方 毅,林澤鎮(zhèn),梁華麗,黃錦炎,劉玉莉
(1.汕頭海關技術(shù)中心,廣東 汕頭 515000;2.汕頭海關,廣東 汕頭 515000)
蛆癥異蚤蠅(Megaseliascalaris)屬雙翅目(Diptera)、環(huán)裂亞目(Cyclorrhapha)、蚤蠅總科(Phoroidea)、蚤蠅科(Phoridae)、異蚤蠅屬(Megaselia),是一種分布廣泛的世界性昆蟲[1]。蛆癥異蚤蠅主要生活在熱帶和亞熱帶地區(qū),在高緯度溫暖氣候地區(qū)也有分布,甚至在偏遠的島嶼上如水手長鳥島、加那利群島和加拉帕戈斯群島也有報道[2-4]。該蟲具有腐食性、糞食性、尸食性和寄生性,且繁殖能力極強,常存活于下水道、垃圾堆、腐敗變質(zhì)食物以及動物尸體上,以腐殖質(zhì)為食物,常常污染人類食物、水源,時刻威脅著人類健康[5-7]。該蟲也是一種重要的法醫(yī)昆蟲,由于其體型微小容易進入相對密閉的空間取食尸體,從而成為案發(fā)現(xiàn)場主要的昆蟲證據(jù),因此在法醫(yī)昆蟲學中也可利用該蟲不同生長期的形態(tài)來估算死后間隔時間[8]。
近年來,我國許多口岸時有截獲蛆癥異蚤蠅幼蟲、蛹或成蟲的報道,如在進口廢紙、原木和郵件等貨物中均有截獲[9-11]。因此,如何進行外來有害物種的快速檢疫鑒定,在口岸通關環(huán)節(jié)非常重要。本文主要通過蛆癥異蚤蠅不同生長期的顯微觀察,拍攝記錄主要形態(tài)特征并介紹制作標本的方法,旨在為該蟲的鑒定提供參考。
供試昆蟲為蛆癥異蚤蠅,利用鮮羊奶腐敗誘捕獲得,并在相對濕度75%和室溫環(huán)境下進行飼養(yǎng),取不同生長期的蟲樣研究。
實驗儀器及材料包括奧林巴斯(OlympusSZX7)體式顯微鏡、基恩士(VXH6000)三維顯微成像系統(tǒng)、鑷子、解剖針、解剖刀、養(yǎng)蟲箱、載玻片、蓋玻片、75%酒精、貝氏(Berlese)封片劑、Barber還軟液[12]。
1.2.1 蟲樣處理
幼蟲和成蟲置于冰箱冷凍殺死后,于75%乙醇中保存待用;蛹置于4℃冰箱中保存待用。
1.2.2 形態(tài)觀察
在基恩士(VXH6000)三維顯微成像系統(tǒng)下觀察不同生長期標本的形態(tài)特征并拍照記錄。
由于蛆癥異蚤蠅體型小,在分類鑒定或標本保存中需要對標本進行還軟、解剖、制片等處理。
1.3.1 標本還軟
因干制蟲體質(zhì)地較脆弱,容易斷裂脫落,筆者使用Barber還軟液對蟲體還軟3 d,待蟲體各關節(jié)能夠撥動時即可進行下一步的解剖、制片等操作,還軟后的標本放入75%酒精中暫存。
Barber還軟液組成為95%乙醇33 mL、純水30 mL、乙醚12 mL、乙酸乙酯15 mL、冰醋酸0.1 mL。
1.3.2 標本解剖
根據(jù)需觀察和拍照的部位,將蟲體頭部、翅膀、足、尾器等重要部位,使用解剖刀等工具在OlympusSZX7體式顯微鏡下解剖剝離下來。
1.3.3 制片
在玻片上滴1滴貝氏封片劑,將解剖好的部位調(diào)整至膠滴中央,用蓋玻片緩慢蓋在標本上,應防止移動擠壓標本,以免產(chǎn)生氣泡。
貝氏封片劑制作方法:稱取6 g阿拉伯膠,于15 mL純水中浸泡48 h;稱取葡萄糖2.5 g,溶于5 mL純水中,制成50%葡萄糖漿;除去阿拉伯膠渣,在阿拉伯膠溶液中加入10 g水合氯醛和2.5 mL乙酸,充分混合溶解,最后加入4 mL 50%葡萄糖漿混合均勻。
1齡幼蟲和2齡幼蟲長0.75~2.00 mm,3齡幼蟲超過2.00 mm,幼蟲體白色,12節(jié),節(jié)間具小突起(圖1-A);口器黑褐色至黑色,背橋(dorsal bridge)明顯,側(cè)板(lateral plate)發(fā)達;觸角具有6個感覺器[13]。蛹為黃色至黃褐色(圖1-B),腹面扁平;背部前端具1對深色呼吸角 (respiratory horn,rh),呼吸角細長,先端稍向外彎曲,呼吸角基部至端部表面有螺旋狀排列橢圓形、圓頂狀的乳突,乳突表面有一條縱裂;蛹背部節(jié)間具有棘狀突起(spinose setae,sp);背部末端有一對后氣門(posterior spiracles,ps)[14]。
