影響油茶對(duì)外界不同磷濃度的響應(yīng)。Pht1;1基因只是油茶Pht1基因家族成員中一員，其基因家族成員的具體數(shù)量及各成員之間相互調(diào)控方式和機(jī)制并未清楚，需要在進(jìn)一步對(duì)其家族成員進(jìn)行克隆、表達(dá)模式和調(diào)控方式等進(jìn)行研究，探索轉(zhuǎn)運(yùn)子在油茶根系中如何進(jìn)行表達(dá)。

4 結(jié)論

本研究研究了接種AM真菌和施無(wú)機(jī)磷對(duì)油茶磷吸收和土壤磷組分的影響，結(jié)果表明，接種C.etuicatum可將土壤中難溶性磷轉(zhuǎn)化成為植物可利用的磷形態(tài)，并提高油茶植株對(duì)土壤中有效磷的吸收效率。同時(shí)，在低磷條件下，接種C. etuicatum顯著增加了油茶葉片和根系中Pht1;1基因的表達(dá)，在中磷、高磷條件下，接種C. etuicatum降低了油茶葉片和根系中Pht1;1基因的表達(dá)。