圖1 幼蟲和蛹的形態(tài)特征
成蟲(圖2-A)體長2~4 mm,典型駝背外觀,體色黃褐色,舐吸式口器,頭小,形如半球形。頭部(圖2-B)額區(qū)密被細毛,中縱溝明顯;觸角上鬃(supra antennal bristles,sb)2對,近等長,上對觸角上鬃間距大于單眼前鬃(pre-ocdllar bristles,po b)間距,前額鬃(antial bristles,ab)幾乎在前側(cè)額鬃(antero-lateral bristles,al b)正下方,并與上對觸角上鬃等高,單眼前鬃略高于中側(cè)額鬃(medio-lateral bristles,ml b),4根鬃等距排列;觸角第3節(jié)鞭節(jié)(flagellum)膨大,淺黃褐色,觸角芒(arista,ar)長于額寬且具微毛。下顎須(palpus)黃色,半月形,端部鬃發(fā)達,喙黃色,短小。胸部黃色或黃褐色,側(cè)板色淺,中側(cè)片(anepisternum)光裸;背側(cè)鬃(notopleural bristles)2根,無背側(cè)裂(notopleural cleft)。
雄蟲小盾鬃(scutellar bristles)1對,雌蟲小盾鬃2對。翅面(圖2-C)略帶黃色,脈褐色;翅前緣纖毛(cilia,cil)短,Sc 伸達Rl;Rs 脈基部無毛。平衡棒黃色,僅端部具1小型暗斑。足黃色;前足跗節(jié)細長,第1跗節(jié)與第2、3跗節(jié)之和近等長;后足(圖2-D)發(fā)達,后足腿節(jié)端部具暗斑,且基部腹緣毛顯著短于端部的腹緣毛,脛節(jié)無前背纖毛,后背纖毛強壯。
雄蟲腹部背板(tergite)黑色或黑褐色(圖2-E),6節(jié),前緣中部具黃斑,尤其以T4和T5的黃斑最大;背板長有稀疏細毛,僅T2兩側(cè)和T6后緣毛較長;雌蟲腹部背板T2~T5向后漸窄,T5顯著長于T6,T6呈馬鞍形并伸達兩側(cè),前緣具3個淺色斑,后緣具1排長毛。腹板(sternite)黃色,st3-st6腹面具細毛。尾器 (terminalia)黑褐色或黑色(圖2-F),生殖背板(epandrium)每側(cè)稀被短毛及長鬃毛1根;生殖腹板(hypandrium)不對稱,左葉大呈舌狀,右葉短小呈圓形;肛管(anual tube,at)黃色,尾狀下彎,端毛強大呈羽狀[15]。
圖2 成蟲的形態(tài)特征
蛆癥異蚤蠅是一種世界廣泛分布的昆蟲,在我國口岸一線入境貨物查驗中時有截獲該蟲的幼蟲、蛹和成蟲;在出口貿(mào)易中,有的國家將該蟲列為檢疫對象,加強了對進口果蔬中蛆癥異蚤蠅的檢疫檢疫工作,直接影響了我國對外貿(mào)易。
本文簡要介紹的蟲體標本制作方法也適合于一些其它昆蟲標本的制作。在制作過程中尤其要注意還軟效果和整姿關鍵,充足的還軟時間才能防止關鍵部位的一些關鍵特征不被破壞,制片時要盡量減少氣泡的產(chǎn)生,讓蓋玻片一側(cè)先接觸膠體,然后輕輕緩慢將蓋玻片放下。本文描述的該蟲幼蟲節(jié)間小突起、口器背橋的形狀、觸角感覺器數(shù)量,蛹呼吸角的形狀、呼吸角上的乳突、蛹節(jié)間的棘狀突起,成蟲額區(qū)鬃毛的位置、距離、數(shù)量,胸區(qū)鬃毛的位置、數(shù)量、中側(cè)片的特征,翅膀各脈的位置、分支,后足特征,腹部背板和腹板的斑紋、形狀、被毛情況,肛管形狀、端毛等這些特征均是該蟲的重要分類特征,在鑒定時應細心觀察,利用本文的形態(tài)特征描述進行分類鑒定,可以鑒定出該蟲。